舟山眼镜蛇毒神经毒素的分离纯化及镇痛作用研究

目的从舟山眼镜蛇毒中分离纯化神经毒素,并测定其部分理化性质及镇痛活性。方法应用SP-Sephadex C-50离子交换色谱法分离眼镜蛇毒粗毒,用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、CM-Sephadex C-25离子交换色谱纯化神经毒素;SDS-PAGE(Tris-Tricine系统)鉴定纯度;用Meier方法测定毒性;用热板法观察神经毒素的镇痛作用。结果应用SP-Sephadex C-50离子交换柱层析,从舟山眼镜蛇毒中分离得到14个蛋白峰,其中6个组分(NNAV-Ⅶ ~Ⅻ)经鉴定为含有神经毒素组分,将神经毒活性最强的组分XI经Sephadex G-50、CM-Sephadex C-25纯化得神经毒素纯品NTⅪ。该纯品分子量12.3kD,小白鼠静脉注射和腹腔注射的LD50分别为1.9875、2.2217 mg·kg-1。NTXI能显著提高小鼠对热板刺激的痛阈。腹腔注射0.2mg·kg-1NTXI可使小鼠的热板痛阈提高84.35%。NTXI的镇痛作用具有时效性,给药后2h起效,4h作用达峰值。结论舟山眼镜蛇毒中分离得到一个神经毒素纯品NTⅪ,具有镇痛作用。     

9-[2-(膦酰甲氧基)乙基]腺苷-钠盐的致突变性研究

目的评价9-[2-(膦酰甲氧基)乙基]腺苷-钠盐(PMEA-Na)的致突变性。方法采用组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Am es试验)、中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验,观察PMEA-Na的致突变性。结果PMEA-Na在50~5000μg.皿-1剂量范围内,加与不加S9活化系统条件下,对TA97、TA98、TA100、TA102四种菌株的回变菌落数均未超过自发对照的2倍,即Am es试验结果为阴性;染色体畸变试验中,当药物浓度为48、24、12、6 mg.L-1时,活化条件下各浓度细胞的染色体畸变率均低于5%。在非活化条件下,药物浓度为48 mg.L-1培养48 h时,染色体畸变率为10%,因此染色体畸变试验结果为阳性;小鼠静脉注射PMEA-Na剂量为1 000、500、250 mg.kg-1时,骨髓中含微核的嗜多染红细胞数明显增加,即微核试验结果为阳性。结论在本实验条件下,PMEA-Na具有潜在的致突变性。     

长春西汀的致突变研究

检测长春西汀是否有致突变作用。方法：要用Ａｍｅｓ试验,小鼠微核试验及哺乳动物培养细胞染色体畸变试验观察长春西汀的诱导性。结果：Ａｍｅｓ试验,微核试验及染色体畸变试验结果为阴性,结论：长春西汀在所试条件下未见致突变作用。     

猫眼草水煎液体外致突变性的研究

目的检验猫眼草水煎液的致突变性;改进经典的A-mes试验体系使之适应于中药体外致突变性检验。方法通过经典的Ames试验检测猫眼草的体外致突变性;通过哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验检测猫眼草的致畸作用;改进的Ames试验通过增设含补充组氨酸(含量对应于猫眼草水煎液中组氨酸浓度)的阴性对照,排除样品中组氨酸成分对试验结果的影响。结果猫眼草水煎液在经典的Ames试验中为强阳性;对哺乳动物骨髓细胞染色体致畸作用为阴性;在改进的Ames试验中猫眼草水煎液的致突变性为阴性。结论经典的Ames试验不适合猫眼草水煎液致突变性检测,改进后的Ames实验体系适合。猫眼草水煎液在体外和体内均没有致突变性。     

乙双吗啉的致突变作用

目的:研究乙双吗啉的遗传毒性.方法:乙双吗啉5,10和15 mg·kg~(-1),腹腔注射观察诱发的小鼠骨髓染色体/染色单体畸变;应用Ames试验观察对测试菌株TA97,TA98,TA100,TA102的诱变作用.结果:乙双吗啉显著诱发小鼠骨髓染色体/染色单体畸变,其诱发的畸变细胞率(ACF)显著增加(P<0.01);在不加S9条件下,乙双吗啉对TA98,TA102有一定的诱发回复突变的作用.结论:乙双吗啉是一种遗传毒物质.     

栎精的毒性和致突变作用

栎精是天然植物中提取的一种具有祛痰、止咳，并有一定的平喘作用小分子化合物。做为一种抗氧化剂，可以清除体内有害的化学物质氧自由基，使脑细胞少受氧自由基的损伤；同时研究表明栎精具有明显抗诱变作用。由于其自身结构上具有2个苯环的特点决定了栎精具有明显的抗突变作用又有明显的致突变性。本试验采用Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验研究栎精的致突变作用。     

眼镜蛇神经毒素对豚鼠颈上神经节烟碱传递的易化作用(英文)

本研究用离休豚鼠颈上神经节细胞内生物电记录技术,对眼镜蛇毒神经毒素对交感神经节突触传递影响进行探讨。研究首次表明,眼镜蛇神经毒素对交感神经突触前ACh的释放有易化作用。     

阿比哚致突变作用的研究

目的研究阿比哚的致突变作用。方法应用微生物回复突变试验、小鼠微核试验、哺乳动物培养细胞染色体试验 ,观察阿比哚对细胞的诱变性。结果阿比哚的Ames实验、小鼠体内微核试验、CHL细胞染色体畸变试验均呈阴性结果 ,阿比哚无诱变性。结论阿比哚无致突变作用。     

聚乙二醇修饰降纤酶的遗传毒性评价

目的检测聚乙二醇修饰降纤酶的遗传毒性。方法应用鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验)、体外培养CHO细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验检测聚乙二醇修饰降纤酶的遗传毒性。结果 Ames试验结果显示每平皿100、20、4、0.8、0.16 U各个剂量组,在加或不加S9代谢活化系统时对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535所诱发的回复突变菌落数均与溶剂对照的突变菌落数相近。体外培养CHO细胞染色体畸变试验结果显示2.5、5.0和10.0 U.mL-1各个剂量组在加S9代谢活化系统于24 h和不加S9代谢活化系统于24 h、48 h培养的CHO细胞染色体畸变率与溶剂对照组比较均无显著差异(P>0.05)。小鼠骨髓微核试验显示425、850、1700 U.kg-1各个剂量组对ICR小鼠的微核诱发率与溶剂对照组比较均无显著差异(P>0.05)。结论聚乙二醇修饰降纤酶对鼠伤寒沙门菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞的染色体无致畸变作用,对ICR小鼠无诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应。表明聚乙二醇修饰降纤酶在本实验条件下无遗传毒性。     

石房蛤毒素致突变性研究

摘 要：目的 通过Ames试验以及体外哺乳类细胞染色体畸变试验探索石房蛤毒素是否存在致突变性。 方法 通过Ames试验,选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102菌株,经过菌株鉴定及菌株毒性试验,在有无代谢活化系统存在的情况下分别对石房蛤毒素0.04、0.2、1.0 μg/皿三个剂量组进行试验,了解其是否具有致突变性。通过体外哺乳类细胞染色体畸变试验,采用MTT法检测石房蛤毒素对CHL细胞毒性,依据IC50,确定试验剂量后染毒,制片、吉姆萨染色,镜下观察染色体畸变数量及类型,计算畸变率,评价其致突变性。 结果 在有无S9活化系统条件下,在0.04、0.2、1.0 μg/皿测试浓度范围内,石房蛤毒素对测试菌株诱发产生的回变菌落数未达到溶剂对照组回变菌落数的2倍,且无剂量反应关系。石房蛤毒素对CHL细胞毒性测定结果显示,有S9时,其IC50值为1.20 μg/mL;无S9时,其IC50值为1.34 μg/mL。石房蛤毒素对CHL细胞染色体畸变作用的研究结果显示,各剂量组分别在加入S9混合液和未加S9混合液条件下染色体畸变数及畸变率与阳性对照组比较,存在显著性差异（P＜0.05）;与阴性对照组比较,均无显著性差异（P＞0.05）。结论 在本试验条件下,石房蛤毒素未见致突变性。     

灵芝孢子油急性毒性及致突变性研究

目的了解灵芝孢子油的毒理学安全性。方法小鼠急性毒性试验和遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)。结果灵芝孢子油的小鼠经口LD50>20 g.kg-1BW,为实际无毒级物质;在Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验中均呈阴性反应,未显示致突变作用。结论灵芝孢子油基本无毒性和无致突变性。     

氟芬那酸丁酯致突变实验

用氟芬那丁酯酸对４种鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型（ＴＡ）进行了回复突变试验和培养中国仓鼠肺细胞（ＣＨＬ）的染色体畸变试验．结果在加代谢活化系统（Ｓ９）或不加的条件下，氟芬那酸丁酯（剂量为０５～５０００μｇ·皿－１）对４种ＴＡ菌的回复突变菌落数无明显影响；对培养ＣＨＬ的５０％细胞抑制浓度为４０μｇ·ｍＬ－１，浓度为４～４０μｇ·ｍＬ－１的氟芬那酸丁酯对ＣＨＬ染色体无致畸变作用．提示本品无致突变作用．     

放射增效剂．Ⅱ号致突变性研究

研究目的：Ⅱ号药（6-硝基吲唑类化合物）是放射所药物室合成的一种放射增敏剂,经体内外实验证明,有很好的放射增敏作用。为了临床安全用药,我们用Ames试验、CHO—K细胞染色体畸变试验及小鼠微核试验对本化合物的致突变性进行了研究。材料与方法：Ⅱ号药由放射医学研究所药物室合成,淡黄色结晶,纯度大于98％,熔点192～194℃Ames菌株为组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102。CHO．k细胞为中国仓鼠卵巢细胞。实验动物选用纯系615小鼠。Ames试验：采用平板掺入法．分别在加与不加代谢活化物（S9mix）两种条件下进行测试。5个剂量组的受试物剂量分别为5000μg/皿、500μg/皿、50μg/皿、5μg/皿和1μg/皿,同时设自发回变组、阴性对照组（溶媒对照）和阳性对照组,后者分别采用敌克松（Dexon）和2．氨基芴（2-AF）。每组3个平皿,做2次独立测试,实验结果以回变菌落数表示。     

赤苷脉通注射液的致突变研究

目的探讨中药制剂赤苷脉通注射液的致突变性。方法采用鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株回复突变实验(Ames实验)、中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变实验和小鼠骨髓微核实验来检测赤苷脉通注射液的致突变作用。结果 Ames实验中,赤苷脉通注射液在312.5～5 000μg.皿-1剂量范围内,无论加或不加S9,鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97,TA98,TA100,TA102和TA1535 5株菌的回复突变菌落数均未出现剂量依赖性的增加;染色体畸变实验中,非活化条件或代谢活化条件下,药物质量浓度为1 200,600和300μg.mL-1时,细胞的染色体畸变率均未出现剂量依赖性增加;微核实验中,在1 150,575和287.5mg.kg-1剂量组中均未见骨髓中含微核的嗜多染红细胞数增加。结论在该实验室条件下,Ames实验、CHL细胞染色体畸变实验和小鼠骨髓微核实验结果均为阴性,即中药制剂赤苷脉通注射液无潜在的遗传毒性。     

喹烯酮遗传毒性的研究

喹烯酮由中国农科院兰州畜牧与兽药研究所研制的一类低毒的抗菌促生长药物。为了探讨其遗传毒性,采用Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验,预测其遗传危害和潜在致癌的可能性。方法在Ames试验中,以1.0、2.6、6.9、18.2和50.0μg/皿的剂量,对TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535、TA1537等6个菌株,采用直接掺入法进行试验;在微核试验中,以1700、3600和7200mg/kg的剂量,采用30h2次给药法制片观察,并计算微核率;在体外染色体畸变试验中,以1.25、2.5、5.0和10.0μg/ml的剂量为终浓度,采用V79细胞株,进行制片观察,并计算染色体畸变率。在Ames试验中,除TA102、TA1535为阴性外,各剂量组在18.2μg/皿时加和不加代谢活化系统都为阳性,且呈现一定的剂量-反应关系;在微核试验中,各剂量组微核率与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);在体外染色体畸变试验,各剂量组加和不加代谢活化系统时染色体畸变率均小于5%,为阴性。本研究首次进行了6种菌株的Ames试验、微核试验和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验,结果表明,喹烯酮对Ames试验菌株具有一定的致突变性,提示喹烯酮具有一定的遗传毒性。     

舟山眼镜蛇毒心脏毒素-13的纯化、活性及尼群地平对其作用的影响

目的　从舟山眼镜蛇 (Najaatra)毒分离纯化心脏毒素并观察其心脏毒性作用和探讨作用机制。方法　用离子交换和凝胶过滤法从蛇毒中分离纯化心脏毒素 ,观察其对整体动物 ,离体器官和组织的作用及作用影响因素。结果　从舟山眼镜蛇毒中分离出 4个有心脏毒性组分 ,纯化其中 1个定名为心脏毒素 13(Cardiotoxin 13,CTX 13) ,它含有 6 0个氨基酸 ,分子质量 7 76 9ku。小鼠ivLD50 为 0 75 6mg·kg-1。对大鼠离体心脏CTX 13可使冠脉阻力增高 ,心脏收缩幅度减小 ,停于收缩期。尼群地平 (Nit)能取消CTX 13升高冠脉阻力作用 ,同时使CTX 13的负性肌力作用逆转为正性肌力作用。CTX 13可诱发猪离体冠脉环呈剂量依赖性收缩 ,其EC50 为 2 6 0mg·L-1,Nit 0 0 5 μmol·L-1使其量效曲线平行右移 ,EC50 提高到 36 0mg·L-1。但对于大鼠离体乳头肌Nit 0 83μmol·L-1对CTX 13所致心脏毒性无明显对抗作用。在整体实验中Ni0 3mg·kg-1可使大鼠ivCTX 13的最小致死量 (MLD)从 (44 4 7± 2 8 5 ) μg·kg-1提高到(5 41 2± 2 3 2 ) μg·kg-1。结论　CTX 13的心脏毒性作用除其直接心脏毒作用外 ,尚与其收缩冠脉作用有关     

门冬氨酸钾致突变作用的研究

目的研究门冬氨酸钾的致突变作用。方法应用小鼠微核试验、哺乳动物培养细胞染色体试验 ,观察门冬氨酸钾对细胞的诱变性。结果门冬氨酸钾的小鼠体内微核试验、CHL细胞染色体畸变试验均呈阴性结果 ,门冬氨酸钾无诱变性。结论门冬氨酸钾无致突变作用     

长链蝎神经毒素在小鼠体内的组织分布(英文)

用 Iodogen方法对马氏钳蝎的两种神经毒素Bm K 和 Bm K IT2进行了 12 5I放射性标记 .分别将标记产物通过腹腔或静脉注射到小鼠体内 .结果发现肾脏的放射性含量最高 ,血液 ,肝脏 ,脾 ,肺 ,膈肌 ,心脏和大腿肌肉等组织器官中或多或少的含有放射性 ,而在脑中几乎检测不到放射性。结果提示长链蝎神经毒素主要通过肾脏排泄 ,且难以穿过血脑屏障 .     

白眉蝮蛇毒精氨酸酯酶Ames试验(英文)

目的　研究白眉蝮蛇 (Agkistrodonhalysussuriensis)毒中精氨酸酯酶的致突变作用。 方法　用鼠伤寒沙门细菌营养缺陷型突变株TA97,TA98,TA10 0和TA10 2 ,采用平皿掺入法进行Ames试验 ,将实验分为加和不加代谢激活系统S92组平行试验。精氨酸酯酶设 6个浓度 :10 .0× 10 -3 ,5 .0× 10 -3 ,2 .5× 10 -3 ,1.2 5× 10 -3 ,0 .6 2 5× 10 -3 和 0 .312× 10 -3 U/mL。结果　加和不加代谢激活系统S9两种条件下 ,精氨酸酯酶不诱发鼠伤寒沙门细菌营养缺陷型突株的回复突变。Ames试验结果为阴性。结论　从致突变角度考虑 ,精氨酸酯酶在高于“蝮蛇清栓酶”(主要成分为精氨酸酯酶 )临床治疗剂量约 10 0 0倍的条件下仍然较安全。