脓毒症大鼠血浆游离氨基酸浓度的变化

目的 探讨脓毒症早期大鼠血浆游离氨基酸含量的变化与骨骼肌蛋白降解间的关系。方法 以腹腔注射内毒素建立大鼠脓毒症模型,将动物随机分为正常对照组和内毒素攻击后2、6、12、24h共5组,每组8只动物。用氨基酸自动分析仪的生理体液柱测定各组大鼠血游离氨基酸含量;用全自动生化分析仪测定血浆谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）浓度;用放射免疫分析（RIA）法测定血浆皮质醇含量;用酰联免疫吸附试验（ELISA）测定血浆TNF－α和IL－6含量。结果 内毒素攻击后各时相点大鼠血浆总氨基酸含量在正常范围内波动;支链氨基酸（BCAA）在2、6、12h降低,24h则出现显著升高,亮氨酸、异亮氨酸无显著怀变化,缬氨酸早期明显降低,后期则上升;芳香族氨基酸（AAA）在各时相点不同程度升高,2h和6h显著升高,酪氨酸12h降低,苯丙氨酸在各时相点均显著升高;苯丙氨酸／酪氨酸（Phe/Tyr)比值内毒素攻击后各时相点均出现显著增加;BCAA／AAA比值在2h和6h较正常显著较低;苏氨酸、谷氨酸、鸟氨酸、3－甲基组氨酸（3－MH）、组氨酸、丙氨酸早期升高或大多数时相点显著升高,赖氨酸、肌氨酸、胱氨酸和磷酸丝氨酸在内毒素攻击后无显著性变化,其它氨基酸均见不同程度的降低或显著降低。血浆ALT、AST浓度在内毒素攻击后各时相点显著升高（P＜0．01）,6h达峰值。血浆皮质醇含量在各时相点均显著升高（P＜0．01）,6h达峰值。血浆TNF－α和IL－6含量均上升（P＜0．01）,其中TNF-α于2h达峰值,IL－6于12h达峰值。结论 脓毒症大鼠血浆游离氨基酸浓度变化主要由于骨骼肌蛋白降解增强与肝脏代谢负担加重所致。     

脓毒症大鼠红细胞变形能力的研究

目的：探讨严重创伤感染时红细胞的功能状态。方法：采用盲肠结扎穿孔法诱导大鼠脓毒症，观察术后红细胞变形能力。结果：脓毒症组动物红细胞变形指数和红细胞膜稳定系数均明显降低；红细胞膜微粘度、丙二醛含量增加，超氧化物歧化酶含量明显减少。结论；严重创伤感染时，动物红细胞变形能力降低，其原因可能与自由基对膜的损伤有关。     

脓毒症大鼠生物喋呤的组织分布特点和意义

目的　探讨腹腔感染致脓毒症时重要器官生物喋呤及其合成限速酶基因表达的改变和病理生理意义。方法　腹腔感染致脓毒症模型采用盲肠结扎穿孔法(CLP),用反相高效液相分析法和逆转录-聚合酶链反应方法测定24只大鼠肝、肺、肾等组织生物喋呤含量及三磷酸鸟苷环水解酶I(GTP-CHI)mRNA的表达。结果　脓毒症大鼠2h时肝、肺、肾组织生物喋呤含量显著增多［分别为(4.18±0.16)、(2.71±0.32)、(2.45±0.27)ng/g蛋白］,同时不同组织GTP-CHImRNA表达亦明显增强,各脏器功能均表现不同程度地损害(P＜0.05)。相关分析显示,肝、肺组织生物喋呤与反映相应脏器功能的指标呈高度正相关(分别为r=0.7916,P＜0.001和r=0.8004,P＜0.001)。结论　生物喋呤参与了腹腔感染所致脓毒症的发生、发展过程。     

TGFβ1对脓毒症大鼠肝脏MD2表达的影响

目的建立大鼠脓毒症模型,观察不同时间点大鼠肝脏髓样分化蛋白2(Myeloid Differential protein-2,MD2)表达情况和NF-κB含量动态变化,并给予外源性TGFβ1干预,探讨TGFβ1对大鼠脓毒症的作用及可能机制,为临床脓毒症的治疗提供思路。方法健康雄性CL级SD大鼠120只随机分为三组:对照组40只,脓毒症模型组40只,TGFβ1干预组40只。按2 h、6 h、12 h、24 h、48 h时间点活杀大鼠取肝脏,HE染色光镜观察肝脏组织形态改变;用ELISA法检测肝脏组织匀浆上清液NF-κB含量;RT-PCR法检测肝脏MD2 mRNA的表达。结果模型组较对照组组织损伤严重,炎症细胞浸润多,伴有出血;TGFβ1组较对照组仍有炎细胞浸润,但较模型组炎症细胞浸润减少,损伤减轻;NF-κB在模型组(6 h、12 h、24 h、48 h)较对照组含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),并且在24 h达到最高,48 h进入平台期。TGFβ1组(6 h、12 h、24 h)较模型组含量减少,差异有统计学意义(P<0.05);MD2 mRNA在在模型组(6 h、12 h、24 h、48 h)较对照组表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),并且在24 h表达达到最高,48 h进入平台期;TGFβ1组(12 h、24 h)与模型组比较表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MD2 mRNA脓毒症时表达明显增加,提示LPS信号转导增强。TGFβ1可能通过抑制LPS的信号转导,减轻炎症反应。     

金葡菌肠毒素B在烧伤脓毒症大鼠中的分布特点及意义

目的　探讨金葡菌肠毒素在烧伤后G 菌脓毒症发生、发展过程中的意义。　方法　采用大鼠 2 0 %TBSAⅢ度烫伤复合金葡菌攻击造成脓毒症模型 ,观察金葡菌肠毒素B(SEB)在动物血浆及心、肝、肺、肾等重要器官中的分布 ,同时动态检测相关器官功能指标的改变。　结果　烫伤脓毒症早期 ,动物血浆中SEB含量呈一过性升高 (P <0 .0 1) ,继而逐渐下降。心、肝、肺、肾等组织中SEB含量于金葡菌攻击后 2h即明显升高 (P <0 .0 1) ,且持续上升。烫伤后 2 4h动物多器官功能明显受损 ,金葡菌的攻击可进一步加重多脏器功能损害 ,且肝、肾等器官损害程度与组织SEB含量呈显著正相关 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。　结论　金葡菌肠毒素在烫伤脓毒症诱发的多器官功能损害中具有一定作用     

甲状腺激素对脓毒症大鼠肠粘膜屏障的保护作用

目的 探讨补充外源性甲状腺激素对脓毒症大鼠肠粘膜屏障的保护作用。方法 将ＳＤ大鼠３０只随机分为３组：假手术组、脓毒症组和治疗组。利用盲肠结扎打孔法（ＣＬＰ）制作大鼠脓毒症模型,通过腹腔注入１０ｍｇ／Ｌ三碘甲状腺原氨酸（Ｔ３）１．５ｍｌ／ｋｇ体重,以纠正脓毒症大鼠的低Ｔ３状态,用透射电镜观察肠粘膜机械性屏障的变化。结果 治疗组动物脓毒症表现轻,２４ｈ存活率显著高于脓毒症组（Ｐ〈０．０５）。脓毒症组大     

清热解毒方改善脓毒症大鼠脏器功能的比较

目的:探讨清热解毒方对脓毒症大鼠的治疗作用.方法:将Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、清热解毒方1组(QR1)、清热解毒方2组(QR2)和血必净组,采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型,给予不同配伍的清热解毒方治疗,治疗后0～3 d,观察各组大鼠的死亡率;检测尚存活大鼠的AST、ALT、AST/ALT、BUN、Cr以及血小板膜表面CD62p表达情况.结果:清热解毒方,尤败酱草能够提高脓毒症大鼠的存活率,并显著降低血小板CD62P阳性血小板的百分率(P＜0.05).给药3 d后,与模型组比较,各清热解毒方组在不同程度上降低了AST及ALT的表达水平.各给药组都可以使造模后升高的BUN、Cr有显著的下降(P＜0.05).结论:清热解毒方可以改善脓毒症大鼠的肝、肾及血小板功能,其中败酱草在提高存活率及降低血小板活化方面发挥重要的作用.     

清热解毒方与益生菌联合治疗大鼠脓毒症

目的：观察清热解毒方和益生菌联合治疗脓毒症模型大鼠的作用。方法：采用盲肠结扎穿孔法制作大鼠脓毒症模型,健康Wistar大鼠140只随机分为假手术组、脓毒症模型组、抗生素组、益生菌组、清热解毒方中药组及清热解毒方和益生菌联合治疗组,对大鼠腹水和血标本进行细菌培养鉴定及实时定量PCR检测。结果：与假手术组比较,脓毒症模型组大鼠腹水和血液中细菌检出率明显升高（P＜0.05）,其腹水中大肠杆菌检出率100%、金黄色葡萄球菌检出率63.6%,血液中大肠杆菌检出率94.7%、金黄色葡萄球菌检出率21.1%。与模型组比较,单纯中药组和单纯益生菌组治疗后细菌检出率和数量均有所降低（P＜0.05）。与单纯用药组比较,联合治疗组上述细菌检出率和数量进一步降低（均P＜0.05）。结论：脓毒症模型大鼠主要致病菌为大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,清热解毒方和益生菌联合使用可协同抑制其主要致病菌。     

脓毒症大鼠心功能及氧化应激水平变化

目的观察脓毒症大鼠超声心动图、心肌组织病理学表现及氧化应激水平变化。方法将48只12周龄SD大鼠随机均分为脓毒症24 h组(CLP24 h组)、脓毒症48 h组(CLP48 h组)、假手术组(Sham组)及空白对照组(Blank组)。造模后采用彩色多普勒超声测量各组左心室舒张末期内径(LVEDD)、室间隔舒张末期厚度(IVSD)、左心室后壁舒张末期厚度(LVPWD)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF)及心率(HR)。对心肌组织行HE及Masson染色,观察心肌组织病理学变化。测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平,并分析其与LVEF的相关性。结果 4组LVIDD、IVSD、LVFS、LVEF及HR差异均有统计学意义(P均0.01), LVFS、LVEF及HR在Blank组Sham组CLP24 hCLP48 h组。CLP24 h组及48 h组部分心肌细胞肿胀坏死,心肌间隙中胶原纤维明显增多,48 h组更显著。SOD、GSH在Blank组Sham组CLP24 hCLP48 h组,MDA在Blank组Sham组CLP24 h组CLP48 h组。LVEF与SOD、GSH呈正相关(r=0.922 6、0.938 0,P均0.001),与MDA呈负相关(r=-0.929 8,P0.001)。结论脓毒症可引起大鼠心功能异常及心脏结构改变;氧化应激可能是脓毒症致心肌损害的重要机制。     

己酮可可碱对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机理

目的：探讨己酮可可碱（PTX）对腹腔感染致脓毒症时急性肺损伤的保护作用及其机理。方法：采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,将42只大鼠随机分为对照组6只,脓毒症组18只和PTX治疗组18只,检测肺组织生物喋呤（BH4）合成限速酶－三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ（GTP－CHI）,诱生型一氧化氮合酶（iNOS)和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）mRNA的表达,同时测定肺组织BH4、一氧化氮（NO）的含量及髓过氧化物酶（MPO）活性的变化。结果：脓毒症早期给予PTX治疗可有效抑制腹腔感染后2、8h肺组织TNF－α mRNA表达和伤后2h MPO活性;同时,治疗组2h肺组织BH4,NO含量及GTP－CHI mRNA,iNOS mRNA表达均显著降低。结论：早期应用PTX对脓毒症后急性肺损伤具有明显保护作用,该效应与PTX抑制BH4,NO的诱生相关。     

胰蛋白酶抑制剂对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的探讨胰蛋白酶抑制剂乌司他丁对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法将 2 2只SD大鼠随机分为 3组 :假手术组、脓毒症组及干预组。利用盲肠结扎打孔法 (cecalligationandpunture ,CLP)制作大鼠脓毒症模型 ,干预组分别于CLP后 5h、15h腹腔给予 7 5× 10 4U/kg体重的乌司他丁 (ulinastatin ,UTI)。应用荧光光谱分析仪检测至肠腔进入门静脉的荧光标记葡聚糖(FITC D)的浓度 ,了解UTI对肠黏膜通透性的影响。同时 ,用透射电镜观察肠黏膜机械屏障的变化。结果CLP 2 1h后干预组动物脓毒症表现轻 ,假手术组门静脉FITC D浓度 (1 2 2± 0 2 1) μg/ml,而脓毒症组 (2 5 1± 0 5 6 ) μg/ml高于假手术组 (F =5 0 31,P <0 0 1) ,干预组 (1 5 7± 0 5 0 ) μg/ml则低于脓毒症组 (F =1 2 4 9,P <0 0 1)。脓毒症组肠黏膜机械屏障明显受损 ,而干预组肠屏障受损较轻。结论给予乌司他丁对脓毒症大鼠肠黏膜屏障有明显的保护作用。     

脓毒症对大鼠骨骼肌组织泛素及泛素化蛋白表达的影响

目的 研究脓毒症大鼠骨骼肌组织泛素化蛋白表达的变化规律,探讨导致骨骼肌蛋白降解增强的机理。方法 大鼠腹腔注射内毒素复制脓毒症模型,将其随机分成内毒素攻击后2、6、12和24h组,每组（16只）各设正常对照。骨骼肌充分氧供离体孵育后,氨基酸自动分析仪测定脓毒下大鼠伸趾长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率,利用蛋白免疫印记（western blot)方法测定大鼠不同时相点伸趾长肌泛素及泛素化蛋白的表达变化。结果 脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在内毒素攻击后2h和6h轻度增加,12h和24h增加不明显,而肌纤维蛋白降解率则在2h和6h分别增加155%和222%,12h增加40%,24h变化不明显;伸趾长肌泛素及泛素及泛素化蛋白的表达在内毒素攻击后2h和6h表达较正常对照组明显增加,其中游离泛素蛋白增加46%,泛素化蛋白增加2.4倍,但12h和24h无明显变化,增加的泛素化蛋白主要为高分子量蛋白。结论 脓毒症大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体途径被激活,泛素及泛素化蛋白高水平表达表明进入泛素-蛋白酶体途径底物显著增多,进而导致骨骼肌蛋白大量消耗。     

皮质醇对脓毒症大毒炎性细胞因子的影响

目的 探讨皮质醇对脓毒症大鼠细胞因子的影响及可能的治疗作用。     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠小肠能量代谢作用的研究

目的：探讨δ阿片受体激动剂DADLE（D—Ala^2-D—Leu^5-enkephali）对脓毒症大鼠小肠屏障功能的保护作用及其机制。方法：72只SD大鼠,分为假手术组、脓毒症组和DADLE（5mg／Kg）治疗组．每组24只。采用改良盲肠结扎穿孔方法（CLP）建立大鼠脓毒症模型,假手术组除不结扎刺穿盲肠外,其余操作同脓毒症组,DADLE治疗组模型建立后立即按5mL/kg剂量静脉注射浓度为0．5mg／mL的DALDE。于手术后4、8、12h处死大鼠,测定小肠黏膜组织中ATP、ADP、AMP含量;制备肠上皮细胞线粒体,测定各组大鼠线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（P／O）和肠道氧摄取率（Oext）;观察并比较各组小肠黏膜上皮组织病理改变。结果：DADLE治疗组的小肠黏膜ATP、ADP含量较脓毒症组均有明显升高（P〈0．05）,AMP含量明显下降（P〈0．05）;DADLE治疗组小肠上皮细胞中线粒体RCR、P／O和Oext较脓毒症组均明显升高（P〈0．05）;小肠黏膜上皮组织病理学提示DADLE组的组织损伤明显轻于脓毒症组。结论：δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠小肠氧代谢和能量代谢的抑制状态具有一定程度的改善作用。     

脓毒症大鼠肾脏AQPs动态变化与水代谢的关系

目的：探讨肾脏AQPs的表达与肾损伤水代谢紊乱的关系。方法：Wistar大鼠采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症大鼠模型。观测尿量、尿渗透压和肾功能。免疫组化方法检测AQP1、AQP2蛋白水平,实时荧光定量PCR方法检测AQP1mRNA、AQP2mRNA水平。结果：手术组大鼠肾脏AQP1蛋白及AQP1mRNA表达随着CPL术后时间的延长呈下降趋势,6h开始下降,24h达最低;AQP2蛋白及AQP2-mRNA表达均在术后3h增高、12h、24h明显降低,较假手术组差异有统计学意义（P〈0.05）。大鼠肾脏AQP1、AQP2分别与尿量呈负相关（P〈0.05）,与尿渗透压呈正相关（P〈0.05）。结论：AQP1和AQP2基因通过调节AQP1、AQP2蛋白的表达,参与肾脏水代谢的调节;AQP1、AQP2蛋白及基因的表达异常是导致脓毒症肾损伤水代谢紊乱的重要原因。     

白细胞介素-18在大鼠脓毒症中的改变及其与内毒素血症的关系

白细胞介素 18(IL 18)最初名为干扰素 γ(IFN γ)诱导因子 ,是近年新发现的一种重要促炎细胞因子 ,在机体感染与免疫过程中具有一定作用[1] 。我们采用大鼠盲肠结扎穿孔术 (CLP)所致脓毒症模型 ,探讨了主要器官IL 18基因表达的改变及其意义。一、材料与方法1.动物模型 :雄性Wistar大鼠 ,体重2 2 0～ 3 0 0 g ,依照Chaudry等[2 ] 方法复制CLP致脓毒症模型。动物 72h死亡率为75 %。2 .动物分组及处理 :将 5 4只动物随机分为 3大组 :正常对照组 ( 6只 ) ,动物麻醉后活杀 ;CLP组 ( 3 6只 ) ,分别于CLP术后 2、6、12、2 4、48、72h活…     

内源性β-受体激动剂对烫伤大鼠肺水肿的影响

研究了内源性β－受体激动剂对烫伤大鼠肺水肿的影响，结果表明，单纯烫伤组和单纯心得安处理组其肺含水量、湿干重比、肺泡灌洗液蛋白浓度、丙二醛含量及白细胞计数均显著高于对照组；心得安预处理后烫伤组以上指标也均显著高于对照组，且略高于单纯烫伤组。提示内源性β－激动剂具有抗水肿、抗脂质过氧化作用，为体内重要的抗炎因素之一     

甲状腺激素对脓毒症大鼠血清一氧化氮浓度及肠粘膜一氧化氮合酶的影响

目的探讨补充外源性甲状腺激素对脓毒症大鼠血清一氧化氮 (NO)及肠粘膜诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的影响。方法应用盲肠结扎打孔法制作大鼠脓毒症模型 ,32只雄性SD大鼠随机分为 4组 :假手术组、脓毒症组、T3预防组及T3治疗组。术后 2 4h检测血清NO及甲状腺激素浓度 ,取末端回肠HE染色以判断组织损伤程度 ,同时应用免疫组化检测小肠粘膜中iNOS的表达。结果T3预防组动物死亡率较脓毒症组低 (LogRank检验值 =3 85 ,P <0 0 5 ) ,血清NO浓度降低 (F =19 6 ,P <0 0 1) ,肠粘膜损伤程度减轻 (χ2 =5 30 3,P <0 0 5 ) ,肠粘膜上皮细胞iNOS的表达明显下降(χ2 =4 876 ,P <0 0 5 )。结论脓毒症时补充外源性甲状腺激素对肠粘膜屏障具有明显的保护作用。     

内源性β-受体激动剂对烫伤大鼠肺水肿的影响

研究了内源性β-受体激动剂对烫伤大鼠肺水肿的影响,结果表明,单纯烫伤组和单纯心得安处理组其肺含水量、湿干重比、肺泡灌洗液蛋白浓度、丙二醛含量及白细胞计数均显著高于对照组;心得安预处理后烫伤组以上指标也均显著高于对照组,且略高于单纯烫伤组。提示内源性β-激动剂具有抗水肿、抗脂质过氧化作用,为体内重要的抗炎因素之一。     

精氨酸加压素对脓毒症大鼠动脉压力反射的影响

目的：观察精氨酸加压素（AVP）通过中枢及外周给药对脓毒症大鼠动脉压力反射（ABR）的影响。
方法:采用盲肠结扎穿刺术（CLP）制作大鼠脓毒症模型。（1）分别于大鼠造模后4、8和12 h检测两组大鼠压力反射（ABR）功能以及下丘脑视上核（SON）和室旁核（PVN）精氨酸加压素（AVP）的表达，以假手术大鼠为对照；（2）大鼠造模后8 h侧脑室注射AVP（50 ng），以等体积的人工脑脊液（aCSF）为对照，于给药后5 min和30 min测ABR功能；（3）大鼠造模后6 h静脉持续泵入AVP［2 ng/（kg·h）］，以等体积的生理盐水为对照，分别于给药后5 min和30 min测ABR功能。
结果:CLP术后，大鼠ABR功能以及SON和PVN中的AVP阳性细胞表达随时间呈进行性降低和减少。侧脑室注射AVP或静脉持续输入AVP均能明显改善脓毒症大鼠的ABR功能，与各自的对照组相比差异有统计学意义（均P<0.05）。
结论:脓毒症发病过程中存在中枢AVP的减少和ABR功能降低，可能是脓毒症进展的关键因素。脓毒症早期给予外源性的AVP可改善大鼠的ABR，延缓脓毒症的进展。