固定化脂肪酶的动力学研究

以壳聚糖为载体，用物理吸附固定化脂肪酶，对影响固定化过程的各种因素进行了考察，确定了最优条件，并比较了游离酶和固定化酶的最适温度、pH、酶的热稳定性以及表观Km。固定化酶水解的最适pH(pH7．0)稍低于游离酶(pH8．0)，最适温度为50℃(游离酶为40℃)。固定化酶在50℃的半衰期(0．96h)是游离酶(0．32h)的3倍，在4℃的冰箱中贮存3个月活力变化很小。     

脂肪酶催化新反应--酯氨解反应在制备光学纯药物中的应用

脂肪酶催化的新反应－酯氨解反应,不仅是合成手性酰胺的一个非常有用的方法,而且也是手性羧酸及手性醇动力学拆分的有效途径。通过比较脂肪酶催化几种外消是水解、转酯及氨解反应,得出脂肪酶催化酶氮解反应在制备光学纯化合物中将有广阔的应用前景这一结论。     

无根根霉脂肪酶的酶学性质研究及酯合成的应用

初步探讨了无根根霉脂肪酶 (RhizopusarrhizusFischerLipase)的酶学性质及酯合成应用。结果表明 :在不同表现形式下该酶具有不同的最适pH、pH稳定性、最适温度和热稳定性。当用胆盐处理发酵液 ,Tween - 80处理菌体细胞时发现该脂肪酶活力分别提高 3倍和 3 5倍。本文利用溶致液晶固定化的方法在有机介质中催化酯合成 ,固定化后该酶酯合成的反应速度比其游离态高 30倍以上。最适条件下 ,合成油酸 - 2 -辛基十二烷酯的能力达 5× 10 - 5mol·hr- 1·u- 1。     

抑制脂肪酶活性成分研究进展

世界卫生组织在1997年宣布肥胖是一种慢性疾病[1],肥胖可导致心血管疾病、糖尿病、高血压、高血脂,且与多种慢性疾病的产生密切相关[2],因此寻找治疗肥胖的药物已成为医学界研究的热点.脂肪酶在人类的健康和疾病中发挥着重要作用,除在人体消化、运输和加工食用脂类中发挥作用外还参与水解各种脂质底物以调节膜完整性、脂质信号及脂...     

固定化脂肪酶Lipozyme TL IM催化葫芦籽油合成脂肪酸乙酯工艺研究

目的 研究固定化脂肪酶Lipozyme TL IM催化葫芦籽油合成脂肪酸乙酯工艺.方法 将葫芦籽油与乙醇(EtOH)作为原料,通过固定化脂肪酶Lipozyme TL IM的催化作用,完成脂肪酸乙酯(FAEE)的合成.采用单因素试验与RSM(响应面分析法),确定葫芦籽油脂肪酸乙酯的最佳合成工艺.结果 单因素试验表明醇油摩...     

脂蛋白脂肪酶基因多态性对脑疾病的相关影响

脂蛋白脂肪酶(LPL)是脂质代谢过程中一种关键酶,在调节体内三酰甘油代谢和血浆脂蛋白水平方面发挥重要作用。LPL免疫反应广泛表达于大脑多个区域,在脑内多种物质的代谢平衡中发挥作用。目前已报道的LPL基因突变高达110种,LPL基因多态性改变可能影响LPL活性、脂蛋白代谢和其他功能,造成一系列与血脂异常、动脉粥样硬化形成有关的临床症状,对多种脑疾病的发生发展起重要作用。     

血清脂肪酶的干化学法测定及其应用

在临床上血清脂肪酶 (ＬＩＰＡ )的测定主要用于胰腺良性疾病及胰腺肿瘤的辅助诊断。测定ＬＩＰＡ的方法较多 ,但都存在操作困难、准确度差的缺点 ,使ＬＩＰＡ在临床的应用受到制约。本文对美国强生公司的ＬＩＰＡ干片及ＲＡＮＤＯＸ公司的ＬＩＰＡ偶联法试剂盒在全自动生化分析仪上进行比较 ,同时对急性胰腺炎的检测作了初步的评价 ,结果报告如下。对象与方法一、对象　正常对照组 :选取门诊健康体检者6 0例 ,用干化学法对其进行血清ＬＩＰＡ及淀粉酶(ＡＭＹ)的测定。疾病组 :选取 4 0例经临床综合诊断 (临床表现 \实验室检查 \影像学检查 …     

南极假丝酵母脂肪酶B在制备手性药物中的应用

结合近期国内外的文献,本文详细介绍了南极假丝酵母脂肪酶B（CALB）在手性醇、胺、酸选择性的拆分以及转酯等的应用。利用脂肪酶合成手性药物是药物合成研究的一个重要领域,CALB在一些药物的拆分和合成中表现出了良好的选择性,本文主要综述了其在手性醇、胺、酸选择性拆分以及转酯中的应用,希望能够为手性药物的合成提供方向。     

单底物一步速率法测定血清脂肪酶及其临床应用

目的 介绍一种测定血清脂肪酶的新方法－单底物一步速率法；对该方法的性能进行评价，并探索LPSR的临床应用，为临床治疗提供依据。方法 采用一种人工合成的大分子有机物为底物，在碱性环境中，通过一步速率法完成反应，于波长581nm处显色，通过测定颜色生成的速率定量测定LPS的活性，生成量与样品中LPS活性成正比。结果 该方法线性范围为0－1200u/L，批内CV值在0.90%-1.20%，批间CV值在3.98%-4.85%，回收率在96％以上。结论 适用于全自动生化分析仪及临床批量标本的测定，可与Amy一起用作急腹症的常规检测。     

血清脂肪酶的临床应用进展

脂肪酶主要是有胰腺及其周围脂肪组织分泌的消化酶,一类具有多种催化功能的酶,参与脂类的消化,测定血清脂肪酶对胰腺疾病诊断有重要意义。本文就其临床应用做一综述。     

激素敏感脂肪酶(HSL)及其与代谢性疾病关系的研究

激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)是动物脂肪分解代谢的限速酶.它通过催化水解储存在脂肪组织中的甘油三酯释放出游离的脂肪酸,以满足机体的能量需要.HSL主要在动物的白色脂肪组织中表达,同时也在肝、骨骼肌、睾丸等组织中有少量的表达.它的活性受体内多种激素调控.在机体正常的生理条件下,HSL发挥着较多的功能,如影响脂肪的代谢、类固醇的合成、精子的生成、胰岛素的分泌等.HSL表达异常或HSL基因(hsl)多态性与人类代谢性疾病如肥胖、胰岛素抵抗、二型糖尿病和高脂血症等之间关系的研究目前已经取得一些进展,现综述如下.     

根霉脂肪酶催化水解（R,S）—环氧丙醇丁酸酯的反应特性

对根霉脂肪酶的粗酶拆分（Ｒ,Ｓ）－环氧丙醇丁酸酯的水解反应进行了初步研究,结果表明：３０℃下ＰＨ５．３时反应初速度最大;ＰＨ５．５－６．０地酶的立体选择季最高,对映体比率（Ｅ值）为５７。４２℃下ＰＨ５．５时反应初速度最大;酶的立体选择性随温度升高而下降,酶促水解反应中未到产物和底物抑制现象,根霉发酵液中脂肪酶的反应特性与硫酸铵沉淀法所得粗酶相吻合。     

脂肪酶的研究应用进展

脂肪酶是一类具有多种催化功能的酶,主要催化三酰甘油酯及其它一些不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应,还具有水解外消旋混合物以及酯和肽键合成的能力.脂肪酶已广泛应用于食品、化工、医药合成等诸多领域.就其来源、结构、作用及机制和应用等方面作一简要综述.     

快速脂肪酶测定对胰腺疾病诊断价值评价

脂肪酶的测定为临床诊断急性胰腺炎的主要指标之一，其特异性远较淀粉酶好。脂肪酶测定方法较多，有滴定法、比浊法和比色法等。但这些方法操作繁琐、复杂、反应时间长（4～48h），不能及时为临床提供诊断急性胰腺炎的依据，故在实际应用中受到限制。快速脂肪酶测定0．5h即可准确地为临床提供诊断急性胰腺炎的参考指标，且其诊断价值较淀粉酶高，操作简便。1995-2004年我们通过临床应用，证实快速脂肪酶测定是诊断胰腺疾病的快速方法之一。     

天然高产脂肪酶细菌的分离鉴定及脂肪酶基因的分析

目的：从环境中分离高产脂肪酶的细菌,并克隆其脂肪酶基因。方法：从天然高油脂含量土壤筛选高产脂肪酶的细菌,鉴定菌种后,设计相应引物PCR扩增脂肪酶基因并进行TA克隆,重组载体转入E.coli DH5α构建工程菌,双酶切及测序鉴定脂肪酶基因。结果：经过微生物菌种鉴定获得4株高活力菌,其中一株金葡菌产酶最高,利用PCR技术成功扩增脂肪酶基因,该基因经过克隆测序及其双酶切鉴定证实为新发现的突变脂肪酶基因,其二级结构与标准基因（EU310372）有较大不同。结论：成功分离一株高产脂肪酶的菌株——金黄色葡萄球菌,克隆的脂肪酶基因为新发现的突变型。     

银杏细胞固定化培养及其影响因素考察

目的　利用银杏细胞固定化培养法生产银杏内酯。方法　以聚胺酯泡沫为固定化材料 ,考察各种因素对固定化银杏细胞培养的影响。结果　用高密度、小孔径聚胺酯材料 P2 9,将其切成 0 .5 cm× 0 .5 cm× 0 .5 cm的小块 ,每瓶加 0 .72 g载体 ,加 6 5 m L 液体培养基 (MS 2 ,4 - D8.0 mg/L KT0 .0 4 mg/L NAA0 .4 mg/L) ,接种鲜重2 0 0 g/L,可得到高达 71%的固定化比例 ,载体上细胞密度达到干重 2 2 mg/cm3。结论　以聚胺酯泡沫为固定化材料进行银杏细胞固定化培养具有方法简便、成本低廉、细胞固定化比例高等优点 ,具有潜在的应用价值     

脂蛋白脂肪酶单克隆抗体的制备及特征分析

用牛奶纯化的脂蛋白脂肪酶（ＬＰＬ）一分子量为５６ＫＤ，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠利用杂交瘤技术，建立了３０余株分泌抗朱ＬＰＬ单克隆抗体的杂交瘤细胞，对其中２Ｅ５，２Ｇ１０，６Ｄ７，８Ｄ２，７Ｆ４进行特征分析表明：（１）其抗体类别均为ＩｇＧ，亚类分别为ＩｇＧ１，ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ２ｈ，ＩｇＧ１，ＩｇＧ１；（２）抗体效价（细胞培养上清）５×１０＾－２－２×１０＾－３；（３）５种单抗可认为识别三个不同的抗原表     

急性胰腺炎血清脂肪酶的测定

急性胰腺炎血清脂肪酶的测定阿西１顾炳权２齐为民２（第四军医大学唐都医院：１临床实验科，２检验科西安７１００３８）关键词胰腺炎脂肪酶淀粉酶诊断中图号Ｒ４４６．１２０引言急性胰腺炎是临床上常见的急腹症，其中重症急性胰腺炎和急性坏死性胰腺炎临床发病凶猛，死...