芒果叶提取物芒果苷安全性评价Ⅳ:遗传、生殖毒性试验

目的:检测芒果苷是否影响遗传物质,并通过口服灌胃给予妊娠期6~15 d致畸敏感期孕期大鼠芒果苷,考察其对妊娠动物、胚胎及胎仔发育的影响,观察芒果苷是否具有遗传和生殖毒性。方法:采用微生物回复突变试验、啮齿动物骨髓微核试验、哺乳动物培养细胞染色体畸变试验检测芒果苷的遗传毒性。从妊娠第7天开始,连续10 d,口服灌胃受试药品0.6 mg/(kg·bw)、1.2 mg/(kg·bw)、2.4 mg/(kg·bw),观察其对各组孕鼠妊娠期毒性反应及孕鼠胚胎期各胎鼠生长发育指标致畸变的影响。结果:微生物回复突变试验中芒果苷各剂量组回变菌落数均在正常范围内未超过自发回变菌落数的2倍,骨髓微核试验中芒果苷各剂量组多染红细胞和正染红细胞比例未低于溶媒对照组的20%,染色体畸变试验中CHL细胞染色体畸变率均小于5%。芒果苷低、中、高3种不同剂量对各孕鼠及孕鼠胚胎期各胎鼠的窝胎数,胚胎形体外观、全身骨骼、各内脏重要脏器等的生长发育指标致畸变检测项目显示为阴性。结论:芒果苷无致突变性,对孕鼠胚胎期胎鼠生长发育指标未见有生殖毒性反应的致畸变影响。     

生半夏汤与干姜人参半夏汤对小鼠一般毒性和胚胎发育的影响

目的:探讨生半夏汤及张仲景《金匮要略》名方干姜人参半夏汤的一般毒性及胚胎毒性,探讨其作用机制。方法:采用一般急性毒性实验及流式细胞术,比较生半夏汤和干姜人参半夏汤在张仲景用量的4倍剂量下对未孕小鼠体重、脏器及T淋巴细胞亚群的影响;采用致畸敏感期生殖毒性实验比较两者对孕鼠妊娠及胚胎发育的影响。结果:以生半夏汤剂量(2.275 g·kg~(-1))及干姜人参半夏汤剂量(5.688 g·kg~(-1))对未孕小鼠及致畸敏感期孕鼠给药,未孕小鼠给药14 d后,两者在体重及主要脏器病理方面与正常组比较无明显毒性;致畸敏感期孕鼠给药10 d后,两者对母鼠心、肝、肾以及胎仔的各项指标亦无显著影响。但未孕小鼠短期重复灌胃14 d后,干姜人参半夏汤组小鼠较正常组小鼠外周血及脾脏CD4~+T细胞明显降低,CD8~+T细胞明显升高(P0.05)。结论:生半夏汤与干姜人参半夏汤本实验剂量下没有胚胎毒性,但仍可能有一定的免疫抑制作用,其原因与作用机制值得进一步研究。     

铁皮石斛粉对SD大鼠致畸作用研究

目的:研究铁皮石斛粉对SD大鼠的致畸毒性。方法:孕鼠按体质量随机分为铁皮石斛粉低、中、高剂量组(0.63 g/kgBW、1.25 g/kgBW、2.50 g/kgBW,相当于人体推荐摄入量的25倍、50倍、100倍),阳性对照组(250 mg/kgBW阿司匹林)和阴性对照组(等体积蒸馏水)。于孕第6～15天灌胃给予受试物,试验期间称孕鼠体质量,第20天处死,剖腹检查子宫连胎重、着床数、活胎数、死胎数、吸收胎数、胎鼠体重和体长、胎鼠雌雄比例、胎鼠外观、骨骼和内脏发育情况。结果:铁皮石斛粉低、中、高剂量组未见母体毒性、胚胎毒性和致畸毒性。阳性对照组大鼠有明显的胚胎毒性和致畸毒性。结论:在本实验条件下,铁皮石斛粉对SD大鼠无母体毒性、胚胎毒性和致畸毒性。     

柿叶提取物对SD大鼠的致畸作用研究

目的:考察柿叶提取物对SD大鼠致畸作用的影响。方法:SD孕鼠随机分为5组:柿叶提取物三个剂量组(0.6、1.8、3.84g/kg)、阴性对照组和阳性对照组,每组15～20只。各受试组均于受孕第7～16天(胚胎器官形成期)灌胃给予1.0ml/100g的柿叶提取物。受孕的0、7、12、16、20 d称量体重,在妊娠的第20天,颈椎脱臼处死,计数活胎数、死胎数和吸收胎数;观察胎仔外观、称量其体重后,将每窝1/2的活胎鼠乙醇固定、茜素红染色、甘油透明后检查骨骼发育情况。另1/2活胎仔经Bouins液固定后,检查内脏发育情况。结果:在实验剂量范围内,柿叶提取物各剂量组孕鼠体重、活胎数、吸收胎数及死胎数,胎鼠形成和胎鼠外观、骨骼及内脏生长发育与阴性对照组相比差异均无统计学意义。结论:该实验条件下未发现柿叶提取物(0.6～3.84 g/kg)对大鼠有胚胎毒性和致畸毒性。     

云南白药对大鼠的胚胎-胎仔发育毒性的影响

目的:评价口服给予云南白药对妊娠SD大鼠的母体毒性、胚胎-胎仔发育毒性和致畸性。方法:将交配成功后的雌性SD大鼠于孕期第6-15天连续10天经口给予云南白药,剂量为4、1.4和0.5 g/(kg·d),阴性对照组给予超纯水。实验过程中观察大鼠的一般反应、定期记录体质量及摄食量;于妊娠第20天解剖孕鼠,记录黄体数、活胎数、死胎数、吸收胎数、着床数及子宫连胎重、胎盘的质量;观察胎仔的外观形态,记录体质量、身长、尾长,并检查骨骼和内脏。结果:云南白药对孕鼠有一定的母体毒性,主要表现为高剂量组大鼠给药后出现流涎、活动减少,部分打嗝、打喷嚏、挠嘴巴、呼吸音加粗等可逆性的异常反应;各剂量组大鼠体重增长减缓;高、中剂量组摄食量偏少;高、中剂量组胎鼠体质量明显小于阴性对照组,但胚胎形成、胎鼠外观形态、内脏发育和骨骼发育均无明显生物学影响。结论:在本试验条件下,云南白药对SD大鼠有一定的母体毒性但未见其他明显胚胎-胎仔发育毒性,无明显致畸作用。云南白药大鼠的胚胎及胎仔的发育无毒性反应剂量(NOAEL)为0.5 g/kg。     

神昌滴丸对孕鼠致畸性的研究

目的:评价神昌滴丸在妊娠期的毒性。方法:用80只孕鼠,分为3个不同的剂量(0.25、0.5、1.0g/kg)实验组,同时设阴性对照组(采用玉米油作为溶剂),每组19~21只孕鼠。实验组和对照组给药容量为1mL/100g体重,均采用灌胃给药,给药时间为GD6-15。于妊娠第20天处死孕鼠,检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果:神昌滴丸在1.0g/kg剂量出现母鼠增重下降,与对照组比较差异有统计学意义;各剂量组出现活胎率下降和死胎率增加,但与对照组比较有差异有统计学意义,不存在剂量反应关系;各剂量组的每窝平均活胎数和吸收胎率及致畸率与对照组比较差异无统计学意义。受试剂量下各组的平均胎盘重、胎儿体重、身长、尾长与对照组比较无统计学差异。低剂量组胸骨节数、骶椎数,高剂量组掌骨数与对照组相比差异具有统计学意义外(P<0.05),其它骨骼发育与对照组比较差异无统计学意义。各实验组均未观察到母鼠和胎鼠明显的外观、脏器以及骨骼的畸形。结论:神昌滴丸在1.0g/kg剂量时对孕期SD大鼠存在一定的母体毒性,在受试剂量下无明显的胚胎毒性、胎儿毒性和致畸作用。     

葫芦茶的急性毒性与致畸作用研究

目的:探讨中药葫芦茶对小鼠的急性毒性及致畸作用,为临床使用葫芦茶提供参考。方法:急性毒性孕鼠随机分为5组,按3个剂量灌胃给予葫芦茶水煎液,并设阴性及阳性对照组,阳性组给予环磷酰胺0.002 g.g-1。妊娠18 d处死孕鼠,计数胚胎着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数。观察胎仔外观、称量其体重后,将每窝1/2的活胎仔用试剂固定、软化、染色、透明后检查骨骼发育情况,另1/2活胎仔检查内脏发育情况。结果:葫芦茶的最大耐受量>240 g.kg-1,相当于人临床每天口服用量480倍。孕鼠体重与阴性组比较,差异无统计学意义(P>0.05),用药3个剂量组出现吸收胎、死胎数与阳性组比较,差异有统计学意义(P<0.01),用药组的胎鼠均无畸形。结论:葫芦茶毒性极小,对小鼠无胚胎毒性和致畸毒性。     

桉叶油对小鼠胚胎发育影响的研究

目的 探讨桉叶油对小鼠胚胎发育的影响.方法 25只健康性成熟的昆明种小鼠孕鼠,随机分成5组,每组5只,分别在小鼠妊娠第12～16天用100,200,400 mg/kg·d的桉叶油进行灌胃,每天一次,同时设花生油对照和环磷酰胺阳性对照.观察孕鼠的体质量增长情况;于妊娠第16天处死各组孕鼠,检查母体妊娠及胎鼠发育及畸形情况.结果 桉叶油各实验组胚胎植入总数、活胎数、死胎数与溶剂对照组相比均无显著性差异,桉叶油高、中剂量组孕鼠增重与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).桉叶油各剂量组活胎鼠平均体质量、身长、尾长均较溶剂对照组高,但只有中剂量组与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而阳性对照组胎鼠平均体质量、尾长明显低于溶剂组,且有显著性差异(P<0.05).胎鼠骨骼骨化情况、前肢芽软骨发育Neubert评分在3个桉叶油实验组与阴性对照组相比均无显著性差异(P>0.05),与阳性对照组相比有显著性差异(P<0.05).结论 在该实验条件下,桉叶油对小鼠无胚胎毒性和致畸作用,在中剂量下对胎鼠的生长发育似有促进作用.环磷酰胺对小鼠有胚胎毒性.     

苦参凝胶对大鼠胚胎和胎仔的发育毒性研究

目的评价在致畸敏感期(妊娠第6～15天)阴道给予苦参凝胶对SD孕鼠的母体毒性、胚胎-胎仔毒性和致畸性。方法将100只孕鼠随机分为4组分别为苦参凝胶高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组(空白凝胶),每组25只。雌性SD大鼠低、中、高剂量组在妊娠第6～15天内分别阴道给予0.5 mL·kg~(-1)·d~(-1)、1 mL·kg~(-1)·d~(-1)、2 mL·kg~(-1)·d~(-1)苦参凝胶,对照组给予1 mL·kg~(-1)·d~(-1)空白凝胶(基质)。试验期间每天观察动物的一般情况和临床毒性表现;记录孕鼠的体质量、摄食量;在妊娠第20天进行剖腹检查,摘取卵巢和子宫,观察黄体数、着床数、胚胎生存和死亡情况、生存胎仔的外观、体质量、骨骼及脏器发育等指标。结果孕鼠及胚胎、胎仔发育的上述各观察指标未见明显异常,与对照组比较无显著性差异。结论在本试验条件下,苦参凝胶未见明显的母体毒性与胚胎-胎仔发育毒性。     

益脂平胶囊对实验性高脂血症大鼠血液流变学影响及对大鼠毒性研究

目的对实验性高脂血症大鼠血液流变学影响及其对大鼠的胚胎毒性和致畸作用.方法①用高脂饲料喂饲10天以形成实验性高脂血症大鼠模型,同时经口灌胃给予75、150mg·kg-1益脂平胶囊20天,测定血液流变学的各项指标.②根据毒理学检测程序[1],实验组经口灌胃给予250、500、1000mg·kg-1益脂平胶囊,观察其对大鼠的胚胎毒性及致畸作用.结果①益脂平胶囊能显著增加实验性高脂血症模型大鼠的红细胞电泳率、显著降低实验性高脂血症模型大鼠的红细胞沉降率(P＜0.05);能降低实验性高脂血症模型大鼠的全血粘度和血浆粘度(P＜0.05);②与对照组比较,益脂平胶囊实验组孕鼠未见体重增长显著减慢、活产仔数显著减少、死胎率及吸收胎率显著增加以及未见胎仔平均体重、体长、尾长发育指标显著减缓和外观畸形与骨骼畸形明显增加.结论①益脂平胶囊可以改善实验性高脂血症大鼠血液流变学指标;②在本试验剂量与条件下益脂平胶囊无母体毒性、胚胎毒性和致畸作用.     

倒千里光碱对小鼠体外培养胚胎的发育毒性研究

目的 探讨倒千里光碱的胚胎发育毒性.方法 采用小鼠全胚胎培养模型,将8.5d小鼠胚胎在含有倒千里光碱的即刻离心血清中培养48 h(倒千里光碱的终浓度分别为12.5,25,50,100 mg·L-1),观察倒千里光碱对胚胎生长发育(卵黄囊直径、颅臀长、头长、体节数)和组织器官形态分化(卵黄囊循环、尿囊、翻转、心、脑、尾神经管、视听嗅系统、腮弓、颌突、肢芽)的影响.结果 倒千里光碱对胚胎的生长发育和形态分化均具有明显的毒性影响.随倒千里光碱浓度的增加,胚胎的生长发育和组织器官形态分化指标影响越来越严重,其中听嗅系统、腮弓、上下颌突、前后肢芽的影响最为明显.结论 倒千里光碱对体外培养的小鼠胚胎有明显的毒性作用,提示妊娠期暴露于该化合物对胎儿具有潜在的毒性.     

金龙胶囊对荷人肺腺癌 A549裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的：探讨金龙胶囊对肺腺癌A549移植瘤生长的抑制作用。方法建立裸鼠移植瘤模型,随机分成阴性对照组（ A组）、单药金龙胶囊组（B组）、单药顺铂组（C组）和联合用药组（D组）4组,连续用药4周。观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率;免疫组化法检测移植瘤微血管密度（microvessel density,MVD）;RT-PCR分析各组治疗后VEGF及凋亡基因Bcl-2mRNA表达情况。结果与阴性对照组比较,金龙胶囊治疗组（ B、D组）抑瘤率分别为26.94％、51.61％,联合用药组（ D组）效果最佳。治疗组微血管密度分别为18.83＆#177;0.75、14.17＆#177;0.75,联合用药组最为显著,而单药顺铂组与对照组在抑瘤率和微血管密度表达上均无差异（ P＞0.05）。金龙胶囊治疗组（B、D组）Bcl-2mRNA表达较对照组有显著差异（P＜0.001）,但两组之间无差异（P＝0.369）;四组之间在VEGFmRNA表达上无明显差异（ P＞0.05）。结论金龙胶囊对荷A549裸鼠移植瘤有抑制作用,联合顺铂用药有显著协同作用,其作用机制可能与抑制肿瘤微血管形成、诱导细胞凋亡增加有关。     

云南白药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的影响

目的：评价云南白药对大鼠生育力及早期胚胎发育的毒性影响。方法：SD大鼠每天分别灌胃给予云南白药4.0、1.4、0.5g.kg-1剂量和超纯水（以下简称＂阴性对照＂）1.5mL.kg-1。每天1次,连续给药4周和2周后将雄鼠和雌鼠按1∶1合笼,交配14d,记录交配情况。雄鼠给药至交配结束,雌鼠给药至妊娠第6天。在整个试验过程中每天观察大鼠的一般反应,定期称量大鼠体重和摄食量。雌雄大鼠分别于妊娠第15天和交配结束后进行解剖检查,计算孕鼠黄体数、着床数、活胎数、死胎数吸收胎数等检查早期胚胎发育情况,睾丸、附睾、前列腺或卵巢、子宫称重并计算脏器系数。结果：云南白药3个剂量组分别与阴性对照组比较,各剂量组雄鼠体重增长缓慢,有剂量和时间关系,雌鼠体重增长无异常;仅高剂量组大鼠的摄食量略少于阴性对照组;高剂量组给药后出现流涎、活动减少、闭眼等症状,少数大鼠出现打喷嚏、挠嘴等反应;各组大鼠解剖脏器均未发现肉眼可见的异常;各剂量组交配率、妊娠率、合笼天数与阴性对照组均无显著性差异P〉0.05;子宫连胎重、黄体数、着床数、着床前丢失数、活胎数、死胎数、吸收胎数等胚胎形成指标与及阴性对照组比较均无显著性差异;高剂量组睾丸系数、附睾系数、前列腺系数,中、低剂量组附睾系数高于阴性对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：在本试验剂量条件下,SD大鼠从交配前到交配期直至胚胎着床期间灌胃给予云南白药,对雌雄大鼠有一定的亲代毒性作用,但并不影响大鼠的生育力及早期胚胎发育,大鼠的生育力及早期胚胎发育毒性的无毒性反应剂量（NOAEL）为4.0g.kg-1。     

祛瘀解毒颗粒治疗子宫内膜异位症患者卵泡液对小鼠胚胎发育的影响

目的 观察经祛瘀解毒颗粒治疗后子宫内膜异位症（endometriosis,EM）患者卵泡液对小鼠胚胎发育的影响。 方法 在常规培养液中分别加入治疗组EM患者卵泡液（祛瘀解毒颗粒）、对照组EM患者卵泡液及空白组（因输卵管因素行体外受精－胚胎移植）患者卵泡液,20只小鼠超排卵共收集189枚2 细胞鼠胚分别放入各组培养液进行培养,其中治疗组培养液70枚,对照组培养液60枚,空白组培养液59枚,观察和检测2 细胞鼠胚在体外发育至8细胞期、桑葚胚期和囊胚期的比率,及早期鼠胚优质胚胎数目和优质胚胎率。 结果 治疗组培养液有53枚鼠胚（75.71%,53/70）发育到8细胞期,48枚（68.57%,48/70）发育到桑葚胚期,45枚（64.28%,45/70）发育到囊胚期,与对照组培养液(56.67%,34/60、48.33%,29/60、35.00%,21/60)比较差异有统计学意义(P＜0.05)。治疗组有61枚优质胚胎（87.14%）,对照组为44枚（73.33%）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 EM患者卵泡液对早期鼠胚存在毒性作用,经祛瘀解毒颗粒治疗后EM患者卵泡液可提高早期鼠胚培养质量。     

枸杞多糖对新生鼠氯化甲基汞慢暴露染毒致成年期生育能力下降的干预作用

目的：探讨早期低剂量接触氯化甲基汞（Methyl Mercury Chloride,MMC）对大鼠生殖功能和生长发育的影响以及枸杞多糖（Lycium Barbarum Polysaccharides,LBP）的早期干预。方法：将60只健康7日龄大鼠随机分为对照组（CON）、MMC组、MMC＋LBP组、LBP组,MMC组和MMC＋LBP组均颈部皮下注射MMC,CON组颈部注射相同剂量的生理盐水,MMC＋LBP组同时喂养LBP,雌雄合笼,自然观察各组体重发育以及生殖繁育能力以及子代仔鼠早期生长发育和存活状况。再将已孕母鼠哺乳期仔鼠染毒,观察母鼠产仔情况。结果：1）MMC组毛色萎缩,精神状态倦怠、动作不活泼、食欲不振。2）MMC组生长较缓慢且随染毒时间的延长而明显。3）MMC组染毒大鼠未产仔,MMC＋LBP组有产仔,但产死率高、出生后存活率低于CON;LBP组产死率较CON低。4）MMC＋LBP组有畸胎,且仔鼠出生体重与正常CON和LBP组仔鼠出生体重有统计学意义（P〈0.01）。5）染毒仔鼠影响其已孕母鼠再次生育。结论：MMC对大鼠有生殖发育毒性,LBP可抑制MMC引起的生殖毒性。     

应用全胚胎培养方法研究野百合碱对 小鼠胚胎发育的影响

目的:探讨野百合碱的胚胎发育毒性.方法:采用小鼠全胚胎培养模型,将8.5 d小鼠胚胎在含有野百合碱的即刻离心血清中培养48 h(野百合碱的终浓度分别为100,50,25,12.5 mg·L-1),观察野百合碱对胚胎生长发育(卵黄囊直径、颅臀长、头长、体节数)和组织器官形态分化(卵黄囊循环、尿囊、翻转、心、脑、尾神经管、视听嗅系统、腮弓、颌突、肢芽)的影响.结果:随野百合碱浓度的增加,胚胎的生长发育和组织器官形态分化受到的影响越来越严重,其中以视听系统、颌突、肢芽等项的影响最为明显.结论:野百合碱对体外培养的小鼠胚胎有明显的毒性作用,提示妊娠期暴露于该化合物对胎儿具有潜在的毒性.     

瑞康益肝胶囊长期毒性实验研究

目的观察瑞康益肝胶囊对大鼠长时间给药可能产生的毒性反应,为临床应用提供毒理学依据。方法分别以相当于人日用量的150,50,25倍,经180 d大鼠灌胃给药,观察给药中、末期及停药恢复期动物的一般状况、主要血液学指标、生化学指标和脏器病理组织变化。结果各实验期动物一般状况良好,体重、脏器系数值、主要血液学指标、生化学指标与空白对照组基本一致;给药末期和恢复期高剂量动物尿液分析指标和空白对照无统计学差别;解剖主要脏器未见明显肉眼可见的病理性改变,组织学检查未发现明显病理改变。结论该品长期服用无明显毒性,停药后未见药物延迟性毒性反应。     

接骨丹胶囊急性毒性与长期毒性实验研究

目的：对接骨丹胶囊的急性和长期毒性进行研究,观察接骨丹胶囊的毒副作用。方法以健康昆明种小鼠和SD大鼠为对象,急性毒性实验将20只小鼠给接骨丹胶囊5.0g·kg^-1,一次灌胃,连续给药1周。长期毒性实验将80只大鼠随机分为4组,分大、中、小给药剂量组（分别给接骨丹胶囊内容物3g、1g、0.5g·kg^-1）和对照组（给生理盐水1mL.100g^-1）。接骨丹胶囊内容物制成混悬溶液,均为灌胃给药。结果：小鼠1天内灌胃给接骨丹胶囊最大耐受量≥5.0g/kg,给药组与对照组检查指标,结果统计分析均无明显差异（P〉0.05）。结论：灌胃给接骨丹胶囊对小鼠,大鼠均无明显的毒性反应。