母鼠低剂量接触甲基汞所致仔鼠学习能力及脑海马超微结构的变化

[目的]研究ICR母鼠饮水暴露低剂量氯化甲基汞(MeHgCl)后,仔鼠脑组织的病理组织学变化和脑海马超微结构变化,评价低剂量饮水暴露甲基汞的安全性。[方法]ICR孕鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组各8只,各组于怀孕第6天起,分别自由饮用蒸馏水和氯化甲基汞含量为0.01、0.1mg/L的蒸馏水,直至哺乳期结束。测试各组仔鼠学习能力,观察仔鼠脑组织病理组织学变化及脑海马超微结构变化。[结果]在对仔鼠进行学习能力测试的水迷宫实验中,对照组、低剂量组和高剂量组成功率分别为81.67%、59.09%和70.00%,低剂量组和高剂量组成功率显著低于对照组(P<0.05)。低剂量组和高剂量组仔鼠脑组织有明显的病理学改变,随着甲基汞染毒剂量的增加,海马区大锥体细胞、大脑神经元和小脑浦肯野细胞嗜酸性增强。电镜结果显示,低剂量和高剂量组脑海马神经细胞有变性,严重者呈暗细胞表现。[结论]实验剂量甲基汞可使仔鼠脑组织发生病理组织学改变,脑海马区超微结构改变,实验剂量甲基汞对于仔代是不安全的。     

二氧化硫对大鼠海马神经元电活动和学习记忆能力的影响

目的从神经电生理学的角度揭示SO2对中枢神经系统的毒性作用。方法采用SO2动式吸入染毒技术使雄性SD大鼠染毒7天,每天6h,SO2的染毒剂量为28mg/m3。用电生理学玻璃微电极细胞外记录的方法,在体观察SO2吸入对大鼠海马CAI区神经元自发放电活动的影响,并通过建立被动回避行为条件反射对大鼠的学习和记忆能力进行测试。结果SO2染毒使大鼠海马CAI区神经元自发放电的时程较对照组显著延长(P<0.001);神经元的平均放电频率显著降低,主要表现为中频放电神经元比例明显下降(P<0.05),而低频放电神经元比例升高;SO2染毒大鼠的学习记忆能力显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论SO2具有类似神经毒物作用,可显著抑制大鼠海马CAI区神经元的兴奋性,并干扰和影响学习记忆功能。     

噪声对大鼠空间学习记忆及海马神经元形态学的影响

[目的]拟观察噪声对大鼠学习记忆及海马神经元的影响,探讨噪声对大鼠学习记忆的影响机制。[方法]将32只Wistar大鼠,随机分为噪声组和对照组,噪声组在80dB(A)噪声下持续暴露1个月,用Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力。HE染色和透射电镜观察大鼠海马神经元形态和超微结构。[结果]Morris水迷宫定航实验中,噪声组大鼠寻找平台的平均逃避潜伏期均较对照组明显延长(P﹤0.05);空间搜索实验中噪声组大鼠第一次寻找原平台的潜伏期、穿越原平台的次数、时间百分比以及距离百分比,均较对照组明显降低(P﹤0.01)。HE染色光镜下观察发现噪声组大鼠海马组织无明显异常,透射电镜下观察发现噪声组大鼠海马神经元超微结构也未见明显异常。[结论]噪声暴露对大鼠海马神经元无器质性损害。噪声暴露下大鼠学习记忆能力的损害可能只与海马神经元功能改变有关。     

氯化甲基汞对小鼠卵巢细胞周期的影响

为探讨氯化甲基汞对雌性动物生殖系统的影响，采用氯化甲基汞给雌性昆明种小鼠急性染毒，剂量为１／２００ ＬＤ５０，１／２０ ＬＤ５０和１／２ ＬＤ５０，染毒后采用ＦＡＣ－Ｓｃａｎ流式细胞仪技术分析了氯化甲基汞对卵巢细胞周期的影响。结果表明：１／２０ ＬＤ５０组和１／２ ＬＤ５０组中处于Ｇ０／Ｇ１期时相的细胞百分数高于对照组（Ｐ〈０．０５），而１／２－ ＬＤ５０组和１／２ ＬＤ５０组的Ｓ期时相的细胞的百     

十溴联苯醚对大鼠学习记忆及海马神经元影响

目的 探讨十溴联苯醚(BDE-209)对成年大鼠学习记忆及海马神经元的影响.方法 将48只SD成年大鼠随机分为溶剂对照组、BDE-209低、中、高(250,500,1 000 mg/kg)剂量组,每天灌胃1次,持续30 d;用Morris水迷宫测试学习记忆,电镜观察海马神经元结构.结果 对照组和BDE-209低、中、高剂量组穿越平台次数分别为(12.63±2.48)、(9.90±1.75)、(7.26±1.48)、(4.72±1.76)次,在平台象限停留时间分别为(52.92±7.78)、(31.89±5.97)、(24.82±6.65)、(18.25±5.23)s,差异具有统计学意义(P＜0.05),平均逃避潜伏期随染毒剂量的增加明显延长(P＜0.05);与对照组比较,BDE-209染毒组海马神经元均有不同程度损害,线粒体肿胀,粗面内质网和高尔基复合体扩张、细胞核染色质异常聚集及均匀化,神经元突触结构不清楚.结论:BDE-209可致成年大鼠海马神经元结构及其功能损伤,降低学习记忆能力.     

十溴联苯醚对小鼠学习记忆能力及海马NOS和NO的影响

目的探讨十溴联苯醚(PBDE-209)暴露对小鼠学习记忆能力的影响和可能机制。方法将18只4周龄雄性ICR小鼠随机分成3组,每组6只。分为溶剂对照组(DMSO组),低剂量染毒组(300 mg/kg),高剂量染毒组(500 mg/kg),每周染毒6次,连续染毒6周。染毒第6周利用Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力(期间继续给药),染毒6周结束后处死老鼠,取一侧海马进行HE染色观察海马组织形态学改变,另一侧海马测定组织NOS活性和NO含量。结果小鼠海马组织的病理切片结果显示:染毒组海马组织CA1区细胞排列紊乱,高剂量染毒组的细胞紊乱更明显。Morris水迷宫实验结果显示,高剂量染毒组和低剂量染毒组小鼠找到平台的平均潜伏期分别为(64.322±4.419)s和(50.912±4.419)s,长于对照组的(23.183±4.419)s(P<0.05)。探索实验结果显示,高剂量染毒组穿越平台次数为(1.83±0.753)次,明显少于对照组的(3.67±0.516)次(P<0.05)。高剂量染毒组和低剂量染毒组小鼠海马NOS活性分别是(1.209±0.241)U/mg prot和(2.198±0.192)U/mg prot,低于对照组的(3.551±0.347)U/mg prot;NO含量分别为(0.099±0.012)μmol/mg prot和(0.325±0.027)μmol/mg prot,低于对照组的(0.544±0.020)μmol/mg prot(P<0.05)。结论 PBDE-209暴露可能抑制海马中NOS活性及NO含量,并影响小鼠学习记忆能力,其间关系值得进一步探讨。     

归脾丸溶液对苯染毒小鼠学习记忆及海马形态学的影响

[目的]观察归脾丸溶液对苯中毒小鼠记忆功能的影响,初步揭示归脾丸溶液改善苯中毒小鼠记忆功能的机理。[方法]72只昆明小鼠,随机分为空白对照组、单纯染毒组、西药组、归脾丸溶液低（2 mg/kg.d）、中（4 mg/kg.d）、高（8 mg/kg.d）剂量组共6组,每组12只;西药组服用利血生。用Morris水迷宫系统进行行为学测定,并进行海马神经细胞形态学检查和外周血检测。[结果]与染毒组相比,归脾丸溶液高、中、低剂量组水迷宫定位导航寻找平台时间减少,差异均有统计学意义（P〈0.01）;归脾丸溶液高剂量组的水迷宫空间搜索跨台次数、目标区域游泳时间增加,差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。海马组织中神经细胞形态及数量有明显差异。与西药组相比,归脾丸溶液高、中剂量组的血红蛋白明显升高,差异均有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。[结论]归脾丸溶液可改善苯中毒小鼠的记忆功能。归脾丸溶液改善记忆功能可能与改善造血及海马神经元功能有关。     

全氟辛烷磺酸亚慢性暴露对小鼠学习记忆及海马神经元的影响

目的 探讨全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulphonate,PFOs)暴露对小鼠的学习记忆能力及海马神经元的影响.方法 将32只健康清洁级8周龄雄性ICR小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(含2％吐温-80的生理盐水)组和5、20、40 mg/kg PFOS暴露组,每组8只.采用腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每周3次,连续染毒6周.采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习、记忆能力,并进行海马神经元形态学的定量分析.结果 训练第1天20 mg/kgPFOS暴露组小鼠的逃避潜伏期长于对照组(P＜0.05),而40 mg/kg PFOS暴露组小鼠训练第1、2天和第5天的逃避潜伏期均较对照组延长(P＜0.05,P＜0.01).与对照组相比,5、20 mg/kg PFOS暴露组小鼠海马CA1和CA3区神经元密度、细胞面积和核黑度差异无统计学意义(P＞0.05);而40 mg/kg PFOS暴露组小鼠海马CA1区神经元密度下降,胞面积减小,核黑度值增大,且CA3区神经元密度也下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 一定剂量的PFOS暴露可使小鼠学习记忆能力减弱,可能与海马区神经元损伤有关.     

氯化甲基汞对雄性小鼠的生殖毒作用

以１／５０００ＬＤ５０、１／１０００ＬＤ５０和１／１００ＬＤ５０的氯化甲基汞剂量分别给雄性小白鼠经口染毒７５天后，测定睾丸组织中的ＬＰＯ和ＬＤＨ－ｘ。结果表明，实验组的ＬＰＯ高于对照组；１／１０００ＬＤ５０和１／１００ＬＤ５０组的ＬＤＨ－Ｘ均低于对照组和１／５０００ＬＤ５０组；睾丸脏器系数各组间无差别。同时探讨了甲基汞造成雄性动物生殖能力下降的可能机制。     

胚胎期暴露于甲基汞大鼠的迷宫测试

为研究胚胎期甲基汞暴露对大鼠迷宫学习与记忆能力的影响 ,用不同剂量甲基汞 [0、0 .0 1、0 .0 5和 2 .0 0 mg/ (kg· d) ]于大鼠孕 6～ 9天连续灌胃染毒 ,仔鼠出生 7周时进行 Y型迷宫测试。学习记忆成绩以平均错误次数、到达安全区平均时间和主动回避率表示。整个实验采用双盲法。结果与对照组相比 ,各暴露组大鼠的平均错误次数和到达安全区平均时间显著增高 ,主动回避率显著降低 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;各组大鼠学习记忆能力无性别差异。提示甲基汞可通过胎盘屏障和乳汁进入仔鼠体内 ,影响仔鼠神经系统的发育 ,使其学习记忆能力受到明显损害     

发育期铅暴露对仔鼠海马Homer表达和学习记忆影响

目的 探讨发育期慢性低浓度铅暴露对仔鼠海马Homer1b/c蛋白表达变化与学习记忆能力的关系。方法 30只孕鼠按体重随机分为3组,分别给予双蒸水(对照组)、0.05%、0.20%醋酸铅饮水(低、高剂量染铅组),断乳后仔鼠自行饮用含铅水至生后28 d,生后56 d采用跳台试验测试仔鼠学习记忆能力;Western blot法检测仔鼠生后7、14、21、28 d海马Homer1b/c蛋白表达;血铅和海马脑铅含量用原子吸收光谱法测定。结果 对照组、0.05%、0.20%醋酸铅组仔鼠跳台试验逃离潜伏期分别为(25.71±4.56)、(39.67±5.18)、(64.82±9.73) s,停留潜伏期分别为(234.89±25.85)、(147.15±19.26)、(83.56±14.52)s,与对照组比较,各剂量染铅组仔鼠逃离潜伏期明显延长、停留潜伏期明显缩短(P<0.05);与对照组比较,生后7、14、21、28 d时,0.05%和0.20%醋酸铅组仔鼠海马Homer1b/c蛋白表达分别为(0.607±0.022)、(0.825±0.054)、(0.583±0.015)、(0.557±0.011)和(0.540±0.021)、(0.574±0.018)、(0.471±0.009)、(0.412±0.007)明显降低(P<0.05)。结论 慢性铅暴露可降低仔鼠被动回避反应的学习和记忆能力,其机制可能与染铅所致仔鼠海马Homer1b/c蛋白表达下降有关。     

出生前后甲基汞暴露对幼鼠海马和小脑结构的影响

目的评价出生前后低水平甲基汞暴露对幼鼠海马和小脑结构的影响。方法将SD孕鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组。Ⅰ组为对照组,自由饮用蒸馏水;Ⅱ、Ⅲ组自孕7天至哺乳期末饮水中分别加入0·1和1mg/(kg·d)甲基汞。观察各组幼鼠早期生理发育指标,21天时取其海马和小脑组织观察结构变化情况。结果各组幼鼠无明显形态和早期生理发育指标的异常改变,21日龄时汞暴露组幼鼠体重低于对照组。光镜下Ⅲ组海马和小脑有个别神经细胞固缩改变,海马结构排列紊乱,Ⅱ组无明显病理改变。免疫组化方法分析阳性表达率,海马NFⅢ组和Ⅱ组低于Ⅰ组(F=7·94,P<0·01);海马GFAPⅢ组和Ⅱ组高于Ⅰ组(F=10·10,P<0·01);小脑NFⅢ组小于Ⅰ组和Ⅱ组(F=6·85,P<0·05);小脑GFAPⅢ组大于Ⅰ组和Ⅱ组(F=4·98,P<0·05)。电镜下观察到Ⅱ组和Ⅲ组均有超微结构改变,如神经元核不规则、胞体固缩、线粒体变性、突起溶解等。结论出生前后低水平甲基汞暴露影响了小脑和海马的超微结构和神经细胞表达。     

铅暴露对发育期小鼠学习记忆能力影响

目的 探讨不同铅暴露水平对发育期小鼠学习记忆能力的影响及脑一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(NO S)与小鼠学习记忆能力的关系.方法 采用自由饮水(含醋酸铅)的方式对刚断乳小鼠染毒,染毒剂量为0.3,1和3g/L,每组30只.开始染铅记为第0d,分别在第7,14,21d进行血铅、小鼠Morris水迷宫试验及小鼠脑铅浓度、脑NO含量和脑总NO S活性的测定.结果 与正常对照组比较,染毒组小鼠血铅和脑铅浓度增加(P<0.05);迷宫实验中,第21d,正常组及染铅0.3,1,3g/L组平均潜伏期分别为(33.8±7.8),(73.0±12.1),(85.9±12.7),(101.3±19.7)s,各铅暴露组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);正常组,0.3,1,3g/L组脑NO含量分别为(10.27±4.28),(6.07±1.95),(5.63±2.03)和(3.74±1.89)μmol/(g.prot),各铅暴露组与对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);正常组,0.3,1,3g/L组脑总NO S活性分别为(6.22±2.42),(4.36±1.76),(2.84±1.42)和(3.25±1.76)U/(m g.prot),各铅暴露组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);第21d,小鼠脑NO含量和脑总NO S与血铅、脑铅浓度及M orris水迷宫逃避潜伏期均呈负相关(r=-0.540,P=0.000;r=-0.520,P=0.000;r=0.755,P=0.000;r=0.709,P=0.000).结论 铅暴露对发育期小鼠学习记忆能力的影响与铅暴露导致的脑NO S活性降低和NO含量减少密切相关,且影响程度与铅的暴露时间及浓度有关.     

妊娠期母体低水平铅暴露对大鼠子代学习记忆能力的影响

目的探讨大鼠妊娠期间低水平铅暴露对其子代学习记忆能力的影响.方法孕鼠随机分为4组,3个处理组自怀孕第1天起分别给予醋酸铅含量为125、250和500 mg/L的饮水,对照组给予不含铅的双重蒸馏水,采用流动注射氢化物发生-原子吸收光谱法测定仔鼠血铅、脑海马组织铅含量,以避暗穿梭箱试验、Morris水迷宫试验测定仔鼠的学习记忆能力.结果各处理组的1、21 d龄仔鼠血铅、海马组织铅水平明显高于对照组仔鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）,至60 d龄,差异无统计学意义（P＞0.05）;Morris水迷宫试验显示,各处理组21、60 d龄仔鼠连续4 d训练期间,第2、3、4天潜伏期均高于同期对照组仔鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）;避暗穿梭箱试验显示,各处理组21、60 d龄仔鼠连续5 d训练期间,主动回避次数低于同期对照组仔鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）;主动回避潜伏期、被动回避潜伏期高于同期对照组仔鼠,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论母体妊娠期低水平铅暴露可以影响仔鼠的空间学习记忆能力,且影响至少可持续至仔鼠成熟期.     

铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸受体亚单位表达的影响

目的探讨铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期各阶段海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)亚单位表达的影响。方法将24只清洁级妊娠昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天起开始饮用含铅水,仔鼠于出生后(PND)21天断乳,继续饮含铅水至实验结束。水迷宫测定PND 40仔鼠学习记忆能力;并分别于PND10、PND20和PND40,测定海马组织中NMDA各受体亚单位(NR1、NR2A、NR2B)蛋白和m RNA的表达水平。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平均较低,除PND 10的0.5 g/L乙酸铅暴露组外,差异有统计学意义(P0.05);且随着乙酸铅暴露剂量的升高,仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平呈下降趋势。与对照组比较,PND 10时各剂量乙酸铅暴露组及PND 20时1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而PND 40时各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均无明显改变。且随着乙酸铅暴露剂量的升高,PND 10、PND 20时仔鼠海马组织中NR2A蛋白的表达水平均呈下降趋势。各剂量乙酸铅暴露不同发育阶段仔鼠海马组织中NR2B m RNA的表达水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论发育早期铅暴露可损伤仔鼠的学习记忆能力,并且抑制仔鼠海马组织中NMDA受体各亚单位的表达。     

电磁辐射对大鼠海马超微结构及凋亡因子影响

目的 探讨2 000 μW/cm2电磁辐射对大鼠海马神经元超微结构及凋亡相关因子表达影响.方法 实验分空白对照组,假辐射组,1、2、3 h/d辐射组,采用2 000 μW/cm2微波对大鼠头部进行辐射,透射电镜观察海马超微结构改变,免疫组织化学法检测海马组织Bcl-2、Bax表达,蛋白免疫印迹(western-blot)法检测海马组织Caspase-3表达.结果 辐射组神经元细胞核仁消失,染色质凝集,核内出现透明区等早期凋亡征象,突触界面结构改变;1、2、3h/d辐射组Bax表达分别为(0.059 8±0.005 1)、(0.066 3±0.006 1)、(0.086 9±0.007 3),Caspase-3表达分别为(0.56±0.04)、(0.74±0.05)、(0.94±0.03),高于对照组(P＜0.05);1、2、3 h/d辐射组Bcl-2表达分别为(0.056 9±0.008 7)、(0.052 4±0.007 8)、(0.042 3±0.001 4),低于对照组(P＜0.05).结论 电磁辐射可引起海马神经元细胞损伤和凋亡,其机制与凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3表达改变有关.     

铅对仔鼠学习记忆及海马中CTGF表达影响

目的探讨母体铅染毒对其仔鼠学习记忆海马组织中结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达的影响,为进一步研究铅的神经毒作用机制提供科学依据。方法采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量为0.3,1,3g/L,每组10只,用石墨炉原子吸收光谱仪测定仔鼠出生后7,14,21d时血液和海马组织中铅含量。用RT-PCR和免疫组化方法分别测定21d不同剂量组仔鼠海马组织中CTGF mRNA和蛋白的表达。结果各剂量染铅组血染、海马组织中铅含量与对照组比较,明显升高(P均<0.05),血液和海马组织的铅含量随着日龄的变化有一定的规律性;迷宫实验中,对照组、0.3,1,3g/L组平均潜伏期分别为(39.13±6.12)(43.22±9.86),(50.85±12.35),(50.85±12.35)s,与对照组比较,0.3g/L组差异无统计学意义(P>0.05),与1,3g/L剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05);在对照组、0.3,1,3g/L组仔鼠海马组织中,CTGF mRNA的相对表达量分别为(0.354±0.603),(0.945±0.522),(1.223±0.279),(1.612±0.136);CTGF蛋白表达的灰度值分别为(126.10±32.11),(186.31±36.17),(220.94±31.27),(286.21±31.24);与对照组比,0.3,1,3g/L组海马中(CTGF mRNA和蛋白表达明显升高(P均>0.05)。结论孕哺期母体铅暴露可使铅在仔鼠体内人蓄积,引起仔鼠学习记忆力功能损害;铅所引起的神经毒性可能通过铅诱导CTGF mRNA和蛋白的高表达,造成神经系统的损害。     

妊娠压力对大鼠子代早期空间学习记忆能力的影响

【目的】探索妊娠期精神压力对大鼠子代早期空间学习、记忆能力的影响。【方法】实验采取产前束缚压力,建立妊娠期大鼠精神压力暴露模型。然后对子代进行Morris水迷宫测试,分析妊娠期压力对子代早期学习和记忆的影响及性别间的差异,同时检测实验前、后子鼠的血清肾上腺酮的变化。【结果】①在隐蔽平台试验中,对照组的平均潜伏期较实验组短,但差异无显著性(F=0.599,P>0.05)。②在保持力试验中,对照组在原平台所在象限逗留的时间大于实验组,差异有显著性(F=4.588,P<0.05)。③子代血清肾上腺酮的测定结果表明:水迷宫测试前,实验组和对照组相比,差异无显著性(F=0.169,P>0.05);实验后,实验组血清肾上腺酮比对照组高,差异具有显著性(F=6.098,P<0.05)。【结论】①妊娠压力可导致子代学习,记忆能力的改变;②妊娠压力造成子代在应激情况下血清肾上腺酮的过度分泌。③妊娠压力对子代的影响没有明显性别差异。