EPO多克隆抗体抑制EPO促CFU-E形成研究

目的:探讨EPO多克隆抗体是否具有对抗EPO促红系形成的功能。方法:对大鼠骨髓进行定向体外红系集落形成单位(CFU-E)培养,观察CFU-E数量,判定EPO多克隆抗体对红系增殖活性的影响。结果:与常规培养组比较,EPO多克隆抗体培养组CFU-E明显减少,P<0.01,差别有非常显著性。结论:EPO抗体可抑制EPO促红系形成,其可作为治疗高原红细胞增多症病人的药物进一步研究。     

胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段抑制EPO促CFU-E形成的研究

目的:观察胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段能否抑制EPO促红系形成。方法:对大鼠骨髓进行红系定向体外培养,加入胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段干预,观察红系集落形成单位(CFU-E)之数量,判定胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段对红系增殖活性的影响。结果:胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段加入干预培养后,CFU-E数量明显减少(P<0.01)。结论:胰蛋白酶酶切EPO之多肽产物体外能对抗EPO,抑制红系增殖。其可作为治疗高原红细胞增多症的可能药物进一步研究。     

用人尿中提取的红细胞生成素进行人骨髓红系祖细胞体外培养

本文介绍用从再生障碍性贫血病人尿中提取的EPO制剂进行人骨髓红系祖细胞体外培养的结果.在EPO为0.1～1u/ml的剂量范围内,CFU-E产率与EPO剂量呈良好线性关系,与同时用日本EPO制剂培养所得的结果相同.在BFU-E培养中,加入EPO 1u/ml,集落产率也与日本制剂相似.用普通显微镜和电子显微镜对集落和细胞进行的观察说明,集落中大部分是幼稚红细胞.     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的 了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例,正常对照22例身体健康者,应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU-E,CFU-E)增殖能力,BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Epo)的反应能力。结果 HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E集落数分别高于正常对照。Epo对HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E刺激明显,与正常对照组比较BFU-E集落数差异显著(P<0.05);CFU-E集落数差异显著(P<0.01)。结论 HAPC骨髓红系祖细胞增殖能力增强,对Epo敏感性增高。     

干扰素γ联合红细胞生成素对多发性骨髓红系祖细胞的体外作用研究

为研究干扰素γ(IFN-γ)联合红细胞生成素(EPO)对多发性骨髓瘤(MM)红系祖细胞(CFU-E)的作用，采用细胞体外培养对10例MM患者进行了CFU-E培养。结果表明，单一IFN-γ对MM患者CFU-E即有明显促增殖作用；与EPO联合时，其促增殖作用更加明显，使MM患者CFU-E接近正常对照。提示IFN-γ联合EPO对MM红系祖细胞具有显著促增殖作用，可能提供可靠的实验依据。     

Epo多克隆抗体对抗Epo活性的研究

目的:探讨促红细胞生成素(Epo)多克隆抗体是否具有拮抗Epo所致的高原红细胞增多症患者骨髓红系增殖活性的功能。方法:抽取高原红细胞增多症病人骨髓,分离单个核细胞,进行红系定向体外培养,观察加入Epo及Epo多克隆抗体对红系集落形成单位(CFU-E)的影响。结果:Epo多克隆抗体体外能抑制高原红细胞增多症病人骨髓红系增殖。结论:Epo抗体可以显著拮抗Epo促红细胞增生作用。     

EPO单克隆抗体的制备

目的：制备EPO单克隆抗体,为高原红细胞增多症的治疗研究提供材料。方法：用细胞融合技术制备能稳定分泌EPO单克隆抗体的细胞株,对该细胞株扩增培养,注射入BALB小鼠腹腔内,（7～10）天后搜集腹水并进行腹水抗体效价测定,提纯,浓缩,进行抗体浓度测定。结果：得到一株能稳定分泌EPO单克隆抗体的细胞株,并制备出高效价的EPO单克隆抗体。结论：该EPO单克隆抗体的制备成功为高原红细胞增多症的治疗的基础研究提供了原料。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例，正常对照22例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU，CFu-E)增殖能力，BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Ep0)的反应能力。结果HAPc惠老骨髓BFU-E，CFUE集落数分别高于正常对照。Ep0对HAPc患者骨髓BFUE，CFu-E刺激明显，与正常对照组比较BFu-E集落数差异显著(P＜0．05)；CFU-E集落数差异显著(P＜0.01)；结论HAPc骨髓红系祖细胞增殖能力增强，对Epo敏感性增高。     

高原缺氧大鼠急性放射损伤血清造血活性的改变

目的：探讨高原缺氧条件下,急性放射损伤大鼠血清造血活性的变化特点;方法;大鼠在模拟5000m高原缺氧条件下喂饲3天后,接受6Gy一次性γ射线全身照射,照后继续在缺氧条件下饲养,3天后处死动物收获血清,ELISA法测定TGF-β1和EPO的含量;造血集落法检测血清对CFU-GM和CFU-E集落形成的影响;结果与结论;发现模拟高原5000m缺氧条件下,骨髓红系和粒系造血均受抑制,但骨髓粒系造血损伤为主。     

Epo多克隆抗体对抗Epo活性的研究

促红细胞生成素(Erythropoieti Epo)是促进骨髓红系祖细胞生长、增殖、分化和成熟的主要刺激因子,在高原红细胞增多症(HAPC)发病机理中起关键性作用。本文采用Epo多克隆抗体作为Epo拮抗剂,观察其抑制红系增殖、分化和成熟的作用,为临床应用Epo抗体治疗高原红细胞增多症提供理论依据。作者随机选取高原红细胞增多症患者8例,对其均进行临床检查及血液化验,于髂骨抽取骨髓,分离单个核细胞,在高原现场(海拔3680m)做以下条件骨髓培养:空白对照培养(既不加Epo,亦不加Epo抗体);加Epo常规培养(加Epo,但不加Epo抗体);加Epo抗体实验培养(既加Ep…     

硫化氢在非酒精性脂肪性肝病大鼠血浆中的浓度变化

目的观察非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠血浆硫化氢（H2s）浓度变化。方法 SPF级雄性sD大鼠按随机数字法分为重度NAFLD模型组（重度组）、轻度NAFLD模型组（轻度组）、空白对照组（对照组）。重度组给予高脂饲料约20g／d;轻度组高脂饲料量为重度组的50％,总重量与重度组相同;对照组给予重度组相同重量的普通饲料。12W后每周处死1只重度组大鼠,观察脂肪肝程度;至16W时,重度组达到重度脂肪肝,终止实验。腹主动脉采集血液,离心取血浆,检测甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、H2S及肝组织匀浆TG浓度。结果 （1）Tc、TG：实验结束时,重度组Tc、TG分别为（8．45±1．19）、（2．43±0．38）mmol／L,轻度组分别为（5．89±1．24）、（1．825±0．41）mmol／L,对照组分别为（1．98±O．14）、（0．84±0．22）mmol／L,3组间均有非常显著差异（P〈0．01）。（2）肝组织TG：重度组（0.82±0．13）mmol／L,轻度组（0．62±0．14）mmol／L,对照组（0．42±O．10）mmol／L,3组间也均有非常显著差异（P〈0．01）。（3）血浆H2S浓度：与对照组比较,重度组和轻度组H2s明显下降（P〈0．01）,重度组比轻度组下降更显著（P〈0．05）。结论NAFLD大鼠血浆H2s浓度下降,与脂肪肝程度相关;H2S下降是由于消耗过多。     

BALB/c小鼠格雷夫斯病模型的构建

目的 通过免疫电穿孔的方法,构建稳定的BALB/c小鼠（简称小鼠）格雷夫斯病（GD）模型.方法 制备重组质粒pcDNA3.1/TSHR268.将50只小鼠按随机数字表法分为实验组（30只）、对照组（10只）和空白组（10只）.分别于实验第1、4、7、10周在实验组小鼠双后肢腓肠肌注射重组质粒,在对照组及空白组小鼠相同位置注射相同体积生理盐水;实验组及对照组小鼠每次注射后在注射区域行电穿孔加强免疫.以放射免疫法检测小鼠血清T4,ELISA法检测小鼠TRAb氨基端（TRAb N）抗体和TRAb羧基端（TRAb C）抗体.对模型小鼠进行甲状腺^99Tc^mO4^-显像及甲状腺形态学、病理学分析.多组间均数比较采用单因素方差分析及最小显著差异t检验.结果 实验组建模成功率为80％（24/30）.24只成功建模的BALB/c小鼠血清T4由第0周的（16.06±5.16） nmol/L升高至第12周的（95.04±68.92） nmol/L（F=18.906,t=-5.598,P＜0.05）,TRAb N抗体由第0周的（0.006±0.002） U/L升高至第12周的（0.251±0.110） U/L（F=47.491,t =-10.869,P＜0.05）,TRAbC抗体由第0周的（11.176±2.635） ×10^3任意单位（AU）/L升高至第12周的（46.395±22.001）×10^3 AU/L（F=14.642,t=-7.787,P＜0.05）.停止免疫后的第18周,小鼠血清T4为（36.64±23.68） nmoL/L、TRAb N抗体为（0.094±0.053） U/L、TRAb C抗体为（24.456±6.725）×10^3 AU/L,均有所下降,但仍明显高于免疫前水平（t=-4.161、-8.085和-9.008,均P＜0.05）.对照组与空白组小鼠T4、TRAb N抗体及TRAb C抗体在免疫前后均未见明显变化.经过4次免疫,实验组小鼠甲状腺对^99Tc^mO4^-的摄取能力较对照组及空白组明显增强.GD模型小鼠甲状腺较正常BALB/c小鼠体积增大,病理学检查可见甲状腺组织淋巴细胞浸润.结论 重组质粒pcDNA3.1/TSHR268＋免疫电穿孔方法可成功构建BALB/c小鼠GD模型.     

心理干预在飞行人员腰椎间盘突出症治疗中的应用

目的：了解腰椎间盘突出症飞行人员的焦虑状态,观察将心理干预应用于临床治疗工作的实用价值。方法将接受冯氏手法复位治疗的60例腰椎间盘突出症飞行人员随机分为干预组和对照组,干预组在手法治疗前给予心理干预,对照组无心理干预。采用焦虑自评量表（self-rating anxiety scale,SAS）对2组飞行人员进行评定。结果2组飞行人员入院后SAS评分、血压和心率等各项指标差异无统计学意义（P＞0.05）。心理干预后的飞行人员SAS评分（27.9±5.3）分和住院天数（17.1±4.1）d均低于对照组飞行人员[（38.0±5.0）分,（23.9±6.2）d]（P＜0.01）;干预组飞行人员收缩压（116.1±5.7）mmHg和心率（82.8±7.6）次/min亦低于对照组飞行人员[（120.6±5.1）mmHg、（98.3±6.7）次/min]（P＜0.01）,2组飞行人员舒张压差异无统计学意义（P＞0.05）。结论心理干预可以改善腰椎间盘突出症飞行人员手法治疗前的焦虑情绪。     

继发性甲状旁腺功能亢进症对肾性贫血的影响

目的观察维持性血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进症（secondary hyperparathyroidism,SHPT）对肾性贫血的影响。方法给予34例维持性血液透析患者活性维生素D3或甲状旁腺切除术纠正SHPT,根据治疗效果分为组1[治疗后全段甲状旁腺激素（immunoreactive parathyroidism hormone,iPTH）≥350 ng/ml]和组2（治疗后iPTH〈350 ng/ml）两组。观察治疗前后血红蛋白（hemoglobin,Hb）、血细胞比容（hematoccrit,Hct）、重组人促红细胞生成素用量/血细胞比容[recombinant human erythropoietin（r-HuEPO）dosage to Hct,EPO/Hct]的变化。结果 34例患者中,25例患者治疗后iPTH降至350 ng/ml以下（组2）,9例患者iPTH仍明显高于350 ng/ml（组1）。组1及组2患者治疗前各参数比较无统计学差异,治疗后各参数比较,组2患者的Hb、Hct、EPO/Hct高于组1患者,差异有统计学意义。组2患者血清iPTH由（739.03±411.77）pg/ml降至（251.91±72.9）pg/ml,Hb由（104.32±9.56）g/L升至（116.44±7.37）g/L,Hct由（32.52±2.8）%升至（36.56±2.08）%,EPO/Hct值由（4.36±1.46）×104U降至（3.47±1.10）×104U,均P〈0.05;组1患者治疗前iPTH（999.67±351.99）pg/ml、Hb（107±11.41）g/L、Hct（33.3±3.5）%、EPO/Hct值（4.36±1.46）×104U,治疗后iPTH（1029.3±281.041）pg/ml、Hb（106±11.12）g/L、Hct（32.8±3.3）%、EPO/Hct值（5.13±1.74）×104U,均P〉0.05。结论 SHPT是引起EPO抵抗的一个重要因素,纠正维持性血液透析患者SHPT有利于肾性贫血的纠正。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注后STATl和STAT3表达的影响

目的探讨促红细胞生成素（EPO）对大鼠局灶性脑缺血再灌注后信号转导与转录激活因子（STAT）1、磷酸化STATl（P．STATl）、STAT3、P—STAT3蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法将雄性sD大鼠80只完全随机分为假手术（A）组、单纯脑缺血再灌注（B）组、脑缺血再灌注＋生理盐水（c）组和脑缺血再灌注＋EPO（D）组,每组20只,采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型。各组大鼠均于缺血2h后再灌注24h时,行MRI检查并计算缺血区异常信号相对面积值,Westernblot检测STATl、P—STATl、STAT3、P—STAT3蛋白表达水平的变化并计算相对灰度（rOD）值,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况并计算细胞凋亡指数。应用单因素方差分析和q检验分析数据。结果MRIT,WI示B、C组在左侧大脑半球皮质及皮质下均可见大片脑缺血异常高信号影,D组仅皮质下脑实质内或仅皮质处可见斑片状脑缺血高信号影;与B、C组比较,D组异常高信号区相对面积明显减小[（28．00±4．60）％、（29．70±4．80）％和（21．10±2．40）％;F=11．285,P〈0．01]。STATl、STAT3蛋白在正常脑组织中表达,缺血再灌注及EPO干预对二者表达水平均无明显影响（F=0．806和1．558,均P〉0．05）。P—STATl在A组表达较低,rOD值为0．75±0．13,缺血再灌注后表达显著增加;与B、C组相比,D组P—STATl表达水平有所减少（B～D：2．08±0．15、2．05±0．16、1．92＋0．05;F=3．274,P〉0．05）。P—STAT3在A组表达也较低,rOD值为1．02±0．09,缺血再灌注后表达显著增加;与B、c组相比,D组P—STAT3表达明显增加（B—D：2．22±0．13、2．04±0．14、4．21±0．21;F=40．719,P〈0．01）。B、C组细胞凋亡指数分别为（42．00±1．30）％和（41．20±2．50）％,高于D组[（20．90±1．46）％;F=378．704,JP〈0．01]。结论EPO可增加脑缺血区域P—STAT3表达水平、降低P—STATl表达水平,从而减少脑细胞凋亡的数目、减小脑梗死面积。     

非酒精性脂肪性肝病兔肝组织硫化氢与一氧化氮的变化

目的观察非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）兔肝组织硫化氢（H2S）、一氧化氮（NO）浓度,探讨H2S、NO在NAFLD发病中的作用。方法 40只日本大耳白兔随机分为重度NAFLD组（重度组）、轻度NAFLD组（轻度组）、空白对照组（对照组）。重度组给予高脂饲料160 g/（兔.d）,轻度组给予高脂饲料80 g/（兔.d）及普通饲料80 g/（兔.d）,对照组给予普通饲料160 g/（兔.d）。均饲养13 w。实验前后采集血浆标本,检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）;肝组织匀浆检测NO、H2S浓度;肝组织HE染色,光镜观察肝脏病理学。结果 （1）饲养后重度组TC、TG分别为（32.12±1.25）、（6.02±2.12）mmol/L,轻度组TC、TG分别为（18.34±2.10）、（4.39±1.93）mmol/L,均高于各组饲养前（P〈0.01或P〈0.05）,饲养后重度组高于轻度组（P〈0.05）。（2）重度组（132.4±20.7）μmol/g蛋白和轻度组（95.4±20.7）μmol/g蛋白肝组织NO浓度显著高于对照组（74.9±34.7）μmol/g蛋白（P〈0.01）,重度组又显著高于轻度组（P〈0.01）。（3）与对照组比较,重度组和轻度组肝组织H2S明显下降（P〈0.01或P〈0.05）,重度组与轻度组比较下降更显著（P〈0.05）。（4）重度组肝脏病理学改变呈重度NAFLD,轻度组呈轻度至中度NAFLD。结论 NO、H2S参与NAFLD的发生、发展,通过干预NO、H2S防治NAFLD可能是未来方向。     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在压疮护理中的应用

目的探讨重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)凝胶在Ⅱ~Ⅲ度压疮创面治疗和护理中的临床应用效果。方法将85例(98处)Ⅱ~Ⅲ度压疮患者分为两组,试验组创面应用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶治疗,对照组创面应用磺胺嘧啶银(SD-Ag)霜治疗,观察、对比两组患者治疗效果、创面细菌培养及PUSH评分结果。结果试验组平均愈合时间为16.75 d±1.22 d,有效率为96.49%,对照组平均愈合时间为21.73 d±4.55 d,有效率为78.05%。换药14 d后,试验组患者创面PUSH评分为5.76±2.59,对照组为8.59±3.23,各项指标对比,差异均具有统计学意义(P0.01)。结论重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶能抑制Ⅱ~Ⅲ度压疮创面细菌繁殖,促进肉芽组织生成,显著缩短创面愈合时间。