Toll样受体4信号传导通路在急性肺损伤发病机制中的作用

炎症反应失控是急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征重要的发病机制之一。Toll样受体4介导生成的炎症介质是急性肺损伤炎症反应中重要的分子生物学基础之一。作者就Toll样受体4的炎症信号传导通路在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的作用机制进行综述。     

Toll样受体5在鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤中的表达研究

目的检测鞭毛蛋白诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织中Toll样受体5（TLR5）mRNA的表达变化,初步探讨TLR5在鞭毛蛋白致大鼠Au中的作用。方法从大肠杆菌ATCC25922中分离纯化鞭毛蛋白并鉴定。108只SD大鼠随机分为正常对照组（n=36）、致伤1组（n=36）和致伤2组（n=36）。经尾静脉注射鞭毛蛋白以建立大鼠ALI模型。每组分别在6个时相点用原位杂交法检测大鼠肺组织中TLR5 mRNA的表达,并观察动脉血气分析和肺病理改变。结果从大肠杆菌ATCC25922中成功分离纯化出鞭毛蛋白,其分子量约65kD。静脉注射鞭毛蛋白成功建立了大鼠急性肺损伤模型。从致伤后1h开始,鞭毛蛋白致肺损伤大鼠肺组织中TLR5 mRNA表达增加,并随时间推移和鞭毛蛋白剂量增加而表达增多。各致伤组大鼠动脉血氧分压降低,肺组织出现肺间质、肺泡水肿和炎性细胞浸润等病理改变。结论静脉注射鞭毛蛋白可导致大鼠ALI;TLR5作为细胞膜上鞭毛蛋白的受体参与了鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤的作用过程。     

脂多糖结合蛋白对内毒素急性肺损伤大鼠肺巨噬细胞TLR4信号通路的影响

为研究脂多糖结合蛋白（LBP）对内毒素（LPS）急性肺损伤大鼠TLR4肺巨噬细胞信号通路的影响，探讨LBP对LPS炎症反应增敏作用的部分机制，运用RT-PCR和ELISA方法分别检测LBP对LPS刺激后大鼠肺巨噬细胞IL-1β、IL-18mRNA表达与TNF-α分泌量的作用，同时用RT-PCR与Western blot检测其TLR4mRNA与蛋白的表达水平。结果显示，LBP显著增加LPS刺激后大鼠肺巨噬细胞TNF-α的分泌和IL-1β、IL-18mRNA的表达，同时也增加TLR4的mRNA与蛋白表达水平，而LBP多抗能阻断上述作用。说明LBP可增强由TLR4介导的LPS信号跨膜转导功能，这可能是LBP对LPS起增敏作用的重要分子机制之一。     

Toll样受体4与糖尿病肾病

我国已是世界第一糖尿病大国,也是糖尿病肾病大国.目前临床上对糖尿病肾病的治疗只能延缓肾功能损害的进程.因此,糖尿病肾病导致肾功能衰竭需行肾脏替代治疗的患者日益增多.糖尿病肾病的发病机制复杂,目前尚不明确.Toll样受体4是Toll样受体大家族中的一员.Toll样受体4通过触发一系列的蛋白质级联反应参与糖尿病肾病的发生发展已经得到越来越多的研究者的证实.本文就Toll样受体4与糖尿病肾病的关系予以简述.     

颅脑创伤后神经炎症反应中的Toll样受体

颅脑创伤后产生的非感染性的神经炎症反应是一个重要的继发性病理生理反应。Toll样受体（TLRs）不仅可以介导感染性的炎症反应,还可以识别内源性配体介导非感染性的炎症反应。而TLRs在颅脑创伤后神经炎症反应中作用的研究目前还不多见,本文就颅脑创伤后神经炎症以及TLRs的表达分布、作用效应、信号通路等方面进行简要综述。     

脂多糖致大鼠急性肺损伤肺组织中糖皮质激素受体的表达及活性变化

目的探讨脂多糖致大鼠急性肺损伤24h内肺组织糖皮质激素受体(GR)表达及活性变化的特点。方法将70只Wistar大鼠随机分为脂多糖致伤组和地塞米松治疗组,采用RT-PCR和Western blot在mRNA水平和蛋白质水平测定致伤组肺组织GR,EMSA法测定肺组织GR活性。结果大鼠肺组织GR mRNA在致伤后表达下调,24h恢复至正常水平;肺组织GR蛋白质表达降低,伤后8h降至最低;肺组织GR活性在伤后1h降到最低,24h仍未恢复至正常水平。地塞米松治疗组在治疗后期不能有效维持GR活性。结论大鼠急性肺损伤肺组织GR蛋白表达降低,可能与mRNA表达降低及蛋白降解加速有关;GR活性被显著抑制,出现糖皮质激素抵抗。     

Toll样受体4对肿瘤细胞放射敏感性的影响

目的 观察Toll样受体4(TLR4)对肿瘤细胞放射敏感性的影响.方法 将体外培养的RAW264.7、Lewis、MFC、Hepal-6、B16和NIH3T3细胞各分为假照组和5 Gy照射组,采用流式细胞术检测照射24 h后TLR4表达变化,从中筛选出照射后高表达和低表达TLR4的细胞,将其各自分为TAK242阻滞组、LPS刺激组和空白对照组,采用CCK-8试剂盒检测其增殖活性,用克隆形成实验计算其细胞存活分数,用Annexin V凋亡试剂盒检测其凋亡率,用流式细胞术观察细胞周期进程的变化.结果 5 Gy照射24 h后Lewis细胞TLR4表达水平明显高于照射前(t=-8.68,P＜0.01),MFC细胞则相反,照射后TLR4表达水平明显低于照射前(t=25.80,P＜0.01),而RAW264.7、Hepa1-6、B16细胞的TLR4表达水平比照射前有升高趋势,但无明显差异.5 Gy照射后Lewis和MFC细胞的增殖活性均明显降低(t=57.62、-6.23,P＜0.01),而用TAK242阻滞TLR4后Leiws细胞增殖活性更加降低(t=5.96,P＜0.01),但MFC细胞增殖活性反而明显升高(t=4.16,P＜0.01).5 Gy照射后Lewis和MFC细胞的存活分数均明显降低(t=13.37、19.24,P＜0.01),用TAK242阻滞TLR4后Leiws和MFC细胞存活分数更加降低(t=4.90、4.42,P＜0.05).5 Gy照射后Lewis细胞的凋亡率明显高于假照组(t=-167.85,P＜0.01),阻断TLR4后明显高于单纯照射组(t=-4.73,P＜0.01).照射后MFC细胞的凋亡率升高(t=-26.45,P＜0.01),阻断和激动TLR4其凋亡率均显著低于单纯照射组(t=8.87、-3.05,P＜0.05).Lewis和MFC细胞受照后G0/G1期、S期细胞明显降低(t=8.68、14.80、20.31、4.48,P＜0.01),G2/M期细胞上升(t=-37.48、-13.06,P＜0.01).两种细胞的TAK242阻断组和LPS刺激组各周期进程均无明显变化.结论 Lewis细胞的TLR4高表达与其受照后的增殖活性和凋亡率变化有关,而与其周期进程无关,TLR4影响肿瘤细胞的放射敏感性.     

脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的变化规律

目的探讨脓毒疗人鼠肝脏组织内毒素复合受体—Toll样受体4（TLR4）／髓样分化蛋白-2（MD-2）mRNA的表达变化，研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）mRNA表达的父系。方法腹腔注射内毒素（LPS）5mg／kg制作大鼠脓毒症模型。动物分为正常对照组（20只）及内毒素注射后1h、2h、6h组（各20只）．检测肝脏组织TLR4／MD-2以及TNF-α mRNA的表达。结果LPS注射后1h，TLR4／MD-2及TNF-α mRNA表达开始升高并达高峰．伤后2～6h逐渐下降，各时间点的表达量均显著高于对照组（P〈0．01）．TLR4与MD-2 mRNA的表达呈明显正相关（P〈0．05）．且分别与TNF—α mRNA的表达呈显著正相关（P〈0．05）。结论LPS可迅速上调肝脏组织TLR4／MD-2的基闪表达并诱导早期炎症细胞因子TNF-α的基因表达。脓毒症时TLR4识别LPS是可能以TLR4／MD-2复合体的形式完成的．且在识别过程中MD-2是TLR4必需的作用分子。     

急性胰腺炎Toll样受体4 mRNA表达与腹腔细菌感染机制的研究

急性胰腺炎（Acute pancreatisis,AP）是21世纪胰腺外科面临的一大难题,重型急性胰腺炎（Sever acute pancreatisis,SAP）合并感染者的病死率可高达25％。最近的研究表明：胰腺坏死组织的细菌感染是SAP死亡的主要原因。     

Toll样受体4(896A/G)单核苷酸多态性与急性胰腺炎相关性的研究

 目的 研究Toll样受体(TLR)4(896A＞G)在急性胰腺炎(AP)患者和正常人群中的分布及其与AP的相关性.方法 采用错配PCR-RFLP分析方法检测AP患者和健康自愿者人群TLR4(896A＞G)等位基因频率.结果 (1)所有TLR4(896A＞G)的基因突变均为杂合子;(2)与健康志愿者组(5.6%)相比,轻型急性胰腺炎(MAP)组TLR4 G等位基因频率(9.8%)呈轻度升高(差异无显著性,P=0.182);(3)与健康志愿者组(5.6%)相比,胰腺组织坏死+感染的重型急性胰腺炎(SAP)组TLR4 G等位基因频率(20%)明显升高(差异有显著性,P=0.019).结论 TLR4错义突变(896A＞G)在AP的发生发展过程中具有双刃性作用:(1)AP早期为一种保护因素;(2)AP后期表现为一种危险因素,TLR4(896A＞G)的单核苷酸多态性可能与SAP存在相关性.     

外源性雌激素在脂多糖诱导大鼠急性肺损伤中的作用

目的 :探讨外源性雌激素在脂多糖 (LPS)诱导大鼠急性肺损伤 (ALI)中对肺脏病理改变及作用机理。方法 :选用Wistar大鼠 60只 ,随机分成 3组 :正常对照组 (静注生理盐水 )、LPS组 (尾静脉注射LPS 5mg/kg)和LPS 雌二醇组 (注射LPS 5mg/kg 雌二醇 1mg/kg) ,2 4h后观察大鼠肺脏病理变化 ,支气管肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量 ,肺通透指数 ,外周血中雌二醇和催乳素浓度 ,肺组织中雌激素受体、孕激素受体表达。结果 :注射LPS后肺泡灌洗液中蛋白含量及肺通透指数均升高 (p <0 0 5 ) ,给予外源性雌激素可显著减轻上述变化 (p <0 0 5 )。LPS 雌二醇组外周血中雌二醇和催乳素浓度 ,肺组织中雌激素受体、孕激素受体含量较LPS组有显著性差异 ,肺组织损伤较轻。结论 :外源性雌激素对脂多糖诱导的急性肺损伤有保护作用。     

乙酰半胱氨酸溶液对急性肺损伤肺泡灌洗液中炎性因子及肺表面活性蛋白的影响

目的 探讨乙酰半胱氨酸溶液对急性肺损伤肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)炎性因子及肺表面活性蛋白的影响.方法 选取2017-02至2020-01医院收治的急性肺损伤患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例,两组入院后均行支气管肺泡灌洗,并均给予机械通气,对照组给予常...     

磷脂酰肌醇3-激酶在油酸型急性肺损伤大鼠肺内的表达及其意义

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-K）在油酸型急性肺损伤大鼠肺内的表达情况及其与肺组织细胞凋亡的关系。方法健康雄性SD大鼠60只,随机分为5组,每组12只：油酸组共4组,分别在尾静脉注入油酸0．25mi／kg后1h,2h,4h,24h颈总动脉放血处死,对照组：尾静脉注入生理盐水0．25ml／kg,2h颈总动脉放血处死。观察各组动脉血气、左肺湿／干比、肺系数、BALF中蛋白含量、肺通透指数,免疫组化法测定肺内Fas-L表达,免疫组化法和免疫印迹法测定肺内PI3-K蛋白表达。结果油酸组大鼠PaO2明显降低,左肺湿／干比、肺系数、BALF中蛋白含量及肺血管通透性明显增高（P〈0．01）,支气管、肺泡上皮细胞,肺血管内皮细胞,肺泡巨噬细胞上表达PI3-K和Fas-L明显增多（P〈0．01）,且PI3-K表达峰值时间早于Fas-L。结论Fas-L依赖的肺泡上皮细胞、肺血管内皮细胞和巨噬细胞凋亡参与早期ALI发病机制,此过程可能通过PI3-K信号转导通路予以实现。     

吸入内皮素A受体阻滞剂对实验性急性肺损伤的影响

目的观察吸入内皮素A(ETA)受体阻滞剂对急性肺损伤(ALI)动物模型肺氧合功能及肺炎性变化的影响。方法选择16只ALI模型犬,随机分为实验组(L组)和对照组(C组),每组8只。分别于肺灌洗前(T0)、灌洗后即刻(T1)、灌洗后1h合并雾化治疗30min(T2)、灌洗后2h(T3)、灌洗后3h(T4)、灌洗后4h(T5)监测两组血流动力学指标、血气和血浆内皮素-1(ET-1)水平。取肺组织观察肺炎性变化。结果两组心率(HR)、平均动脉压(MAP)和心输出量(CO)在各时点均无显著性差异(P>0.05);两组CO均于T2、T3、T4和T5时降低(P<0.05);L组T3、T4、T5时段平均肺动脉压(MPAP)明显低于C组(P<0.01);与C组比较,L组动脉氧分压(PaO2)、动脉氧饱和度(SaO2)、混合静脉血氧饱和度(SvO2)于T2、T3、T4、T5时点显著升高(P<0.01);动脉二氧化碳分压(PaCO2)和肺分流值(Qs/Qt)于T4、T5时点明显降低(P<0.01)。与T0比较,两组ET-1水平在ALI后均升高,L组ET-1水平在T2、T3、T4、T5时段低于C组(P<0.05)。两组均有肺损伤改变,L组肺间质炎和肺间质出血度低于C组(P<0.05)。结论吸入低剂量ETA受体阻滞剂能改善ALI的氧合和换气功能,减轻炎性改变。     

血管内皮细胞分泌的炎性递质在急性肺损伤发病机制中的作用

肺血管内皮细胞损伤在急性肺损伤（ALI）／急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的病理过程中起重要作用,各种血管源性炎症递质可导致血管内皮细胞损伤,提高肺泡-毛细血管通透性,肺血管间质和肺泡腔水肿,发生顽固性低氧血症、呼吸窘迫等临床表现。本文探讨了ALI时各种炎症递质的表达、对肺血管内皮的作用机制及对ALI的病理生理影响。这些可能成为ALI／ARDS新的治疗靶点和研究的方向。     

内毒素诱导急性肺损伤小鼠基因表达的综合分析

目的利用改良的基因表达综合分析(SAGE)技术监测内毒素诱发小鼠急性肺损伤的基因表达状况，探讨急性肺损伤的分子机制。方法气管内注射内毒素(25mg／kg)复制急性肺损伤模型。正常对照小鼠气管内注射等体积等渗盐水。内毒素注射24h后以氯胺酮深度麻醉后处死小鼠，整块取出肺脏用于SAGE研究。建立正常和急性肺损伤两个SAGE标记物文库。结果正常文库包括24670个SAGE标记物，代表12168个基因。急性肺损伤文库包括26378个SAGE标记物，代表13：397个基因。急性肺损伤组有11种基因升高10倍以上，107种基因升高5～10倍，2121种基因升高2—5倍。7种基因表达降低大于10倍，87种基因降低5～10倍，1571种基因降低2～5倍。结论证实了内毒素诱导的急性肺损伤发生机制中各种基因表达的变化，并发现了以往没有报道的基因。对这些基因功能的进一步研究有助于阐明急性肺损伤的发生机制，并为临床诊断提供有参考价值的血清标记物。     

双侧迷走神经切除对大鼠肺缺血再灌注损伤炎症反应的影响

目的 观察双侧迷走神经切除对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)导致的炎症反应的影响.方法 SD大鼠24只,随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和双侧迷走神经切断合并缺血再灌注组(NIR组),每组8只.于缺血前、再灌注0.5h及再灌注4h抽取动脉血进行血气分析,观察动脉血氧分压(PaO2)及肺泡动脉氧分压差(A-aDO2)的变化.实验结束时取左肺测量肺组织的湿/干重比(W/D),于光学显微镜下观察缺血再灌注后肺的病理学改变,采用ELISA检测肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量及髓过氧化物酶(MPO)活性等炎性指标的水平.结果 与S组比较,IR组PaO2明显降低,A-aDO2明显升高,W/D及肺组织匀浆中TNF-α、IL-10含量和MPO活性明显增加,肺组织炎性细胞浸润、肺泡腔红细胞增多、肺泡破坏及组织水肿明显(P<0.05).与IR组相比,NIR组PaO2进一步降低,肺组织炎性反应及病理学损伤更加严重(P<0.05),但A-aDO2无明显变化.结论 切断双侧迷走神经可加重大鼠肺缺血再灌注损伤,提示迷走神经完整性在LIRI的炎性反应调节中具有重要作用.     

急性肺损伤研究进展

急性肺损伤是由一系列局部或全身因素造成的肺实质弥漫性损伤,临床特征为非心源性肺水肿、严重低氧血症和肺顺应性下降。尽管目前已经积累了大量的员伤生理和细胞方面的资料。但其发病机理依然不清。本文总结了近期肺损伤机理方面的研究进展,重点阐述了ＡＬＩ的病理生理、肺细胞的损伤机理和损伤后的防御及修复,为ＡＬＩ的临床预防和治疗提供依据。