脑还丹对SAM-P/8小鼠海马神经元细胞色素C氧化酶和细胞凋亡的影响

目的探讨脑还丹对快速老化小鼠SAM-P/8海马神经元细胞色素C氧化酶(Cytochrome c oxidase,COX)活性及COXⅡmRNA和COXⅣmRNA表达和细胞凋亡的影响。方法 SAM-P/8快速老化小鼠随机分为模型组,银可络组,脑还丹高、低剂量组,模型组小鼠予蒸馏水灌胃,银可络组,脑还丹高、低剂量组小鼠分别给予银可络,高、低剂量脑还丹,于治疗105 d,取海马组织,培养海马神经元24 h后,检测各组的海马神经元COX活性,COXⅡmRNA和COXⅣmRNA的表达及观察细胞凋亡情况。结果模型组小鼠COX活性低于银可络组、脑还丹低、高剂量组(P0.01),脑还丹高剂量组、银可络组小鼠COX活性高于脑还丹低剂量组(P0.01),同时模型组小鼠COXⅡmRNA表达低于脑还丹高剂量组和银可络组(P0.01或P0.05),银可络组、脑还丹高剂量组小鼠COXⅡmRNA表达高于脑还丹低剂量组(P0.01或P0.05),COXⅣmRNA表达也取得相似的结果。另外,模型组小鼠海马神经元凋亡较脑还丹高、低剂量组、银可络组增多(P0.01),脑还丹低剂量组小鼠的海马神经元凋亡数多于银可络组及脑还丹高剂量组(P0.01)。结论脑还丹可能通过提高快速老化小鼠COX活性和促进COXⅡmRNA和COXⅣmRNA表达发挥抗凋亡的作用,疗效随着剂量升高而增加。     

补肾疏肝方对老年抑郁症小鼠海马氧化应激及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的 观察慢性轻度不可预见性应激（CUMS）后老年抑郁症小鼠海马组织氧化应激和转化生长因子-β₁（TGF-β₁）/Smad信号通路变化,并探讨补肾疏肝方抗抑郁的可能机制。方法 5月龄的小鼠90只,随机分为正常组、模型组、补肾疏肝方高、中、低剂量组和氟西汀组共6组,每组15只。除正常组外,其余各组小鼠均采用CUMS建立老年抑郁症模型。补肾疏肝方高、中、低剂量组小鼠在造模第1天开始同时灌胃补肾疏肝方19.5,9.75,4.87 g·kg^-1,氟西汀组小鼠灌胃氟西汀0.033 g·kg^-1,正常组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,共21 d。用矿场实验评价各组小鼠的行为反应,采集小鼠海马组织并进行相关指标检测,WST-1法测超氧化物歧化酶（SOD）含量,TBA法测丙二醛（MDA）的含量,微量酶标法测谷胱甘肽（GSH）含量,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测TGF-β₁,Smad2,Smad3,Smad7 mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠OFT水平得分和垂直得分明显降低,海马组织SOD,GSH水平均下降,MDA含量明显升高（P<0.05）;TGF-β₁,Smad2,Smad3 mRNA表达均上调,Smad7 mRNA表达下调（P<0.05）。与模型组比较,补肾疏肝方高、中、低剂量组及氟西汀组小鼠海马组织SOD,GSH含量均上升,MDA含量下降（P<0.05）,补肾疏肝方高、中、低剂量组及氟西汀组小鼠海马组织TGF-β₁,Smad2,Smad3 mRNA表达均下调,Smad7 mRNA表达上调（P<0.05）。与补肾疏肝方高剂量组比较,补肾疏肝方中、低剂量组小鼠海马组织SOD,GSH含量下降,MDA含量均上升（P<0.05）;补肾疏肝方中、低剂量组小鼠海马组织TGF-β₁,Smad2,Smad3 mRNA表达均上调,Smad7 mRNA表达下调（P<0.05）。结论 补肾疏肝方可显著改善SAPM8小鼠的老年抑郁症状,其机制可能与调节海马氧化应激及TGF-β₁/Smad信号通路有关。     

二苯乙烯苷对APP/PS1/Tau三转基因小鼠痴呆模型GSK3β，PKA，PP2A的影响

目的 观察二苯乙烯苷（TSG）对淀粉样前体蛋白/早老蛋白-1/Tau（APP/PS1/Tau）三转基因小鼠阿尔茨海默病（AD）模型脑组织中糖原合成酶激酶3β（GSK3β）,环磷酸腺苷依赖的蛋白激酶（PKA）,磷酸丝氨酰/磷酸苏氨酰蛋白磷酸酶2A（PP2A）的表达影响。方法 8月龄APP/PS1/Tau三转基因小鼠45只,随机分为模型组、石杉碱甲组（石杉碱甲,0.15 mg·kg^-1）,TSG低、中、高剂量组（TSG,0.033,0.1,0.3 g·kg^-1）,每组9只。另取同龄C5B7L/6J小鼠9只为正常组。各组灌胃60 d相应药物后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠海马神经元的一般结构;免疫组化（IHC）检测各组小鼠脑组织PKA蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测GSK3β,PKA,PP2A mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测GSK3β,PP2A蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组小鼠神经元细胞的凋亡水平显著升高,GSK3β,PKA蛋白及mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,PP2A蛋白及mRNA表达水平显著下调（P<0.01）;与模型组比较,各给药组小鼠神经元细胞凋亡水平显著下调,GSK3β,PKA蛋白及mRNA表达水平明显下调（P<0.05,P<0.01）,PP2A蛋白及mRNA表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 TSG治疗AD的机制可能与降低GSK3β和PKA mRNA表达水平与蛋白表达水平,提高PP2A的mRNA表达水平与蛋白表达水平等机制有关。     

4种归肺经中药对肺热证小鼠TNF-α,IL-1β表达的影响

目的：探讨麻黄、干姜、黄芩、桑白皮4味归肺经中药对小鼠肺热证的影响,并初步揭示其作用机制。方法：将100只昆明种小鼠随机分为正常对照组,模型组,麻黄、干姜、黄芩、桑白皮组（20,10 g·kg^-1）,每组10只,灌胃给药7 d,每天1次,于实验第4,5,6天鼻腔滴入肺炎链球菌菌液建立小鼠肺热证模型,病理学观察肺组织形态变化,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,免疫组化法测定肺组织TNF-α,白介素-1β（IL-1β）蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组肺组织实变（P<0.001）,血清TNF-α含量升高（P<0.01）,肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较,麻黄低剂量组,干姜高、低剂量组,黄芩高剂量组肺组织病理有明显改善（P<0.01,P<0.05）;血清TNF-α含量降低,除干姜高剂量组、黄芩低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达降低,其中,TNF-α表达除干姜低剂量组、桑白皮高剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,IL-1β表达除麻黄低剂量组、桑白皮低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论：麻黄、干姜、黄芩、桑白皮可以干预肺热证,抑制TNF-α,IL-1β炎症因子表达可能是其减轻小鼠肺热证肺组织损伤的主要途径。     

二苯乙烯苷对SAMP8小鼠APPmRNA和PS1mRNA表达的影响

目的:探讨灌胃给二苯乙烯苷(TSG)后SAMP8小鼠β淀粉样蛋白前体(APP)mRNA和早老蛋白-1(PS1)mRNA表达的变化。方法:6月龄快速老化模型小鼠SAMP8 50只,随机均分为SAMP8空白组,阳性药石杉碱甲对照组,高、中、低剂量TSG组(0.3,0.1,0.033 g·kg-1·d-1)共6组;6月龄正常老化小鼠SAMR1鼠10只为正常对照组。各组分别灌胃相应药物60 d后,应用实时定量PCR法检测海马组织APP和早老蛋白-1(PS1)mRNA的表达。结果:与SAMP8空白组比较,TSG组APP mRNA 2-△△CT值明显降低,PS1 mRNA 2-△△CT值也明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明TSG组APP mRNA和PS1 mRNA表达下调。结论:二苯乙烯苷对痴呆小鼠SAMP8有显著地抗痴呆作用,其作用机制可能与调控APP,PS1表达有关。     

双蓣调脂汤对高胆固醇血症模型大鼠肝组织HNF1α/PCSK9/LDLR信号通路的影响

目的 观察高胆固醇血症大鼠肝组织中肝细胞核因子1α（HNF1α）,前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9型（PCSK9）,低密度脂蛋白胆固醇受体（LDLR）的表达水平,探讨双蓣调脂汤调节胆固醇代谢、缓解高胆固醇血症的作用机制。方法 40只雄性SD大鼠随机抽取8只为正常组予普通饲料喂养,其余32只予高脂饲料喂养,高胆固醇血症模型造模成功后,分为模型组,双蓣调脂汤低剂量组（7.8 g·kg^-1）,双蓣调脂汤高剂量组（15.6 g·kg^-1）,辛伐他汀组（4 mg·kg^-1）,每组8只,连续灌胃给药8周。生化法检测血清总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肝组织病理形态学变化;免疫组化检测大鼠肝组织中PCSK9和LDLR的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝组织HNF1α,PCSK9和LDLR mRNA与蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平显著升高（P<0.01）,肝脂肪变性明显,HNF1α,PCSK9 mRNA与蛋白表达水平明显上升（P<0.05）,LDLR mRNA与蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,双蓣调脂汤高剂量组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平显著降低（P<0.01）,双蓣调脂汤低剂量组和辛伐他汀组大鼠血清TC,LDL-C水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,各给药组HDL-C水平没有明显变化,各治疗组肝脂肪变性明显改善,各治疗组大鼠肝脏HNF1α mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,双蓣调脂汤低、高剂量组大鼠肝脏PCSK9 mRNA与蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,辛伐他汀组大鼠肝脏PCSK9 mRNA水平显著升高（P<0.01）,蛋白表达水平呈降低趋势,各治疗组大鼠肝脏LDLR mRNA水平显著升高（P<0.01）,双蓣调脂汤高剂量组大鼠肝脏LDLR蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,双蓣调脂汤低剂量组和辛伐他汀组大鼠肝脏LDLR蛋白表达量呈升高的趋势,免疫组化结果显示各治疗组PCSK9阳性表达减弱,LDLR阳性表达增强。双蓣调脂汤高剂量组的治疗效果略优于辛伐他汀组,双蓣调脂汤低剂量组的治疗效果与辛伐他汀组比较,差异无统计学意义。结论 双蓣调脂汤可能通过HNF1α/PCSK9/LDLR信号通路降低血脂水平,在调节胆固醇代谢和减轻大鼠高胆固醇血症中发挥积极作用。     

E2/ERβ信号通路介导引火汤改善慢性应激诱导的双侧卵巢摘除小鼠抑郁样行为

目的 观察引火汤（YHT）对慢性应激诱导的双侧卵巢摘除（OVX）小鼠抑郁样行为的影响并探索其基于雌二醇（E₂）/雌激素受体β（ERβ）信号通路的作用机制。方法 实验分两部分完成,第一部分将小鼠随机分为假手术组（Sham）,模型组（OVX）,阳性药组（E₂,0.13 mg·kg^-1）和引火汤组（YHT,23.4 g·kg^-1）。采用OVX联合慢性不可预知性温和刺激（CUMS）方法复制OVX。双侧卵巢摘除术后第8天,各组小鼠开始CUMS并开始给药,强迫游泳（FST）,悬尾（TST）,旷场（OFT）3种行为学实验观察各组小鼠不动时间、水平运动评分及垂直运动评分变化,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清、脑组织E₂水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测芳香化酶（Cyp19）基因转录,免疫组织化学法（IHC）检测海马齿状回ERα和ERβ表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脑内总ERα和ERβ蛋白水平。第二部分实验分Sham,OVX,YHT和阻断剂组（Y+B,23.4 g·kg^-1+100 μg·kg^-1）,Y+B组小鼠在引火汤灌胃同时采用隔天腹腔注射方式的给予ERβ阻断剂（PHTPP）,3种行为学实验观察各组小鼠不动时间、水平运动评分及垂直运动评分变化。结果 与Sham组比较,OVX组小鼠不动时间显著增加、水平运动及垂直运动水平显著降低（P<0.01）,血清和脑内E₂显著降低（P<0.01）,脑内Cyp19 mRNA表达显著降低（P<0.01）,海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达显著降低（P<0.01）;与OVX组比较,E₂组小鼠不动时间显著降低、水平运动及垂直运动水平显著增加（P<0.01）,血清E₂显著升高（P<0.01）,脑内Cyp19 mRNA表达差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达显著升高（P<0.01）,YHT组小鼠不动时间显著降低、水平运动及垂直运动水平显著增加（P<0.01）,血清E₂未见升高,脑内E₂明显升高（P<0.01）,脑内Cyp19 mRNA表达显著增加（P<0.01）,海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达均显著升高（P<0.05,P<0.01）。PHTPP可阻断引火汤对OVX小鼠在FST,TST,OFT实验中的作用。结论 引火汤促进脑内源性雌激素合成和释放,激活E₂/ERβ信号通路可能是其改善慢性应激诱导的OVX小鼠抑郁样行为关键机制之一。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠作用机制

目的 观察红芪多糖（HPS）对糖尿病肾病db/db小鼠Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法 将50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、HPS高、中、低剂量组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。正常组和模型组给予5 mL·kg^-1·d^-1蒸馏水,厄贝沙坦组给予22.75 mg·kg^-1·d^-1厄贝沙坦溶液,HPS高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg·kg^-1·d^-1 HPS溶液。6组小鼠每日灌胃1次,连续给药12周。检测各组小鼠一般状态、血糖（GLU）、24 h尿蛋白（UTP）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾脏中Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化糖原合成激酶-3β（p-GSK-3β）的蛋白及mRNA的表达水平。结果 治疗12周后,与正常组比较,模型组小鼠一般状态较差且肾脏组织病理超微结构病变显著,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组小鼠一般状态及肾脏组织病理超微结构均得到一定程度改善,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均降低（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论 HPS可在一定程度上减轻糖尿病肾病的肾损伤,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。     

补肾活血方调控Wnt/β-catenin信号通路改善复发性流产小鼠子宫螺旋动脉重铸的机制

目的 观察补肾活血方对复发性流产模型小鼠子宫蜕膜组织Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路及子宫螺旋动脉重铸的影响，探讨其作用机制。方法 以CBA/J×BALB/c小鼠合笼构建正常妊娠小鼠模型，以CBA/J×DBA/2小鼠合笼构建复发性流产小鼠模型，将复发性流产模型小鼠随机分为模型组、地屈孕酮组、中药低剂量组及中药高剂量组，以正常妊娠小鼠作为空白组，每组10只，各组分别给予药物治疗14 d。疗程结束后观察各组小鼠胚胎吸收率，苏木素-伊红（HE）染色观察蜕膜组织病理形态、螺旋动脉生理性转变率，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、血管内皮生长因子（VEGF）及Wnt/β-catenin信号通路的mRNA与蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组胚胎吸收率明显升高（P<0.05）；子宫螺旋动脉生理性转变率明显降低（P<0.05）；子宫蜕膜组织的细胞水肿变性，排列紊乱；螺旋动脉重铸关键因子MMP-2、MMP-9、VEGF及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Wnt2、β-catenin、细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）、c-Myc的mRNA与蛋白表达明显降低（P<0.05）。与模型组比较，中药低剂量组、中药高剂量组可以明显降低胚胎吸收率（P<0.05）；明显提高螺旋动脉生理性转变率（P<0.05）；改善子宫蜕膜组织的细胞形态、增加蜕膜血管数量；明显上调MMP-2、MMP-9、VEGF及Wnt/β-catenin信号通路相关因子的mRNA与蛋白表达（P<0.05）。结论 复发性流产存在子宫螺旋动脉重铸障碍，补肾活血方可以通过激活Wnt/β-catenin信号通路，增加VEGF、MMP-2及MMP-9的表达，促进子宫螺旋动脉重铸，从而治疗复发性流产。     

β-catenin RNA干扰对黄精丸治疗学习记忆障碍小鼠的信号通路机制的影响

目的 用侧脑室β-连环蛋白（β-catenin）RNA干扰（RNAi）黄精丸治疗D-半乳糖联合东莨菪碱模拟的阿尔茨海默病（AD）小鼠,以探讨黄精丸防治AD的神经保护信号分子机制。方法 81只雄性昆明种小鼠随机分成正常组,假手术组,AD模型组,多奈哌齐组,黄精丸+scrambled组（即β-catenin RNA干扰组）,黄精丸+RNAi组,黄精丸组,多奈哌齐组和黄精丸组每组小鼠8只,其余各组每组13只。连续5周采用D-半乳糖联合东莨菪碱注射法给后5组的各小鼠制作AD模型。造模后第4周第1天,给黄精丸+RNAi组各小鼠右侧脑室一次性注射聚乙烯亚胺（PEI-LMW）/β-catenin siRNAs纳米络合物0.75 μL以脑内β-catenin RNA干扰处理,黄精丸+scrambled组各小鼠右侧脑室一次性注射络合复合物0.75 μL以作β-catenin干扰对照,假手术组各小鼠侧脑室内注射生理盐水0.75 μL。侧脑室注射2周后,经确认小鼠β-catenin RNAi成功,再给多奈哌齐组小鼠灌胃多奈哌齐（6.5×10^-4 g·kg^-1）,给黄精丸+scrambled组,黄精丸+RNAi组,黄精丸组各小鼠灌胃黄精丸（2.5 g·kg^-1）,持续4周。灌胃结束后,采用跳台实验评价各小鼠的学习记忆能力差异;尼氏染色计数各组小鼠大脑皮层S1Tr区及海马CA1,CA3区神经元数量差异;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组小鼠大脑Wnt1,蓬松蛋白极性片段2（DVL2）,糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）,β-catenin,细胞周期蛋白D₁（CyclinD₁） mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠大脑Wnt1,DVL2,GSK-3β,β-catenin,CyclinD₁蛋白表达水平。结果 AD小鼠侧脑室内β-catenin RNAi可明显抑制其脑内β-catenin表达,可成功实现目的基因沉默。与正常组比较,AD模型组小鼠学习与记忆成绩显著下降,跳台的错误次数增多（P<0.01）,大脑皮层S1Tr区及海马CA1,CA3区神经元神经元数量显著减少（P<0.01）,大脑Wnt1,DVL2,β-catenin,CyclinD₁ mRNA及蛋白表达水平均显著下降（P<0.01）,GSK-3β mRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。与AD模型组比较,黄精丸组小鼠的学习与记忆成绩均显著升高,跳台错误次数均显著降低,大脑皮层S1Tr区及海马CA1,CA3区神经元数量显著升高,大脑Wnt1,DVL2,β-catenin,CyclinD₁ mRNA及蛋白表达水平均显著升高,GSK-3β mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与黄精丸组比较,黄精丸+RNAi组小鼠的学习与记忆成绩均下降,跳台错误次数显著升高（P<0.01）,大脑皮层S1Tr区及海马CA1,CA3区神经元数量显著降低（P<0.01）,大脑Wnt1,DVL2,GSK-3β mRNA及蛋白表达水平无明显变化,β-catenin,CyclinD₁ mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。结论 黄精丸可通过激活Wnt/β-catenin信号通路转导发挥治疗AD作用。     

Inhibitory effect of medicinal plant-derived carboxylic acids on the human transporters hOAT1, hOAT3, hOATP1B1, and hOATP2B1简

A significant number of organic carboxylic acids have been shown to influence the absorption and distribution of drugs mediated by organic anion transporters （OATs）. In this study, uptake experiments were performed to assess the inhibitory effects of cinnamic acid, ferulic acid, oleanolic acid, deoxycholic acid, and cynarin on bOAT1, hOAT3, hOATP 1B l, and hOATP2B 1. After a drug-drug interaction （DDI） investigation, cinnamic acid, ferulic acid, deoxycholic acid, and cynarin were found and validated to inhibit hOAT1 in a competitive manner, and deoxycholic acid was found to be an inhibitor of all four transporters. The apparent 50% inhibitory concentrations of cinnamic acid, ferulic acid, deoxycholic acid, and cynarin were estimated to be 133.87, 3.69, 90.03 and 6.03 μmol·L ^-1 for hOAT1, respectively. The apparent 50% inhibitory concentrations of deoxycholic acid were estimated to be 9.57μmol·L ^-1 for hOAT3, 70.54 μmol·L ^-1 for hOATP1B1, and 168.27μmol·L ^-1 for hOATP2B1. Because cinnamic acid, ferulic acid, and cynarin are ingredients of food or food additives, the present study suggests there are new food-drug interactions to be disclosed. In addition, deoxycholic acid may be used as a probe for studying the correlation of OATs and OATPs.     

三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测量不确定度评定

目的：建立三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测量不确定度评定方法.方法：采用HPLC法测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量,建立数学模型,分析不确定度来源,最后计算扩展不确定度.结果：按干燥品计算,三七中三七皂苷R1的含量为（0.815±0.020）％,k=2;人参皂苷Rg1的含量为（3.324±0.076）％,k=2;人参皂苷Rb1的含量为（2.931±0.008）％,k=2结论：本方法建立的数学模型合理、可靠,可用于三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的不确定度评定.     

子宫内膜异位症患者内膜组织中kiss-1及血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达的意义

目的研究子宫内膜异位症患者内膜组织中kiss-1及血清和腹腔液中血管内皮生长因子可溶性受体(sflt-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、T细胞表达和分泌的调节性激活因子(RANTES)表达的意义。方法选取子宫内膜异位症行腹腔镜手术患者256例作为观察组,根据病变部位、大小、粘连程度分为Ⅰ~Ⅱ期组76例,Ⅲ~Ⅳ期组180例。选取同期因卵巢良性肿瘤、卵巢系膜囊肿、宫颈病变等入院治疗的患者114例作为对照组。采用免疫组化法测定受检者子宫内膜组织标本kiss-1的表达情况,采用ELISA方法测定受检者血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达情况。结果观察组kiss-1阳性表达率明显低于对照组(P0.05)。Ⅰ~Ⅱ期组kiss-1阳性表达率明显高于Ⅲ~Ⅳ期组(P0.05)。观察组血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达水平明显高于对照组(P均0.05)。Ⅰ~Ⅱ期组血清和腹腔液中sflt-1、VEGF和RANTES表达水平低于Ⅲ~Ⅳ期组(P0.05)。结论kiss-1、sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES水平与子宫内膜异位症发展密切相关,可能参与了其发病过程,可以作为子宫内膜异位症的辅助检测指标。     

血脂异常患者中医证型及血清sICAM-1、sVCAM-1水平与幽门螺旋杆菌感染的相关性研究

目的研究不同中医证型的血脂异常患者与幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染的关系,以及Hp感染对血脂异常患者血清炎症因子的影响。方法对120例血脂异常患者及20例健康对照者的流行病学信息、中医证型、血脂、血清Hp特异性抗体(helicobacter pylori immunoglobulin G,Hp Ig G)、细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,s ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,s VCAM-1)水平进行检测,并采用非参数检验及一元线性回归的方法进行分析。结果血清Hp Ig G表达水平从高到低为肝肾阴虚组脾肾阳虚组阴虚阳亢组气滞血瘀组痰浊阻滞组健康对照组(P0.01)。血脂异常组各中医证型患者血清Hp Ig G表达水平均显著高于对照组(P0.01),肝肾阴虚组患者血清Hp Ig G表达水平与痰浊阻滞组间差异具有显著统计学意义(P0.01)。血脂异常患者血清Hp Ig G水平与s ICAM-1(r=0.236,P0.01)、s VCAM-1(r=0.253,P0.01)表达水平均成正相关关系。结论血脂异常患者血清Hp Ig G水平明显高于健康对照组,且不同中医证型的血脂异常患者血清Hp Ig G水平具有差异性,Hp感染可能通过参与炎性因子的激活,从而促使动脉粥样硬化的发生发展。     

HPLC同时测定脑脉泰胶囊中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1的含量

目的:建立高效液相色谱法来同时测定脑脉泰胶囊(红参、三七、当归等)中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1含量的方法。方法:采用高效液相色谱梯度洗脱法,色谱柱为AgiLent-ODS-3(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相:乙腈-水进行梯度洗脱,流速:1.0 mL/m in,检测波长为203 nm,柱温:35℃。结果:三七皂苷R1线性浓度范围在0.205~1.539μg,r=0.999 6,平均回收率为98.07%,RSD=0.51%(n=5),人参皂苷Rg1线性浓度范围在0.838~6.285μg,r=0.999 4,平均回收率为97.66%,RSD=0.53%(n=5);人参皂苷Rb1线性浓度范围在0.822~6.165μg,r=0.999 6,平均回收率为98.19%,RSD=0.44%(n=5)。结论:本法简单准确,重复性好,可作为脑脉泰胶囊的质量控制方法。     

HPLC测定颈康胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1与三七皂苷R1的含量

目的建立颈康胶囊(熟地、何首乌、三七等)中人参皂苷Rg1、Rb1与三七皂苷R1的含量测定方法.方法采用高效液相色谱梯度洗脱法,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为203 nm.结果三七皂苷R1在0.327～2.180 μg范围内线性关系良好(r=0.999 4),平均回收率为98.23%,RSD=1.53%(n=6),人参皂苷Rg1在0.909～6.060 μg范围内线性关系良好(r=1.0),平均回收率为99.04%,RSD=1.00%(n=6),人参皂苷Rb1在0.672～4.480 μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.17%,RSD=1.31%(n=6).结论本法简便、快速、准确,可用于该制剂的质量控制.     

双波长薄层扫描测定血塞通片中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的含量

目的：对血塞通片进行质量标准的研究。方法：采用双波长薄层扫描法对血塞通片中的人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1进行含量测定。结果：在本色谱条件下，人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的回收率分别为99．1％、98．9％、99．3％，RSD分别为4．76％、4．71％、3．72％；回归方程分别为人参皂苷Rg1：Y=532．18x-2．6 r=0．9981；人参皂苷Rb1：Y=1788．5x-74．3 r=0．9978；三七皂苷R1：Y=1404．14x-124．7 r=0．9983。结论：所建立的人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量测定的方法简便、准确，可用于血塞通片的质量控制。     

不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血VCAM-1、ICAM-1和PAI-1水平的影响

目的探讨不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血清血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）水平的影响。方法将急性冠脉综合征患者256例随机分成A组（瑞舒伐他汀10mg/d,128例）,B组（瑞舒伐他汀20mg/d,128例）,另选50例冠状动脉造影检查证实无冠状动脉狭窄者设为对照组。分别于治疗前及治疗后1周、2周收集血液,采用酶联免疫吸附剂法测定血清VCAM-1、ICAM-1和PAI-1浓度。结果急性冠脉综合征患者血清中VCAM-1、ICAM-1和PAI-1的水平明显高于正常对照组（P〈0.05）;A组、B组在治疗后1周、2周VCAW-1、ICAM-1和PAI-1的水平较治疗前降低（P〈0.05）;B组在治疗后VCAW-1、ICAM-1和PAI-1水平均较A组低（P〈0.05）。结论瑞舒伐他汀可以有效降低ACS患者血清中VCAM-1、ICAM-1和PAI-1的水平,且随着瑞舒伐他汀剂量的增加,其降低ACS患者血清VCAM-1、ICAM-1和PAI-1水平的作用更为显著。     

中药活性成分对M_1受体及其偶联G_(q/11α)的影响

目的 :观察 ZMA ,QST,QT对 M1 受体及其偶联 G-蛋白结合功能的影响。方法 :以 CH Om 1细胞为模型在使用不同药时 ,用放射配基结合分析法检测 M1 受体密度 ,以非 GTP ase水解的 [35 S] GTPγS与 G-蛋白的不可逆结合检测 G-蛋白的结合活性 ,并计算偶联比率 ;以 Western blot方法检测 Gq/1 1α的量。结果 :ZMA10 - 5 m ol/L 及 QST10 - 5 m ol/L 能够提高M1 受体、M1 受体偶联的 G-蛋白的活性。并改善其偶联比率。Q ST10 - 5 m ol/L 还能够提高 Gq/1 1α的量。结论 :ZMA和 QST作用机理可能不同 :ZMA促进偶联的机理很可能主要是提高 M1 受体后 G -蛋白的结合活性提高 ,并且改善 M1 受体和Gq/1 1α的偶联。Q ST可能还与促进 Gq/1 1α合成有关。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠海马区神经干细胞增殖及Frizzled1、Dvl1、CyclinD1表达的影响

目的:探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠海马区神经干细胞增殖,以及Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1表达的影响。方法:将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、丹龙醒脑方7.4g/kg组和丹龙醒脑方14.8g/kg组,采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注1d、3d和7d采用改良m-NSS法进行神经功能缺损评分,7d后取大鼠缺血侧海马组织,采用免疫荧光法检测海马区Brdu阳性细胞率;采用RT-q PCR法、Western Blot法分别检测Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达。结果:1再灌注1d,与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分明显升高,而各组间差异无统计学意义;再灌注3d、7d,与模型组比较,依达拉奉组、丹龙醒脑方7.4g/kg组、丹龙醒脑方14.8g/kg组评分明显降低。2与假手术组比较,各组Brdu阳性细胞率增大,Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1mRNA及蛋白的表达明显增强;与模型组比较,依达拉奉组、丹龙醒脑方7.4g/kg组、丹龙醒脑方14.8g/kg组Brdu阳性细胞率增大,Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1mRNA及蛋白的表达明显增强。结论:丹龙醒脑方能改善神经缺损症状,促进脑缺血后海马区NSCs增殖,其机制可能与通过上调缺血再灌注后海马区Frizzled1、Dvl1表达水平,从而促进Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因Cyclin D1的表达水平有关。