新肝炎病毒TTV在各类高危人群中分子流行病学研究

为观察新肝炎病毒TTV在各类高危人群中的感染状况和基因分型,在日本株TTV ORF,保守区合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应(nPCR)两次扩增血清TTV DNA,对各类人群中TTV DNA分别进行了分子克隆和部分基因测序,并与日本报道的TTV DNA基因序列比较。结果显示：从非甲．戊型和非庚型肝炎病人、血清HBsAg阳性的肝炎病人、正常献血员、静脉内吸毒者和女性性乱者中,分别获得的6份TTV DNA克隆,其基因序列与日本株TTV ORF,部分基因核苷酸序列同源性为97％～99％,均属于TTV la型。提示：我国各类高危人群感染TTV 以la型为主;TTV基因型与疾病发生和传播方式关系不大。     

TTV感染形式及致病性分析

目的 :探讨非甲 -戊型、非庚型肝炎病原诊断 ,了解慢性乙肝、献血员和体检者TTV现症感染状况 ,分析 TTV感染表现形式。方法 :对比调查非甲 -戊型、非庚型肝炎患者2 5例、慢性乙肝 63例、献血员 3 0例及体检者 3 2例 TTV感染情况。结果 :4组中 TTV DNA检出率各为 5 2 .0 0 % (1 3 / 2 5 )、1 5 .87% (1 0 / 63 )、1 0 .0 0 % (3 / 3 0 )和 3 .1 3 % (1 / 3 2 ) ,非甲 -戊型、非庚型肝炎组与其它 3组比较 P均 <0 .0 1。结论 :TTV系非甲 -戊型 ,非庚型肝炎病因之一 ,其致病力较弱。单纯 TTV感染引起慢性肝炎 47.0 6% (8/ 1 7) ,急性肝炎 2 3 .5 3 % (4 /1 7)、病原携带状态或隐性感染 2 3 .5 3 % (4 / 1 7) ,重型肝炎最少 5 .88% (1 / 1 7)明显少于慢性肝炎 (P<0 .0 1 )。     

肝炎患者TTV感染情况及部分基因序列分析的研究

目的 :新发现的DNA病毒 (transfusiontransmittedvirus简称TTV)被认为是一种新的肝炎病毒。为了研究肝炎患者中TTV的感染情况 ,对 10 8例肝炎患者 (ALT >2 0 0IU/L)进行了TTVDNA的检测。方法 :利用巢式PCR方法扩增TTV基因 ,并对两例TTV分离株的部分基因进行克隆和序列分析。结果 :10 8中有 2 4例TTVDNA阳性 ,阳性率为 2 2 2 % ;在非甲～非庚型肝炎中TTV的阳性率为 3 4 6% ( 9/ 2 6) ;甲型肝炎病例中TTVDNA的阳性率为 9 1%( 1/ 11) ;乙型肝炎病例为 2 3 2 % ( 13 / 5 6) ;丙型肝炎病例 7 1% ( 1/ 14 )。两个TTV分离株 (TTVHN 1AF15 15 3 2 ,TTVHN 2AF15 1683 )的核酸序列与GenBank资料中TTV对应序列的核酸同源性高于 90 %。结论 :TTV病毒可能是非甲～非庚型肝炎的重要致病因子 ,并且能够与甲、乙、丙型肝炎病毒发生重叠感染     

非甲—非庚型肝炎患者中TTV感染的研究

目的 了解TTV在我院非甲－非庚型肝炎患中的感染状况,研究TTV感染对非甲－非庚型肝炎临床表现的影响,探讨TTV在病毒性肝炎中的致病作用。方法 采用聚合酶链反应（PCR）斑点杂交法对我院108例非甲－非庚型肝炎患血清标本进行TTV DNA检测。结果 非甲－非庚型肝炎患TTV DNA阳性率为14．8％（16／108）,急、慢性肝炎及重型肝炎患中TTV DNA的检出率无统计学差异。TTV阳性组与TTV阴性组肝脏临床及生化指标无显性差异。结论 TTV可能并非是导致肝脏功能损害的真正病原。     

献血员、肝炎患者TTV DNA检测及部分TTV基因序列分析

目的了解献血员、肝炎患者中的输血传递病毒(TTV)感染状况及基因型别。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应（hemi-nestPCR）方法,对195份献血员血清、72份不同型别的肝炎患者血清进行了TTVDNA的PCR检测,并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果①在血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常,HBsAg及抗HCV阴性的99份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本36份,阳性检出率为36.3%;而在ALT正常的96份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本16份,阳性检出率为16.6%,明显低于ALT异常献血者。②在72例不同肝炎患者中,共检出39例TTVDNA阳性血清,总检出率为54.16%,在非甲-非庚型肝炎患者中TTVDNA阳性率为87.5%,而在明确诊断为甲-庚型肝炎的患者中TTVDNA阳性率为50%,两组相比差异显著（P<0.05）。对8株阳性株序列分析结果显示,测序的8个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60.4%～99.1%,氨基酸的同源性为55.4%～98.6%。经系统发育分析表明,这8个TTV分离株中有7株可分属于G1、G2两个基因型的5个亚型,而另1株为G1型的新亚型。结论①献血者中存在TTV感染,提示TTV可以导致感染个体的肝功能异常,TTV可能与HBV感染相似,亦存在“健康携带状态”。②非甲-非庚型肝炎患者的TTV感染率明显高于明确病原的甲-庚型肝炎患者,TTV感染与肝炎有关,可能是非甲-非庚型肝炎的病原之一。③8个TTV分离株中7个分属于G1、G2两个基因型中的5个亚型,另有1株为G1型的新亚型。     

TTV在非甲至非庚型肝炎中感染的检测和分析

目的 研究新近报导的1种与输血后肝炎有关的病毒（TTV）在中国郑州地区非甲至非庚型肝炎患中的感染和基因序列变异情况。方法 采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应（nested-PCR)方法对非甲至非庚型肝炎患和正常人血清标本进行检测，并对非甲至非庚型肝炎患中的TTV分离株进行序列测定。结果 TTV DNA在40例非甲至非庚型肝炎患中检出18例，阳性率为45％，在96例正常人中检出17例，阳性率为17.7%，两组阳性率相比差异有统计学意义。TTV分离株序列与日本株（CLON22）相对应位置的核苷酸同源性为99.1%。结论 TTV在非甲至非庚型肝炎患中的感染率较高，可能是非甲至非庚型肝炎的主要致病因子。TTV分离株与日本株可能属同一基因型。     

输血传播病毒及其对肝脏的致病作用

目的研究输血传播病毒(transfusion transmitted virus, TTV)在供血员及各型病毒性肝炎中的感染率及对肝脏的致病作用.方法检测49名供血员和165例肝炎患者血清中的TTV DNA(采用套式PCR技术).结果 TTV在供血员中的感染率为24.5%,病毒性肝炎中的感染率分别为:甲25.0%,乙29.3%,乙+丁23.8%,丙66.7%,戊10.0%,庚80.0%,非甲～非庚36.1%.非甲～非庚肝炎中TTV阳性者的肝损(ALT,SB)与全阴性者相比无显著差异(P＞0.05).TTV分别和各型肝炎混合感染及各型肝炎病毒单独引起的肝损相比无显著差异(P＞0.05).结论 TTV在人群中感染率较高,尤其在输血后易感.但TTV可能不是非甲～非庚病毒以外造成肝损的主要原因,甲～庚肝炎患者再感染该病毒可能不会进一步加重肝损.     

新肝炎病毒TTV在各类高危人群中分子流行病学研究

为观察新肝炎病毒TTV在各类高危人群中的感染状况和基因分型 ,在日本株TTVORF1保守区合成了特异性引物 ,采用巢式聚合酶链反应 (nPCR)两次扩增血清TTVDNA ,对各类人群中TTVDNA分别进行了分子克隆和部分基因测序 ,并与日本报道的TTVDNA基因序列比较。结果显示 :从非甲 戊型和非庚型肝炎病人、血清HBsAg阳性的肝炎病人、正常献血员、静脉内吸毒者和女性性乱者中 ,分别获得的 6份TTVDNA克隆 ,其基因序列与日本株TTVORF1部分基因核苷酸序列同源性为 97%～ 99% ,均属于TTVla型。提示 :我国各类高危人群感染TTV以la型为主 ;TTV基因型与疾病发生和传播方式关系不大。     

各型肝炎患者中输血传播病毒感染的检测及临床意义

目的:了解输血传播病毒(TTV)在各型肝炎患者中的感染情况。方法:采用套式PCR方法,对218 例不同型别的肝炎病人血清进行TTV-DNA检测。结果:218 例不同肝炎病人中共检出72 例TTV-DNA阳性血清,总检出率为33.0%,不同民族、性别间TTV-DNA 阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。其中排除非甲非戊型肝炎单纯转氨酶增高病人中TTV-DNA阳性率为53.9%,而在明确诊断为甲型、乙型、丙型肝炎病人中TTV-DNA阳性率为26.5%,两组相比差异有统计学意义(χ2=13.38,P<0.05)。结论:各型肝炎患者中存在TTV感染,非甲非戊型肝炎单纯转氨酶增高病人中TTV感染率明显高于明确病原肝炎病人。TTV感染与肝炎有关,可能是原因不明肝炎的病因之一。     

输血传播病毒TTV致病性的探讨

目的　通过病例对比 ,进一步研究 TTV是否有致病性 ;对 1例西安地区非甲 -非戊型肝炎但血清 TTV阳性患者套式 PCR终产物纯化测序 ,在验证我们 TTV DNA检测正确性的同时初步研究西安地区 TTV流行株部分分子生物学特点 .方法　在 TTV ORF1区参照文献 [1]设计一套套式 PCR引物 ,并建立稳定的套式 PCR检测法 ,对西安地区 119例非甲 -非戊型肝炎患者及 16 2例健康有偿献血员进行 TTV对比检测和统计学处理 ;对 1例患者套式 PCR终产物纯化测序 ,用 DNAsis软件在计算机上与中国 1株做同源性比较阳性 .结果　 119例非甲 -非戊型肝炎患者中 37例 TTV DNA阳性 ,阳性率 31.1% ;16 2例健康有偿献血员中 TTV DNA阳性 30例 ,阳性率 18.5 % ;两组有明显的统计学差异 (P<0 .0 5 ,χ2 =5 .2 5 1) .对 1例非甲 -非戊型肝炎患者血清 TTV套式 PCR终产物纯化直接测序 ,测得 143bp序列 ,经计算机比较 ,其与中国 1株同源性为 6 5 .0 % ,差异率为 35 .0 % (>30 .0 % ) .其中6 2 bp序列同源性高达 75 .8% .结论　 TTV可能有致病性 ;西安地区可能存在新的 TTV流行株     

兰州地区静脉毒瘾者TT病毒感染情况的调查

目的：了解兰州地区静脉毒瘾者TT病毒（TTV）感染状况及其与肝功能的关系，探讨TTV的流行病学特征及其致病性。方法：采用巢式聚合酶链反应（PCR）检测血清TTV DNA，采用酶联免疫吸附实验法（ELISA）检测谷丙转氨酶（ALT）的含量。结果：（1）静脉毒瘾组TTV DNA阳性率显著高于非静脉毒瘾组和对照组（P＜0．01）。（2）静脉毒瘾者每日静脉注射毒品次数大于3次者，TTV DNA阳性率显著高于每日静脉注射毒品次数小于3次者（P＜0．01）。（3）静脉毒瘾者TTV DNA阳性伴随血清ALT水平异常，二者存在相互关系。（4）不同人群的TV DNA阳性与TTV DNA阳性的血清ALT阳性率有显著性差异（P＜0．01）。结论：（1）血液传播是TTV传播的主要途径。（2）TTV感染与ALT异常有密切的关系，可能是非甲－非庚型肝炎病的主要病源。（3）正常人群中存在TTV感染者，类似HBsAg的所谓“慢性携带状态”。     

非甲～非庚型肝炎病人中TTV感染和自身免疫性疾病

筛选非甲～非庚型肝炎患者血清 4 8例 ,采用冰冻组织切片间接免疫荧光法检测 4种自身抗体 :抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体 (AMA)、抗平滑肌抗体 (SMA)和抗肝肾微粒体抗体 (LKM) ,采用巢式PCR法检测输血传播病毒 (TTV)核酸。结果显示 ,4 8例病人中 4种自身抗体阳性总人数 2 2例 ( 45.8% ) ,其中抗 ANA阳性 1 5例 ( 31 .3% ) ,抗 AMA阳性 5例 ( 1 0 .4 % ) ,抗 SMA阳性 4例 ( 8.3% ) ,而抗 LKM未检出阳性。有 7例患者最终诊断为自身免疫性疾病 ( 3例自身免疫性肝炎 ,2例原发性胆汁性肝硬化 ,2例原发性干燥综合征 )。TTV阳性者 1 4例 ( 1 4 / 36,38.9% ) ,男女比例 2∶1 ,3例TTV感染者伴有自身抗体阳性。提示非甲～非庚型肝炎中存在自身免疫性疾病和TTV感染者 ,TTV感染导致肝损伤的过程中可以伴有自身免疫反应     

乙型肝炎及其与戊型肝炎重叠感染临床对照

目的了解乙型肝炎患者重叠戊型肝炎感染状况及重叠感染对病情的影响. 方法对单纯HBV感染者与HBV重叠HEV感染者进行临床对照研究.结果 726例乙型肝炎患者血清抗-HEV阳性率为12.25%(89/726).其中重型肝炎、肝硬化患者中抗-HEV阳性率分别为22.41%和18.83%;急性肝炎和慢性肝炎分别为8.69%和7.24%.重型肝炎、肝硬化患者抗HEV阳性率高于急性肝炎和慢性肝炎(P<0.01).各型肝炎重叠感染戊型肝炎后其肝功能恢复正常时间延长(P<0.05),且在乙型肝炎基础上重型肝炎和肝硬化重叠感染戊型肝炎血清胆红素明显升高(P<0.01).重叠感染者并发症及病死率较单纯感染者高. 结论乙型肝炎重叠感染戊型肝炎是病情加重及重症化的因素之一.     

TTV 部分传播途径的初步研究及西安地区TTV部分片段测序分析

目的研究输血传播肝炎病毒(TTV)有否直接垂直传播途径及尿液传播的可能性,初步了解西安地区TTV结构部分特点.方法参照文献[1]在TTV DNA ORF1区设计一套套式PCR引物,建立TTV DNA套式PCR检测方法,对16例血清检测TTV DNA阳性的患者尿液做了TTV DNA检测,对52 例正常顺产孕妇血清及其婴儿脐带血同时检测TTV DNA; 并且对西安地区1例原因不明而TTV阳性肝炎患者的TTV套式PCR扩增终产物纯化直接测序.结果 16例血清检测TTV DNA阳性的患者尿液TTV DNA检测未发现1例阳性; 在52例顺产妇外周血中,9例TTV DNA阳性TTV基因检测阳性率为17.3%(9/52);而新生儿脐带血TTV基因检测阳性率为7.7%(4/52); 其中,母子同时TTV DNA阳性2 例,单纯母亲血TTV DNA 阳性7例; 单纯婴儿脐带血TTV DNA 阳性2例.直接测序法测序,测得的143bp序列用DNAsis分析软件中国1株(BDH1)序列比较,二者同源性为65.0%,差异率为35.0%(>30%).结论 TTV可能不能通过尿液传播,但能经胎盘直接垂直传播, 西安地区TTV流行毒株可能存在新的TTV基因型.     

TTV部分传播途径的初步研究及西安地区TTV部分片段测序分析

目的　研究输血传播肝炎病毒 (TTV)有否直接垂直传播途径及尿液传播的可能性 ,初步了解西安地区 TTV结构部分特点 .方法　参照文献 [1]在 TTV DNA ORF1区设计一套套式 PCR引物 ,建立 TTV DNA套式 PCR检测方法 ,对 16例血清检测TTV DNA阳性的患者尿液做了 TTV DNA检测 ,对 5 2例正常顺产孕妇血清及其婴儿脐带血同时检测 TTV DNA;并且对西安地区 1例原因不明而 TTV阳性肝炎患者的 TTV套式 PCR扩增终产物纯化直接测序 .结果　 16例血清检测 TTV DNA阳性的患者尿液 TTV DNA检测未发现 1例阳性 ;在 5 2例顺产妇外周血中 ,9例 TTV DNA阳性 TTV基因检测阳性率为 17.3%(9/5 2 ) ;而新生儿脐带血 TTV基因检测阳性率为 7.7%(4 / 5 2 ) ;其中 ,母子同时 TTV DNA阳性 2例 ,单纯母亲血 TTV DNA阳性 7例 ;单纯婴儿脐带血 TTV DNA阳性 2例 .直接测序法测序 ,测得的 143bp序列用 DNAsis分析软件中国 1株 (BDH1)序列比较 ,二者同源性为 6 5 .0 %,差异率为 35 .0 %(>30 %) .结论　 TTV可能不能通过尿液传播 ,但能经胎盘直接垂直传播 ,西安地区TTV流行毒株可能存在新的 TTV基因型 .     

TT病毒与原发性肝细胞癌发病的关系

目的探讨TT病毒(TTV)感染与原发性肝细胞癌(HCC)之间的关系.方法使用第二代TTV PCR引物,从112例HCC患者、95例无HCC的慢性肝病(CLD)患者及30例健康志愿者血清中检测TTV,每份DNA样本均取自50μl血清.记录各组患者的临床特点(性别、年龄、肝功能、肿瘤特性、其他肝炎病毒指标和输血史),并分析其与TTV感染的关系.结果 (1)TTV DNA在HCC患者的阳性检出率为17.86%(20/112),与在无HCC的CLD患者中的阳性检出率15.78%(15/95)相比,差异无显著性,但均较正常对照组有显著差异(P＜0.05);(2)在输血史这一临床特征上,HCC和CLD组内,TTV DNA阳性与阴性组之间差异有显著性,分别为80.00%vs 35.87%(P＜0.05)和73.33% vs 27.50%(P＜0.05);(3)在HCC患者中,TTV DNA阳性组丙氨酸氨基转移酶(ALT)较阴性组有显著升高,[(93±27)IU/L vs (68±31)IU/L](P＜0.05),且TTV DNA的存在造成同时合并HBV和/或HCV感染的HCC患者ALT的显著升高(P＜0.05);(4)在CLD患者中,有无TTV DNA的存在,对HBV和/或HCV所致的肝功能损伤并无显著性影响.结论 TTV这种可能经过血液传播的肝炎病毒可造成HCC患者的肝功能损伤,但在CLD向HCC的转化中,似乎不起主导作用.     

聚合酶链反应检测HBsAg(-)慢性肝病患者血清中HBV DNA

应用聚合酶链反应检测了53例HBsAg(-)慢性肝病患者血清中的HBV DNA。结果为:53例患者中38例阳性,占71.70%;其中慢性肝炎15例,阳性率83.33%(15/18);肝炎后肝硬化7例,阳性率58.33%(7/12);原发性肝癌16例,阳性率69.57%(16/23)。结果提示在HBsAg(-)慢性肝病中,仍以乙肝病毒感染为主。     

Enteric transmission of transfusion- transmitted virus

目的　最近在输血后肝炎病人中发现了一种新型肝炎病毒 ,并命名为输血传播的病毒即TTV。我们在一次经肠道传播的非甲非戊型肝炎暴发流行的病人粪便和血清中也检测到了这一病毒。本文旨在于回顾这种新型病毒的流行病学特征和实验感染。方法　主要收集我们的资料 ,并参照世界各地有关论著。结果　在一次经肠道传播的非甲非戊型肝炎的暴发流行中 ,从 381名学生 (6 0 7% )的血清和粪便标本中检测到TTV病毒的片段 ,该职校中无症状携带者的血清阳性率为 32 1% ,而粪便阳性率为 2 4 6 % ,提示有潜在的传染源存在。来自中国北方与南方的两个偏远农村人群流行病学调查 ,其阳性率分别为 9 2 %和 10 6 % ,表明中国是TTV感染的地方性流行区。我们用TTV阳性肝炎病人的粪便滤过液分别经灌胃和静脉接种两种途径成功地使两组恒河猴 (每组 3只 )感染了TTV ,并对其中两只恒河猴进行了研究 ,分别在它们的肝、脾、小肠和结肠组织中检测到TTV ,而单链的复制中间体 ,仅仅在肝和小肠中检测到。结论　这种无包膜的DNA病毒可能经血液和肠道途径传播 ,根据其广泛分布和高的流行率 ,我们推测肠道传播是更为重要的     

TTV DNA在肝病患者和供血者中检测结果分析

迄今已发现至少有6种肝炎病毒(甲-戊及庚型肝炎病毒),但仍有10%～15%的肝炎患者病因未明,推测尚存在新的致病因子.1997年日本学者Nishizawa等[1]应用代表性差异分析法(RDA)从1例非甲-庚型输血后肝炎病人血清中分离出一种新的单链DNA病毒,命名为输血传播病毒(TTV).由于其在肝组织内的浓度较血清中高10～100倍,病毒血症的出现与血清ALT改变相平行,因而被认为是原因不明肝炎的又一个病原.为明确TTV的感染状况,我们采用套式PCR对一组肝病患者和供血者血清中的TTV DNA进行了检测,现将结果报告如下.     

广州地区献血者中输血传播病毒感染情况调查

目的:了解广州地区献血人群中的输血传播病毒(TTV)感染状况,探讨TTV与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBsAg及抗HCV指标的相关性.方法:用聚合酶链反应(PCR)方法对不同献血人群血清标本进行TTV-DNA检测,并对所有标本进行了ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒及抗-HAV、抗-HEV、抗-HGV筛查.结果:献血者中的TTV-DNA阳性率为7.6%(43/564),其中有偿献血者和无偿献血者中的TTV-DNA阳性率分别为9.4%、5.9%;单一ALT异常无偿献血者的TTV-DNA阳性率明显高于ALT正常无偿献血者(10.6%、4.2%,P＜0.05),HBsAg及抗-HCV阳性献血者中的TTV-DNA阳性率分别为11.1%、8.3%.结论:本文结果显示广州地区献血者中存在TTV感染,而且在有偿献血者中感染率相对较高.TTV可以单独感染也可与HBV、HCV重叠感染并与ALT密切相关.