苏林酸诱导结肠腺癌HT-29细胞凋亡的实验研究

为观察苏林酸对结肠腺癌HT-29细胞有无促凋亡作用,采用流式细胞仪检测、DN A电泳和透射电镜观察苏林酸对HT-29细胞的促凋亡作用.结果:流式细胞术、DNA电泳和透射电镜观察均显示苏林酸可诱导HT-29细胞凋亡,且具有时间和剂量依赖性.用0.3mmol/L 、0.6mmol/L和1.2mmol/L苏林酸处理48小时,凋亡细胞分别占5.8%、7.6%和11.7%,处理72 小时则分别升为12.5%、15.4%和24.2%,而对照组凋亡细胞分别占2.9%和5.1%,处理组和对照组差异显著(P＜0.05).以上结果表明,本实验条件下,苏林酸可诱导HT-29细胞凋亡,抑制其增殖.     

五肽胃泌素及丙谷胺对人结肠癌细胞增殖的影响

目的：探讨五肽胃泌素（ｐｅｎｔａｇａｓｔｒｉｎＰＧ）及丙谷胺（ｐｒｏｇｌｕｍｉｄｅＰＧＬ）对体外培养的人结肠癌细胞株ＨＴ２９增殖的影响。方法：用ＭＴＴ法测定细胞生长曲线，用流式细胞仪分析细胞周期变化。结果：ＰＧ能明显刺激ＨＴ２９细胞增殖，２．５×１０－６ｍｏｌ／ＬＰＧ使细胞倍增时间缩短５小时，提高细胞增殖指数（Ｐ＜０．０１）。ＰＧＬ能抑制ＰＧ的促增殖作用，单独使用能抑制ＨＴ２９细胞增殖，４ｍＭＰＧＬ能使ＨＴ２９细胞倍增时间延长１１小时，并降低增殖指数（Ｐ＜０．０１）。结论：胃泌素可能在结肠癌的生长中具有调节作用，胃泌素受体拮抗剂可能在结肠癌的治疗中具有重要作用。     

苯乙酸对胶质瘤细胞C6DNA合成的抑制作用

目的：观察诱导分化剂苯酸对胶质瘤细胞Ｃ６的诱导分化作用，并在发子水平上探讨其作用机理。方法：细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测细胞增殖，流式细胞术分析细胞周期。结果：苯乙酸对细胞增殖存在剂量（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，５．０ｍｍｏｌ／Ｌ）依赖性抑制，免疫细胞检测ＣＰＭ值降低，肿瘤细胞ＤＮＡ合成减少，细胞周期分析Ｇ０／Ｇ１期所占比例下降，Ｓ期相对升高。结论：苯乙酸可阻抑细胞增殖周期，使细胞周期增殖循环上止     

γ—射线诱导HL—60细胞凋亡的观察

目的 观察γ－射线诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的时间和剂量效应,以探求辐射诱发肿瘤细胞凋亡分子机制。方法 分别以２．５、５、７．５、１０、１５Ｇｙ γ－射线照射ＨＬ－６０细胞,于照后继续培养３、６、９、１２、２４、２７、３０ｈ,分别收获细胞。电泳检测ＤＮＡ梯状带;流式细胞术（ＦＣＭ）细胞凋亡定量并观察细胞周期变化;Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８－ＰＩ复染荧光显微镜计数凋亡细胞及已死亡细胞百分率。结果 ＨＬ－     

一种快速灵敏分离凋亡细胞DNA片断的方法

一些资料表明氧应激能导致小鼠胸腺细胞凋亡。用含有２０μｍｏｌ／Ｌ的地氧化氢和０．１ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸亚铁的磷酸缓冲液处理胸腺细胞１０ｍｉｎ后去掉处理液，再用含有１０％的小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养基在３７℃５％ＣＯ２条件下分别培养０，１，２和４ｈ。测量凋亡细胞的ＤＮＡ片段的百分数，同时比较了两种ＤＮＡ抽提方法对凋亡细胞“ＤＮＡｌａｄｄｅｒ”的影响。结果提示快速一步法抽提凋亡细胞的“ＤＮＡ ｌａｄｄ     

胃泌素及其受体拮抗剂对结肠癌HT29细胞生长的调节

目的：探讨胃泌素类似物五肽胃泌素（ＰＧ）及胃泌素受体拮抗剂丙谷胺（ＰＧＬ）对体外培养的人结肠癌细胞株ＨＴ２９生长的影响。方法：采用ＭＴＴ法检测细胞增殖情况用流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞周期变化。结果：高浓度的ＰＧ（１０－５～１０－７Ｍ）能明显促进ＨＴ２９细胞的增殖（Ｐ＜００５），低浓度的ＰＧ（１０－８～１０－１０Ｍ）对ＨＴ２９细胞无明显促增殖作用（Ｐ＞００５）。ＰＧＬ能抑制ＰＧ对ＨＴ２９细胞的刺激作用，并对ＨＴ２９细胞的增殖有直接抑制作用（Ｐ＜００５）。细胞周期分析显示ＰＧ能缩短细胞Ｇ３／Ｇ１期，ＰＧＬ则延长细胞Ｇ０／Ｇ１期（Ｐ＜００５）。结论：胃泌素对体外培养的ＨＴ２９细胞的生长具有调节作用，胃泌素受体拮抗剂可能在结肠癌的治疗中发挥重要作用。     

阿霉素诱导亲本S—180和抗药S—180—R细胞凋主恨的差异

目的探讨阿霉素对抗阿霉素细胞系Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡的作用。方法用低剂量和主同剂量阿霉素分别处理亲本Ｓ－１８０和扩Ｓ－１８０－Ｒ细胞腹腔接种的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠，７２ｈ取腹水，用流式细胞仪测定细胞ＤＮＡ相对含量。结果低剂量阿霉素７２ｈ使亲本Ｓ－１８０细胞出现６２．５％的凋亡，使抗药Ｓ－１８０－Ｒ仅出现１３．０％的凋亡细胞，高主一阿霉素７２ｈ亲本Ｓ－１８０细胞几乎全部死亡，使Ｓ－１８０－Ｒ出现２０．０％     

阿霉素在小鼠体内诱导S—180瘤细胞凋亡的作用

（１）目的探讨阿霉素对细胞凋亡的影响。（２）用低剂量（３．２５μｇ）阿霉素处理Ｓ－１８０瘤细胞腹腔接种的ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠，０～７２ｈ取腹水，用流式细胞仪测定细胞ＤＮＡ相对含量，（３）结果阿霉素处理０，２４，４８，７２ｈ后，凋亡细胞分别占０．５％，８．３％，３８．１％，６２．５％，７２ｈ后凋亡达到高峰，并在Ｓ１－８０瘤细胞接种鼠腹水中出现依时间递增的淋巴细胞，（４）结论：阿霉素对Ｓ－１８０瘤细胞是一     

维甲酸诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：观察维甲酸（ＲＡ）在体外诱导ＨＬ６０细胞（人早幼粒细胞白血病细胞株）凋亡的作用,探讨维甲酸治疗早幼粒细胞白血病的作用机制。方法：用ＤＮＡ电泳、ＤＮＡ片段定量测定技术、流式细胞术分析及光镜和电镜观察凋亡细胞。结果：在体外培养中加维甲酸５０ｍｇ／Ｌ孵育４ｈ,ＤＮＡ片段率达５５７％±１２１％,而对照为１２５％±４９％（Ｐ＜０００１,ｎ＝９）;流式细胞术检测发现,在５０ｍｇ／Ｌ维甲酸作用下,细胞凋亡达５０％,对照为９％。电镜观察维甲酸组ＨＬ６０细胞出现典型的凋亡细胞形态改变。维甲酸诱导ＨＬ６０细胞凋亡具有剂量及时间依赖性,维甲酸作用６ｈ,出现凋亡高峰;随维甲酸浓度升高,诱导凋亡作用明显增强。在环孢素Ａ（ＣｓＡ）存在时,低浓度的维甲酸也有明显诱导ＨＬ６０细胞凋亡作用。结论：维甲酸在体外能诱导ＨＬ６０细胞凋亡,ＣｓＡ能增强维甲酸诱导ＨＬ６０细胞凋亡活性。研究提示诱导白血病细胞凋亡是维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病的重要机制之一。     

牛磺酸对小鼠脾细胞DNA修复能力的影响

①目的观察牛磺酸对小鼠脾细胞ＤＮＡ修复能力的影响，以探讨牛磺酸抗衰老的机制。②方法以不同鼠龄小白鼠脾细胞悬液进行培养，实验组培养液中加入牛磺酸（３０μｇ／ｍｌ），以１０ｍｍｏｌ／Ｌ羟基脲抑制ＤＮＡ复制，经紫外线照射后，以３Ｈ－胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＤＮＡ损伤后修复能力。③结果鼠龄１１０ｄ，１５０ｄ和１８０ｄ３组小鼠中，ＤＮＡ修复能力均随鼠龄增加而降低，但在不同鼠龄阶段，牛磺酸组ＤＮＡ修复能力均高于对照组，牛磺酸组的闪烁值分别为８．０±０．６Ｈｚ，５．３±０．５Ｈｚ和４．１±０．４Ｈｚ，而对照组则分别为６．３±０．７Ｈｚ，４．７±０．５Ｈｚ和３．２±０．２Ｈｚ（ｔ＝７．５０，２．８７，３３．８０，Ｐ均＜０．０１）。④结论牛磺酸具有增强小鼠脾细胞ＤＮＡ的修复能力和延缓衰老的作用。     

羟基磷灰石纳米粒子抑制结肠癌SW-480细胞生长的体外实验

目的:本研究旨在明确羟基磷灰石纳米粒子(HAP)在体外能否诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡并从凋亡角度探讨其抑癌机制。方法:用HAP以不同浓度作用于人结肠癌SW-480细胞,以诱导其凋亡。用MTT比色法观察其细胞毒性,荧光显微镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞术(FCM)等方法来检测凋亡,观察其形态学和生化方面的变化。结果:HAP以剂量和时间依赖的方式抑制人结肠癌SW-480细胞的生长。25 mg/L,50mg/L HAP作用72 h细胞的生长抑制率分别是49.71%和61.03%。12.5-100 mg/L的HAP处理48 h后,结肠癌细胞表现为细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形式等凋亡特征的形态学改变。流式细胞仪均能检测到凋亡峰,12.5,25,50,100 mg/L HAP作用48 h,凋亡率分别是3.57%,21.45%,37.10%和49.45%。结论:HAP在体外能抑制人结肠癌SW-480细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

三叶青乙酸乙酯提取物诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡

目的:评价三叶青乙酸乙酯提取物(ethyl-acetate fraction of extracts from Tetrastigma hemsleyanumDiels et.Gilg,EAFT)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:体外培养HT-29细胞。FITC标记annexinⅤ/PI染色流式细胞术分析细胞凋亡率。ELISA法测定细胞组蛋白/DNA碎片。Western Blotting分析细胞Bax蛋白和细胞色素C的表达。结果:EAFT以浓度依赖方式诱导annexinⅤ染色阳性细胞百分率和组蛋白/DNA碎片增加(P<0.01)。10.0 mg/L EAFT分别作用HeLa细胞6 h、12 h和24 h,细胞色素C和Bax蛋白表达上调。结论:EAFT具有诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用,其作用机制与激活线粒体途径有关。     

NF-κB途径在舒林酸促人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

目的探讨核因子κB（NF-κB）途径在舒林酸促人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,舒林酸（0.1、0.3、0.6、1.2、2.4 mmol/L）作用后,苏木精-伊红染色、电镜观察药物作用后细胞形态学变化,免疫组化、Western-blot方法检测药物对人胃癌SGC-7901细胞核因子κB（NF-κB）、bcl-2、bax蛋白表达的影响。结果苏木精-伊红染色检测结果显示舒林酸抑制肿瘤细胞生长,肿瘤细胞出现核固缩、核碎裂、染色质边集等凋亡及坏死的形态学表现;电镜下可看到染色质边集、凋亡小体;免疫组化、West-ern-blot结果显示舒林酸作用48 h后人胃癌SGC-7901细胞NF-κB、bcl-2表达逐渐下降,bax表达逐渐上升,具有剂量依赖性。NF-κB与bcl-2蛋白表达率之间具有相关性（r=0.846 5,P〈0.01）。结论舒林酸可以促进人胃癌SGC-7901细胞凋亡,NF-κB途径在舒林酸促进胃癌SGC-7901细胞凋亡中发挥部分作用。     

舒林酸对胃癌细胞株BGC-823作用的实验研究

目的: 研究舒林酸对胃癌细胞株BGC-823增殖、凋亡的作用,探讨其作用机制。方法: 体外培养的胃癌细胞株BGC-823加入不同浓度的舒林酸作用不同时间后,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,四甲基噻唑氮蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期;透射电镜观察细胞超微结构变化及凋亡形态变化,DNA电泳检测细胞凋亡DNA片段。结果: 舒林酸可以改变胃癌细胞株BGC-823的形态,抑制其生长,影响其细胞周期分布,透射电镜观察到细胞凋亡的形态,DNA电泳检测出典型的细胞凋亡的特征性梯状条带。结论: 舒林酸有抑制胃癌细胞株BGC-823增殖,诱导其凋亡的作用,并且可能与舒林酸影响其细胞周期分布、抑制了环氧合酶-2(COX-2)表达有关。     

三氧化二砷在体外抑制结肠癌细胞的研究

目的 在体外观察三氧化二砷(As2O3)对结肠癌细胞系HT-29的抑制作用,并探讨其作用机制,为其是否能作为结肠肿瘤的化疗药物提供理论基础.方法 将不同浓度As2O3作用于HT-29细胞不同时间后,用MTT检测细胞抑制率,光镜及透射电镜观察细胞形态学和超微结构的变化,通过流式细胞仪及共聚焦显微镜分析凋亡及自噬.结果 4.0μmol/L As2O3作用72h可明显抑制HT-29细胞增殖及诱发其凋亡,且抑制率与药物作用时间及浓度成正比.在凋亡早期细胞形态学变化在光镜下可见细胞缩小变圆,在电镜上可见细胞质浓缩、核固缩及自噬溶酶体.4.0μmol/L As2O3作用72h后HT-29细胞凋亡率为25%.结论 As2O3能明显抑制结肠癌细胞系HT-29的增殖,其作用机制与引起凋亡及自噬密切相关.     

联合索拉非尼与TRAIL对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的:研究多激酶抑制剂甲苯磺酸索拉非尼(SOR)是否具有增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:体外培养HT-29细胞。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析亚二倍体(sub-G1)细胞百分率。比色法测定细胞Caspase-3活性。AO/EB双染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果:SOR(5μmol/L)和TRAIL(100ng/mL)以及两者合用作用48小时HT-29细胞的sub-G1百分率分别是4.65%±2.33%、5.29%±2.80%和42.6.50%±4.65%;HT-29细胞的Caspase-3的活性分别是培养基组的1.24、1.37和9.51倍。两者合用展示出细胞核染色质固缩和碎裂的典型凋亡细胞形态。结论:亚细胞毒性浓度的SOR具有增强TRAIL诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。     

白藜芦醇抑制食管癌Eca109细胞增殖的初步研究

目的观察白藜芦醇对人食管癌Eca109细胞增殖影响及凋亡诱导作用。方法噻唑蓝法测定细胞生长抑制率,倒置显微镜、透射电镜和HE染色法观察细胞的形态变化,流式细胞术用于检测白藜芦醇培养Eca109细胞前后的细胞凋亡情况。结果白藜芦醇对Eca109细胞生长有抑制作用,抑制率达76.42%,并呈剂量、时间效应关系。倒置显微镜下可见细胞生长明显被抑制,胞浆内颗粒增多增粗,部分细胞变圆悬浮在培养基中;HE染色和透射电镜观察发现白藜芦醇能诱导Eca109细胞呈现典型的细胞凋亡特征,如细胞体积变小,染色质浓缩等。流式细胞术检测结果显示,40 mg/L白藜芦醇培养Eca109细胞72 h后细胞凋亡率达19.52%,在DNA直方图上有明显的亚二倍体凋亡峰。结论白藜芦醇能明显抑制Eca109细胞增殖,并进一步诱导食管癌细胞凋亡。     

肌醇六磷酸对结肠癌HT-29细胞分化的影响

目的 研究肌醇六磷酸(IP6)对结肠癌细胞株HT-29细胞周期的影响,探讨IP6诱导HT-29细胞分化的作用及其机制.方法 将HT-29细胞与不同浓度(0、1.8、3.3 mmol/L)IP6共同孵育24、48、72 h后,收集细胞,使用流式细胞仪检测细胞周期,并用透射电镜观察细胞结构的变化.结果 除1.8 mmol/L IP6作用24 h对HT-29细胞周期分布没有明显的影响外,其他各组G0/G1期细胞明显增多,S期、G2/M期细胞则相应减少.同时,IP6作用后细胞结构发生改变,出现核固缩、细胞器丰富、微绒毛增多等分化趋势.结论 IP6能够调节HT-29细胞周期,阻止细胞从G0/G1期进入S期,从而诱导细胞分化.     

蟾蜍毒素诱导结肠腺癌细胞HT-29凋亡中对相关蛋白的影响

目的 探讨蟾蜍毒素诱导结肠癌细胞株HT-29凋亡及其机制.方法 MTI检测蟾蜍毒素对结肠腺癌细胞HT-29增殖抑制;瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学变化;流式细胞术分析细胞凋亡;Western-Blot检测livin、Bcl-2、Bax及Capase-3蛋白的表达.结果 蟾蜍毒素抑制HT-29细胞增殖,呈时间、剂量依赖关系;蟾蜍毒素诱导HT-29细胞凋亡,形态学观察到典型的凋亡小体;流式细胞仪检测到明显亚二倍体凋亡峰;蟾蜍毒素诱导细胞凋亡过程中下调livin、Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,并活化Caspase-3蛋白.结论 蟾蜍毒素诱导HT-29细胞凋亡可能与下调livin、Bcl-2蛋白、上调Bax蛋白表达并活化Caspase-3有关.