银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白和Caspase-3表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（ginkgo biloba extract,GBE）对脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白和半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组（A组）、缺血再灌注组（B组）和GBE治疗组（C组）,建立大鼠大脑中动脉缺血1.5 h再灌注24 h的模型;C组于缺血前30 min及缺血再灌注后1 h腹腔内注射银杏叶提取物;采用免疫组化SP法检测脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白的表达,采用四肽酶底物法检测Caspase-3活性水平。结果 GBE治疗组大鼠Bcl-2阳性细胞表达数目均高于缺血再灌注组,Bax少于缺血再灌注组（P〈0.05）;假手术组未检测到Caspase-3活性升高,缺血再灌注组Caspase-3活性明显高于GBE组,有统计学意义（P〈0.05）。结论 GBE可通过上调Bcl-2蛋白表达而减少Caspase-3活性水平,下调Bax蛋白表达,来降低脑缺血再灌注后大鼠神经细胞凋亡。     

银杏叶提取物对1型糖尿病心肌病大鼠心肌Bcl-2、Bax和caspase-3表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物（extract of Ginkgo biloba,EGB）对1型糖尿病心肌病大鼠心肌Bcl-2、Bax和caspase-3表达的影响.方法 将30只SD雄性大鼠随机分成3组：正常对照组（Con组,n=10）、糖尿病模型组（DM组,n=10）和银杏叶提取物治疗组（EGB组,n=10）.用链脲佐菌素（strepozotocin,STZ）进行腹腔注射,建立1型糖尿病动物模型后用银杏叶提取物注射液腹腔注射建立EGB组,其余两组给予相同体积的生理盐水.于12周末用超声心动图仪测定左心室舒张末期容积（LVIDV）、左心室收缩末期容积（LVISV）、左心室射血分数（LVEF）和每搏射血量（SV）;测定左心室重量指数、血糖和血胰岛素水平;用TUNEL法测定心肌细胞的凋亡指数（AI）;用RT-PCR和Western blot法分别检测其Bcl-2、Bax和caspase-3的表达.结果 与Con组相比,DM组大鼠LVIDV（P ＜0.01）、SV（P ＜0.01）、胰岛素含量（P＜0.01）和心肌组织Bcl-2（P ＜0.05）的表达都显著降低;而左心室重量指数和血糖浓度（P＜0.01）、心肌组织中Bax （P ＜0.05）、caspase-3（P＜0.05）的表达以及Bax/Bcl-2比例均明显升高.当EGB干预治疗后,与DM组相比,大鼠LVIDV（P＜0.05）、SV（P ＜0.05）、胰岛素含量（P＜0.05）和心肌组织Bcl-2（P ＜0.05）的表达均显著升高;而左心室重量指数（P＜0.05）、血糖浓度（P＜0.01）、心肌组织中Bax （P ＜0.05）、caspase-3（P＜0.05）的表达以及Bax/Bcl-2比例（P＜0.05）均明显降低.但是TUNEL染色显示各组大鼠的心肌细胞凋亡率（cardiomyocyte apoptosis index,CAI）没有明显的差异（P＞0.05）.结论 银杏叶提取物可以通过增加Bcl-2的表达,降低Bax、caspase-3表达及Bax/Bcl-2比例,减少心肌细胞的凋亡,从而提高了糖尿病心肌病的心肌功能.这也提示EGB通过调节心肌凋亡相关基因的表达,减少细胞的凋亡是其治疗糖尿病心肌病的重要机制之一.     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞Bax和Bcl-2基因表达的影响

目的 观察银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba leaf, EGB)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响,探讨EGB防治糖尿病性视网膜病变的作用机制.方法 选择健康成年Wistar大鼠30 只, 随机分成正常对照组、模型组和EGB治疗组.腹腔内注射链脲佐菌素(STZ) 诱发大鼠糖尿病.EGB治疗组给予EGB溶液灌胃12周,模型组和对照组灌服等体积生理盐水,随后制备视网膜石蜡切片,行免疫组化染色, 并对染色结果行计算机图像分析.透射电镜观察各组神经节细胞的超微结构变化.结果 Bax在模型组神经节细胞的表达较正常对照组显著增强,在EGB治疗组的表达强度较模型组减弱;Bcl-2在EGB治疗组表达较模型组明显增强,差异均有统计学意义(P<0.01).EGB治疗组神经节细胞超微结构的损害明显减轻.结论 EGB可减轻糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的超微结构损伤,减轻细胞凋亡的发生,其机制可能与EGB调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达有关.     

沙棘总黄酮对糖尿病心脏病大鼠心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨沙棘总黄酮对糖尿病心脏病心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法以腹腔注射链脲佐菌素法造成糖尿病心脏病大鼠为研究对象。观察沙棘总黄酮对糖尿病心脏病大鼠心肌细胞Bax、bcl-2蛋白表达的影响，探讨沙棘总黄酮对糖尿病心脏病的治疗作用及其作用机制。结果模型组大鼠心肌Bax蛋白表达增强，Bc1-2表达减弱的。沙棘总黄酮组大鼠与模型组比较Bax蛋白表达减弱，Bcl-2表达较模型组增强，差异显著。结论沙棘总黄酮具有调节Bax/BCL-2蛋白表达，抑制心肌细胞凋亡作用。     

银杏叶提取物对实验性糖尿病大鼠氧化应激的影响

目的：观察银杏叶提取物对实验性糖尿病的抗氧化作用。方法：30只Wistar大鼠随机分为正常组、糖尿病组和治疗组，每组10只。正常组始终喂以基础饲料，糖尿病和治疗组均喂饲高糖-高脂肪饲料。实验开始及结束时进行糖耐量实验，于实验结束后测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL—TC)、高密度脂蛋白(HDL—TC)含量，并测血清丙二醛(MDA)及超大型氧化物歧化酶(SOD)含量。结果：银杏叶提取物能降低餐后血糖，降低血中TC、TG、LDL—TC的含量，HDL—TC升高趋势不明显，可降低血中MDA含量，提高血中SOD活力，减轻胰岛损害。结论：银杏叶提取物具有降糖、降脂、减轻脂质过氧化作用。对预防和治疗糖尿病有一定作用。     

海洛因依赖对大鼠颌下腺Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察海洛因依赖对大鼠颌下腺Bcl-2、Bax阳性细胞表达及分布的影响.方法:正常SD大鼠,随机分为正常对照组和海洛因依赖组,皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38天取颌下腺组织,用免疫组织化学Envision法并结合图像分析方法,观察Bcl-和Bax表达.结果:(1) Bcl-2阳性细胞数量在海洛因依赖第10天明显下降(P＜0.05),此后开始增加,至第24天时达最高峰(P＜0.05),而在第38天时低于正常水平(P＜0.05);平均灰度值在依赖第10天明显上升(P＜0.05),后开始下降,第24天时达最低值(P＜0.05),至第31 ～38天时接近正常水平(P＞0.05);(2)Bax阳性细胞数量在依赖第10天明显降低(P＜0.05),第17天时又增加达峰值(P＜0.05);之后即开始下降,第31-38天时接近正常水平(P＞0.05);其平均灰度值在依赖第10天显著上升(P＜0.05),而在第17天时达最低值(P＜0.05),后随依赖时间延长,与正常水平无显著性差异(P＞0.05).结论:海洛因对颌下腺Bcl-2、Bax的表达有明显影响,且与依赖时间长短有关.     

川芎嗪对早期糖尿病大鼠胸主动脉PCNA c-myc Bcl-2 Bax表达的影响

目的：探讨川芎嗪对早期糖尿病大鼠胸主动脉PCNA、c-myc、Bcl-2、Bax表达的影响。方法：用链脲佐菌素大剂量单次腹腔注射法造成大鼠糖尿病模型。实验分为4组：正常组、糖尿病模型组、川芎嗪低剂量组及高剂量组。正常组和模型组每天腹腔注射注射用水，川芎嗪低、高剂量组分别用40mg／kg、80mg／kg的量腹腔注射，用药8周后。处死大鼠，分离胸主动脉，作PCNA的免疫组化、c—myc、Bcl-2、Bax原位杂交检测，分析阳性细胞表达率。结果：糖尿病模型组、川芎嗪低、高剂量组的PCNA、c-myc、Bcl-2、Bax表达高于正常组（P〈0．01），川芎嗪低、高剂量组PCNA表达低于模型组（P〈0．01o川芎嗪低、高剂量组的c-myc、Bcl-2的表达低于模型组（P〈0．01），Bax（P〈0、05）的表达高于模型组。结论：在糖尿病早期川芎嗪可以通过抑制PCNA、c-myc、Bcl-2的表达，增加Bax的表达，抑制血管平滑肌细胞的增殖，促进其凋亡。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠心功能的改善作用

糖尿病性心肌病 （diabetic cardiomyopathy,DCM）是糖尿病患者较常并发的一种心脏疾患,疾病初期主要是心脏无明显症状的舒张功能降低,随着病情的加重,将逐渐发展成有症状的充血性心力衰竭,表现为心室顺应性降低、收缩功能障碍等.本实验通过糖尿病大鼠动物模型的建立,观察银杏叶提取物对糖尿病大鼠心功能的影响,目的在于研究银杏叶提取物对糖尿病大鼠心功能的改善作用.     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾组织MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及银杏叶提取物(EGB)对两者表达的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(C组),糖尿病组(DM组),EGB治疗组(EGB组,8 mg.kg-1.d-1)。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠造成糖尿病模型,EGB组用银杏叶提取物进行灌胃。8周后,用免疫组化方法检测各组大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2的蛋白表达。结果:糖尿病组大鼠肾小球MMP-2蛋白表达较正常对照组明显减少,TIMP-2蛋白明显升高(P<0.01);EGB组MMP-2较糖尿病组表达升高(P<0.01)、TIMP-2表达较糖尿病组减少(P<0.01)。结论:EGB可通过调节MMP-2/TIMP-2的平衡,减少细胞外基质积聚而对糖尿病大鼠起到肾脏保护作用。     

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。方法荧光显微镜观察透骨草提取物对SMMC-7721细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果荧光显微镜可见,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞,细胞皱缩,细胞核固缩,呈新月状且边集,呈现凋亡现象。免疫组化结果显示40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞Bcl-2蛋白表达明显低于对照组（P〈0.05）,而Bax蛋白表达明显高于对照组（P〈0.05）。结论透骨草提取物可能通过下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达诱导SMMC-7721细胞凋亡。     

银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血损伤的实验研究

目的　观察银杏叶提取物对大鼠急性肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机理。方法　SD大鼠随机分为假手术对照组、单纯缺血再灌注组、缺血再灌注 +银杏叶提取物处理组。测定肾组织丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶变化并观察肾脏病理学改变。结果　与假手术对照组相比 ,单纯缺血再灌注组肾小管上皮细胞呈明显的缺血性改变 ,MDA含量增加 (P <0 0 1) ,SOD、Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶活性降低 (P <0 0 1) ;缺血再灌注 +银杏叶提取物处理组与单纯缺血再灌注组相比 ,MDA含量明显降低 (P <0 0 5 ) ,SOD活性显著升高 (P <0 0 1) ,Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶活性增高 (P <0 0 1、P <0 0 5 ) ,肾小管上皮细胞缺血性改变减轻。结论　银杏叶提取物通过抗氧化 ,对急性肾缺血再灌注损伤有保护作用     

银杏叶提取物对6-OHDA诱导PC12细胞Bax和Bcl—2表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）对6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OH—DA）诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法经不同浓度GBE预处理体外培养的PC12细胞加入6-OHDA诱导多巴胺能神经元损伤模型,用4-甲基偶氮唑蓝（MTT）检测PC12细胞活力;流式细胞仪（FCM）测定PC12细胞凋亡百分比;采用免疫印迹法检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果100μmolZL的6-OHDA处理PC12细胞24h,细胞活力较正常对照组明显降低（P〈0．01）;与模型组比较,GBE20,40μg/ml可明显减轻6-OHDA对PCI2细胞的毒性,GBE可使细胞活性增强,降低凋亡百分比。与正常对照组比较,模型组Bax表达升高,而Bcl-2表达降低（P〈0．05）。与模型组比较,GBE各剂量组Bax降低,而Bcl-2升高,且呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论GBE对6-OHDA诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,上调Bcl-2和下调Bax表达可能是其作用的机制之一。     

银杏叶提取物对大鼠非酒精性脂肪肝炎肝脏保护作用的研究

目的：观察银杏叶提取物对非酒精性脂肪肝炎大鼠Toll样受体4（TLR4）、肿瘤坏死因子α（TNF‐α）等表达的影响。方法雄性SD大鼠分为3组。对照组正常饮食,模型组、治疗组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎后分别以生理盐水、银杏叶提取物液10 mL／kg灌胃,每日1次,共8周。处死大鼠,分别进行如下检测：（1）观察肝脏病理变化;（2）检测 TLR4表达水平;（3）检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平及血清TNF‐α水平。结果（1）治疗组和模型组均有不同程度的肝细胞脂肪变性,且治疗组轻于模型组。（2）模型组、治疗组TLR4 mRNA及蛋白、TNF‐α表达高于对照组,模型组又高于治疗组,差异有统计学意义。对照组血清ALT、AST明显低于模型组及治疗组,治疗组又低于模型组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论银杏叶提取物对非酒精性脂肪肝炎大鼠有较好的肝脏保护作用,其可能机制与降低 TLR4的表达、抑制炎性反应有关。     

氯沙坦对自发性高血压大鼠肾脏组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的：探讨氯沙坦对自发性高血压（SHR）大鼠肾脏组织Bax、Bcl-2表达的影响。方法：将40只11周龄雄性SHR大鼠随机分成4组：氯沙坦组[氯沙坦30 mg/（kg.d）,灌胃]、培哚普利组[培哚普利2 mg/（kg.d）,灌胃]、氨氯地平组[氨氯地平6 mg/（kg.d）,灌胃]和对照组各10只,另设11周龄雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作正常对照组（n=10）。实验前及实验开始后测大鼠尾动脉收缩压1次/4周。饲养并灌胃8周后,收集肾脏组织,采用荧光定量PCR法和免疫组化法检测各组肾脏细胞凋亡因子Bax、Bcl-2表达的情况。结果：氯沙坦、培哚普利、氨氯地平均能显著降低SHR大鼠的收缩压,各组间差异无统计学意义。其中氯沙坦能显著降低SHR大鼠肾脏组织中Bax的表达（P〈0.01）,增加Bcl-2的表达（P〈0.01）,而培哚普利组、氨氯地平组无明显作用。结论：三种降压药均有明显的降压作用,其中氯沙坦在高血压病程中可抑制细胞凋亡因子Bax和促进Bcl-2的基因及蛋白质表达。     

NO对大鼠卵巢Bcl-2／Bax表达的影响

目的探讨一氧化氮参与卵泡发育和凋亡的机制。方法采用免疫组化的方法检测NO供体硝普纳（SNP）对成熟大鼠卵巢中凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。结果实验（SNP）组Bcl-2蛋白在窦前卵泡、窦状卵泡中表达下调,Bax蛋白在始基卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡中的表达明显上调,与对照组比较差异有显著性（P〈O．05）。结论高浓度NO可上调大鼠卵泡中Bax蛋白的表达,下调Bcl-2的表达。推测NO可能通过Bcl-2／Bax途径来诱导卵泡中的细胞凋亡及卵泡闭锁。     

Bcl-2和Bax蛋白在糖尿病大鼠耳蜗中的表达

目的：探讨糖尿病耳聋大鼠的耳蜗病变与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的相关性。方法： 35只大鼠随机分为糖尿病组和对照组。糖尿病组（25只）采用STZ腹腔一次性注射制备，对照组(10只)注射等量生理盐水。在成模后3个月时采用免疫组织化学方法，对大鼠耳蜗组织进行Bcl-2和Bax的表达检测。结果：糖尿病大鼠耳蜗结构未见异常的形态学改变。对照组大鼠耳蜗内、外毛细胞及血管纹、螺旋神经元均有少量的Bcl-2表达，糖尿病组仅血管纹组织表达的Bcl-2明显高于正常组，毛细胞和螺旋神经元的表达与正常对照组比较差异无显著性（P>0.05）。计算机定量分析显示，糖尿病组和对照组耳蜗血管纹的Bcl-2表达灰度值分别为135.32±21.69和45.32±9.08,两组比较差异有显著性 (P<0.01)。糖尿病组与对照组大鼠耳蜗组织均不表达Bax蛋白。结论：糖尿病大鼠血管纹组织表达过量的Bcl-2蛋白可能是糖尿病耳蜗早期病变的影响因素之一。     

促红细胞生成素对新生HIBD大鼠Bcl-2及Bax蛋白表达的影响

目的:观察促红细胞生成素(EP0)对新生缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达的影响,探讨EPO神经保护作用的分子机制。方法:42只7d龄新生Wistar大鼠随机分为假手术组、HIBD组、生理盐水对照组、EPO干预组,其中EPO干预组又分大、中、小剂量3组。建立HIBD模型后,立即一次性腹腔注射不同剂量(10000U/kg、5000U/kg、1000U/kg)的人基因重组促红细胞生成素(rhEPO),用免疫组织化学方法观察给药24h后脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达的变化。结果:大鼠缺氧缺血后,脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达均显著增高,Bcl-2/Bax显著降低,EPO干预后Bcl-2蛋白表达增加,Bcl-2/Bax显著增高,Bax蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义。结论:EPO可以通过上调Bcl-2蛋白表达及下调Bax蛋白表达,改变Bcl-2/Bax比值,抑制细胞凋亡而起到神经保护作用,为临床治疗新生儿HIBD提供了更有意义的理论依据。     

凋亡相关基因Bax、Bcl-2及细胞色素C在链脲佐菌素糖尿病大鼠肾组织内的表达

目的 观察糖尿病大鼠肾组织中促凋亡基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2及细胞色素C(cytochrome C,cytC)的表达变化.方法 雄性SD大鼠24只,随机分为糖尿病组和正常对照组,每组12只.糖尿病组给予2％链脲佐菌素(溶于pH4.4、0.1 mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液)按65 mg/kg单次腹腔注射,复制糖尿病模型.正常对照组只注射相当体积的枸橼酸缓冲液.分别于4周、12周后测体质量、尿蛋白、血糖、血清尿素氮及血清肌酐水平.用H-E染色观察肾形态学变化,免疫组织化学染色观察Bax、Bcl-2和cytC蛋白表达变化,TUNEL法观察大鼠肾皮质细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,糖尿病组大鼠24 h尿蛋白、血糖、尿素氮及血肌酐水平升高(P＜0.05,P＜0.01).糖尿病组大鼠4周时肾小球体积增大,12周时肾小球系膜基质增生和肾小球硬化,肾小管上皮细胞空泡样变.随病程延长,糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞Bax及cytC表达增加,而Bcl-2表达减弱.细胞凋亡检测结果显示,糖尿病组大鼠4周时凋亡细胞增多,多数在远曲肾小管,12周时远曲肾小管及近曲肾小管均可见凋亡细胞.结论 Bax及cytC表达随糖尿病病程延长而增强,引起细胞凋亡增加,导致肾功能异常,这可能是糖尿病肾病的重要发病机制.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的改变及银杏叶提取物的保护作用

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的变化及银杏叶提取物对其表达的影响.方法制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.40只Wistar雄性大鼠被随机分为A假手术组、B缺血组、C小剂量治疗组和D大剂量治疗组.于术前30min及术后1 h分别给予银杏叶提取物20mg/kg和40mg/kg腹腔内注射.应用TTC染色及HE染色观察梗死体积及缺血坏死程度,应用免疫组化染色及POD法检测Bcl-2蛋白表达及凋亡细胞数.结果C、D两组梗死体积明显小于B组(P＜0.01),D组梗死体积小于C组(P＜0.05);C、D两组凋亡细胞数明显少于B组(P＜0.01),D组凋亡细胞数少于C组(P＜0.05);C、D两组Bcl-2蛋白表达明显高于B组(P＜0.01),D组Bcl-2蛋白表达高于C组(P＜0.05).结论银杏叶提取物可通过上调Bcl-2蛋白表达,减少神经细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤起保护作用,疗效与剂量有关.