大鼠溃疡性结肠炎模型的实验研究

目的对不同剂量的三硝基苯磺酸（ＴＮＢＳ）引起的大鼠溃疡性结肠炎（ＵＣ）模型进行观察和评价。方法采用一次性直肠注入大鼠ＴＮＢＳ（２５～１５０ｍｇ·ｋｇ－１）的３０％乙醇溶液，引起慢性炎症性肠疾病（ＩＢＤ），３ｗｋ后外死动物对各剂量下动物结肠的重量、髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性及组织形态学变化进行观察和评价。结果ＴＮＢＳ在１００～１５０ｍｇ·ｋｇ－１剂量下引起的ＵＣ肠壁明显增厚，炎症和溃疡至少维持７ｗｋ时间，ＭＰＯ活性值显著性升高，组织学检查发现粘膜及粘膜下层有大量中性粒细胞及淋巴细胞、巨噬细胞、纤维细胞浸润，肉芽组织及隐窝脓肿形成，５０ｍｇ·ｋｇ－１剂量时有一较轻度的损伤。２５ｍｇ·ｋｇ－１时对结肠的重量、ＭＰＯ活性及损伤指数都没有显著性改变（Ｐ＞０．０５）。结论用ＴＮＢＳ引起大鼠实验性ＵＣ，其溃疡和炎症维持一较长时间，这一病理特征为炎症性疾病防治药物的研究提供了条件；本模型的最佳剂量为１００ｍｇ·ｋｇ－１左右     

栀子有效部位的溃疡性结肠炎活性及其化学成分研究

目的研究栀子浸膏35%和70%乙醇洗脱部位对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,并采用液质联用鉴定活性洗脱部位的化学成分。方法采用TNBS诱导大鼠UC模型,不同洗脱部均按生药量2.1 g·kg-1连续灌胃给药7 d,进行体质量测定,疾病活动指数(DAI)评分,结肠组织病理评分,比较各组大鼠结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。采用液质联用鉴定药效较好部位的化学成分。结果与模型组相比,35%洗脱部位组体质量下降明显改善,DAI和组织病理评分降低,组织中MPO、NO、MDA、TNF-α、IL-6及IL-1β含量均降低,SOD含量升高(P <0.01)。液质联用共鉴定出19个化学成分,其中11个为环烯醚萜类成分。结论栀子35%洗脱部位对UC大鼠有明显治疗作用,环烯醚萜类成分可能是其发挥作用的物质基础。     

肠炎冲剂对溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用

目的：研究肠炎冲剂对三硝基苯磺酸(TNBS)所致慢性溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用。方法：TNBS的50％乙醇溶液一次性注人大鼠直肠，造成大鼠的慢性溃疡性结肠炎模型后，连续给药，观察腹泻率、死亡率，分别于连续给药3周及4周后麻醉处死动物，测定组织髓过氧化物酶(MPO)活力。地塞米松为阳性对照药。结果：地塞米松组动物症状减轻，但解剖学检查可见胸腺明显萎缩；连续给予不同剂量的肠炎冲剂药液(给药剂量为11．4、5．7、2．9g生药／kg体重)，各剂量组动物腹泻明显缓解，动物死亡率、腹泻率、结肠组织MPO活力明显降低，病理学检查或尸检可见结肠组织溃疡面积明显缩小，水肿缓解，坏死减轻，未见肠壁增厚。肠炎冲剂能显著缓解TNBS所致慢性溃疡性结肠炎症状，且未见地塞米松所致免疫器官萎缩的免疫抑制作用。结论：肠炎冲剂连续给药，对慢性溃疡性结肠炎模型大鼠治疗作用明显，并且未见地塞米松所致严重不良反应，是治疗慢性溃疡性结肠炎的较合适药物。     

TNBS/乙醇法建立溃疡性结肠炎大鼠模型的实验研究

目的评价2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法致溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型。方法采用TNBS与不同体积分数的乙醇配比诱导大鼠UC模型,每日观察大鼠体重、肛温、粪常规等,造模8 d后处死大鼠,结合溃疡面积、粘连指数、结肠黏膜的组织病理学变化及黏膜组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)等的表达,综合评价TNBS/不同体积分数乙醇致UC大鼠模型。结果 TNBS/40%乙醇组给药4 h后大鼠出现腹泻、水样便、血便等现象,8 d后大鼠肠壁明显增厚,皱褶消失并出现大面积坏死,肠黏膜多处充血水肿并可见明显的溃疡面,有些还伴有组织增生,结肠黏膜TNF-α及COX-2阳性表达水平较正常对照组明显升高,差异具有统计学意义。结论 TNBS/40%乙醇可成功诱导UC大鼠模型。     

复方苦参汤抗溃疡性结肠炎活性成分的初步研究

目的研究复方苦参汤抗溃疡性结肠炎的活性成分。方法采用系统溶剂法、硅胶柱层析、中压制备液相、制备液相、重结晶等仪器方法,对复方苦参汤水煎液进行分离纯化和结构鉴定。并通过考察各化合物对LPS刺激RAW 264.7细胞产生的NO的抑制作用,对各化合物的抗NO活性进行筛选。结果从复方苦参汤中分离得到7个化合物,化合物1~7经鉴定分别为苦参碱、氧化苦参碱、靛蓝、靛玉红、没食子酸、甘草苷和甘草酸。并筛选出4个活性成分。结论初步确定复方苦参汤抗溃疡性结肠炎的活性成分为苦参碱、氧化苦参碱、靛蓝及靛玉红。     

吲哚丙酸对葡聚糖硫酸钠诱导急性溃疡性结肠炎小鼠的影响

目的 研究吲哚丙酸(IPA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导急性溃疡性结肠炎(UC)小鼠的影响。方法将SPF级6～8周雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、DSS模型组(饮用3%DSS 7 d)及低、中、高剂量IPA组(在DSS给药前2 d行IPA灌胃),每组12只。每日观察小鼠的一般情况,根据体质量下降、大便性状和便血状况评定疾病活动指数(DAI); DSS给药第7日处死小鼠,测量结肠长度及评定病理学评分,ELISA检测各组小鼠血清髓过氧化物酶(MPO)及结肠组织MPO、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。Western blot法检测各组小鼠结肠组织中核因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果 与对照组比较,DSS模型组DAI、结肠组织病理学评分、血清MPO及结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO和p-NF-κB p65/NF-κB p65比值显著升高,结肠长度明显缩短(P <0.05,P <0.01);与DSS模型组比较,中、高剂量IPA...     

黄芩-芍药配伍治疗溃疡性结肠炎研究进展

摘要：溃疡性结肠炎（UC）是一种非特异性炎症性疾病,其发病机制复杂,与肠道菌群失调、免疫反应、氧化应激和黏膜屏障功能受损密切相关。单一靶点治疗的药物往往难以取得较好的治疗效果,因此选用多靶点联合药物治疗已成为当前UC治疗的趋势。黄芩味苦,性寒,入肝、胆、胃、大肠经,功能清少阳热邪,泻上焦实火,燥肠胃湿热;芍药,味苦、酸,性微寒,功能活血化瘀,柔肝止痛,行寒热,中恶,腹痛,且黄芩-芍药两者相伍,相互促进,相互制约。临床实践表明,黄芩-芍药两者配伍治疗UC不仅有深远历史渊源,更受到众多医家认可。本文基于作用机制归纳黄芩-芍药配伍治疗溃疡性结肠炎的概述。     

乌司他丁对大鼠实验性溃疡性结肠炎的作用

目的 探讨乌司他丁对大鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)的作用及机制.方法 120只SD大鼠随机分为4组,每组各30只.使用三硝基苯磺酸钠( TNBS)建立UC模型,Ⅰ组不使用乌司他丁,为造膜对照组;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别于造模0、6、12 h使用乌司他丁,剂量为2万单位/kg,为研究组.检测分析各组肠静脉内毒素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和UC模型症状积分(实验开始24、72、168 h各观察10只大鼠).结果 ①在实验各时段,使用乌司他丁组UC大鼠病变积分均低于Ⅰ组(均P＜0.05),且24、72 h时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组差异均有统计学意义[24 h:(1.8±0.4),(2.7±0.3),(3.0±0.1);72 h:(3.7±2.3),(4.2±1.2),(5.0±0.9),均P＜0.05],但168 h时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组未见明显差异.②使用乌司他丁组肠静脉内毒素含量在实验各时期内均低于Ⅰ组,24h时Ⅱ组与Ⅲ组、Ⅳ组之间差异均有统计学意义[(97.7±11.7) ng/L比(117.1±9.7) ng/L,( 124.3 ±4.9) ng/L,均P＜0.05],72、168 h时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肠静脉血内毒素含量差异无统计学意义.③24h时Ⅱ组TNF-α低于Ⅰ组及Ⅲ、Ⅳ组[(6.7±2.6) pg/100 μg比(13.5±1.7),(11.8±2.8),(12.4±2.7)pg/100 μg,均P＜0.05)],但72、168 h使用乌司他丁各组低于Ⅰ组.结论 乌司他丁对TNBS导致的大鼠UC有明显防护作用,其机制可能通过抑制内毒素水平而降低免疫异常水平.     

唐古特大黄多糖对小鼠溃疡性结肠炎细胞因子的影响

目的:观察唐古特大黄多糖(rheum tanguticumpolysaccharides,RTP)对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)的疗效并探讨其可能存在的机制。方法:应用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制备小鼠溃疡性结肠炎模型。实验设正常对照组、模型对照组、RTP治疗组(100、200、400 mg.kg-1)。观察各组实验小鼠体质量变化及组织病理学改变,采用酶联免疫吸附法检测细胞因子(IL-8、IL-10、TNFα-、IL-4)的含量。结果:中、高剂量的RTP能够缓解小鼠体质量的减轻,减少腹泻及便血的发生;并且能够显著改善小鼠结肠组织损伤及病理学改变。溃疡性结肠炎模型组TNFα-、IL-8的表达较正常对照组显著增高,而IL-10、IL-4的表达明显降低(P<0.05);高剂量RTP治疗组的TNFα-、IL-8表达明显低于溃疡性结肠炎模型组,IL-10、IL-4的表达显著高于模型组(P<0.01)。结论:RTP对TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有良好治疗作用,其机制可能与上调抗炎细胞因子(IL-10、IL-4)及下调促炎细胞因子有关。     

虾青素对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎的影响

虾青素(Astaxanthin, AST)是一种天然的脂溶性类胡萝卜素,已被证实有抗氧化、抗炎等多种生物活性,但AST对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis, UC)的影响尚不清楚。实验探究AST对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium, DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的潜在治疗作用。40只C57BL/6小鼠分为正常对照(Control)、模型组(Model)、溶剂对照橄榄油组(Oil)和虾青素(AST)4组。除Control组外,其他小鼠构建实验性慢性结肠炎模型。在造模的第5 d开始分别口服生理盐水、橄榄油或AST至观测末期。检测各组小鼠体重、粪便隐血和存活率等相关疾病表征;检测结肠长度及脾脏指数;H&E染色检测结肠病理情况;髓过氧化物酶(Myeloperoxidase, MPO)活性检测结肠组织中性粒细胞浸润情况;ELISA检测结肠与血清中炎性因子TNF-α和IL-1β水平。结果表明,AST治疗能缓解DSS诱导结肠炎小鼠的体重减轻(P<0.05)、结肠缩短(P<0.05)和疾病活动指数(Disease acti-vity ind...     

木樨草素对小鼠实验性溃疡性肠炎影响

目的：观察木樨草素对小鼠急性结肠炎的药效作用。方法：2，4-二硝基氯苯(DNCB)／乙醇灌肠制作小鼠急性结肠炎模型，灌肠给予木樨草素(1、10、50mg·kg~(-1))，考察木樨草素对小鼠结肠黏膜组织形态损伤，以及结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活力和前列腺素E_2(PGE_2)含量等的影响。结果：DNCB诱发结肠炎后，小鼠出现腹泻、充血、溃疡、肠壁增厚等变化。灌肠给予木樨草素后，对小鼠的腹泻、组织损伤等有显著改善，并且能够降低结肠组织中MPO活性和pGE_2的含量。结论：木樨草素抑制炎性浸润、渗出和组织增生，减轻结肠黏膜的病理损害，对实验性动物急性结肠炎有较好的治疗作用。     

黄连水煎液对实验性大鼠溃疡性结肠炎治疗作用的研究

目的 探寻黄连水煎液对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。 方法 大鼠以二甲肼(DMH) 40 mg/kg皮下注射+3%葡聚糖硫酸钠(DSS)水溶液饮用诱导形成大鼠溃疡性结肠炎模型,给予黄连水煎液灌胃治疗5周,观察黄连水煎液对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。 结果 与模型组相比,黄连水煎液各剂量组能够不同程度改善溃疡性结肠炎引起的大鼠体重增长过慢(P<0.05,P<0.01)。实验第10周各组大鼠结肠均有畸变隐窝灶(ACF)形成, 黄连水煎液各剂量组形成ACF的平均数量明显低于模型组(P<0.01。病理检查结果显示,模型组大鼠可见结肠组织出现了比较严重的不典型增生,腺体排列紊乱,细胞层次明显增多且拥挤,黏液分泌显著减少,黏膜上皮脱落,糜烂重,溃疡多且大,黏膜严重充血、水肿;采用黄连水煎液各剂量组的大鼠上述现象则有所改善,但出现了不同程度的细胞拥挤,核增大和复层。透射电镜结果显示,模型组大鼠出现上皮细胞核染色质聚集,细胞表面微绒毛排列紊乱、断裂现象,黄连水煎液各剂量组的大鼠绒毛排列稀疏,未见断裂。结论 黄连水煎液对大鼠溃疡性结肠炎有显著的治疗作用。     

烟酰胺单核苷酸对小鼠溃疡性结肠炎的作用

目的 探究烟酰胺单核苷酸(NMN)对葡聚糖硫酸钠盐(DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型的作用.方法 采用DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠模型评价NMN的作用.应用DSS对C57小鼠进行造模,给予NMN后观察模型小鼠的生存时间、体重、疾病评分(DAI)、结肠组织长度以及结肠组织切片病理学变化.结果 NMN对模型小鼠的生存时间、...     

吴茱萸次碱对小鼠溃疡性肠炎的治疗作用

目的:观察吴茱萸次碱治疗小鼠急性结肠炎的药效及对豚鼠肠道平滑肌运动的影响。方法:2,4-二硝基氯苯(DNCB)／乙醇灌肠制作小鼠急性结肠炎模型,经口给予吴茱萸次碱10、30、100 mg·kg-1,观察吴茱萸次碱对小鼠腹泻,组织形态损伤,结肠组织PGE2含量、MPO活力以及对乙酰胆碱、组胺作用下豚鼠离体肠管收缩运动的影响。结果:DNCB诱发结肠炎后,小鼠出现腹泻、充血、溃疡、肠壁增厚等变化。经口给予吴茱萸次碱后,可以显著改善小鼠的腹泻、组织损伤,并且能够降低结肠组织中MPO活性和PGE2的含量,对乙酰胆碱及组胺作用下豚鼠离体肠管收缩亦表现出显著的对抗作用。结论:吴茱萸次碱可以抑制炎性浸润、渗出和组织增生,减轻结肠黏膜的病理损害和抑制肠道平滑肌运动,对实验性动物急性结肠炎有较好的治疗作用。     

Glutamate microinjection into the hypothalamic paraventricular nucleus attenuates ulcerative colitis in rats

Aim： To investigate the effects of glutamate microinjection into hypothalamic paraventricular nucleus （PVN） on ulcerative colitis （UC） in rats and to explore the relevant mechanisms. Methods： 2,4,6-Trinitrobenzenesulfonic acid （100 mg/kg in 50% ethanol） was instilled into the colon of adult male SD rats to induce UC. A colonic damage score （CDS） was used to indicate the severity of the colonic mucosal damage. The pathological changes in the colonic mucosa were evaluated using immunohistochemistry, Western blotting, biochemical analyses or ELISA. Ten minutes before UC induction, drugs were microinjected into the relevant nuclei in rat brain to produce chemical stimulation or chemical lesion. Results： Microinjection of glutamate （3, 6 and 12 pg） into the PVN dose-dependently decreased the CDS in UC rats. This protective effect was eliminated after kainic acid （0.3 IJg） was microinjected into PVN or into the nucleus tractus solitarius （NTS） that caused chemical lesion of these nuclei. This protective effect was also prevented when the AVP-V1 receptor antagonist DPVDAV （200 ng） was microinjected into the NTS. The discharge frequency of the vagus was markedly decreased following microinjection of glutamate into the PVN. Microinjection of glutamate into the PVN in UC rats significantly increased the cell proliferation and anti-oxidant levels, and decreased the apoptosis and Bax and caspase 3 expression levels and reduced the pro-inflammatory factors in the colonic mucosa. Conclusion： The activation of hypothalamic PVN exerts protective effects against UC, which is mediated by the NTS and vagus. The effects may be achieved via anti-oxidative, anti-apoptotic, and anti-inflammatory factors.     

半夏泻心汤对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎影响及作用机制

目的研究半夏泻心汤对溃疡性结肠炎( UC)小鼠氧化应激损伤的影响,并探讨核转录因子 E2相关因子( Nrf2)/血红素加氧酶 -1(HO-1)通路在其中发挥的作用。方法 2023年 1―5月,小鼠自由饮用 3%葡聚糖硫酸钠( DSS)1周,建立溃疡性结肠炎模型。 60只雄性 C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、美沙拉嗪组( 100 mg/kg)、半夏泻心汤高、中、低剂量组( 32.76、16.38、8.19 g/kg)。造模同时灌胃给予相应药物,连续 10 d。实验结束时称量小鼠体质量、测量结肠长度并观察结肠组织病理学改变。酶联免疫法检测血清中活性氧自由基( ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-px)变化情况; RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测 Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶 -1(NQO-1)的 mRNA和蛋白含量。结果空白组小鼠结肠长度、 ROS、MDA、SOD、GSH-px含量分别为( 12.53±0.94)cm、(9.39±0.76)U/mL、(4.32±0.37)nmol/L、(124.79±11.27)U/mL、(1 102.92±87.20)U/mL;模型组小鼠结肠长度、 ROS、MDA、SOD、GSH-px含量分别为( 5.63±0.45)cm、(13.30±1.47) U/mL、(7.65±0.81)nmol/L、(80.31±8.98)U/mL、(823.00±89.63)U/mL。与空白组相比,模型组小鼠体质量和结肠长度明显降低,结肠黏膜组织隐窝结构被破坏、杯状细胞减少、炎性细胞浸润明显,血清中 ROS、MDA含量明显增加,抗氧化酶 SOD、GSH-px活性明显降低, Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA及蛋白含量显著下降。半夏泻心汤高剂量组小鼠结肠长度、 ROS、MDA、SOD、GSH-px含量分别为( 8.97±1.20)cm、(10.49±1.04)U/mL、5.72±0.57 nmol/L、112.24±10.85 U/mL、1032.20±117.66 U/mL;半夏泻心汤中剂量组小鼠结肠长度、 ROS、MDA、SOD、GSH-px含量分别为( 8.03±0.69)cm、(11.23±1.11)U/mL、(6.47±0.30)nmol/L、(93.20±11.47)U/ mL、(993.96±96.72)U/mL;半夏泻心汤低剂量组小鼠结肠长度、 ROS、MDA、SOD、GSH-px含量分别为( 7.53±0.69)cm、(12.33±1.45)U/mL、(7.23±0.65)nmol/L、(84.89±9.07)U/mL、(891.06±86.61)U/mL。与模型组相比,半夏泻心汤干预后,小鼠体质量和结肠长度明显增加,结肠组织隐窝结构清晰且炎性细胞浸润减少,血清中 ROS和 MDA含量明显降低, SOD和 GSH-px活性明显增加,结肠组织中 Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达亦显著提高。结论半夏泻心汤可改善 UC症状,通过调节 Nrf2/HO-1相关蛋白表达水平,进而影响氧化应激指标 ROS、MDA、SOD和 GSH-px含量,减轻结肠病理损伤程度。为半夏泻心汤开发为防治 UC药物奠定一定基础。     

Protective effect of taurohyodeoxycholic acid from Pulvis Fellis Suis on trinitrobenzene sulfonic acid induced ulcerative colitis in mice

Ulcerative colitis is a nonspecific inflammatory disorder characterized by oxidative and nitrosative stress, leucocyte infiltration and up-regulation of pro-inflammatory cytokines. The aim of this study is to evaluate the effect of taurohyodeoxycholic acid (THDCA) isolated from Pulvis Fellis Suis on acute ulcerative colitis model induced by trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) in mice. The efficacy of THDCA was studied by macroscopical and histological scoring systems as well as myeloperoxidase (MPO) activity. Serum levels, including tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-6 were assayed by enzyme-linked immunoassay. The expression of cyclooxygenase (COX)-2 in the colons was assessed by immunohistochemical analysis. Treatment with THDCA in doses of 25, 50 and 100 mg/kg/day and sulfasalazine in a dose of 500 mg/kg/day used as reference for 7 consecutive days after the induction of colitis, significantly decreased colonic MPO activity, TNF-α, IL-6 serum levels and the expression of COX-2 in colon compared with TNBS induced ulcerative colitis model group. Moreover, THDCA attenuated the macroscopic colonic damage and the histopathological changes induced by TNBS. All the effects of these parameters were comparable to that of the standard sulfasalazine, especially at the highest dose level. The results suggested that THDCA from Pulvis Fellis Suis has a protective effect in TNBS-induced ulcerative colitis which might be due to its anti-inflammatory activities, and that it may have therapeutic value in the setting of inflammatory bowel disease.