环氧化酶-2抑制剂nimesulide对乳腺癌细胞株增生、凋亡的影响

目的 探讨环氧化酶-2抑制剂nimesulide(NIM)对雌激素受体(ER)阴性(MDA-MB．231)和阳性(MCF-7)人乳腺癌细胞株增生、凋亡的影响。方法 应用MTT比色法分析细胞生长抑制作用，流式细胞技术测定细胞周期分布和凋亡率，透射电镜观察细胞形态与超微结构，AnnexinV法检测细胞的凋亡。结果 NIM以时间、剂量依赖性方式抑制MDA-MB-231(COX-2阳性)、MCF-7(COX-2阴性)细胞生长，阻滞细胞周期于G0／G1期，诱导细胞的凋亡，MDA—MB-231细胞对NIM的作用更为敏感。NIM对COX-2表达阴性的MCF-7细胞同样具有抑制增生、诱导凋亡的作用。结论 NIM对ER阳性和ER阴性乳腺癌细胞均有抑制增生、诱导凋亡的作用。NIM的抗肿瘤作用存在环氧化酶．2依赖性与非依赖性两种途径。     

蛋白酶体抑制剂联合亚砷酸对白血病细胞株NB4的凋亡诱导效应

目的 观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米(BOR)联合急性早幼粒细胞白血病(APL)凋亡诱导剂亚砷酸(ATO)对NB4细胞株的作用.方法 BOR单独及联合ATO作用于NB4细胞,应用MTT法观察细胞的生长抑制效应;流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率;RT-PCR方法检测survivin mRNA的表达.结果 MTT法显示BOR对NB4细胞具有生长抑制作用,且能增强ATO对细胞的杀伤作用;流式细胞仪检测可见明显凋亡峰及G2/M期细胞周期阻滞;RT-PCR检测发现两药单独应用均能下调survivin mRNA的表达,联合作用时具相加效应.结论 ATO与BOR联合作用较单独作用有更强的细胞杀伤及诱导细胞凋亡活性,细胞周期G2/M期的阻滞及survivin mRNA表达的下降是蛋白酶体抑制剂及亚砷酸对白血病细胞株联合诱导凋亡的可能机制.     

槲皮素对人膀胱癌BIU-87细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究槲皮素(Quercetin)在体外对人膀胱癌BIU-87细胞增殖和凋亡的影响.方法 对在体外经槲皮素不同浓度和时间处理后的人膀胱癌BIU-87细胞,分别采用MTT试验检测细胞增殖的变化,流式细胞技术和倒置显微镜分析细胞周期及凋亡.结果 MTT试验显示槲皮素能抑制人膀胱癌BIU-87细胞生长,且呈一定的剂量和时间依赖性; 流式细胞仪检测发现,一定浓度和时间的槲皮素作用BIU-87细胞后能阻滞G2/M期细胞向G0/G1和S期移行,且在细胞周期G1峰的左侧出现了亚G1凋亡峰;倒置显微镜观察发现有凋亡的特征性改变.结论 槲皮素能抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖,阻滞细胞于G2/M期,并诱导细胞凋亡.     

选择性环氧合酶2抑制剂对人膀胱癌细胞T24增殖和凋亡的作用

背景与目的:环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)与膀胱癌的发生发展密切相关,因此COX-2抑制剂对于膀胱癌可能具有潜在的抗肿瘤效应.本实验旨在探讨选择性COX-2抑制剂对人膀胱癌细胞T24增殖和凋亡的抑制作用.方法:用四甲基偶氮唑蓝还原法(MTT)研究选择性COX-2抑制剂SC-58125、塞来昔布(celecoxib)和非选择性COX抑制剂吲哚美辛(indomethacin)对T24细胞增殖的影响;用流式细胞术、DNA电泳和Hoechst33258荧光染色3种方法检测SC-58125作用下T24细胞的凋亡,同时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax基因的变化.结果:在12.5 μmol/L至200 μmol/L的剂量范围内,SC-58125、塞来昔布及吲哚美辛均能不同程度地抑制T24细胞的增殖,以SC-58125的抑制作用最强,IC50在25 μmol/L～50 μmol/L之间;3种凋亡检测方法均观察到SC-58125作用后凋亡细胞的比例增加,其中100 μmol/L的SC-58125作用于T24细胞6 h和12 h后,流式细胞仪测得凋亡细胞的比例分别为(7.95±1.88)%和(12.5±2.42)%,较对照组增加(P＜0.05),但细胞内与凋亡相关的Bcl-2和Bax基因表达没有变化.结论:选择性COX-2抑制剂体外可抑制T24细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.     

蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO对人骨肉瘤细胞株MG-63作用的体外研究

目的　探讨蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对人骨肉瘤细胞株MG 63的作用 ,并探讨其作用机制。方法　将不同浓度的Z LLL CHO作用于骨肉瘤细胞株MG 63 ,采用荧光显微镜观察细胞形态改变、电镜观察细胞超微结构变化、MTT法检测细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪分析细胞凋亡率及细胞周期改变。结果　Z LLL CHO可有效抑制MG 63细胞株的生长 ,并诱导细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为浓染致密的颗粒块状荧光 ,胞核固缩、染色质凝聚并边缘化 ,DNA呈“阶梯状”排列的条带。流式细胞仪分析显示 ,Z LLL CHO在 1.0 μmol/L作用 2 4h、3 6h、48h后 ,细胞凋亡率分别为 5 .4%、2 0 .5 %、5 2 .7%。随药物浓度增高及作用时间延长 ,细胞周期被阻滞于G2 /M期。结论　蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO可有效抑制人骨肉瘤MG 63细胞株的生长增殖 ,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起重要作用。     

PARP抑制剂对非小细胞肺癌A549及H460细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨PARP抑制剂PJ34体外对非小细胞肺癌的增殖及凋亡影响。方法:采用MTT法检测PARP抑制剂PJ34对非小细胞肺癌A549、NCI-H460细胞的增殖抑制作用;Hoechst33342荧光染色法观察PJ34诱导的细胞凋亡;流式细胞术检测PJ34作用后细胞周期变化及凋亡情况。结果:在1.25-20μg/ml浓度范围内,PJ34抑制A549、NCI-H460细胞增殖,且具有浓度和时间依赖性。荧光显微镜下观察到PJ34处理后细胞出现凋亡的形态学变化如核固缩、体积缩小等。细胞周期分析PJ34能将细胞阻滞于细胞周期中G0/G1期。Annxin V-FITC/PI双染流式细胞分析发现PJ34作用后细胞凋亡比例明显增加(P<0.01)。结论:PARP抑制剂PJ34能够抑制非小细胞肺癌A549、NCI-H460细胞增殖,引起细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡。     

姜黄素诱导人膀胱癌UMUC2细胞株凋亡的作用

目的为寻找有效无毒的膀胱灌注药物用于膀胱肿瘤术后预防肿瘤种植与复发,我们观察了姜黄素对人膀胱癌细胞UMUC2的细胞毒效应及诱导凋亡的体外作用。方法以0~160 μmol/L姜黄素作用于UMUC2细胞1~48 h,应用MTT法、平板克隆实验观察姜黄素的细胞毒效应,荧光染色观察凋亡形态学改变,流式细胞仪进行细胞周期分析及凋亡定量测定,免疫细胞化学染色观察凋亡相关蛋白p53和Survivin的表达。结果所有浓度组姜黄素均对膀胱癌UMUC2细胞有明显的生长抑制作用,160 μmol/L姜黄素作用1 h对全部癌细胞是致命的。荧光染色观察到典型的核凝集、碎裂凋亡形态学改变。流式细胞术定量分析了亚G1峰,后者同时表明姜黄素导致的细胞周期阻滞以G2/M期为主,使S期细胞比例显著减少。免疫细胞化学染色显示姜黄素下调p53、Survivin蛋白的表达。结论姜黄素明显抑制膀胱癌细胞系UMUC2的生长并诱导凋亡,导致细胞G2/M期阻滞,其作用机制与其下调p53、Survivin的表达相关,克隆形成实验证实大剂量姜黄素、短期作用对膀胱癌细胞系UMUC2有致命的细胞毒效应,显示了姜黄素用于膀胱癌患者的化学治疗,尤其是腔内灌注化疗的可能性。     

环氧合酶-2抑制剂对人肝癌细胞株的体外研究

目的:观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂Celecoxib对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响以及COX-2、Survivin和MDR1/P-gp表达水平的变化,探讨COX-2抑制剂治疗肝癌的作用机制。方法:MTT法检测细胞增殖状态;免疫组化法测定细胞中PCNA和COX-2表达;透射电镜及流式细胞仪观察Celecoxib诱导肝癌细胞凋亡的作用、对细胞周期的影响以及P-gp表达的变化;进一步用RT-PCR检测Survivin和COX-2mRNA在药物处理前后表达的变化。结果:人肝癌细胞系Hep-G2和BEL-7402中COX-2均有显著表达,Celecoxib呈时间和剂量依赖性抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡;细胞周期分布改变,G0/G1期细胞比例增加;肝癌细胞凋亡过程中,COX-2和Survivin基因的表达显著下调,P-gp表达减弱。结论:COX-2抑制剂Celecoxib可能通过下调COX-2、Survivin和P-gp表达,改变细胞周期分布,抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

As2O3联合L-OHP对HepG2肝癌细胞株的体外抑制作用

目的探讨As2O3联合L-OHP对HepG2肝癌细胞株的体外抑制作用。方法采用MTT法（四唑盐比色法）动态观察As2O3联合L-OHP对HepG2肝癌细胞的生长抑制作用,并采用两药相互作用系数（CDI）来评价两药相互作用的性质;应用流式细胞术（FCM）检测凋亡率和细胞周期分布。结果 As2O3与L-OHP联合应用,对HepG2肝癌细胞株的生长抑制、诱导凋亡作用均较相应的单药增强。流式细胞直方图上可见明显的＂凋亡峰＂,且As2O3使肝癌细胞周期阻滞于G2/M期,L-OHP使细胞周期阻滞于S期和G2/M期,两药合用使细胞周期阻滞于S期和G2/M期。结论中低浓度As2O3与L-OHP联合作用具有显著的协同效益,其主要机制可能是As2O3联合L-OHP诱导肝癌细胞凋亡作用及增强细胞周期阻滞作用。     

奥曲肽对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡影响的研究

目的:研究生长抑素类似物奥曲肽(octreotide,OCT)对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及其可能的作用机制.方法:不同浓度的OCT作用于体外培养的人胃癌BGC-823细胞,以5-FU作为阳性对照,应用MTT法分析细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,AO-EB染色观察细胞形态变化.结果:OCT对BGC-823细胞的生长、增殖产生抑制作用,该抑制作用具有量效、时效关系和饱和性;OCT作用后细胞呈典型的凋亡形态学改变,流式细胞仪检测的细胞凋亡率和AO-EB染色测得细胞凋亡率与对照组相比较差异有显著性(P<0.05);BGC-823细胞经OCT作用后,G1期细胞数明显增加,S细胞数明显减少,细胞被阻滞于G1/S 期.结论:10-5-10-3g/L 浓度的OCT能够抑制胃癌BGC-823细胞增殖,机制可能与其诱导肿瘤细胞的凋亡和出现G1/S期阻滞有关.     

环氧化酶抑制剂诱导人膀胱癌细胞系T24凋亡作用研究

 目的 探讨环氧化酶抑制剂尼美舒利对膀胱癌细胞系T24的凋亡诱导作用和对环氧化酶-2(COX-2)的表达抑制作用。方法 以膀胱癌细胞系T24为研究对象，已知COX-2高表达的胃癌细胞系SGC-7901为阳性对照。分别经不同浓度尼美舒利作用25小时后，Western blot检测COX-2的表达；凋亡DNA琼脂凝胶电泳检测DNA凋亡梯度。Image Tool凝胶分析软件分析Western blot电泳图像。结果 DNA梯度随尼美舒利浓度的加大而加大，Western blot结果显示COX-2的表达随着尼美舒利的浓度加大而明显抑制，在浓度为100μmol／L时，无法检测到COX-2的表达。Image Tool软件分析Western blot灰度值差异有显著性(P<0．01)。结论 尼美舒利有良好的诱导凋亡作用，其机制可能与COX-2的表达抑制有关。     

敲低BTF3基因表达对膀胱癌细胞T24生物学功能的影响

目的:探究BTF3基因对人膀胱癌细胞株T24生物学功能的影响。方法:通过慢病毒感染的方法，构建BTF3基因低表达的T24细胞株。通过体外平板克隆实验检测克隆形成，MTT检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。结果:RT-PCR和Western blotting证实BTF3低表达的T24细胞株构建成功。与对照组的细胞相比，敲低BTF3的表达能够抑制T24细胞克隆形成和细胞增殖，促进细胞凋亡。结论:我们的研究结果证明了BTF3在人膀胱癌细胞株T24中的重要性，提示BTF3不仅可能与膀胱癌的发生有关，而且可能成为膀胱癌潜在的治疗靶点和生物标记物。     

奥曲肽对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡影响的研究

目的：研究生长抑素类似物奥曲肽（octreotide,OCT）对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及其可能的作用机制。方法：不同浓度的OCT作用于体外培养的人胃癌BGC-823细胞,以5～FU作为阳性对照,应用M1Tr法分析细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,AO—EB染色观察细胞形态变化。结果：OCT对BGC-823细胞的生长、增殖产生抑制作用,该抑制作用具有量效、时效关系和饱和性;OCT作用后细胞呈典型的凋亡形态学改变,流式细胞仪检测的细胞凋亡率和AO—EB染色测得细胞凋亡率与对照组相比较差异有显著性（P〈0．05）;BGC-823细胞经OCT作用后,G1期细胞数明显增加,S细胞数明显减少,细胞被阻滞于G1／S期。结论：10^-5-10^-3g/L浓度的OCT能够抑制胃癌BGC-823细胞增殖,机制可能与其诱导肿瘤细胞的凋亡和出现G1／S期阻滞有关。     

选择性COX2抑制剂对胃癌细胞增殖的影响

背景与目的：越来越多证据表明非甾体类抗炎药（NSAIDs)可以减少消化道肿瘤的危险,其化学预防作用在于抑制了环氧全酶－2（COX－2）,但选择性COX－2抑制剂对胃癌细胞生长的影响及机制目前3仍不十分清楚。本研究目的是观察选择性COX－2抑制剂尼美舒利对SGC7901胃腺癌细胞PGE2释放及增殖和凋亡的影响。方法：采用MTT比色法和放射免疫分析法观察尼美舒利对SGC7901细胞增殖及前列腺素E（PGE2）释放的影响,采用透射电镜及流式细胞仪观察尼美舒利对SGC7901细胞诱导凋亡的作用及细胞周期的影响。结果：尼美舒利呈时间,剂量依赖性方式抑制SGC7901细胞增殖,减少PGE2释放;改变细胞周期的分布,增加G0／G1期细胞比例,呈剂量依赖性非线型方式诱导其凋亡。结论：尼美舒利可能通过减少PGE2释放,影响细胞周期分布和诱导细胞凋亡,从而抑制SGC7901胃腺癌细胞的增殖,选择性抑制COX－2发挥其抑制人胃癌细胞恶性增殖和诱导凋亡的作用。     

Effects of salinomycin on human ovarian cancer cell line OV2008 are associated with modulating p38 MAPK

This study investigated the anticancer effect and mechanism of salinomycin, a selective inhibitor of cancer stem cell, on human ovarian cancer cell line OV2008 in vitro and in vivo. The growth inhibitory effect of salinomycin on ovarian cancer cell line OV2008 was determined by measuring cell viability using the resazurin reduction assay. Apoptotic nuclear morphology was visualized by 4,6-diamino-2-phenylindole staining technique. The percentages of apoptotic cells and cell cycle parameters were detected by flow cytometry. The activity of p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK) was analyzed by Bio-Plex phosphoprotein assay. In vivo activity of salinomycin was assayed through tumor growth. Salinomycin caused concentration- (0.01?C200???M) and time-dependent (24?C72?h) growth inhibitory effects in OV2008. Cell nuclear morphology observations showed that salinomycin-treated OV2008 cells displayed typical apoptotic characteristics. Salinomycin significantly increased the percentages of apoptotic cells in OV2008, showing a concentration- and time-dependent manner. There was no cell cycle arrest in the G1/G0, S, and G2/M phases between salinomycin-treated cells and control cells. Salinomycin also enhanced the phosphorylation of p38 MAPK. Moreover, salinomycin significantly inhibited the growth of the ovarian xenograft tumors. Salinomycin exhibited significant growth inhibition and induction of apoptosis in the human ovarian cancer cell line OV2008. The data suggested that salinomycin-induced apoptosis in OV2008 might be associated with activating p38 MAPK and merits further investigations.     

全反式维甲酸对人膀胱癌细胞株T24生长 抑制和凋亡诱导作用的实验研究

 目的　探讨全反式维甲酸(ATRA)对人膀胱癌细胞T24的生长抑制和凋亡诱导作用。方法　应用细胞和分子生物学技术检测不同浓度ATRA对T24细胞生长和凋亡的影响。结果　3×10-5M～3×10-7M ATRA可显著抑制T24细胞增殖。用3×10-5M和3×10-6M ATRA作用细胞6天出现典型凋亡特征;3×10-5M、3×10-6M组及对照组的细胞凋亡率分别为20.16%、15.31%和1.49%;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡特征性的DNA梯形带。结论　ATRA对人膀胱癌细胞T24有剂量生长抑制作用,且可成功地诱导人膀胱癌细胞T24发生凋亡。     

尼美舒利对不同COX-2表达水平的食管鳞癌细胞的抑制作用

目的：比较选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂尼美舒利对不同COX-2表达水平的食管鳞癌细胞的抑制作用。方法：选取食管鳞癌细胞株EC 109、KYSE 150和TE-1,采用Western blot方法测定COX-2蛋白表达、MTT法检测细胞增殖抑制,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,观察尼美舒利对各组细胞的增殖抑制和促凋亡作用。结果：COX-2蛋白在EC 109细胞中呈高表达,KYSE 150细胞中呈中等度表达,TE-1细胞不表达COX-2蛋白。尼美舒利在50μmol/L-400μmol/L浓度区间可抑制EC 109、KYSE 150细胞的增殖（P〈0.05）,并呈剂量依赖性,在400μmol/L时对TE-1细胞有抑制作用。EC 109细胞尼美舒利的IC50值最低,KYSE150次之,TE-1最高。尼美舒利可使EC 109和KYSE 150的细胞周期阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,但对TE-1细胞无上述作用。结论：尼美舒利对表达COX-2的食管鳞癌细胞有较好的增殖抑制和促凋亡作用。     

大蒜素对结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖的影响

目的：观察大蒜素对结肠癌细胞ＬｏＶｏ生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：不同浓度的大蒜素作用于体外培养的ＬｏＶｏ细胞,倒置显微镜下观察ＬｏＶｏ细胞的形态学变化,采用ＭＴＴ法检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞增殖抑制能力,Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ ＦＩＴＣ标记流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞周期影响。结果：大蒜素可抑制人结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,２４、４８和７２ｈ大蒜素抑制ＬｏＶｏ细胞的ＩＣ５０分别为３２.２３、１０.７４和６.５８μｇ／ｍｌ;大蒜素能够诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡,作用２４ｈ其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用４８ｈ其诱导凋亡作用峰值浓度为８μｇ／ｍｌ,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用ＬｏＶｏ细胞２４ｈ后,大蒜素浓度低于４μｇ／ｍｌ时,ＬｏＶｏ细胞周期被阻滞于Ｇ２／Ｍ;