抗人T细胞单克隆抗体的应用及应注意的几个问题

1979年,龚忠恕(P.C.kung)和Golds-tein等首次报道抗人T细胞单克隆抗体(McAb)OKT系列制备成功。其中,OKT3与大约70％正常人外周血单个核细胞(PBM)反应,识别全部T细胞;OKT4与40％～50％正常人PBM反应,识别诱导和辅助T细胞亚群(Ti/h);OKT8与20％～30％正常人PBM反应,识别杀伤抑制性T细胞亚群(Tc,s)。     

自身免疫病与淋巴细胞、单核细胞亚型

正常人末梢血中T细胞用单克隆抗体分为二个亚型:一是有辅助功能的亚群,称OKT4或Leu3a;二是有杀伤和抑制活性的亚群,称Leu2a或OKT8T细胞.OKT4细胞可对破伤风外毒素和链球菌"O"溶血毒素、簇抗原Ⅱ(ClassⅡ抗原)以及PHA刺激发生反应.OKT8T细胞对PHA刺激无反应,能识别簇抗原Ⅰ(ClassⅠ抗原),     

用武系列单克隆抗体检测健康成人外周血淋巴细胞亚群

本文应用国产自制武系列抗人淋巴细胞单克隆抗体与进口OKT系列对比检测103例健康成人外周血T淋巴细胞的正常值。经免疫荧光法检查,Wu71(抗人金T)与外周血单个核细胞反应,Wu167(抗人辅助性T亚群)和Wu448(抗人抑制性T亚群)分别与43.8±9.0％(30％～61％)和31.3±7.0％(20％～48％)外周血单个核细胞反应。Wu167/Wu448之值为1.48±0.5(0.88～2.48)。本文结果还证实上述结果与相应抗人全T单抗(OKT_3),OKT_4,OKT_8的测定值相此无显著性差别。不同性别和不同年龄组的细胞及亚群测定值统计表明:T细胞总数随年龄增长有下降趋势,以男性中老年组与青年组之间差异较显著。T_4受年龄影响较小而性别之间差异较大,女性的T_4及T4/T8明显高于男性。T_8除男性老年组明显低于男性青年组外,其余均无明显差异。     

FITC-直标单抗及应用

随着单克隆抗体技术的发展,目前出现了许多抗人T细胞表面抗原的单克隆抗体,对这些表面抗原的检测,国内学者大多利用间接免疫荧光技术。我室用异硫氰酸荧光素(FITC)成功地标记了多种抗人体T细胞亚群的单克隆抗体,这对研究T细胞亚群在感染性疾病、自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病中的变化,以及检测免疫抑制治疗等提供了有力工具。 OKT系列单克隆抗体为从美国ATCC公司引进的细胞株,由本室制备。抗-CD3(OKT3)、抗-CD4(OKT4)、抗-CD8(OKT8)、抗-CD2(OKT11)、抗-CD1(OKT6)、抗-CD38(OKT10)、抗-CD11b(OKM1),还有抗HLA—Ⅰ类抗原及HLA—Ⅱ类抗原的单抗。各种单抗腹水用硫酸铵粗提丙球和经SPA-     

人类小肠中的淋巴细胞亚群——在正常人及成年腹腔病患者肠粘膜中的发现

用多克隆或单克隆抗体的双标记免疫荧光技术已经发现,正常人小肠粘膜中存在着不同亚群的淋巴细胞。据报道这些淋巴细胞均能与抗T细胞抗体反应,多数为HuTLA~+,OKT8~+。固有层中的HuTLA~+细胞则多为OKT8~-。为作进一步研究,作者采用了单克隆抗体的免疫荧光技术,以正常人及腹部疾病患者的小肠组织切片为实验材料,检测并比较了各淋巴细胞亚群的分布。     

抗人T细胞及其主要功能亚群McAb的产生

本文报道用杂交瘤技术产生了一组抗全部T细胞、T辅助细胞及T抑制杀伤细胞抗体。 经用间接免疫荧光检测,抗体T1b、T1C识别所测试的8个T细胞株;与周血E~+细胞反应达77％,提示其识别全部T细胞;与部分B细胞慢淋的交叉反应性提示其为CD_5(即OKT_1或Lcu-1)类抗体。抗体T8b与部分T细胞反应;与周血E~+细胞为35％,与胸腺细胞为79％,提示其为CD8(OKT8、Leu-2a)类抗体。抗体T4a也与部分T细胞反应;与周血E~+细胞为     

普通变量对单克隆抗体测定T细胞亚群的影响

用异种抗血清和单抗已阐明,T细胞功能仅限于带某些分化抗原的T细胞亚群.已证明疾病变化与体内T_H/T_S细胞比例的变化有关.因此定量分析淋巴细胞亚群已成为临床诊断的手段.而普通变量对淋巴细胞亚群的影响尚未详细研究.作者测定了两性T细胞亚群的正常值,研究了一个时期内T细胞亚群的个体变量,并研究了年龄、身体锻练、饮食、取血时间、血样保存期限及冰冻分离淋巴细胞等对亚群的影响.为说明这些问题,作者使用了普通单抗如OKT3、OKT4、OKT8及OKIal(主要鉴定B细胞)     

人T细胞亚群研究进展

根据分化抗原不同,通常可以将人外周血淋巴细胞分成OKT4~+和OKT8~+两个亚群(简称T4~+和T8~+)。一般认为T4~+亚群具有辅助和诱导功能(T_H/T_i),T8~+亚群具有抑制和细胞毒功能(T_S/TC)。近年来,由于单克隆抗体技术的发展,已获得了一些新的人T细胞单克隆抗体(下称     

肿瘤患者手术前后T细胞亚群、细胞毒性细胞因子及血浆抑制因子变化

对36名肿瘤患者(含6名良性肿瘤)手术前后的免疫功能进行了动态观察。检测指标包括 T细胞亚群(T3、T4、T8及 OKT4/OKT8)、单个核细胞细胞毒性因子(MCCF)及血浆淋转抑制因子(PLTIF)。结果表明:手术可明显降低 OKT4亚群,并造成 OKT4/OKT8下降,此种效应维持时间较长;术后 MCCF 活性明显增强,反映了手术的治疗作用;手术后 PLTIF 活性有一过性增加,对其性质需作进一步研究。     

急性多发性神经根神经炎外周血T淋巴细胞亚群的研究

一般认为,急性多发性神经根神经炎与感染及免疫调节紊乱有关。为探讨T淋巴细胞在发病中的作用,我们用抗人T淋巴细胞单克隆抗体OKT3,OKT4和OKT8检测了23例该病患者外周血T细胞亚群。     

人体长绒毛野豌豆凝集素受体阳性细胞的形态与功能

反抑制T细胞(TCS)借助辅助T细胞对抗T抑制细胞的抑制效应参与免疫调节。小鼠和人体TCS都表达长绒毛野豌豆凝集素受体(VVR)。而人体TCS则主要是CD8VV~+T亚群,和临床多种疾病免疫功能异常密切相关。 本文用抗VV抗体单色和双色免疫荧光法和流式细胞术(FCM)测知正常人VV~+T亚群的比例是16.6％±2.9％,CD8VV~+T亚群比例是8.45％±1.92％,各种VV~+细胞亚群的功能测定,显示健康人CD8VV~+T细胞亚群,具有拮抗ConA诱导的抑制细胞对杀伤细胞的抑制作用,以及具有增强PBL对PPD诱导的增殖反应,具有正调节功能,而CD8VV~-却具有相反的抑制作用。在后一系统中CD8VV~+细胞相对反应值可高达223.2％,CD8VV~-的相对反应值仅为34.5％。如果在PBL增殖反应中加入CD8VV~-亚群诱发免疫抑制后再加入CD8VV~+亚群可以看到低反应迅速回升,回升幅度和递增加入的CD8~+细胞数量相对应,表明人体CD8VV~+T亚群具有反抑制功能。     

肾移植受者排斥反应与外周血T细胞亚群变化

<正> 我们用OKT单克隆抗体(McAb)检测肾移植受者外周血T细胞亚群,并对16例尸体肾移植受者进行分析,其中8例进行手术后(用CsA前),用CsA及时发生排斥(治疗前)时检测比较。另8例较典型病例则分析其排斥反应出现与否以及与T细胞亚群的变化。结果显示OKT检测和临床判断基本相符,提示OKT检测为研究和诊断肾移植受者的急性排斥提供了较好的手段,现报道如下。     

抗人淋巴细胞T8抗原样McAb的研制和初步鉴定

用杂交瘤技术,将经人外周血E花环阳性细胞免疫小鼠脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合后,产生一分泌IgG_1亚型McAb杂交瘤株。其所分泌抗体经微量放射免疫测定及间接免疫荧光法分析,表明它只能与T细胞系、76％的胸腺细胞及22％的外周血T淋巴细胞反应,不与其它各种不同细胞反应。将此抗体所识别入外周血T淋巴细胞亚群与抗Leu-2a识别T8~+细胞、抗Leu-3a识别T4~+细胞比较,发现此抗体与抗Leu-2a识别同一群细胞。此抗体能从T细胞表面沉淀出30KD(还原条件)或78KD(非还原条件)分子,并完全阻断FITC标记抗Leu-2a与T细胞的结合,说明此抗体是识别T8抗原样的McAb。     

小儿急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的研究

本文用单克隆抗体SACI-Ig花环法测定了小儿急性白血病及再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,在急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血患儿OKT8~ 细胞均明显高于正常,OKT4~ /OKT8~ 比值显著降低,但在急性粒细胞性白血病患儿淋巴细胞亚群变化不明显。这提示,抑制性T细胞(OKT8~ )的增多可能与小儿急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血的发生或发展有关。     

CD8类McAb—SM4的研制与鉴定

本文报导一株抗人T细胞亚群单克隆抗体SM_4的研制与鉴定。SM_4仅与T细胞中的一个亚群反应,在淋巴组织冰冻切片上,SM_4只与胸腺依赖区的部分细胞反应,其组织分布特征与CD_8单抗相类似。叠加试验结果表明SM_4与CD_8类单抗识别同一细胞亚群——Ts/Tc亚群。竞争抑制试验进一步证明SM_4识别CD_8分子上某一特定表位。本文还就CD_8亚群异质性问题及SM_4的应用潜力进行了讨论。     

人淋巴细胞在E玫瑰花试验中的T细胞抗原表达

以往实验表明,利用E玫瑰花试验可将T淋巴细胞分成两个亚群:即与羊红细胞亲和力高的活性玫瑰花形成细胞和亲和力低的迟发性玫瑰花形成细胞.本文作者利用重复玫瑰花试验研究两类T细胞表达OKT决定簇的能力.分离活性和迟发性E玫瑰花形成细胞用14名年龄在23～51岁的正常人周围淋巴细胞     

OKT4类似抗体在恒河猴体内的免疫抑制作用

当器官移植物受体内需要人为地产生一种免疫抑制应答时,可以T细胞及其亚群反应的单克隆抗体(McAb)作为一种选择性制剂。该项研究中,作者首先在移植皮片模型中,证实两种与OKT4~+细胞反应的单克隆抗体(OKT4:IgG2b和OKT4A:IgG2a)用于恒河猴肾移植物的模型中有免疫抑制作用,实验采用OKT4+4A治疗方案:每天给予两种抗体各2.5     

改良微量细胞毒试验检测外周血T、B细胞总数及T细胞亚群

本文介绍一种改良微量细胞毒试验。应用抗B细胞单克隆抗体和OKT单克隆抗体系统对86例健康成人外周血中T、B细胞总数及T细胞亚群进行了检测。本法具有简便,不需特殊仪器,在白细胞计数池内计数死活细胞,结果准确等特点,结果显示B细胞、OKT_3(总T细胞),OKT_4(辅助T细胞)和OKT_8(抑制/杀伤T细胞)占外周血淋巴细胞百分率分别为20.59±0.6％;66.42±0.8％;41.65±0.8％,27.19±0.7％。并且,观察到随年龄增加,OKT_3和OKT_4细胞降低。OKT_8细胞增加,T_4/T_8比值降低。文章还讨论了老年组OKT_4细胞显著降低的意义。     

20例1～3个月婴儿肺炎T淋巴细胞亚群的测定

<正> 肺炎是小儿的主要常见病,尤其多见于婴幼儿,也是婴幼儿时期主要死亡原因。本文利用单克隆抗体OKT_3(抗全T细胞)、OKT_1(抗T辅助/诱导细胞亚群),OKT_8(抗T会伤/抑制细胞亚群)检测了20例1～3个月婴儿肺炎的外周血T细胞及其业群,现总结如下。 材料和方法 一、受检者:本组病例为1987年8月～1988年8月收住我院儿科的1～3个月婴儿肺     

结缔组织疾病患者外周血T细胞亚群测定

<正> 本文采用人T细胞单克隆抗体OKT系列的直接血球测定法,检测了类风湿性关节炎(RA)及全身性红斑狼疮(SLE)患者共45例,以了解该病治疗前后,T细胞亚群的变化。