微量量热法研究天然虫草和人工虫草对大肠杆菌生长代谢的影响

考察天然虫草和人工虫草对大肠杆菌生长代谢的影响,评价虫草类中药的生物活性,为其质量控制提供研究基础。采用微量量热法,以指数生长期最大发热功率 (P_{1 max}) 和有效率 (E) 为指标,客观地表征天然虫草和人工虫草对大肠杆菌生长代谢的影响,并对实验结果进行聚类分析。结果显示,天然虫草和人工虫草有促进大肠杆菌生长、调节胃肠道微生态平衡的作用。与空白对照相比,当虫草质量浓度大于6.0 mg·mL⁻¹时,天然虫草对大肠杆菌生长代谢促进作用显著 (P < 0.05), 且与浓度间的量效关系良好 (r > 0.9),人工虫草的促菌作用不显著 (P > 0.05), 且与浓度无明显的量效关系 (r < 0.6),当虫草质量浓度 < 6.0 mg·mL⁻¹,促菌作用均不显著 (P > 0.05)。结果经聚类分析, 两者可较好地区分,提示微量量热法可用于评价天然虫草和人工虫草的质量, 在中药品质评价方面具有一定的应用潜力。     

微量量热法研究甘草多糖对细菌代谢作用的影响

甘草多糖是甘草中一种重要的活性物质,用微量量热法研究了甘草多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长代谢作用的影响.微量量热仪绘制了37℃时大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在不同浓度的甘草多糖作用下的热谱曲线,根据热动力学模型,分别得到了生长速率常数μ、抑制率Ⅰ、最大产热功率Pm以及最大产热功率所对应的时间Tp等热动力学参数,从热动力...     

应用微量量热法研究大肠埃希菌在白头翁总皂苷液中的代谢作用

目的确定大肠埃希菌在白头翁总皂苷液中的最佳生长浓度和临界生长浓度。方法微量量热法。结果测定了大肠埃希菌在不同浓度的白头翁总皂苷液中生长的热功率-时间曲线,应用限制性条件下微生物生长的模型进行数据处理,得出生长速率常数,并用计算机拟合出非线性方程。结论白头翁总皂苷液是抑菌的。     

应用微量量热法研究大肠埃希菌在白头翁总皂苷液中的代谢作用

目的确定大肠埃希菌在白头翁总皂苷液中的最佳生长浓度和临界生长浓度。方法微量量热法。结果测定了大肠埃希菌在不同浓度的白头翁总皂苷液中生长的热功率-时间曲线,应用限制性条件下微生物生长的模型进行数据处理,得出生长速率常数,并用计算机拟合出非线性方程。结论白头翁总皂苷液是抑菌的。     

应用基因芯片技术研究茶多酚对金葡菌基因表达的影响

目的 了解茶多酚对金葡菌的抗菌机制.方法 应用金葡菌全基因组表达谱芯片研究茶多酚对金葡菌的作用机制,观察茶多酚处理前后金葡菌基因组表达谱的变化,并以RT-PCR对部分差异表达基因进行验证.结果 共筛选出功能已明确的差异表达基因204个.与对照组比较,有160个基因表达上调,有44个表达下调.经RT-PCR验证,结果与全基因组表达谱芯片结果相符.结论 差异表达基因主要涉及金葡菌细胞生物合成、代谢和毒力因子合成等生物过程.     

抗病毒新药17997抗病毒效应的细胞微量量热的研究

目的研究抗病毒新药17997对细胞代谢的影响和抑制病毒复制时细胞热效应的变化。方法利用微量量热的方法。结果热代谢曲线表明 ,在有效抑制病毒复制浓度下 ,17997不影响宿主细胞的正常代谢 ,且能明显地降低病毒复制时的细胞热代谢。结论17997能够抑制病毒复制 ,对宿主细胞的热代谢没有影响。     

人参不同提取部位对大鼠肝脏线粒体影响的微量热研究

目的:研究人参不同部位对线粒体作用的微量热差异,同时为作用于线粒体的药物筛选建立新的方法。方法:采用微量量热法,动态的观察正常线粒体以及在不同部位作用下的线粒体的热代谢过程,观测热谱图的变化并计算一系列的热动力学参数。结果:人参不同部位均可使线粒体恢复速率常数减慢,总发热量增加,最高发热量降低,停滞期缩短。结论:通过对结果的分析,表明人参不同部位通过对代谢过程中多项指标的影响,均可提高线粒体的能量利用率,其中尤以F2的作用最为明显。同时为微量量热法在中药的活性筛选中的应用提供了较好的佐证。     

金葡菌对生物杀灭剂的耐药研究进展

随着生物杀灭剂在医院、社区和家庭中的广泛使用,耐生物杀灭剂的金葡菌被发现,并且已成为最近20年来引起广泛关注的问题.金葡菌耐生物杀灭剂的基因包括qacA,qacB和qacC,主要通过外排机制来表达对多种生物杀灭剂的耐药.本文结合近年来国外的研究动态,介绍金葡菌对生物杀灭剂的耐药情况和基因研究.     

微量量热技术在医药筛选和检验中的应用

基于物质间相互作用时存在的热能效应，几年来，本文用MS－80标准型Calvet微量量热计进行了一系列药物与人体细胞某些生物大分子相互作用的热动力学实验。这些实验包括：1.抗癌药物（去甲斑蟊酸钠[ASN],螺旋藻活性提取[Sp.P]和[Sp.S]等）以癌细胞（宫颈癌传代细胞[Hela]）、人乳腺癌细胞[Bcap-37]和[MCF-7]、人胃癌细胞[SGc-7901]等）以及正常人体细胞（人体胚肺二倍体细胞2BS]等）作用的热动力学研究；2.具有抗单胺氧化酶活性的生物碱类药物（骆驼逢碱[HL]、去氢骆驼逢碱[HM]等）在水溶液中对牛胸腺DNA嵌结合及其焓变的研究；3.长效医药（长效避孕药－复方甲基炔诺酮[HQ]等）和缓释医药（康太克[Contac]－复方盐酸苯丙醇胺）与生理盐水（0.9%的氯化钠水溶液）作用的研究。所有的实验结果都给出了各自的特征热动力学图谱及相互作用的焓变。通过实验结果的分析和总结，作者提出了将微量量热技术用于筛选和检验医药的新方法。文章中阐述了方法实施的科学依据，同时简单叙述了实验的过程及操作，并对实验结果进行了一些必要的讨论，与其他筛选和检验医药的方法相比，微量量热法有其明显的特点及优越性。     

赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

目的 探究赶黄草水煎液在体外对金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜(MRSA)形成的影响。方法 采用微量肉汤稀释法测定赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),根据MIC和MBC绘制杀菌曲线,采用结晶紫染色法和激光共聚焦观察赶黄草水煎液对SA和MRSA生物膜形成的影响,并通过测定胞外多糖和胞外DNA的含量研究赶黄草水煎液破坏SA和MRSA生物膜的作用方式。结果 赶黄草水煎液对SA的MIC和MBC分别为1.36和2.71 mg/mL,对MRSA的MIC和MBC为2.71和5.73 mg/mL;赶黄草水煎液可使SA和MRSA均生长受到抑制,抑制生物膜的形成、减少胞外多糖和胞外DNA的释放。结论 赶黄草水煎液对SA和MRSA具有良好的抑菌作用,可通过抑制胞外多糖和DNA的分泌破坏生物膜的形成。     

长春市金葡菌耐药状况及耐甲氧西林金葡菌基因分型

目的调查长春地区临床分离金葡菌的耐药状况及Panton—Valentine杀白细胞素（PVL）分布情况；确定耐甲氧西林金葡菌（MRSA）染色体及葡萄球菌me~盒式染色体（SCCmec）基因分型。方法琼脂稀释法测定苯唑西林等17种抗菌药物对2004年6月～2005年1月长春市3家教学医院临床标本分离的83株金葡菌的最低抑菌浓度（MIC）；聚合酶链式反应（PCR）进行金葡菌的PVL基因检测；脉冲场凝胶电泳（PFGE）对MRSA菌株作染色体同源性分析。多重PCR方法检测MRSA的SCCmec基因分型。结果83株金葡菌中MRSA12株（占14．5％）；金葡菌PVL的基因阳性7株（占8．4％）。MRSA对β-内酰胺类、红霉素、克林霉素、庆大霉素、四环素、氟喹诺酮类耐药率均超过90％，对氯霉素、利福平耐药率分别为8．3％、58．3％。未发现对糖肽类及复方磺胺甲嗯唑耐药的MRSA。甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）对青霉素G、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素耐药率分别为95．8％、67．6％、49．3％、45．1％、26．8％，对头孢菌素、氯霉素、利福平、氟喹诺酮类、复方磺胺甲曙唑耐药率均低于20％。MRSA的PFGE显示为A、B两种类型，以A型为主，占92％（11／12），三家医院均有分布。MRSA的SCCmec分型．Ⅲ型为主75％（9／12）。结论长春市MRSA发生率低于国内报道平均水平；MRSA为两种不同类型克隆株，在不同医院间存在克隆传播；未发现社区获得性MRSA菌株。     

胸腔内注射金黄色葡萄球菌滤液注射液治疗恶性胸水的疗效

目的 :研究金黄色葡萄球菌滤液注射液 (含金黄色葡萄球菌肠毒素C ,SEC)胸腔内注射治疗恶性胸水的疗效。方法 :经组织学或细胞学检查确诊的恶性胸水病人 12例 ,包括非小细胞肺癌 9例 ,小细胞肺癌 ,子宫肉瘤和黑色素瘤各 1例。行常规胸腔穿刺术并尽量抽尽胸水后注入金黄色葡萄球菌滤液注射液 10mL(含SEC 5 0ng) ,每周 2次 ,治疗时间 2～ 3wk。结果 :完全有效 (CR) 10例 (83% ) ,部分有效 (PR ) 2例 ,总有效率 10 0 %。CR中 1例无病生存达 2 0mo ,另有 2例分别在治疗后 10mo和 6mo死亡 ,但未见胸水复发。与治疗前比较 ,胸腔注射金黄色葡萄球菌滤液注射液 6h后普遍出现周围血液淋巴细胞轻度升高 ,而胸水淋巴细胞比例升高显著。未发现明显不良反应。结论 :胸腔内注射金黄色葡萄球菌滤液注射液治疗恶性胸水的疗效确切 ,使用安全简便     

金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因qacA的研究

目的 检测我院近年来临床分离的金葡菌耐消毒剂的qacA基因水平，为动态监测细菌耐药性的变化趋势、有效控制细菌耐药性的传播提供对策。方法 收集我科临床分离的金葡菌共252株，并经本实验室重新鉴定确认。参照美国CLSI／NCCLS标准，用6μg／ml苯唑西林和4％NaCl平板，筛选出耐苯唑西林金葡菌和对苯唑西林敏感的金葡菌。应用PCR基因扩增试验检测金葡菌中耐消毒剂的qacA基因水平。随机抽取一株MRSA阳性株进行基因测序，作qacA基因验证。作qacA基因阳性株的MIC检测，了解阳性株是否有耐药性的表达。结果 共检测金葡菌252株，其中MRSA84株（带有qacA基因4株），MSSA168株（带有qacA基因1株）。MRSA阳性菌株对消毒剂的MIC值明显高于MSSA菌株。结论 携带含有耐消毒剂基因qacA的金葡菌未在我院流行．     

异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的流行性及mgrA基因对万古霉素耐药性影响的研究

目的 监测郑州大学第一附属医院近5年来异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycin-intermediated Staphylococcus aureus, hVISA)的流行性,并进一步研究金黄色葡萄球菌mgrA基因对万古霉素耐药性的影响。方法 采用琼脂稀释法和E-test法检测万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC);MHA5T和菌群曲线分析法(PAP/AUC)检测hVISA,Real-time RT-PCR法测定hVISA和non-hVISA菌株中mgrA基因的mRNA表达水平,通过SOE-PCR+同源重组的方法敲除mgrA基因。结果 823株MRSA中共检出hVISA 147株,检出率为17.9%,hVISA菌株mgrA基因的mRNA表达水平是non-hVISA菌株的2.65倍,明显高于non-hVISA菌株(t=7.326, P<0.001),成功构建mgrA基因缺失株,并发现mgrA基因缺失株万古霉素耐药性有所下降。结论 本地区hVISA的流行率为17.9%,并且5年来检出率呈逐年上升的趋势,mgrA基因可能与万古霉素耐药性有关,本研究推测mgrA基因下调可使万古霉素耐药性下降,研究为进一步明确金黄色葡萄球菌对万古霉素的耐药机制提供了新的理论基础。     

MRSA表面标志物PBP2a的检出与苯唑西林MIC的相关性分析

目的研究MRSA表面标志物PBP2a与苯唑西林MIC的相关性。方法收集62株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过乳胶凝集试验和全自动细菌分析仪分别检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和苯唑西林MIC值。结果62株金葡中32株PBP2a检测阳性,30株PBP2a检测阴性。苯唑西林MIC≥4μg/ml31株,苯唑西林MIC≤2μg/ml31株。在苯唑西林MIC≥4μg/ml的31株MRSA中30株PBP2a检测均为阳性。结论金黄色葡萄球菌耐苯唑西林的耐药水平与PBA2a的检出有较好的相关性。     

金黄色葡萄球菌鉴别方法探讨

目的探讨金黄色葡萄球菌的检验方法,提高金黄色葡萄球菌的鉴定准确率。方法本研究针对金黄色葡萄球菌的特异性、敏感性、准确性进行研究,比较该方法与传统国标法的检测结果。结果在传统国标法上增加APIStaph鉴定试条试验,检测结果与国标法的显示阳性的检测结果相一致。结论此方法可对似阳非阳的结果进行判定,甚至对假阴性进行修正,防止漏检,明显提高了金葡菌的检出水平和准确性,对日常的检验工作具有很现实的指导意义,值得推广。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染现状与治疗进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是医院感染和社区感染的重要病原菌之一。近年来MRSA的感染率不断上升,其耐药性也日益严重,给人类带来了巨大挑战。合理使用抗生素、研究开发新药及新技术的应用对控制MRSA的蔓延具有重大意义。本文主要针对MRSA的感染现状、有效的治疗药物及新的治疗手段进行综述。     

生产工艺对清开灵注射液不良反应的影响

清开灵注射液在临床上应用的同时,其不良反应时有发生。本文在清开灵注射液生产工艺优化研究的基础上,从生产工艺角度分析引发清开灵不良反应的潜在原因,并提出相应减少不良反应发生的建议,以期为保障清开灵注射液临床应用安全、有效提供理论基础。