高效液相色谱法同时测定人血浆1'-羟基咪达唑仑与咪达唑仑含量

目的建立同时检测1’-羟基咪达唑仑和咪达唑仑血药浓度的高效液相色谱法。方法采用Zirchrom 反相柱(Kromasil C18， 250 mm×4.6 mm，5 μm)；柱温：40 ℃；流动相：醋酸铵水溶液-甲醇(35∶65，V/V)；流速：1.5 mL·min^-1，样品经碱化提取分离后，流动相溶解，在220 nm波长处检测，内标：地西泮溶液。结果1’-羟基咪达唑仑和咪达唑仑分别在0.005 ～0.100和0.01 ～0.20 μg·mL^-1范围内线性关系良好，最低检测浓度分别为0.002和0.003 μg·mL^-1。萃取回收率均＞95%，日内和日间RSD均＜5%。结论该方法专一性强、灵敏度高、简单可靠，可用于研究体内CYP3A4酶的活性。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中黄芪甲苷及其药动学

目的建立大鼠血浆中黄芪甲苷的测定方法。方法以尼群地平为内标,采用LC-MS/MS方法,以Kiomasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,甲醇-0.1%甲酸水(70∶30,V/V)为流动相,梯度洗脱,流速为700μL.min-1,柱温为恒温,进样量为20μL。质谱检测采用多反应监测(MRM)模式,ESI源,分别监测离子反应m/z 785.6m/z 143.1(黄芪甲苷)和m/z 361.3m/z329.2(内标尼群地平)。结果在0.202～202.000μg.L-1浓度范围内具有良好的线性关系,典型回归方程为:Y=0.004 9c+0.070 6,r=0.997 0(n=9)。回收率为(91±8)%(n=9)。准确度、精密度均符合生物样品的测定要求,最低定量浓度为0.202μg.L-1。大鼠尾静脉注射和口服黄芪甲苷(20μg.g-1)体内主要药动学参数:t1/2(1.37±0.02)h、tmax(0.08±0.00)h、AUC0-t(4 717.54±178.20)μg.h.L-1、AUC0-∞(6 444.68±521.25)μg.h.L-1和t1/2(1.84±0.17)h、tmax(1.00±0.00)h、AUC0-t(499.27±10.14)μg.h.L-1、AUC0-∞(1 593.52±217.19)μg.h.L-1。结论该检测方法简便、准确、专属性强,能够满足黄芪甲苷在大鼠体内药动学研究的需要。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中咪达唑仑含量

目的建立检测大鼠血浆中咪达唑仑质量浓度的高效液相色谱法。方法取大鼠20只,一次性给予尾静脉注射咪达唑仑10mg／kg,分别于给药后0rain,5min,10min,20min,30min,1h,1．5h,2h,4h,6h时眼内眦取血,采用高效液相色谱法检测其血药浓度。采用DiamonsilC。8柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（62：38）,流速1．0mL／min,检测波长225nm,柱温30℃,进样量20此。结果咪达唑仑的保留时间为6．7rain,回归方程为y=0．0752X一0．0042（r=0．9999,n=7）,检测质量浓度的线性范围为0．1。30mg／L。低、中、高3种质量浓度血浆样品的绝对回收率分别为（109．84-4．54）％,（101．6±3．28）％和（104．9±4．30）％;日内RSD分别为2．86％,4．38％,3．54％,日间RSD分别为3．25％,3．17％,3．14％;咪达唑仑血浆样品-40℃保存3d及反复冻融3次,性质稳定,血浆样品处理后放置4h对测定无影响。20只大鼠血浆样品中咪逸唑仑的平均质量浓度为（8．78±2．18）mg／L。结论该方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于大鼠血浆中咪达唑仑浓度的测定。     

高效液相串联质谱法测定大鼠血浆中咪哒唑仑的浓度

目的:建立测定大鼠血浆中咪哒唑仑浓度的液相色谱串联质谱法。方法:以伊曲康唑为内标,色谱柱为XTerra MSC18(150mm×2.1mm,3.5μm);流动相为乙腈-0.02%醋酸铵(75∶25);流速为0.2mL.min-1;质谱仪为电喷雾-三重四极杆质谱,以多反应监测(MRM)方式对咪哒唑仑(m/z326.2→m/z291.2)和伊曲康唑(m/z705.3→m/z392.1)进行测定。结果:咪哒唑仑在125～50 000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.996 8),最低检测限为5.0μg.L-1。低、中、高浓度的平均回收率为97.22%,101.88%,90.57%;日内及日间精密度均小于10%。结论:本方法简单、快速、灵敏,能有效检测大鼠血浆中咪哒唑仑的浓度。     

咪达唑仑临床药动学参数的研究

目的:研究咪达唑仑的临床药动学参数。方法:选择14例咪达唑仑复合瑞芬太尼、异氟醚全身麻醉手术患者,以恒速20μg·kg-1.min-1静脉泵注咪达唑仑20min,于给药前,给药后1、3、5、7、10、15、20min,停药后5、15、30、45min及1、2、4、6、12、18、24h分别抽取桡动脉血3mL,应用高效液相色谱法检测血浆中咪达唑仑的浓度,DAS2.1.1软件计算药动学参数。结果:咪达唑仑给药后药-时曲线可用开放性三房室模型描述,其中权重系数为1,t1/2α=9.5842min,t1/2β=85.3677min,t1/2γ=339.7365min,中央室分布容积(V1)=0.1821L.kg-1,CL=119.4344mL.h-1.kg-1,K10=0.0458min-1,K12=0.0863min-1,K21=0.0175min-1,K13=0.0133min-1,K31=0.0024min-1。结论:t1/2α、t1/2β、t1/2γ、CL与国外文献报道一致,但V1偏小,用药易于达到平衡,而清除速率较快,可能更符合中国人的药动学特征。     

HPLC测定人血浆中咪达唑仑含量

目的：建立血浆中咪达唑仑浓度的高效液相色谱-紫外检测方法。方法：采用inertsilODS色谱柱;流动相为甲醇-水（62：38）,水相含磷酸0.16%,二乙胺0.25%;流速为1mL.min-1。采用紫外检测,检测波长为225nm。结果：咪达唑仑保留时间分别为12.86min、19.15min,咪达唑仑在0.4～12.8μg.mL-1范围内线性关系良好,回归方程为：Y=15448X＋313.47,r=0.9993;日内及日间变异均〈5%。结论：用高效液相色谱-紫外法检测咪达唑仑的血药浓度,方法简便、稳定,可满足临床研究的需要。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法采用Hypersil-C18反相色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,水（pH=7.3,内含三乙胺0.15%,磷酸0.05%）-乙腈（46∶54）为流动相;流速为1.0mL.min-1;柱温为30℃;样品经碱化提取分离后用流动相溶解;采用紫外检测,检测波长为223nm。结果本方法测定咪达唑仑血药浓度在50～2000ng.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,咪达唑仑的保留时间为9.60min,其低、中、高（200、500、2000ng.mL-1）浓度的提取回收率分别为92.11%、90.25%、93.27%,方法回收率分别为96.81%、101.97%、101.58%,日内、日间RSD均〈5.0%。咪达唑仑血浆样品预处理室温放置10h及咪达唑仑标准贮备液于4℃下15d稳定。结论本法简单,准确,快速,稳定,灵敏度高,可满足咪达唑仑血药浓度的检测及临床药代动力学研究要求。     

高效液相色谱法测定咪达唑仑注射液的含量

目的研究HPLC法测定咪达唑仑注射液的方法及条件.方法色谱柱Diamonsil C18,流动相为磷酸盐缓冲液(pH7.3)-甲醇-乙腈(36∶30∶34),检测波长219 nm.结果咪达唑仑在4.14～82.80 mg·L-1范围内线性关系良好,其回归方程为Y=2.1476X+0.03560,r=0.999 9,平均回收率为99.9%.结论本法操作简便、结果准确,可作为该制剂的定量分析方法.     

高效液相色谱法测定人血浆中地西泮和咪达唑仑含量

目的 建立测定人血浆中地西泮和咪达唑仑质量浓度的高效液相色谱法.方法 色谱柱采用Waters C18柱(250 mm x4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(55∶45),柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长220 nnl.结果 地西泮和咪迭唑仑的最低检测质量浓度为5 ng/mL,进样质量浓度的线性范围为O.05～10.0μg/mL(r＞0.990 0);咪达唑仑和地西泮日内精密度的RSD分别为3.09%～5.33%和1.56%～4.25%,日间精密度的JRSD分别为4.72%～6.52%和2.59%～6.22%,方法回收率分别为94.02%～97.19%和96.07%～105.64%.结论 所用方法简便、快速、准确,适用于地西泮和咪达唑仑体内血药浓度和生物等效性的测定.     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中靛玉红的含量及其药动学

目的建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中靛玉红的浓度,并研究其在大鼠体内的药动学特点。方法血浆经乙腈沉淀蛋白后取上清进样分析,采用Agilent C_(18)柱,以乙腈:水(70:30,V/V)为流动相,ESI源,负离子检测,检测离子对为m/z 260.9→156.9(靛玉红)和m/z 253.0→225.0(大黄酚,内标)。大鼠禁食过夜后按20 mg·kg~(-1)剂量靛玉红混悬液灌胃,给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、10、12、24和32 h采血。LC-MS/MS法测定血浆药物浓度,绘制血药浓度-时间曲线图,统计矩法计算主要药动学参数。结果靛玉红线性范围为0.1～10μg·L~(-1),定量下限为0.1μg·L-1。低、中、高浓度质控样品的批内和批间精密度均小于8%,低、中、高浓度质控样品和内标提取回收率在93.6%～96.3%,室温稳定性、冻融稳定性及30 d稳定性考察结果均符合要求。药动学参数为t_(max)(4.2±1.0)h,p)(max)(3.7±0.7)μg·L~(-1),t_(1/2z)(4.7±2.5)h,AUC_(0-t)(22.8±8.7)μg·h·L~(-1)。结论所建立的LC-MS/MS法简便快捷、重复性好、灵敏度高,适合于靛玉红的体内药动学研究。     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中的托莫西汀与牛磺酸及其药动学研究

目的 采用LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中的托莫西汀与牛磺酸,比较托莫西汀单独给药与托莫西汀联合牛磺酸给药两种方式下托莫西汀的药动学参数.方法 色谱柱为Inertsil ODS-3(100 mm×2.1 mm,5μm),流动相为含0.2％甲酸的甲醇-20 mmol·L-1乙酸铵的水溶液(80∶20),流速0.3 mL· min-1;质谱采用电喷雾接口,正离子模式,多反应监测.结果 托莫西汀和牛磺酸的线性范围分别为0.935～935 ng· mL-1和0.564～112.8 μg·mL-1(r2 ＞0.99),最低定量限分别为0.935ng· mL-1、0.564 μg· mL-1;方法 的日内和日间精密度均＜5.25％;稳定性试验证明牛磺酸和托莫西汀比较稳定.结论 所用方法灵敏度高,选择性好,分析速度快,可用于同时测定血浆中托莫西汀与牛磺酸的含量;在牛磺酸辅助托莫西汀用于治疗注意力缺陷障碍时,托莫西汀的药动学参数与单用托莫西汀时的相比无显著性差异.     

液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪的浓度及药动学

目的建立液相色谱-串联质谱法同时测定血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪的浓度,并用于人体药动学研究。方法 20名健康受试者单剂量口服试验制剂1片(厄贝沙坦150 mg,氢氯噻嗪12.5 mg)后,在0～36 h内不同时间点分别采集血样,分取血浆,以氯沙坦为内标,经甲醇沉淀蛋白浓缩后流动相溶解,采用CuroSil-PFP色谱柱(Phenomenex 250 mm×4.6 mm,5μm),用含4%冰醋酸的水和含4%冰醋酸的甲醇-乙腈(1∶1,V/V)的流动相梯度洗脱分离,电喷雾离子化串联质谱选择性反应监测(SRM),分别采用正和负离子切换测定厄贝沙坦和氢氯噻嗪在血浆中的浓度。结果厄贝沙坦和氢氯噻嗪血浆样品分别在10～4 000μg.L-1和1～400μg.L-1的浓度范围内质谱响应线性良好。定量下限(LLOQ)分别为10.0μg.L-1和1.0μg.L-1,准确度和精密度良好。受试者单剂量口服厄贝沙坦氢氯噻嗪片1片后,测得氢氯噻嗪的ρmax、tmax、AUC0-36和t1/2分别为(86.96±34.99)μg.L-1、(1.75±0.69)h、(434±143)μg.h.L-1和(7.91±1.31)h;厄贝沙坦的相应参数分别为(1 670±409)μg.L-1、(1.55±0.70)h、(7 396±274)μg.h.L-1和(9.45±5.20)h。结论本方法专属性强、灵敏度高、准确性高,满足厄贝沙坦和氢氯噻嗪药动学研究的要求。     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中多奈哌齐和美金刚的含量

目的建立一种简单、快速的LC-MS/MS法,同时测定大鼠血浆中多奈哌齐和美金刚的含量,研究多奈哌齐和美金刚在大鼠体内药动学的相互影响。方法大鼠血浆样品用正己烷-乙醚(体积比为1∶1)提取,Agilent-TC-C_(18)柱分离;流动相为甲醇-水(含体积分数为0.05%的甲酸溶液)(体积比为90∶10),流速为0.7m L·min~(-1),分流比为1∶1;质谱:采用电喷雾电离源,正离子方式检测,多反应监测扫描。结果多奈哌齐与美金刚线性范围分别为0.5~50.0μg·L~(-1)和2.0~200μg·L~(-1);定量下限分别为0.5μg·L~(-1)和2.0μg·L~(-1);准确度(RE)均小于15%,日内日间精密度(RSD)均不大于13.3%。结论该法简单、灵敏、选择性强,适用于同时测定大鼠血浆中多奈哌齐和美金刚的含量,并成功应用于多奈哌齐和美金刚在大鼠体内药动学相互影响的研究。     

液相色谱-质谱联用法同时测定大鼠血浆中柔红霉素和汉防己甲素的浓度

目的:建立一种灵敏快速的LC-MS/MS方法,能够同时测定大鼠血浆中的柔红霉素(DNR)和汉防己甲素(Tet)含量。方法:色谱柱使用的是BDS HYPERSIL-C₈柱(2.1 mm×100 mm,3 μm);采用乙腈-5 mmoL·L^-1醋酸铵(46:54 V/V)作为流动相, 其中含千分之四的甲酸;流速设为0.2 ml·min^-1。采用醋酸乙酯对血浆样品进行液液萃取,选择阿霉素(DOX)为内标,进行HPLC-MS/MS分析,正离子扫描, MRM模式检测。DNR、Tet和IS的定量检测离子对分别为m/z 528.4→321.3,m/z 623.1→381.8,m/z 544.4→397.6。结果:大鼠血浆中检测DNR及Tet的线性范围分别为2~500 ng·ml^-1,0.5~400 ng·ml^-1,DNR与Tet高、中、低浓度提取回收率均>86%,日内精密度RSD<7.3%,日间精密度RSD<4.9%,准确度RE在-0.4%~4.5%范围内。结论:本方法可灵敏、快速地测定大鼠血浆中DNR及Tet 浓度。     

LC-MS/MS法测定伊马替尼及代谢物在大鼠体内的药动学参数

目的建立LC-MS/MS法测定血浆中伊马替尼及其代谢物去甲伊马替尼的浓度。方法血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以含0.1%甲酸和2 nmol·L-1的醋酸铵混合溶液-甲醇=40:60(v/v)为流动相;采用Dikma Diamonsil C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱进行分离,流速为0.4 m L·min-1;柱温为45℃。结果伊马替尼和去甲伊马替尼的线性范围都为1~2000 ng·m L-1,最低检测限为1 ng·m L-1;伊马替尼平均方法回收率为101.3%~103.2%,去甲伊马替尼平均方法回收率为99.6%~102.4%,日内和日间变异均<15%。结论本方法简便、准确、灵敏、专属性强,可满足伊马替尼及其代谢物临床药物浓度测定的需要。     

LC-MS／MS法测定右溴苯那敏的血药浓度及其药动学特征评价

目的建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中右溴苯那敏的浓度,并评价右溴苯那敏在健康受试者体内的药动学特征。方法血浆经参有氯苯那敏为内标的甲醇沉淀后在Inertsil ODS-3柱（150mm×2．1mm,5μm）上分离,流动相采用含10mmol·L^-1甲酸铵的甲醇／sic／甲酸（60：40：0．1,V／V／V）溶液。串联质谱sciex API 3000采用正电喷雾离子源和多反应监测的扫描模式。结果右溴苯那敏在0．1—40μg·L^-1内线性良好,定量下限为0．1μg·L^-1。方法的准确度为87％～113％,批内、批间的RSD均〈15％。右溴苯那敏的主要药动学参数ρmax、tmax、t1/2、AUC0→t。和AUC0→∞在单剂量给药后分别为：（3．58±1．14）μg·L^-1、（9．42±2．94）h、（18．46±9．48）h、（108．4±53．97）μg·L^-1和（126．3±73．91）μg·L^-1;在多剂量给药后分别为：（14．59±6．75）μg·L^-1,（6．35±2．09）h、（21．40±7．74）h、（487．9±316．2）μg·L^-1和（578．0±437．3）μg·L^-1。稳态时的药动学参数AUC^88、ρmax、tmax和DF分别为：（153．0±74．47）μg·L^-1、（12．07±5．84）μg·L^-1、（12．75±6．21）μg·L^-1和（21．2±7．7）％。结论本方法专属性强,精确,灵敏度高,操作简单,快速。结果表明单剂量和多剂量给药后ρmax、tmax和AUC^88之间的差异有统计学意义,右溴苯那敏在体内有蓄积。     

LC-MS/MS法测定吡非尼酮在大鼠体内的药动学参数

目的建立灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中吡非尼酮的浓度。方法血浆样品采用乙腈蛋白沉淀方法,色谱柱为Dikma Diamonsil C18;以0.1%甲酸-乙腈(45:55,v/v)为流动相;流速为0.4 m L·min-1;柱温为30℃。结果吡非尼酮血药浓度在5~2000 ng·m L-1内线性关系良好(r=0.9995),最低检测限为5 ng·m L-1;日内、日间RSD均≤10%,高、中、低3种浓度的回收率均在93%左右。6只SD大鼠单剂量口服给予吡非尼酮后药动学参数分别为:Cmax(1354.3±143.5)ng·m L-1;t1/2(2.21±0.24)h;AUC0~t(3474.6±982.5)h·ng·m L-1;AUC0~∞(3687.4±992.4)h·ng·m L-1。结论本方法简便、准确、灵敏、专属性强,同样适用于人血浆中吡非尼酮浓度的测定及其药动学研究,对于评价吡非尼酮疗效和安全性有重要意义。     

用LC-MS/MS法测定大鼠血浆中大蒜皂苷PIEB的浓度及其体内药动学研究

目的 采用高效液相色谱-质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中大蒜皂苷提取物中大蒜皂苷Proto-iso-eruboside-B（PIEB）的浓度,并研究其药动学特点。方法 采用Athena C₁₈-WP色谱柱（50 mm×2.1 mm,3 μm）,流动相为乙腈-水（含0.05%甲酸）体系,梯度洗脱,流速0.3 ml/min。大鼠分别给予低、中、高剂量大蒜皂苷总提取物灌胃及静脉注射单一剂量大蒜皂苷总提取物,给药后在不同的时间点眼眶取血,采用LC-MS/MS法测定血药浓度;采用InnaPhase Kinetica2000^TM软件计算相关药动学参数。结果 大蒜皂苷提取物中的PIEB成分在10~2 430 ng/ml范围内具有良好的线性关系（r=0.999 1）;方法学考察均符合要求;大鼠静脉给药大蒜皂苷总提取物（50 mg/kg）后,PIEB即刻在体内达到最大血药浓度,其t_1/2为322 min左右,平均驻留时间（MRT）为270 min;口服灌胃低、中、高浓度大蒜皂苷总提取物后,PIEB的AUC、c_max等随给药剂量的增加而增大,大蒜皂苷提取物中的PIEB成分在大鼠体内的药动学过程符合线性药动学特征。结论 本方法操作简便、结果准确、重复性好,适用于测定大鼠血浆中大蒜皂苷PIEB的浓度。     

LC-MS/MS法测定舒肝平胃丸中厚朴酚在大鼠体内的血药浓度及其药动学研究

目的:建立舒肝平胃丸中厚朴酚在大鼠体内血药浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究其在大鼠体内的药动学。方法:以1,8-二羟基蒽醌为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白。以Agilent ZOBAX SB-C18柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm)进行分离;采用电喷雾离子源(ESI源)以正离子方式检测;扫描方式:多反应离子监测(MRM)方式。结果:厚朴酚血药浓度在0.0166～1.66μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9996);平均提取回收率在83.3%～86.1%之间,日内、日间RSD均≤7.2%。结论:本方法快速、简便、准确、灵敏,适用于舒肝平胃丸中厚朴酚的药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度

目的建立一种简单、快速的同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以利奈唑胺为内标,血浆经高氯酸沉淀蛋白,加入2倍量水,离心,上清液用二氯甲烷萃取后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ,1mL·L-1甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,流速为0.3mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源,正离子检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),万古霉素、去甲万古霉素和利奈唑胺的检测离子对分别为m/z725.7→144.2,m/z718.3→144.2和m/z338.3→296.0。结果各样品分析时间均为8min,血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度在0.01～10μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限均为10ng·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD值小于15%,日内和日间相对误差在±15%以内。万古霉素和去甲万古霉素的提取回收率分别为74.16%～76.79%和73.01%～81.11%,基质效应分别为98.86%～108.69%和95.97%～109.64%。万古霉素和去甲万古霉素血浆样品在冻融、室温下保存24h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏、准确,可同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度,并用于临床血药质量浓度的监测。