基因治疗冠心病的研究进展

近年来 ,随着细胞生物学及基因重组技术的发展 ,基因治疗冠心病的研究已取得很大的进展 ,一些已成功应用于临床[1,2 ] ,成为当今心血管领域研究的热点。目前国内外研究较多的将血管生长因子如碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)及血管内皮细胞生长因子(ＶＥＧＦ)基因导入心脏 ,促使冠状动脉 (冠脉 )血管新生 ,侧枝循环建立 ,增加缺血心肌的血液供给 ,防御或减少心肌缺血或坏死 ,称之为“基因冠脉搭桥” ,为冠心病病的治疗提供了又一新途径。1　基因治疗方法学及进展1.1　概念 :基因治疗是指将目的基因通过相应载体导入靶器官或靶组织 ,并使…     

生长因子应用于冠心病治疗的实验和临床研究现状

近年来 ,人们发现一些生长因子有促进缺血组织血管新生、加速侧枝循环建立的作用 ,有可能通过直接提高缺血区血供来改善心肌缺血 ,为冠心病治疗提供了新的思路。目前研究较多的是血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)和成纤维细胞生长因子 (ＦＧＦ)。一、ＶＥＧＦ和ＦＧＦ在心肌的表达为了研究生长因子对心肌缺血的治疗作用 ,有必要了解他们在心肌缺血时的水平变化。ＶＥＧＦ是特异的血管内皮细胞促分裂物 ,有强大的促进新生血管生成的作用。体外和在体实验的结果均表明缺血和 (或 )缺氧可以诱导心肌ＶＥＧＦ及其受体的表达 ,ＶＥＧＦ可能介导心肌缺…     

心肌缺血的分子再血管化

应用促血管生成因子（AF）的蛋白多肽或表达基因治疗心肌缺血的分子再血管化技术成为人们关注的热点。AF包括一大类蛋白多肽,其中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和成纤维细胞生长因子（FGF）的研究最为深入,心肌缺血时VEGF和FGF及其受体表达增加,应用外源VEGF或FGF可以促进侧支和新生血管生成、改善血液灌注及减少缺血面积。心肌缺血的基因治疗是将AF的表达基因转入心脏,在局部产生表达蛋白发挥作用,一系列动物实验证实了其可行性。尽管目前仍有许多问题有待解决,但分子再血管化为终末期冠心病治疗提供了新的希望。     

闭塞性血管病的血管内皮生长因子基因治疗

闭塞性血管病基本治疗方法有药物治疗、血管介入成形术及血管搭桥术。血管内皮生长因子(ＶＥＧＦ)基因治疗以诱导血管生成为特点 ,现成为研究热点〔1〕。本文将ＶＥＧＦ基因调控、蛋白功能及其应用研究综述如下。1　ＶＥＧＦ基因及其表达调控人类ＶＥＧＦ基因定位于染色体 6ｐ12 〔2〕。ＶＥＧＦｍＲＮＡ选择性拼接而成大小不同的表达产物 :ＶＥＧＦ12 1、145、16 5、189、2 0 6 ,并赋予产物不同性质。ＶＥＧＦｃＤＮＡ全长 6 4 8ｂｐ ,分为 8个外显子〔1〕。人ＶＥＧＦ的基因分析显示 ,在其 3′ＰｏｌｙＡ加尾点下游6 0ｂｐ处 ,有一含有增…     

血管内皮细胞生长因子质粒治疗慢性缺血性心脏病的实验研究

以分子生物学手段来治疗组织缺血的方式被称为“治疗性血管生成”或“分子搭桥”,使用血管内皮细胞生长因子 (VEGF)基因治疗下肢或心肌缺血的治疗效果仍存在争议 ,我们在慢性心肌缺血模型基础上对VEGF基因的疗效进行了评价 ,为临床应用提供依据。材料与方法　　雄性小型猪 ,体重 (2 7 0± 3 2 )kg。全麻后左开胸于冠状动脉左回旋支近端套入慢性缩窄环 (内径 2 75mm ,ResearchInstrumentSW公司产品)。 4周后进行冠状动脉造影、心肌灌注单电子发射计算机断层扫描 (MPSPECT)和负荷超声心动图评价 ,符合慢性缺血标准的动物进入以后实验…     

血管内皮生长因子在治疗性血管生成中的应用

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是特异的有丝分裂素,除有促进内皮细胞增生、转移、增加血管通透性和血管生成的作用外,微血管造影证实ＶＥＧＦ可促进侧枝血管的形成。人重组ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ转基因治疗促进缺血模型的治疗性血管生成。ＶＥＧＦ基因还成功地用于严重下肢缺血病人的转基因治疗。     

VEGF基因治疗冠心病的现状

近年来 ,随着冠心病监护系统的建立、溶栓治疗、经皮腔内冠状动脉成形术 (PTCA)、冠状动脉内支架植入(ICS)及冠状动脉旁路移植术 (CABG)治疗技术的应用 ,冠心病患者的死亡率已呈明显下降。但是 ,PTCA术后再狭窄 ,CABG血管狭窄 ,冠状血管多支弥漫性病变等仍待解决。目前一种新的治疗手段 -血管新生疗法 ,通过促进心肌缺血小血管生长和侧支循环形成 ,为这类患者的治疗带来新的希望 ,血管内皮生长因子 (VEGF)是目前公认的最具有特异性而强大的促进新生血管形成的生长因子 ,现对 VEGF基因治疗冠心病的进展综述如下。1　 VEGF的生物…     

从微血管生成到肌性动脉生成探讨血管内皮细胞生长因子的成血管作用

血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)促心肌血管再生是国内外研究的热点 ,其过程包括先前存在的毛细血管出芽 ,最终形成毛细血管水平 (直径 5～ 8μｍ)的微血管。值得注意的是 ,这些新生毛细血管没有血管平滑肌或壁细胞包绕 ,脆弱而容易破裂 ,因此 ,从微血管生成到肌性动脉生成是心肌再血管化治疗的关键。我们试图从微血管生成到肌性动脉生成探讨血管内皮细胞生长因子的成血管作用。1　ＶＥＧＦ介导的微血管生成成人血管系统由富含内皮细胞层、平滑肌层的大动脉逐级分支为几乎仅由内皮细胞构成的毛细血管 ,这些毛细血管只有在某些情况下偶然被…     

人类生长因子诱导缺血性心肌的血管生成──一种冠心病治疗新方法的首次临床报告

本研究旨在评估动物实验中血管生长因子生物学效应以及人类生长因子（ｈｕｍａｎｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ；ＨＧＦ）治疗冠心病的潜在疗效。研究涉及（１）通过基因工程对ＨＧＦ的提取、分离、定性及纯化。（２）应用动物实验证实ＨＧＦ的新生血管作用，以及排除其任何可能的致病作用。（３）临床应用碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ；　ＦＧＦ－Ｉ）作为冠脉搭桥术后的辅助治疗并证实其新生血管作用。选择２０例患冠状动脉多支病变的患者进行研究（男性１４例，女性６例），最小年…     

血管内皮生长因子与心血管疾病

大量的动物实验证明血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）可促进新生血管的形成和侧支循环的建立，改善缺血组织的血供，ＶＥＧＦ及其基因治疗在动物实验和临床上取得了初步的成果，可改善心肌缺血，防治再狭窄，甚至在心脏和血管移植方面均有重要作用。     

沙立度胺对肺腺癌细胞系血管生成因子的影响

血管生成是肿瘤生长与转移的基础 ,抗血管生成是肿瘤治疗的新策略 ,沙立度胺 (ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ,商品名 :反应停 )是 2 0世纪 5 0年代问世的镇静药物 ,因其致畸作用而被淘汰 ,但近来发现它具有免疫调节及抗血管生成活性 ,对于实体瘤的治疗具有重要意义 ,但有关肺癌治疗的研究却极少。我们采用逆转录 ＰＣＲ与免疫细胞化学方法检测沙立度胺处理前后肺腺癌细胞系Ａ549碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ )与血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)表达水平 ,旨在探讨沙立度胺对肺腺癌细胞系血管生成因子表达的影响。材料与方法　细胞培养 :以含 10 …     

鼠萎缩性胃炎生长激素及其受体表达

生长因子家族是 2 0世纪逐步被发现的一组蛋白质激素 ,它包括生长激素 (ＧＨ)、表皮生长因子 (ＥＧＦ)、转化生长因子 (ＴＧＦ)、血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)、胰岛素样生长因子(ＩＬＧＦ)、成纤维生长因子 (ｂＦＧＦ)等。它们具有促进细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成 ,控制上皮组织生长、分裂以及分化作用。它们能促进损伤上皮修复 ,保护黏膜屏障。黏膜受到炎症等损伤刺激后的愈合过程受生长因子及受体调控。近年来研究发现 ,生长因子与胃黏膜疾病关系密切。但临床上能否用生长因子类或刺激生长因子类分泌的药物对萎缩性胃炎作逆转治疗 ,…     

心肌缺血时血管内皮生长因子的基因表达

目的：研究缺血对心肌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因表达的影响。方法：提取正常兔（ｎ＝２）、假手术兔（ｎ＝２）及冠状动脉左旋支结扎后不同缺血时间的兔（ｎ＝６）心肌总核糖核酸（ＲＮＡ），用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ＶＥＧＦ信使核糖核酸（ＶＥＧＦｍＲＮＡ）的表达。结果：正常及缺血兔心肌中均有３．９ｋｂ的ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达，但缺血心肌中表达明显高于正常心肌，心肌缺血３０分钟ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达即已明显增高，并持续增高达４小时。结论：兔心肌中有ＶＥＧＦ基因的基础表达，缺血可致其表达增加。关键词血管内皮生长因子心肌缺血信使核糖核酸表达     

基因治疗对激光及针刺隧道的组织学影响

激光心肌血运重建 (ＴＭＬＲ)和血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)基因都可以促进新生血管的生成 ,结合两者能否有协同作用呢 ?我们在正常的猪心脏上进行ＴＭＬＲ的同时转入外源性ＶＥＧＦ基因 ,检测 1个月后局部组织ＶＥＧＦ蛋白含量和组织学变化。一、材料与方法6只健康小型猪 ,左室前外侧壁分为 6个区域 ,每区域中用钬激光 (Ｅｃｌｉｐｓ,美国 )或活检针 (Ｔｒｕｅｃｕｔ,可切取径约0 .1ｃｍ的长条心肌 )打出三角形分布的 3个隧道 ,携带ＶＥＧＦ基因的复制缺陷型腺病毒 (ＡｄＶＥＧＦ)或携带ＬａｃＺ的腺病毒(ＡｄＬａｃＺ ,对照基因 ) 1× 10…     

酞胺哌啶酮对耐顺铂人肺腺癌细胞系血管生成因子的影响

血管生成在恶性肿瘤的增殖与转移中起重要作用[1 ] ,血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)与碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)的促血管生成活性已被公认[2 ] 。近来发现酞胺哌啶酮具有免疫调节及抗炎活性 ,且具有强大的抗血管生成效应。本研究通过采用逆转录 (ＲＴ) 聚合酶链反应 (ＰＣＲ)与免疫细胞化学方法 ,检测酞胺哌啶酮处理耐顺铂人肺腺癌细胞系Ａ549ＤＤＰ前后ＶＥＧＦ和ｂＦＧＦ的表达水平 ,探讨酞胺哌啶酮在降低人肺腺癌细胞系顺铂耐药中的作用。一、材料与方法1 .细胞培养 :用含 1 0 %胎牛血清的Ｄｕｌｂｅｃｃｏ改良培养基在 37℃、5 …     

肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子异常表达及其机制的研究进展

现已鉴定出数种具有促进或抑制作用的血管生成调节因子,其中血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）或称血管通透性因子,为一种特异的作用于血管内皮细胞的、已糖化的多功能蛋白,它与多种肿瘤的血管形成有关［１］。我们就ＶＥＧＦ的构成、结构特点和在肝癌中的表达特征等最新研究作一综述。 一、ＶＥＧＦ分布及基因构成 ＶＥＧＦ可促进毛细血管生成,可在很多正常组织中表达,但一般水平较低。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实ＶＥＧＦ在一些代谢旺盛、血供丰富的组织如肺、肾、心肌…     

促血管生成素1和血管内皮生长因子基因合适剂量配比有效促进血管生成

目的在大鼠后肢缺血模型中,探讨联合转染促血管生成素1和血管内皮生长因子基因治疗对新生血管数量和侧支循环形成的影响,并观察不同基因剂量配比对新生血管形态和功能的影响。方法制备大鼠后肢血管闭塞病变模型,采用电脉冲法介导转基因,按不同剂量配比进行肌肉组织转染携带促血管生成素1基因的质粒和/或携带血管内皮生长因子基因的质粒。采用逆转录聚合酶链反应检测外源基因的表达、免疫组织化学染色检测缺血局部毛细血管和小动脉的数量和分布、通过后肢血管造影检测侧支循环建立的情况。结果单独转促血管生成素1基因或血管内皮生长因子基因治疗组血管生成数量略有增加,联合基因治疗组中,血管内皮生长因子质粒剂量为100μg时,随着促血管生成素1质粒剂量的增加,小动脉计数较同期空载质粒对照组分别增加0.90倍、1.40倍和1.45倍;当促血管生成素1质粒剂量为100μg时,随着血管内皮生长因子质粒剂量的增加,小动脉计数较同期空载质粒对照组分别增加1.90倍、1.07倍和1.39倍。血管通透性检测表明,随着血管内皮生长因子质粒剂量的增加,血管通透性渐增加,促血管生成素1质粒能降低新生血管的通透性;其中促血管生成素1质粒200μg联合血管内皮生长因子质粒100μg组在有效促进小动脉形成的同时血管通透性与正常对照组最为接近。结论联合血管生成素1和血管内皮细胞生长因子基因治疗能更有效促进小动脉形成,其中血管内皮生长因子质粒与促血管生成素1质粒比例为1:2时血管通透性最接近生理状态,是比较理想的联合基因治疗剂量配比。     

血管内皮细胞生长因子与脑缺血

最近研究发现，脑缺血可诱导血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）及其受体ｍＲＮＡ蛋白的表达，内源性ＶＥＧＦ对缺血脑组织可能具有神经保护作用。缺血脑表面应用外源性ＶＥＧＦ可减小脑梗死体积，减轻缺血性脑水肿，减轻神经元的缺血性损伤。携带ＶＥＧＦ基因的载体有望成为缺血性脑血管病基因治疗的新手段。     

肌肉电针介导血管内皮生长因子基因治疗猴闭塞性血管病的实验研究

目的　利用一种新的基因转移方法探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗猴闭塞性血管病的可行性。方法构建重组ＶＥＧＦ基因的真核表达载体。转基因前３天肌肉内注入肌肉再生剂了哌卡因（ｂｕｐｉｖａｃａｉｎｅ）,通过电针向血管闭塞症猴（ｎ＝６）骨骼肌内转移重组ＶＥＧＦ基因（１６００μｇ／只）,应用血管造影、局部血管染色及超声多普勒等方法观察ＶＥＧＦ基因导入猴体内后的生物效应,并利用临床自动生化分析仪、病理切片和Ｂ超进行转基因的安全性研究。结果转ｐｃＤ２／ＶＥＧＦ基因２８天后,血管造影可见明显的新生血管和侧支循环形成,超声多普勒发现血流明显恢复,３个月后更显著,血管染色记数两组间差异有显著性（ＰｃＤ２／ＶＥＧＦ组４０．３±９．４３／ｍｍ２;ｐｃＤ２组２５．９±９．００／ｍｍ２,Ｐ＜０．０１）。血液生化测定、主要脏器病理切片和Ｂ超检查未发现异常。结论利用电针向肌肉内转移ＶＥＧＦ基因可促进局部组织新生血管形成和侧支循环建立,促进血流恢复,且安全、简便,为闭塞性血管病的基因治疗提供一种新的基因转移方法。     

血管内皮细胞生长因子在心脏的表达特点及衰老对血管生成的影响

血管生成及其相关因子表达随生长发育或创伤、缺血/缺氧及炎症反应而有不同的反应,促血管生成治疗是目前治疗血管阻塞导致的肢体和心肌缺血的研究热点,进一步研究血管内皮细胞生长因子及其受体在老年心脏中的表达规律以及老年常见疾病对心脏血管生成的影响,可为促血管生成治疗心肌缺血提供理论基础。