外源金属硫蛋白基因表达对NIH3T3细胞耐寒力的影响

目的：研究金属硫蛋白基因对细胞耐寒力的影响．方法：通过将金属硫蛋白基因（ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,ＭＴ）的表达载体ｐＢＡｃＮｅｏ－ＭＴⅡＡ转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞（小鼠胚胎成纤维细胞系）,筛选获得了高表达ＭＴ的细胞克隆ＭＴ１（ＭＴ阳性细胞百分比为２９．４％）,用四唑盐（ＭＴＴ）比色实验观察了该细胞的生长曲线以及不同低温条件下的存活能力,并通过电镜观察超微结构以进一步证实．结果：与转染ｐＢＡｃＮｅｏ空载体的细胞克隆Ｎｅｏ相比,常温下二者的增殖能力无显著差别．在不同的低温条件下,存活能力都受到一定程度的影响,细胞克隆ＭＴ１的存活细胞数明显高于阴性对照（Ｐ＜０．０１）,超微结构改变不明显．结论：上调金属硫蛋白基因表达可能具有增强耐寒的能力．     

过表达ERCC1蛋白细胞系的建立

[目的]建立过表达ERCC1蛋白的细胞系，为遗传毒性化合物的研究提供模型细胞系，并有可能为具有DNA加合作用化合物提供新的毒理学筛选方法。[方法]应用PCR和DNA重组技术将核苷酸切除修复交叉互补组1(Excision repair cross complementation groupl，ERCCl)基因与pT7Blue载体相连接，然后构建真核细胞重组表达质粒pcDNA3．1／Zeo( )-ERCC1，并导入293细胞。经Zeocin抗性筛选后获得转染ERCC1基因的细胞克隆。细胞增殖后以Western-blot检测目的蛋白的表达。[结果]获得稳定转染ERCC1基因的细胞系，并在细胞中检测出有ERCC1蛋白的过表达．[结论]用基因转染法成功建立了过袁达ERCC1蛋白的ERCC1-293细胞系。     

金属硫蛋白在宫颈癌中表达及其意义

目的 探讨金属硫蛋白(MT)在宫颈鳞状细胞癌中的表达状况。方法 对66例宫颈鳞状细胞癌(cSc)和30例宫颈上皮内瘤样增生(CIN)标本，进行免疫组化检测。结果表明 MT在CSC中阳性率为68．18％(45／66)，在CIN中阳性率为29．03％(8/30)，正常对照组阳性率为8．00％(2／25)。MT表达与癌组织分化程度有关。结论 MT在CSC中有比较高的表达，检测MT对化疗方案制定有指导意义。     

Robo家族在肝癌细胞系的表达

目的研究不同肝癌细胞系中Robo1,Robo2、Robo3和Robo4的表达差异。方法用RT-PCR检测8个肝癌细胞系的mRNA表达。结果 Robo1和Robo4在这8个肝癌细胞系中均表达;Robo2只在PLC细胞系中微量表达;Robo3在Hep3B、Huh7表达较高,而97L和G2表达较低,其它细胞系均无表达。结论 Robo1、Robo2、Robo3和Robo4在不同的肝癌细胞系中表达水平不同,为研究Robo家族选择合适的细胞模型提供理论依据。     

锌对幼鼠脑金属硫蛋白表达的影响

目的：研究不同含锌铜饲料对幼鼠脑金属硫蛋白表达的影响。方法：从哺乳期开始建立幼鼠低锌、常锌和高锌动物模型，以流式细胞仪及免疫组化的方法，定位、定量观测脑组织（皮层、海马）内ＭＴ表达的变化。结果：幼鼠在哺乳期末（４周）和７周档脑内ＭＴ含量；ＺＤ组明显低于ＺＮ组，而ＺＥ组明显高于ＺＮ组。Ｍ广泛分布于胶质细胞，散在分布于神经元内，在络膜、脑室管及血管内皮细胞内含量丰富。结论；饲料锌明显影响幼离ＭＴ表达。     

金属硫蛋白的研究进展

金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于生物界的金属结合蛋白,因其功能独特,近年来对MT各方面的研究日益受到重视。本文对MT在结构、基因调控、生物学功能及与疾病关系方面的研究进行了综述,并提出了MT研究中存在的问题及展望。     

金属硫蛋白在胃癌中的表达及意义

目的：观察金属硫蛋白(metallothionein，MT)在胃癌中的表达状况。方法：对66例病人的癌组织标本采用SP免疫组织化学方法染色，观察MT的表达状况。结果：MT在胃癌中的表达总阳性率为54．5％(36／66)，MT在胃癌中表达与癌组织分化程度相关性不明显；与侵犯深度呈正相关。结论：MT在胃癌中有较高表达，检测MT对制定化疗方案中有指导意义。     

金属硫蛋白的研究进展

金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎｅ,ＭＴ）是一种富含金属（Ａｇ、Ａｕ、Ｂｉ、Ｃｄ、Ｈｇ、Ｚｎ等）和半胱氨酸的低分子质量的蛋白质,ＭＴ在体内被金属和其它因素诱导而合成,具有重要的生物学功能。它与微量元素的代谢、自由基的清除以及肿瘤等疾病的发生、...     

金属硫蛋白的提纯

金属硫蛋白(MT)是一类广泛分布、富含半胱氨酸,可结合金属的低分子量非酶蛋白质。它在金属中毒、微量元素代谢调节和抗射线、自由基损伤等方面有重要作用。本研究提纯了兔肝MT_1和MT_2(rlMT_1、rlMT_2)。方法是:先给家兔多次皮下注射CdCl_2诱导MT合成,之后取肝作匀浆,经冷乙醇提取制得MT粗提液。该粗提液通过Sepbaclx G—50 柱(4.5×95cm)和DEAE-cellulose DE52 柱(2.5×4cm)层析,使分离出rlMT_1和rlMT_2两种亚型。鉴定表明,rlMT_1和rlMT_2的分子量均约14KD,纯度为SDS—PAGE分析呈单一条带,与Sigma标准品的分子量和纯度一致。氨基酸组成中,半胱氨酸和硫基含量都接近每分子20个,不含芳香族氨基酸和组氨酸。本次研究为探寻MT检测工作,推动我国MT的研究奠定了良好基础。     

金属硫蛋白在人甲状腺肿瘤中的表达

目的 探讨可吸收髓内钉治疗手部骨折的可行性。方法 24例手部骨折病例复位后用可吸收髓内钉作内固定。2,4例共使用28枚髓内钉,有1例5枚;16例用PDLLA钉,8例用PDLLA混合壳聚糖钉12枚,其中掌骨4例,近节指骨14例,中节指骨5例,末节指骨1例。结果 24例除2例用PDLLA钉固定出现排异反应外,其余术后随访3～10个月,平均4个月,在随访期内骨折均为骨性愈合。结论 可吸收髓内钉治疗手部掌指骨骨折是一种可取的方法,只要适应证合理,掌握良好的手术技巧和术后早期功能锻炼,可取得满意的疗效。     

金属硫蛋白在肾盂癌中的表达及其临床意义

目的分析金属硫蛋白（Metallothioaein,MT）在肾盂癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法观察不同分级的36例肾盂癌、15例正常肾盂组织MT的表达情况,分析MT与临床病理因素及预后之间的关系。结果15例正常肾盂组织MT的表达率为6．7％（1／15）,36例肾盂癌组织中MT的表达率为52．8％（19／36）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。MT的表达随着癌组织病理学分级、临床分期的增加而增加（P〈0．05）;MT阳性表达组与阴性表达组之间的生存率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MT的表达与肾盂癌发生、发展及预后有密切的关系。     

金属硫蛋白对仔猪抗氧化功能及SOD基因表达的影响

目的：用仔猪作模型,研究经锌元素诱导的外源性金属硫蛋白（Zn—MT）对机体抗氧化功能和超氧化物歧化酶（SOD）基因表达的影响．方法：选用杜长大杂交仔猪18头,随机分为3组（1,2和3）．分别肌肉注射经生理盐水溶解的猪肝Zn—MT0mg／kg（1组）,0．8mg／kg（2组）,1．6mg／kg（3组）,让仔猪运动产生应激．注射MT后3h和6h,分别从每组取3头仔猪屠宰取肝脏,测定肝脏中与抗氧化有关的生化指标,检测肝脏SOD基因表达水平．结果：在应激条件下,补充外源性Zn—MT一段时间后,仔猪肝脏SOD,GSH—PX活性显著升高（P〈0．05）,MDA含量显著降低（P〈0．05）,肝脏抗活性氧和抗超氧阴离子水平也有提高的趋势．在注射Zn—MT后6h,0．8mg／kg．1．6mg／kg组仔猪肝脏SOD基因表达水平比对照组显著提高（P〈0．05）．0．8ms／kg组和1．6ms／kg组6hSOD基因表达水平比3h显著增加,表明MT对SOD基因表达的诱导与时间和剂量关系密切．结论：补充外源性Zn—MT可提高应激机体的抗氧化物酶活性,从而提高机体的抗应激能力．     

FHIT基因转染对肝癌细胞系HepG2的作用

目的:探讨外源性FHIT基因的表达对肝癌细胞株HepG2的影响. 方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1-FHIT及空载体pcDNA3.1( )导入肝癌细胞系HepG2中,G418选择培养,经免疫组化和Western blotting鉴定其过表达. 用流式细胞仪、普通光镜、透射电镜观察FHIT基因的表达对HepG2细胞凋亡和增殖的影响. 结果:获得FHIT基因稳定表达的肝癌细胞株HepG2-FHIT. 转染FHIT基因的HepG2细胞的生长速率明显下降,电镜下超微结构发生了凋亡早期改变,流式分析细胞的生长周期可见S/G2期阻滞. 结论:外源性FHIT基因在体外通过诱导其凋亡及细胞周期俘获作用可有效抑制HepG2生长增殖.     

金属硫蛋白基因对小鼠变应性接触性皮炎的影响

目的：探讨金属硫蛋白（metallothioneins,MTs)在小鼠变应性接触性皮炎中所起的作用。方法：用二硝基氟苯（dinitrofluorobenzene,JNFB)致敏金属硫蛋白基因敲除小鼠（metallothionein-null mouse,MT-/-,不表达MT－I及MT－Ⅱ）及基因同源对照野生型鼠（MT＋／＋，正常表达MTs)，并在小鼠右耳激发变应性接触性皮炎，分别对比两组小鼠激发后耳肿胀度。结果：野生型鼠（MT＋／＋）耳肿胀度明显高于基因敲除鼠（MT－／－），统计学分析差异有显著性（P＜0．05，t检验）。结论：MTs在迟发型变态反应的炎症过程中起重要作用，MT－／－小鼠不能完全表达迟发型变态反应的炎症。     

金属硫蛋白研究进展

金属硫蛋白（metallothionein,MT）是近来发现的人类肿瘤细胞表面表达的一个生物学标记。本文就MT与肿瘤的关系等方面的研究进行了综述,并对MT研究中存在的问题进行探讨及展望。     

金属硫蛋白对秋水仙碱致肝毒性的保护作用

秋水仙碱在临床上用于治疗急性痛风性关节炎和某些肿瘤,但是,其半数致死量较低,过量的秋水仙碱可导致消化道反应,肾、骨髓和肝的损害等[1,2].误食含有秋水仙碱的鲜黄花菜也会引起食物中毒[3].金属硫蛋白(metallothionein, MT)是生物体内的一种富含半胱氨酸巯基(-SH)的金属结合蛋白质,具有拮抗有害重金属毒性、抗电离辐射、捕获自由基、抗过氧化应激等功能[4].肝是MT含量比较丰富的器官.本研究利用MT基因敲除小鼠观察秋水仙碱对小鼠肝的毒性,为防治秋水仙碱中毒提供实验依据.     

Bax蛋白稳定高表达肝癌细胞的建立及其凋亡

目的　建立稳定高表达 Bax蛋白的肝癌细胞 .方法　用脂质体介导的基因转染法分别将含人 bax c DNA的p BK- bax和 p BK- CMV空载体质粒导入人肝癌细胞系 HCC-92 0 4细胞中 .经 G- 4 18筛选获得细胞克隆 .ABC法和图像定量分析检测 Bax蛋白在细胞中的表达情况 .HE染色观察细胞形态学变化 .TU NEL 法检测细胞凋亡发生情况 .结果　转染后用 G- 4 18筛选 2 wk,获得了细胞克隆 .转染 p BK- bax细胞的 Bax蛋白表达强度明显强于转染 p BK- CMV或未转染的 HCC- 92 0 4细胞 (P<0 .0 5 ) ,而转染 p BK- CMV的细胞与未转染的 HCC- 92 0 4细胞的 Bax蛋白表达强度未见明显差异 .p BK- bax转染的细胞有的可见细胞固缩、变圆、浓染和“出泡”等凋亡形态学变化 ,并且其 TU NEL 指数明显高于转染 p BK-CMV或未转染的 HCC- 92 0 4细胞 (P<0 .0 5 ) .结论　获得了稳定高表达 Bax蛋白的肝癌细胞 .bax基因转染的 HCC-92 0 4细胞凋亡率明显增高     

铅对人胎盘金属硫蛋白表达的影响

目的了解铅对孕妇胎盘金属硫蛋白(MT)表达的影响,为预防胎儿铅中毒提供依据。方法选择早孕期(6～10周)的孕妇77例,检测其血铅水平,对其进行追踪,检测其分娩后胎盘MT的表达水平。结果 MT主要表达于胎盘组织细胞的胞浆,不同血铅水平孕妇的胎盘MT的表达不同(Hc=29.03,P0.01);胎盘MT表达水平与血铅的浓度呈正相关(rs=0.55,Uc=2.443,P0.05)。结论铅能诱导人胎盘组织MT的表达,其表达与孕妇的血铅水平有关。     

金属硫蛋白与肿瘤治疗

金属硫蛋白与肿瘤治疗黄国健周舒（临床医学研究所病理生理室）金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）是一类富含巯基和金属元素的小分子量非酶蛋白，主要存在于脊椎动物的实质脏器中。ＭＴ具有良好的热稳定性，在８５℃中存在１０ｍｉｎ不会被破坏［１］。并...