胰腺癌中ERα变异体的表达

目的检测胰腺癌中雌激素受体α(ERα)不同变异体ERC4、ERD3、ERD5mRNA的表达。方法采用免疫组化和RT-PCR检测技术,对50例胰腺癌和20例乳腺癌患者ERα的表达以及变异体ERC4、ERD3、ERD5mRNA的表达进行检测。结果胰腺癌ERα蛋白的阳性率为32％。ERD3mRNA在ER阳性胰腺癌表达低于阴性病例;ERC4mRNA在ER阴性胰腺癌表达明显低于阳性病例(P<0.05);ERD5mRNA在ER阳性胰腺癌表达低于阴性病例。结论ERα变异体的检出说明它们在胰腺癌发生过程中起一定的作用。在胰腺癌的发生过程中,ERα变异体mRNA的表达失控。     

雌激素受体α的突变mRNA在乳腺癌肿瘤组织及癌旁正常组织中的表达

为检测正常乳腺组织及乳腺癌组织中野生型雌激素受体α不同mRNA突变体ERC_4、ERD_3、ERD_5mRNA的表达,采用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测技术,对18例乳腺癌患者正常乳腺组织及乳腺癌组织中野生型雌激素受体α不同mRNA突变体进行检测。结果:在ER阳性/PR阳性组中,ERC_4mRNA在肿瘤组织中的表达比正常组织中明显增高;在肿瘤组织中,ERD_3mRNA的表达比相邻的正常组织中的表达有降低的倾向,但仅在ER阳性组中有统计学显著性差异;乳腺癌组织中ERD5mRNA的表达比相应的正常乳腺组织显著升高;在乳腺癌的发生过程中,ERα突变体mRNA的表达失控。     

HIF-1α在胰腺癌组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的 通过检测胰腺癌组织HIF-1α、Bcl-XL的表达,探讨HIF-1α对胰腺癌细胞凋亡的影响.方法 应用免疫组化方法检测41例胰腺癌和20例正常胰腺组织中HIF-1α、Bcl-XL的表达,TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot检测21例胰腺癌组织和10例正常胰腺中HIF-1α、Bcl-XL mRNA和蛋白的表达.结果 正常胰腺组织均无HIF-1α、Bcl-XL蛋白和mRNA的表达.胰腺癌组织HIF-1α、Bcl-XL蛋白表达率分别为63.4%和87.8%,HIF-1α mRNA和Bcl-XL mRNA的表达率分别为71.4%和80.9%,两者的表达呈正相关(r = 0.335, P = 0.032),HIF-1α阳性表达的胰腺癌的凋亡指数较阴性表达者低[(1.32 ± 0.59)% vs (1.79 ± 0.77)%,P = 0.034].结论 HIF-1α和Bcl-XL在胰腺癌组织中存在高表达.HIF-1α可能通过上调Bcl-XL的表达抑制胰腺癌细胞凋亡,在胰腺癌发生发展中起重要作用.     

甲状腺乳头状癌组织中雌激素受体亚型与表皮生长因子受体-2表达的关系

目的研究人甲状腺乳头状癌(PTC)组织中雌激素受体(ER)亚型(ERα、ERβ1、ERβ2)与表皮生长因子受体-2(HER-2)表达的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例PTC组织中ERα、ERβ1、ERβ2的mRNA的表达水平,应用免疫组织化学的方法检测PTC组织中HER-2表达水平。结果 HER-2阳性表达的PTC患者ERαmRNA明显高于HER-2阴性者,ERβ2 mRNA明显低于HER-2阴性者。结论 PTC患者中ER亚型的表达可能受HER-2调节,HER-2过表达,可上调ERα、下调ERβ1和ERβ2,促进肿瘤发生发展。     

Mucin4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织中Mucin 4(MUC4)的表达及其与临床病理参数间的关系.方法 (1)采用ABC免疫组织化学方法检测35例胰腺癌、12例胰腺良性肿瘤及5例慢性胰腺炎组织MUC4的表达.(2)通过RT-PCR方法检测12例胰腺癌组织、癌旁胰腺组织以及2株胰腺癌细胞株MUC4 mRNA的表达.结果 (1)35例胰腺癌组织中MUC4蛋白阳性表达24例,12例胰腺良性肿瘤中MUC4蛋白阳性表达2例,5例慢性胰腺炎组织中MUC4蛋白均为阴性.MUC4蛋白胰腺癌组织中阳性表达率显著高于胰腺良性肿瘤及慢性胰腺炎组织(P ＜ 0.05).MUC 4在胰腺癌组织中阳性表达率与肿瘤的部位、淋巴结转移、临床分期无关(P ＞ 0.05).(2)12例胰腺癌组织中MUC4 mRNA表达阳性有6例,癌旁组织中无阳性表达,2株胰腺癌细胞株均呈阳性表达.MUC4 mRNA在胰腺癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(P ＜ 0.05).结论 MUC4在胰腺癌中有较高的表达率,检测其表达可能有助于胰腺癌的诊断,并可作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎一个重要参考指标.     

HIF—1α在胰腺癌组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的通过检测胰腺癌组织HIF-1α、Bcl-XL的表达,探讨HIF-1α对胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用免疫组化方法检测41例胰腺癌和20例正常胰腺组织中HIF-1α、Bcl-XL的表达,TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot检测21例胰腺癌组织和10例正常胰腺中HIF-1α、Bcl-XLmRNA和蛋白的表达。结果正常胰腺组织均无HIF-1α、Bcl-XL蛋白和mRNA的表达。胰腺癌组织HIF-1α、Bcl-XL蛋白表达率分别为63.4%和87.8%,HIF-1αmRNA和Bcl-XL mRNA的表达率分别为71.4%和80.9%,两者的表达呈正相关(r=0.335,P=0.032),HIF-1α阳性表达的胰腺癌的凋亡指数较阴性表达者低[(1.32±0.59)%vs(1.79±0.77)%,P=0.034]。结论HIF-1α和Bcl-XL在胰腺癌组织中存在高表达。HIF-1α可能通过上调Bcl-XL的表达抑制胰腺癌细胞凋亡,在胰腺癌发生发展中起重要作用。     

Mucin4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织中Mucin 4(MUC4)的表达及其与临床病理参数间的关系。方法(1)采用ABC免疫组织化学方法检测35例胰腺癌、12例胰腺良性肿瘤及5例慢性胰腺炎组织MUC4的表达。(2)通过RT-PCR方法检测12例胰腺癌组织、癌旁胰腺组织以及2株胰腺癌细胞株MUC4 mRNA的表达。结果 (1)35例胰腺癌组织中MUC4蛋白阳性表达24例,12例胰腺良性肿瘤中MUC4蛋白阳性表达2例,5例慢性胰腺炎组织中MUC4蛋白均为阴性。MUC4蛋白胰腺癌组织中阳性表达率显著高于胰腺良性肿瘤及慢性胰腺炎组织(P<0．05)。MUC4在胰腺癌组织中阳性表达率与肿瘤的部位、淋巴结转移、临床分期无关(P>0．05)。(2)12例胰腺癌组织中MUC4 mRNA表达阳性有6例,癌旁组织中无阳性表达,2株胰腺癌细胞株均呈阳性表达。MUC4 mRNA在胰腺癌组织中阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0．05)。结论 MUC4在胰腺癌中有较高的表达率,检测其表达可能有助于胰腺癌的诊断,并可作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎一个重要参考指标。     

肿瘤抑制基因PTEN蛋白在乳腺癌中的表达及意义

采用免疫组化法检测 138例乳腺癌患者的 PTEN蛋白、ER和 PR的阳性表达。结果示 PTEN阳性率(4 7.83% )与 ER阳性率 (39.86 % )和 PR阳性率 (4 2 .0 3% )接近。PTEN阳性病例中淋巴结转移率 (2 7.6 9% )远低于 PTEN阴性者 (6 1.6 4% ) ,两者差异显著 (P〈0 .0 5 )。认为 PTEN、ER和 PR表达具有较强的一致性 ,推测 PTEN基因的突变和缺失可能与乳腺癌的发生、发展有关 ;PTEN与 ER的表达与淋巴结转移有明显相关性 ,可作为判断乳腺癌预后的指标。     

无嘌呤嘧啶核酸内切酶在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织APE的表达及其与临床肿瘤指标的关系.方法 (1)通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测4株胰腺癌细胞株APE mRNA的表达;(2)收集37例手术切除的胰腺癌及12例相应癌旁胰腺组织石蜡标本,应用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织APE的表达情况.结果 4株胰腺癌细胞株均有APE mRNA表达;37例胰腺癌中APE阳性表达33例(89.2%),其中APE胞核阳性表达7例(21.2%),胞质阳性表达5例(15.2%),胞质及胞核均表达21例(63.6%).12例癌旁胰腺组织导管及腺泡呈阴性表达,胰岛胞质呈阳性表达,胰腺上皮内瘤变呈胞核阳性表达.APE阳性率与肿瘤分化程度,肿瘤大小、淋巴及远处转移无关(P ＞ 0.1).结论 APE在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其定位的特异性表达可能有助于胰腺癌的早期诊断.     

新的候选抑癌基因NOEY2在胰腺肿瘤中的表达

目的探讨NOEY2基因与胰腺癌的相关性.方法病理确诊的胰腺肿瘤26例(23例胰腺导管腺癌、3例胰岛细胞瘤),12例正常胰腺,8株人胰腺癌细胞株(Pu-Pan-1、MiapacaⅡ、Panc-1、CFpac-1、Aapc-1、BXPC3、HS766T、SW1990).用NOEY2特异性抗体进行免疫组化检测NOEY2基因编码蛋白在胰腺癌组织的表达;用该基因的cDNA探针进行RNA印迹杂交分析上述胰腺癌细胞株有无NOEY2 mRNA表达;用免疫细胞化学的方法检测NOEY2基因编码蛋白在胰腺癌细胞株的表达.结果(1)正常人胰腺导管、腺泡、胰岛细胞胞浆中均可见到NOEY2蛋白的表达;(2)23例胰腺导管腺癌组织中有11例胰腺癌组织无NOEY2蛋白表达,占47.8%,又可分为二种类型,一种为肿瘤组织表达阴性、正常组织表达阳性(2/11),另一种为肿瘤组织、正常组织表达均阴性(9/11);12/23例(52.2%)肿瘤组织癌旁组织表达均阳性.(3)本实验未发现NOEY2蛋白与胰腺癌分化程度之间有相关性;(4)3例胰岛细胞瘤均无NOEY2蛋白表达;(5)RNA印迹杂交分析及免疫细胞化学结果显示8个胰腺癌细胞株均无NOEY2基因在mRNA和蛋白水平的表达.结论NOEY2基因蛋白在正常人胰腺广泛表达,但在胰腺癌组织中蛋白表达有较高比例的缺失,在胰腺癌细胞株中不仅有蛋白表达缺失,同时NOEY2基因mRNA表达也缺失.提示NOEY2基因在胰腺癌的发生中可能起一定作用.     

Plk1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 研究胰腺癌组织标本及细胞系中Plk1的表达及临床意义.方法 应用免疫组化EnVision两步法检测33例胰腺癌及其癌旁组织、3例胰腺浆液性囊腺瘤、3例黏液性囊腺瘤、5例慢性胰腺炎的石蜡标本中Plk1的表达.用半定量RT-PCR检测5例新鲜胰腺癌组织及其癌旁组织中Plk1 mRNA的表达.用Western blot检测两株胰腺癌细胞PANC1和CFPAC1中Plk1表达.结果 胰腺癌组织中Plk1的阳性表达率为72.7%(24/33),其表达与胰腺癌患者的年龄、性别、临床分期、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤的部位无显著相关(P ＞ 0.05).癌旁组织、慢性胰腺炎和良性胰腺肿瘤组织中Plk1的表达均为阴性.5例新鲜胰腺癌组织中都有Plk1 mRNA的高表达,两株胰腺癌细胞中也有Plk1蛋白的表达.结论 Plk1在胰腺癌中的表达具有一定肿瘤特异性,有可能成为胰腺癌诊治的理想靶标.     

运动相关蛋白Fascin在胰腺癌的表达及其临床意义

目的 探讨运动相关蛋白Fascin在胰腺癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用RT-PCR法检测SW1990、Patu8988、BxPC3、CfPAC1 4株胰腺癌细胞株Fascin mRNA表达;采用免疫组化方法 检测54例胰腺癌及42例相应癌旁胰腺组织Fascin蛋白表达.结果 胰腺癌细胞株SW1990、Patu8988、CfPAC1有Fascin mRNA表达,BxPC3无表达;54例胰腺癌组织Fascin蛋白表达阳性35例,占64.8%,42例癌旁胰腺组织中均无阳性表达.Fascin蛋白表达与肿瘤分化程度(P<0.01)和淋巴转移(P<0.05)呈显著正相关,但与肿瘤大小及远处转移无相关性(P>0.05).结论 Fascin蛋白在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并有助于判断胰腺癌恶性程度.     

胰腺癌及胰腺星状细胞中基质细胞衍生因子SDF-1及其受体CXCR4的表达

目的 检测基质细胞衍生因子(SDF-1)及其受体CXCR4在胰腺癌组织、细胞株及星状细胞(PSC)中的表达.方法 采用免疫组织化学方法 检测37例胰腺癌及10例癌旁正常胰腺组织SDF-1、CXCR4、α-SMA蛋白表达以及细胞株AsPC-1、PSC的SDF-1、CXCR4蛋白表达.RT-PCR检测AsPC-1、BxPC3、SW1990及PSC的SDF-1、CXCR4 mRNA表达.结果 37例胰腺癌CXCR4表达(+)8例、(++)20例、(+++)9例;10例癌旁正常胰腺组织CXCR4表达(-)2例、(+)7例、(++)1例,两者差异显著(P<0.01).胰腺癌的间质组织SDF-1的表达高于癌旁间质组织(P<0.01),并随α-SMA表达的增加而增加.胰腺癌细胞株AsPC-1有CXCR4蛋白表达,而PSC有SDF-1蛋白表达.AsPC-1、BxPC3、SW1990细胞株均有CXCR4 mRNA的表达,而无SDF-1 mRNA的表达;PSC有SDF-1 mRNA表达,CXCR4 mRNA微弱表达.结论 胰腺癌组织及细胞系表达CXCR4,PSC表达SDF-1,PSC有可能通过SDF-1/CXCR4轴促进胰腺癌的侵袭转移.     

Plk1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 研究胰腺癌组织标本及细胞系中Plk1的表达及临床意义。方法 应用免疫组化EnVision两步法检测33例胰腺癌及其癌旁组织、3例胰腺浆液性囊腺瘤、3例黏液性囊腺瘤、5例慢性胰腺炎的石蜡标本中Plk1的表达。用半定量RT—PCR检测5例新鲜胰腺癌组织及其癌旁组织中Plk1 mRNA的表达。用Westernblot检测两株胰腺癌细胞PANC1和CFPAC1中Plk1表达。结果 胰腺癌组织中Plk1的阳性表达率为72、7％（24／33），其表达与胰腺癌患者的年龄、性别、临床分期、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤的部位无显著相关（P〉0.05）。癌旁组织、慢性胰腺炎和良性胰腺肿瘤组织中Plk1的表达均为阴性。5例新鲜胰腺癌组织中都有Plk1mRNA的高表达，两株胰腺癌细胞中也有Plk1蛋白的表达。结论 Plk1在胰腺癌中的表达具有一定肿瘤特异性，有可能成为胰腺癌诊治的理想靶标。     

运动相关蛋白-1对胰腺癌转移的调控作用

目的探讨运动相关蛋白-1(MRP-1)基因的表达与胰腺癌转移的关系.方法用原位杂交及免疫组织化学技术对7例正常胰腺组织及22例胰腺癌患者组织中MRP-1 mRNA和蛋白表达进行分析.结果原位杂交分析显示,原发性胰腺癌组织中有14例(63.6%)MRP-1阳性表达,其中10例为中～强阳性表达,明显高于正常组织(3/7,42.9%);在13例有转移的淋巴结及远处器官转移的原发性胰腺癌中,MRP-1 mRNA阳性表达显著低于9例无转移的原发性胰腺癌(P ＜ 0.05),免疫组织化学检测结果也与其一致.结论 MRP-1表达在胰腺癌的抗转移中具有一定的作用.     

雌激素受体亚型ERα、ERβ在乳腺癌中的表达

目的研究雌激素受体亚型ERα、ERβ在不同乳腺组织中的表达及其在浸润性乳腺癌中与肿瘤病理参数和生物学标志物之间的关系。方法选取70例乳腺癌(其中8例原位癌、44例浸润性导管癌、18例浸润性小叶癌)、15例乳腺增生、15例正常乳腺组织石蜡标本,用免疫组织化学法检测ERα、ERβ、C-erbB-2的表达情况。结果 (1)乳腺癌组织中的ERα阳性表达率明显高于正常乳腺及乳腺增生组织;晚期乳腺癌患者ERα阳性表达率明显低于早期患者;C-erbB-2阳性患者的ERα阳性表达率明显减低。(2)乳腺癌组织中的ERβ阳性表达率明显低于正常乳腺及乳腺增生组织;在浸润性乳腺癌中淋巴结转移阳性者、C-erbB-2表达阳性者的ERβ阳性表达率明显高于对照组患者。结论 ERα在乳腺癌的发生发展中可能起到促进作用,ERα的阳性表达与一些预后良好因素相关。ERβ可能对维持乳腺组织的正常生理功能起着重要作用,其与某些预后不良因素可能相关。     

无嘌呤嘧啶核酸内切酶在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的 研究胰腺癌组织APE的表达及其与临床肿瘤指标的关系。方法 （1）通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测4株胰腺癌细胞株APE mRNA的表达；（2）收集37例手术切除的胰腺癌及12例相应癌旁胰腺组织石蜡标本，应用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织APE的表达情况。结果 4株胰腺癌细胞株均有APE mRNA表达；37例胰腺癌中APE阳性表达33例（89．2％），其中APE胞核阳性表达7例（21．2％），胞质阳性表达5例（15．2％），胞质及胞核均表达21例（63．6％）。12例癌旁胰腺组织导管及腺泡呈阴性表达，胰岛胞质呈阳性表达，胰腺上皮内瘤变呈胞核阳性表达。APE阳性率与肿瘤分化程度，肿瘤大小、淋巴及远处转移无关（P〉0．1）。结论 APE在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率，检测其定位的特异性表达可能有助于胰腺癌的早期诊断。     

胰腺癌组织中胆囊收缩素B受体的表达

检测20例胰腺癌组织（观察组）和4例正常胰腺组织（对照组）中的胆囊收缩素B（CCKB）受体的表达情况,分析其与临床分期和病理分级之间的关系。结果观察组CCKB受体mRNA阳性17例,对照组均为阴性;观察组CCKB受体蛋白阳性15例,阳性颗粒主要分布在癌细胞的胞膜和胞质中,对照组均为阴性。不同病理学、组织学分级间CCKB受体阳性表达率无统计学差异（P均〉0.05）。表明CCKB受体在肿瘤的发生发展过程中具有一定作用,可用于胰腺癌临床诊断和治疗。     

雌激素受体在人类垂体腺瘤中的表达

目的检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)在人类不同类型激素垂体腺瘤中的表达,探讨垂体腺瘤中分泌不同类型激素的腺瘤细胞与ER免疫组化阳性细胞之间的关系.方法采用免疫组化S-P法对53例垂体腺瘤标本进行激素分型,检测垂体腺瘤中ER蛋白的表达.采用免疫组化双标法检测多激素分泌型垂体腺瘤中垂体激素合并ER表达的情况.结果53例垂体腺瘤标本中,部分PRL(5/7)、FSH(2/3)、LH(1/1)单激素腺瘤及部分多激素腺瘤有ER蛋白表达,而全部GH、ACTH、TSH单激素腺瘤均无ER蛋白表达,4例无功能腺瘤无ER蛋白表达.在33例多激素型垂体腺瘤标本中,22例有ER蛋白表达,其中PRL ER双标染色阳性标本10例、LH ER双标染色阳性标本9例、FSH ER双标染色阳性标本7例、GH ER双标染色阳性标本2例,33例标本的ACTH ER和TSH ER的双标染色均为阴性.结论垂体腺瘤患者的性别不影响肿瘤组织中ER蛋白的表达.垂体腺瘤中,分泌PRL、LH或FSH的垂体腺瘤细胞可表达ER;分泌ACTH或TSH的垂体腺瘤细胞不表达ER;分泌GH的垂体腺瘤细胞是否表达ER可能与该垂体腺瘤是否同时分泌PRL有关.ER在PRL、LH及FSH垂体腺瘤细胞的发生、发展中发挥作用.     

12-脂氧合酶在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测胰腺癌组织和胰腺癌细胞株SW1990和PANC1的12-脂氧合酶(12-lipooxygenase,12-LOX)表达,探讨其与胰腺癌临床病理参数的关系.方法 分别应用免疫组化染色、RT-PCR和蛋白质印迹法检测胰腺癌组织、癌旁正常胰腺组织及胰腺癌细胞株SW1990和PANC1中12-LOX mRNA和蛋白的表达.分析胰腺癌组织12-LOX表达与临床病理参数的相关性.结果 30例胰腺癌组织12-LOX表达阴性8例,弱阳性7例,强阳性15例,总阳性率为73.3％.SW1990和PANC1细胞均表达12-LOX.阳性表达的胰腺癌组织及两株胰腺癌细胞株均表达12-LOX mRNA,而癌旁正常胰腺组织不表达12-LOX mRNA及蛋白.胰腺癌组织12-LOX强阳性表达与肿瘤TNM分期、肿瘤病理分级和淋巴结转移相关(P＜0.05),而与患者年龄、性别无关.结论 12-LOX在胰腺癌中表达上调,与胰腺癌的恶性生物学行为有关.