阿霉素细胞水平药物动力学在维拉帕米对Swis－3T3细胞的化学增敏效应中不起作用

阿霉素细胞水平药物动力学在维拉帕米对Ｓｗｉｓ３Ｔ３细胞的化学增敏效应中不起作用王楠，汤仲明，章扬培，丁清明（北京放射医学研究所，北京１００８５０，中国）关键词阿霉素；维拉帕米；抗药性；药物动力学；成纤维细胞；培养的肿瘤细胞目的：确定维拉帕米（Ｖｅｒ...     

人肝微粒-小鼠3T3细胞联合模型评价氟咯草酮代谢后的体外细胞毒性

目的建立人肝微粒-小鼠3T3细胞联合模型,并应用该模型评价氟咯草酮代谢后的体外细胞毒性。方法以环磷酰胺和他莫西芬分别作为代谢增毒和代谢减毒的模型药物,建立人肝微粒体-小鼠3T3细胞联合模型。首先将环磷酰胺和他莫西芬分别配制成一系列浓度的工作溶液,加入人肝微粒体系孵育180 min后离心,将上清液与培养基1∶1混合获得孵育液。将孵育液与未经代谢的细胞供试液同时给予小鼠3T3细胞,给药48 h后,开展CCK-8试验,利用测得的吸光度(A)值,计算细胞供试液及孵育液的半数抑制浓度IC50以及IC50比值,并以IC50比值为指标评价模型药物的代谢毒性。待测化合物氟咯草酮采用与模型药物相同的方法。结果环磷酰胺IC50比值大于535.31%,经人肝微粒体代谢后对3T3细胞毒性显著增加。他莫西芬IC50比值小于5.58%,经代谢后对3T3细胞毒性显著降低。符合二者作为代谢增毒和代谢减毒代表性药物的特征。氟咯草酮IC50比值大于391.38%,表明经代谢后对3T3细胞毒性增加。结论成功建立人肝微粒-小鼠3T3细胞联合模型。待测化合物氟咯草酮经代谢后毒性增加,为进一步的毒理学研究提供参考依据。     

人体内细胞色素P450 3A探针的研究进展

人体内细胞色素P450 3A(CYP3A)是细胞色素P450酶系中最主要的一类.评价CYP3A的活性可用于研究药动学、药物或毒物的代谢、药物相互作用、药物代谢酶的遗传多态性及疾病与代谢酶的相互影响,从而预测最佳给药剂量,达到提高药物治疗效果和减少不良反应的目的.评价CYP3A的活性一般采用探针法,其评价结果的优劣取决于探针的特异性,安全性和方法的科学性.本文就目前被广泛应用的几种CYP3A探针的研究进展作一综述和评价.     

槲皮素联合喜树碱促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡

目的考察槲皮素联用喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养PC-3细胞,用CCK-8实验、细胞周期检测实验和Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测实验,考察槲皮素联用喜树碱对PC-3细胞增殖凋亡的影响;用Western-Blot实验检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、PARP1和Caspase-3)的表达。结果 CCK-8实验结果显示槲皮素和喜树碱都可以一定程度地抑制PC-3细胞增殖,诱导凋亡作用,其中槲皮素和喜树碱联用效果更优。药物作用48 h后其半数抑制浓度(IC₅₀)分别为38.76、2.25、1.88μmol·L^-1。细胞周期实验显示,药物联用组细胞周期处于S期的细胞比例明显高于单用组(P<0.05);细胞凋亡实验显示,药物联用组的细胞凋亡率显著高于单用组(P<0.05);Western-Blot结果显示,药物联用组对凋亡相关蛋白的影响更为明显,使Bcl-2蛋白表达下降为47%,分别使Bax、PARP1和Caspase-3依次增加1.17、0.77和0.69倍(P<0.05)。结论槲皮素联合喜树碱能够显著促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡。     

细胞色素P450 3A研究进展

P4503A是细胞色素P450中含量最多的同工酶,临床中有60％以上的药物由其代谢。总结了CYP3A的分布、含量、亚型、表达与调控、与疾病的关系以及活性研究方法等研究进展。     

3-溴丙酮酸-胆固醇酯增强乳腺癌细胞对他莫昔芬敏感性研究

目的：探讨3-溴丙酮酸-胆固醇酯（3-bromopyruvate cholesterol ester,3-BP-Cl）增强乳腺癌对他莫昔芬（tamoxifen,TAM）敏感性作用及机制。方法：MTT法检测药物对乳腺癌细胞活力的影响，并使用金氏公式检验3-溴丙酮酸-胆固醇酯与他莫昔芬是否具有协同抗乳腺癌作用。Calcein AM/PI染色法检测药物对细胞的毒性作用，集落克隆形成法检测药物对乳腺癌细胞的增殖抑制作用。流式细胞术检测药物诱导乳腺癌细胞的凋亡作用。Western blot检测药物对细胞己糖激酶2、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果：MTT结果显示3-溴丙酮酸-胆固醇酯具有抑制乳腺癌作用，与他莫昔芬联用能显著抑制MCF-7细胞生长活性（P<0.05）。金氏公式测算结果显示3-溴丙酮酸-胆固醇酯与他莫昔芬具有协同抑制乳腺癌细胞增殖作用（q>1.15）。Calcein AM/PI染色结果显示两药联用组细胞死亡数量最多。集落克隆形成实验结果显示两药联用组MCF-7细胞的集落数量最少。Annexin V凋亡结果显示与单药组相比，联用组细胞凋亡数量显著升高（P<0.0...     

维拉帕米对MDR1基因转染的Swiss-3T3细胞的化疗增敏作用

为进一步了解维拉帕米对抗药性逆转作用的特征,在人MDR1基因转染的Swiss-3T3多药抗药性细胞,观察了维拉帕米逆转幅度与阿霉素抗性水平的关系。各个转染细胞与母细胞相比,阿霉素毒性明显降低。非毒性浓度(3μmol·L^-1)的维拉帕米对阿霉素毒性的增强作用,在转染细胞均高于母细胞,但逆转幅度与抗性水平成反比。Southern杂交显示,转染细胞基因组中有MDR1 cDNA整合。转染细胞的阿霉素蓄积障碍可被维拉帕米纠正。讨论了药物主动转运的饱和现象在维拉帕米增强效应中的作用,以及P-糖蛋白与药物相互作用的方式。     

CYP3A4高表达细胞模型及其应用于药物代谢研究进展

细胞色素P450酶3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)属于细胞色素P450酶家族,参与多种化合物代谢及相互作用,是药物(尤其是口服药物)筛选和代谢研究的重要对象。该文按年代顺序对国外文献中CYP3A4高表达细胞模型的建立及在药物代谢中的应用进行综述,旨在将这一有价值的模型引入到新药研究中。     

小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2细胞Caspase-3和NF-κB蛋白表达的影响

目的:研究小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2增殖抑制和诱导凋亡作用的机制.为小白菊内酯在临床上早日应用于肝癌患者提供理论及实验依据.方法:用体外培养的方法培养人肝癌HepG-2细胞;用四唑盐(M TT)比色法检测小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞的抗增殖及细胞毒作用;用倒置显微镜、HE染色光学显微镜;用免疫组织化学染色法检测小白菊内酯作用人肝癌HepG-2前后Caspase-3、NF-κB蛋白阳性表达变化的情况.通过以上实验研究小白菊内酯在体外对人肝癌HepG-2在细胞增殖、细胞凋亡等方面的影响及其作用机制.结果:(1)MTT法结果显示:小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞的作用影响具有浓度和时间依赖性;(2)细胞形态学观察:倒置显微镜观察到对照组细胞贴壁生长,伸展性良好,细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密.小白菊内酯作用人肝癌HepG-2 24h以后,增殖速度减慢,细胞贴壁能力下降,细胞之间连接疏松.药物作用48h以后,增殖速度大大减慢,大部分细胞变圆漂浮在培养瓶中.药物作用72h以后,几乎无活细胞,并且可见死细胞碎片;HE染色光学显微镜下观察:对照组细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密,细胞胞浆丰富,细胞核完整;药物作用24h以后,细胞伸展减弱,有一部分细胞呈现圆形,细胞之间连接疏松,核浓缩,染色质出现边聚;药物作用48h后视野中可见凋亡细胞和死亡细胞,细胞浆浓缩、染色质浓缩成新月形和“出泡”现象的变化;(3)免疫组化结果显示:实验组Caspase-3表达增加,NF-κB表达降低,与对照组相比具有显著性差异(P＜0.05).结论:小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞有明显的抑制增殖作用,呈现出浓度和时间的依赖性;小白菊内酯对人肝癌HepG-2细胞株有诱导凋亡作用,其诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制可能与NF-kB、Caspase-3等信号转导有关.     

3种药物诱导兔血管平滑肌细胞凋亡实验研究

目的 研究阿克拉霉素(ACR)、雷公藤甲素(TP)、羟基喜树碱(HCPT)是否具有抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖并诱导其发生凋亡的作用，为临床开发新型药物涂层支架提供实验依据。方法 体外主动脉SMCs培养和流式细胞仪检测，DNA凝胶电泳。结果TP组与阳性对照地塞米松组相比．凋亡率有显著增高，ACR组凋亡率与正常细胞组相比基本无变化；HCPT组细胞凋亡率高于正常细胞组，但相比阳性对照地塞米松组无显著性差异。3种药物干预组凝胶电泳谱型呈凋亡特征性梯状条带。结论 ACR、TP、HCPT可抑制指数生长期SMCs增殖并诱导其凋亡。     

血管内皮生长因子反义核酸提高前列腺癌PC3细胞对化疗药物敏感性的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义核酸对前列腺癌细胞PC3对常用化疗药物作用的影响,联合反义核酸和紫杉醇治疗裸鼠移植肿瘤。方法采用新型脂质体Oligofectamine携带VEGF反义核酸转染前列腺癌细胞PC3。定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western杂交的方法检测细胞VEGFmRNA和蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测转染反义核酸的细胞对化疗药物的敏感性,联合反义核酸和紫杉醇对裸鼠移植肿瘤进行治疗,观察肿瘤抑制率,计算药物相互作用指数(CDI)。结果新型脂质体携带VEGF反义核酸转染前列腺癌细胞PC3,与对照组和正义组比较,反义组细胞VEGFmRNA和蛋白的表达明显下降,对2种前列腺癌常用化疗药物紫杉醇和米托蒽醌的敏感性明显增强(P<0.05)。治疗裸鼠移植肿瘤28d后肿瘤生长抑制率分别为反义组58.5%,紫杉醇组60.2%,联合组84.1%,CDI=0.97。结论 VEGF反义寡核苷酸抑制VEGF的表达,提高细胞对化疗药物的敏感性,联合反义核酸和紫杉醇可以更有效地抑制肿瘤生长,并且2种药物具有协同作用。     

细胞色素P450 3A 选择性探针药物的评价

理想的细胞色素P4 5 0 3A(CYP3A)探针药物有助于检测CYP3A活性 ,辅助临床合理用药。本文对CYP3A选择性探针药物进行比较和综合分析 ,评价各种CYP3A选择性探针药物的特点 ,阐明对临床合理用药的指导意义。在已筛选的CYP3A选择性探针药物中 ,咪哒唑仑是一较理想的探药。     

维拉帕米对MDR1基因转染的Swiss－3T3细胞的化疗增敏作用

为进一步了解维拉帕米对抗药性逆转作用的待征，在人ＭＤＲ１基因转染的Ｓｗｉｓｓ－３Ｔ３多药抗药性细胞，观察了维拉帕米逆转幅度与阿霉素抗性水平的关系。各个转染细胞与母细胞相比，阿霉素毒性明显降低。非毒性浓度（３Ｕｍｏｌ·Ｌ－１）的维拉帕米对阿霉素毒性的增强作用，在转染细胞均高于母细胞，但逆转幅度与抗性水平成反比。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示，转染细胞基因组中有ＭＤＲ１ｃＤＮＡ整合。转染细胞的阿霉素蓄积障碍可被维拉帕米纠正。讨论了药物主动转运的饱和现象在维拉帕米增强效应中的作用，以及Ｐ－糖蛋白与药物相互作用的方式。     

细胞色素P450—3A4相关的药物相互作用

目的：综述与细胞色素P4503A4相关的药物相互作用。方法：检索Medline和中国药学文摘。结果：发现多种由CYP3A4催化代谢的药物之间可以竞争药物代谢酶,引起药物相互作用,CYP3A4的抑制剂和诱导剂均可以抑制或诱导CYP3A4催化代谢的药物代谢。导致有益或不良的药物相互作用。结论：CYP3A4催化代谢的药物联合使用,特别是CYP3A4抑制剂与底物联合使用时,可能因为抑制了药物的代谢而导致严重的药物不良反应。     

穿琥宁抑制H3N2病毒诱导细胞凋亡的研究

目的 探讨穿琥宁抑制甲3型（H3N2）流感病毒诱导细胞凋亡的研究。方法 采用细胞形态学变化、计算凋亡细胞的百分率和流式细胞仪测定等方法。结果 （1）在光镜下观察了流感病毒感染的狗肾传代细胞（MDCK），感染的MDCK细胞可见细胞凋亡特有的形态学变化。如：可见广泛的染色质凝集成数个紧密的块状、胞浆浓缩及胞浆内大量空泡形态等。（2）病毒感染组MDCK细胞凋亡的百分率显著高于其它对照组（P＜0．001）。（3）药物病毒组、药物对照组和细胞对照组比较无显著性差异（P＞0．05）。（4）抗流感病毒药效琥宁（中草药）能明显抑制甲3型流感病毒诱导的细胞凋亡（P＜0．001）。（5）病毒感染组的MDCK细胞“亚G1峰”明显高于其它对照组。结论 本研究说明甲型流感病毒能诱导细胞凋亡，而抗流感病毒中草药穿琥宁能抑制其诱导的细胞凋亡。     

重组肝CYP3A4与CYP3A29细胞微粒体药物代谢动力学比较

目的 比较巴马小型猪CYP3A29和人CYP3 A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体的药物代谢特征,在分子水平为巴马小型猪作为临床前药物代谢实验动物提供科学依据.方法 以CYP3A特异性代谢底物硝苯地平、睾酮及其抑制药酮康唑为探针药物,将探针药物与重组CYP3A4、CYP3A29细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,高效液相色谱法检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析.结果 巴马小型猪CYP3A29与CYP3A4在硝苯地平和睾酮代谢差异无统计学意义(P＞0.05).酮康唑的抑制活性为:当代谢底物为硝苯地平时,酮康唑对CYP3A29和CYP3A4的半数抑制浓度分别为0.090,0.132 μmol·L-1(P＜0.05);当代谢底物为睾酮时,酮康唑对CYP3A29和CYP3A4的半数抑制浓度分别为0.056,0.032 μmol·L-1(P＜0.05).结论 重组CYP3A29与CYP3 A4细胞微粒体对硝苯地平和睾酮活性差异不显著;酮康唑对重组CYP3A29与CYP3A4细胞微粒体硝苯地平和睾酮代谢活性有差异.     

细胞色素氧化酶CYP3A4基因多态性研究进展

CYP3A4是人类肝脏及肠道中一种主要的细胞色素P450酶,约占成人肝脏P450酶总量的25%,体内许多药物、内源性化合物和环境污染物都由它代谢,大约有38个类别共150多种药物是它的底物,涉及抗癫痫药、抗精神病药、大环内酯类抗生     

加强细胞毒性药物的职业安全防护意识

细胞毒性药物对护士存在职业危害,提出危害途径、细胞毒性药物配置的安全防护措施及正确的配制方法. 配制人员必须熟练掌握细胞毒性药物的药理知识,提高自身的综合素质;配制时应严格执行细胞毒性药物安全操作规范,做好防护工作. 从而使细胞毒性药物对护士的职业危害降低至最低限度.     

急性淋巴细胞白血病3种化疗方案成本效果分析

目的：考察急性淋巴细胞白血病3种缓解诱导化疗方案的经济费用。方法：对70例急性淋巴细胞白血病缓解诱导化疗所用的3种方案,即：DVLP（daunorubicin,vineristine,l-asparaginase and drednisone)、DVP（daunorubicin,vincristine and prednisone)及DVLD（daunorubicin,vincristine,l-asparaginase and dexamethasone)进行回顾性分析评价,用成本-效果分析的药物经济学方法进行比较。结果：DVLP是3种化疗方案中最理想的方案。结论：药物经济学可为临床合理用药,优选治疗方案提供一定的参考。     

衰老细胞清除剂研究进展

老龄化是许多慢性疾病的首要危险因素。细胞衰老与老龄化的关系一直是人们关注的热点。近年来研究显示,衰老细胞堆积是驱动老龄化和老年性疾病发生、发展的重要机制。衰老细胞成为防治老年病的一个新靶点,研发选择性清除衰老细胞的药物也成为热点。该文将对衰老细胞在老年病发生、发展过程中的作用,以及诱导衰老细胞凋亡的药物——衰老细胞清除剂的相关研究进行综述。