大黄中蒽醌类成分清除氧自由基作用的研究

目的通过研究大黄中游离蒽醌类成分大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚清除超氧阴离子自由基（O2.）的作用,从分子生物学的角度探讨大黄延缓衰老作用的可能机理。方法采用电子自旋共振技术（ESR）分别检测大黄中游离蒽醌类成分对O2.的清除作用。结果大黄中游离蒽醌类成分对O2.的清除作用,依次为大黄酸〉大黄酚〉大黄素〉大黄素甲醚〉芦荟大黄素。结论大黄所具有的延缓衰老的作用,可能与其所含的游离蒽醌类成分大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚具有清除O2.的能力有关。     

酒制大黄对大鼠体内药动学的影响

目的：建立同时测定大鼠血浆及组织中芦荟大黄素、大黄酸和大黄素的液-质联用方法,并探讨酒制大黄中游离蒽醌成分对大鼠体内的药动学的影响。方法：分别给予SD大鼠灌胃大黄生品和酒制品水煎液后,采用LC-MS测定血浆中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素的血药浓度的含量。结果：大黄酒制品组的药动学参数（Tmax、Cmax、T1/2和AUC0-t）与生品组相比具有显著性差异,大黄酒制后,芦荟大黄素和大黄素在大鼠体内的Tmax均有不同程度的延长,Cmax均较生品组高,AUC0-t也有不同程度的增加,说明大黄酒制后有助于促进芦荟大黄素和大黄素的吸收,增加其生物利用度。但两者的半衰期T1/2均有所减少,说明两者在体内代谢较快;大黄酸的药动学参数变化不大。结论：酒制大黄中游离蒽醌成分对大鼠体内的药物代谢动力学有较大影响,该研究结果为探讨大黄炮制机理提供实验依据。     

大黄总蒽醌胶囊血清药化学研究

目的:初步分析大黄总蒽醌胶囊含药血清中药源性成分。方法:大鼠灌胃给予大黄总蒽醌胶囊内容物,采集含药血清,高效液相色谱法测定其指纹图谱,与相同条件下测定的胶囊内容物、对照品及空白血清图谱比较,分析大鼠给药后体内产生的药源性成分并进行鉴定。结果:含药血清中产生药源性成分20个,其中6个为体外原形成分,14个为代谢产物,6个原形成分分别被鉴定为大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚,1个代谢产物被鉴定为芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷,其余13个代谢产物均具有大黄蒽醌类成分的紫外吸收特征。结论:本研究建立的方法准确可靠,可用于大黄总蒽醌胶囊血清药化学研究。     

不同炮制方法大黄饮片在贮存过程中蒽醌成分的含量变化分析

目的分析不同大黄炮制方法对饮片贮藏过程中蒽醌类成分含量变化的影响.方法 对3种大黄饮片1～12个月贮藏样品采用超高效液相色谱仪,检测其中的大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素和大黄素甲醚的含量变化.结果 5种蒽醌类成分在贮存过程中都存在明显下降的趋势,大黄酚及大黄素甲醚的含量下降尤为明显.不同饮片中,熟大黄中的蒽醌类成分含量变化较小,酒大黄中蒽醌类成分的含量下降明显.结论 不同炮制方法对大黄饮片贮藏过程中的蒽醌类成分的含量变化影响不同,虽然随贮藏时间的增加蒽醌类成分含量均有所下降,但以熟大黄变化最小,酒大黄变化最为明显.     

中药大黄不同炮制方法的成份分析试验

目的分析大黄不同炮制品的成分。方法薄层层析定性,紫外分光光度法定量。结果与结论生大黄总蒽醌含量最高、炮制后含量减少,炮制后游离蒽醌含量大于蒽醌甙。     

大黄炮制前后物质基础变化研究

目的:探讨大黄不同炮制品在炮制前后物质基础的变化规律。方法:分别制备生大黄、酒大黄、熟大黄、大黄炭等几种炮制品,采用薄层色谱法测定不同炮制品中干燥失质量和酸不溶成分、总灰分、浸出物含量;并测定鞣质及蒽醌含量变化。结果:生大黄、酒大黄、熟大黄、大黄炭总灰分及酸不溶灰分成分含量相差不多;酒大黄及熟大黄干燥失质量及浸出物含量没有明显变化,大黄炭干燥失质量及浸出物含量明显降低;大黄在炮制前后蒽醌及鞣质含量发生了变化,且变化程度同炮制条件的强烈程度相关。熟大黄中游离蒽醌含量最高,生大黄中结合蒽醌含量最多。结论:鞣质及蒽醌类物质为大黄泻下解热的物质基础。对饮片不同炮制品的物质基础变化进行研究,可为不同炮制品的质量鉴定提供参考。     

长期服用生大黄、熟大黄对大鼠肝肾功能影响的比较

目的:观察生、熟大黄对SD大鼠肝、肾功能的作用,明确生、熟大黄的毒性作用差异。方法:生、熟大黄总提物10 g·kg^-1给予大鼠灌胃95 d,相当于临床用量的100倍,观察对大鼠行为活动、肝肾功能、电解质影响,并对大鼠脏器进行系统观察和组织病理学检查。结果:与正常对照组比较,生大黄组、熟大黄组的BUN、Cys-c、Crea、β2-MG显著性升高、Na⁺显著降低(P<0.01);与生大黄组相比,熟大黄组的BUN、Cys-c、Crea、β2-MG均显著性下降、Na⁺显著升高(P<0.01~0.05);生大黄组大鼠肾脏有色素沉积、肿胀变性,熟大黄组大鼠色素沉积。结论:长期服用生、熟大黄对大鼠的肾功能有一定的损伤,熟大黄可减轻生大黄的肾损伤作用。     

一测多评法测定肾康栓中的大黄蒽醌类成分

目的建立一测多评法测定肾康栓中大黄蒽醌类成分含量的HPLC法,并进行方法学考察。方法以大黄素为内标,建立芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚的相对校正因子。分别采用外标法和一测多评法测定肾康栓中5种大黄蒽醌类成分的含量。结果肾康栓中蒽醌类成分间的相对校正因子分别为f_(芦荟大黄素/大黄素)=0.750,f_(大黄酸/大黄素)=0.860,f_(大黄酚/大黄素)=0.690,f_(大黄素甲醚/大黄素)=0.930。采用一测多评法计算的含量与外标法实测值比较差异无统计学意义。结论一测多评法可用于测定肾康栓中5种大黄蒽醌类成分的含量。     

门静脉吸收动力学模型与大黄蒽醌在正常大鼠体内吸收动力学研究

目的:探索门静脉吸收动力学模型应用的可行性,并考察大黄游离蒽醌在大鼠门静脉的吸收动力学特征.方法:正常大鼠十二指肠给予大黄游离蒽醌,同时采集门静脉和颈总静脉血液,采用反相离子对高效液相色谱法测定血浆中五种游离蒽醌的浓度.首次提出了门静脉吸收动力学模型,以门静脉浓度与颈总静脉浓度差值表示药物吸收浓度,并在此基础上采用统计矩法计算吸收动力学参数.结果:门静脉血浆中大黄素甲醚仅在个别动物少数时间点可以检测到,大黄素与大黄酚多数浓度都低于最低定量限;颈总静脉血浆中仅大黄酸浓度高于最低定量限.因此,本文仅对芦荟大黄素和大黄酸的血药浓度进行了吸收动力学参数的计算.结论:应用门静脉吸收动力学模型研究药物的吸收动力特征方法可行.芦荟大黄素和大黄酸在正常大鼠体内的吸收具有性别差异;二者属于慢吸收化合物;研究提示芦荟大黄素在肝脏内具有代谢过程.     

X-5大孔树脂分离纯化5种大黄蒽醌的工艺研究

目的 研究X-5大孔吸附树脂对大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸的吸附性能及纯化工艺.方法 用HPLC测定5种大黄蒽醌的含量,以总蒽醌为指标,考察X-5大孔吸附树脂对大黄总蒽醌的纯化工艺及参数.结果 X-5型大孔吸附树脂对大黄总蒽醌具有良好的吸附性能,大黄的上样浓度为0.064 g·mL-1,流速1 BV·h-1,洗脱剂为3倍量树脂柱体积的70%乙醇.结论 通过X-5型大孔吸附树脂富集、纯化后,总蒽醌含量达13%,浸膏收率为11%,表明该树脂分离、纯化大黄总蒽醌的工艺可行.     

Distribution and pharmacokinetics of five Rhubarb anthraquinones in rabbits and rats

The main active components of Rhubarb are anthraquinones (AQs), most of which are glycosides and others are free. The concentrations of AQs derivatives (rhein, aloe-emodin, emodin, chrysophanol and physcion) in plasma and homogenate were assayed with a high performance liquid chromatography (HPLC) method. The pharmacokinetic parameters and distribution of Rhubarb AQs in rabbits or rats were studied after administrationof different formulas. Elimination of AQs was fit to a two-compartment model in rats and rabbits. There were no significant difference in the main pharmacokinetic parameters between rhein and AQs in rats. AQs were distributed progressively in the kidney, liver, blood, and heart. The AQs were mainly composed of rhein in vivo and was excreted by the kidney. For formulas that contained Rhubarb, rhein could be used as a probe for in vivo pharmacokinetic studies.     

中药大黄的生化学研究.ⅪⅩ.蒽醌衍生物对线粒体呼吸链的抑制部位

本实验结果表明:大黄素、大黄酸和芦荟大黄素是线粒体呼吸链电子传递的抑制剂。(1)三药对NADH脱氢酶有不同程度的抑制作用,(2)大黄素对琥珀酸脱氢酶有较强的抑制作用,而大黄酸和芦荟大黄素对此酶仅有轻微的抑制作用;(3)三药对辅酶Q-细胞色素C还原酶及细胞色素C氧化酶也仅有轻微的抑制作用;(4)动力学观察表明:三药对NADH脱氢酶的抑制均为竞争性的。     

5个蒽醌三三配伍治疗脑缺血大鼠的药代动力学研究

目的:建立LC-MS方法测定大鼠血浆中蒽醌成分含量,探讨5个大黄蒽醌成分(芦荟大黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚)三三配伍时在脑缺血大鼠模型中的药代动力学特征.方法:MCAO法制备大鼠局灶性脑缺血模型.模型大鼠随机分成11组,空白组1组,给药组10组.给药组将5个大黄蒽醌三三结合,给药剂量:芦荟大黄素(A) 1...     

黄芩对大黄蒽醌在提取精制过程中转化的影响

目的探讨黄芩对大黄中5种蒽醌类成分在提取精制过程中相互转化的影响。方法 HPLC测定药材和提取物中5种成分的含量,比较药材和提取物中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的相对比例;再分别用5种蒽醌的对照品加入和不加黄芩药材提取液模拟提取精制过程,考察5种蒽醌成分之间的转化情况。结果大黄药材和提取物中5种成分的相对比例有明显变化,大黄酸在提取物中的比例增高;同时采用对照品模拟提取精制过程时各个成分并无转化,而加入黄芩药材提取液后,大黄酸经过提取精制处理后能部分转化为大黄素,其余4种成分之间无转化。结论黄芩和大黄药材配伍提取可以使大黄蒽醌类成分发生转化。     

中药大黄的综合研究——Ⅻ.蒽醌衍生物对艾氏腹水癌细胞呼吸和酵解的影响

本实验观察大黄蒽醌衍生物对艾氏腹水癌细胞呼吸和酵解的影响。实验结果表明:(1)大黄素对艾氏腹水癌细胞呼吸有较强的抑制作用,50%抑制的浓度为20μg/ml,至于大黄酸则有中等程度的抑制作用,而芦荟大黄素和大黄酚只有轻度的抑制作用。(2)大黄素对艾氏腹水癌细胞对某些氨基酸和糖代谢中间产物的氧化和脱氢也有很强的抑制作用,例如大黄素50μg/ml对乳酸的氧化和脱氢的抑制率分别为87%和91%。(3)大黄酸对艾氏腹水癌细胞的酵解也有明显的抑制作用,25μg/ml的抑制率为60%,而大黄素对酵解则反而有刺激作用。(4)大黄素(25和50μg/ml)和大黄酸(25μg/ml)对宿主正常组织,如肝和肾等匀浆呼吸几乎无抑制作用,但大黄酸50μg/ml对正常组织,尤其是脑组织匀浆呼吸有一定的抑制作用。     

环糊精修饰混合胶束电动色谱法测定大黄中6种有效成分

目的分离、测定大黄样品中6种有效成分。方法用20 mmol·L^-1硼砂缓冲溶液(含20 mmol·L^-1脱氧胆酸钠、20 mmol·L^-1牛磺胆酸钠和15 mmol·L^-1 β-环糊精),通过环糊精修饰的混合胶束电动色谱内标定量法测定。结果在25 min内分离出芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、土大黄苷、大黄素甲醚和大黄酚,对缓冲溶液pH、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠和β-环糊精浓度等分离条件进行了优化。考察了方法的线性行为、精密度和回收率,并对生大黄和蒙古大黄样品进行了测定。结论本法可作为鉴别大黄优劣的有效方法之一。     

Extra-weak chemiluminescence of drugs. X. Extra-weak chemiluminescence quenching component of rhubarb

Active components contained in rhubarb (Rhei Rhizoma) that show a quenching effect of extra-week chemiluminescence (CL) arising from Maillard reaction, had been studied. As the result of fractionation and purification of rhubarb, CL quenching activity was found to exist mainly in the fraction of quinone derivatives as emodin, aloe-emodin or rhein. The authentic samples of these quinones showed high CL quenching activities.     

中药大黄的綜合研究 Ⅱ.蒽醌衍生物的紙上层析

本文研究了中药大黄中蒽醌衍生物纸上层析的扩展剂体系和其他条件.实验试用了33种扩展剂体系,我们选择了8种效果较好者,其中以四氯化碳-苯-水体系为最好.以此改进的纸上层析法进行了不同品种大黄中蒽醌衍生物含量的测定,实验结果表明,不同品种及同品种不同部位的大黄中各种蒽醌衍生物的含量差异很大.蒽醌衍生物总量及致泻与抗菌有效成分,都以西宁大黄为最高.     

Synergistic effects of anthraquinones on the purgative activity of rhein anthrone in mice

This study was performed to determine whether intracaecally administered rhein anthrone and anthraquinones such as aloe-emodin, chrysophanol, emodin or rhein synergistically enhance the purgative action as has been observed for rhein anthrone and aloe-emodin anthrone. These anthraquinones were less potent than rhein anthrone. An equimolar mixture of aloe-emodin and rhein anthrone had synergistic potentiating effects because the ED50 value (50% purgative dose) of the combination was smaller than that calculated additively from the ED50 values of aloe-emodin and rhein anthrone. An equimolar mixture of other anthraquinones and rhein anthrone tended to potentiate the purgative action. These results confirmed that rhein anthrone and aloe-emodin synergistically exert a purgative action as has been observed for rhein anthrone and aloe-emodin anthrone.     

Participation of cathepsin B in emodin-induced apoptosis in HK-2 Cells

Emodin (1,3,8-trihydroxy-6-methyl-anthraquinone) and rhein (4,5-dihydroxyanthraquinone-2-carboxyl acid) are two main active compounds in total rhubarb anthraquinones (TRAs), which showed nephrotoxicity in Sprague Dawley (S.D.) rats in our previous study. However, it is unknown yet whether emodin and rhein have cytotoxic effects on kidney. To address this issue, HK-2 cells, a human proximal tubular epithelial cell line, were treated with different concentrations of emodin or rhein, and cell viability and morphological changes were investigated. The ratio of hypodiploid cells and the activity of caspase 3 protease were also detected. Results showed that addition of emodin but not rhein at concentrations above 40muM for 24h reduced cell viability and induced apoptosis in HK-2 cells. Additionally, emodin at apoptosis-inducing concentrations caused expression of cathepsin B (CB) protein and activation of CB protease. Addition of CB inhibitor, CA-074, significantly attenuated the ratio of hypodiploid and apoptotic cells, partially blocked caspase 3 activation and inhibited reduction of cell viability induced by emodin. These data indicate that emodin possesses cytotoxic effects on HK-2 cells partially through induction of CB protein and activation of CB protease.