结直肠癌患者microRNA-101、microRNA-182表达与病理特征及预后的关系

目的 探讨结直肠癌组织中microRNA-101（miR-101）、microRNA-182（miR-182）表达与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2015年4月—2018年1月青海省人民医院收治的83例拟行结直肠癌根治术患者,术后随访5年。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测所有患者癌组织及癌旁组织miR-101、miR-182的表达;分析不同临床病理特征结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182的表达;采用多因素Cox比例风险模型分析影响结直肠癌患者术后复发转移的因素;分析结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182表达与术后复发转移的关系。结果 癌组织miR-101 mRNA相对表达量低于癌旁组织,miR-182 mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）;低分化、病理分期Ⅲ期、有浆膜浸润、有淋巴结转移的结直肠癌患者癌组织miR-101 mRNA相对表达量低于中高分化、病理分期Ⅱ期、无浆膜浸润、无淋巴结转移者（P <0.05）,miR-182 mRNA相对表达量的比较结果则相反（P <0.05）;多因素Cox比例风险模型分析结果显示,病理分期［R^R =7.294（95% CI：3.001,17.726）、分化程度［R^R =5.150（95% CI：2.119,12.516）］、miR-101［R^R =4.477（95% CI：1.842,10.881）］、miR-182［R^R =4.495（95% CI：1.850,10.925）］是影响结直肠癌患者术后复发转移的因素（P <0.05）;miR-101高表达患者的无病生存率高于低表达患者（P <0.05）,miR-182低表达患者的无病生存率高于高表达患者（P <0.05）。结论 结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182的表达与临床病理特征及预后有关,miR-101低表达、miR-182高表达患者治疗后复发转移风险高。     

结肠癌组织microRNA-223、FBXW7的表达及与其临床病理参数和预后的关系

目的 研究结肠癌组织中microRNA-223（miR-223）、FBXW7的表达及其与临床病理参数和预后的关系。方法 收集2015年1月—2017年4月钦州市第一人民医院146例经手术切除的结肠癌组织和癌旁组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测结肠癌组织中miR-223、FBXW7表达。通过在线网站预测miR-223与FBXW7存在结合位点。Pearson法分析两者表达的相关性及其与临床病理参数的关系。根据结肠癌组织中miR-223、FBXW7表达的均值分为miR-223高表达组与miR-223低表达组，FBXW7高表达组与FBXW7低表达组。用Kaplan-Meier法绘制不同miR-223、FBXW7表达结肠癌患者的生存曲线。多因素Cox回归分析结肠癌患者预后的影响因素。结果 结肠癌组织miR-223 mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05），FBXW7 mRNA相对表达量低于癌旁组织（P <0.05）。病理分期Ⅲ期、有淋巴结转移结肠癌组织miR-223 mRNA相对表达量高于Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移（P <0.05）；病理分期Ⅲ期、有淋巴结转移结肠癌组织FBXW7 mRNA相对表达量低于Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移（P <0.05）。不同性别、年龄、肿瘤大小、分化程度及有无侵犯浆膜结肠癌组织miR-223、FBXW7 mRNA相对表达量比较，差异无统计学意义（P >0.05）。Pearson相关系数分析显示，结肠癌组织miR-223表达与FBXW7表达呈负相关（r =-0.679，P <0.05）。术后随访8～60个月，随访期间死亡35例，总生存率为76.03％（111/146）。miR-223高表达组总生存率低于miR-223低表达组（P <0.05）。FBXW7高表达组总生存率高于FBXW7低表达组（P <0.05）。单因素Cox回归分析结果显示，侵犯浆膜［H^R =1.454（95% CI：1.086，1.947）］、病理分期Ⅲ期［H^R =1.744（95% CI：1.070，2.840）］、淋巴结转移［H^R =2.896（95% CI：1.114，7.531）］、miR-223 ≥ 4.76［HR =2.196（95% CI：1.085，4.445）］为结肠癌患者预后的危险因素（P <0.05），FBXW7 ≥ 1.23［H^R =0.388（95% CI：0.172，0.875）］为保护因素（P <0.05）。多因素Cox回归分析结果显示，侵犯浆膜［H^R =1.490（95% CI：1.154，1.924）］、病理分期Ⅲ期［H^R =1.979（95% CI：1.132，3.460）］、淋巴结转移［H^R =2.401（95% CI：1.015，5.677）］、miR-223≥ 4.76［H^R =2.140（95% CI：1.063，4.309）］为结肠癌患者预后的危险因素（P <0.05），FBXW7 ≥1.23［H^R =0.625（95% CI：0.475，0.823）］为保护因素（P <0.05）。结论 结肠癌组织miR-223高表达、FBXW7低表达与结肠癌患者病理分期、淋巴结转移及预后有关。     

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b（miR-196b）、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组（P <0.05）。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组（P <0.05）,IGFBP-3阳性表达率低于稳定组（P <0.05）。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）,IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织（P <0.05）。多因素逐步Logistic回归分析结果显示：临床分期［O^R=3.684（95% CI：1.259,10.778）］、术前淋巴结转移［O^R=3.557（95% CI：1.216,10.408）］、癌组织miR-196b表达［O^R=3.979（95% CI：1.359,11.641）］是NSCLC患者预后的危险因素（P <0.05）,癌组织IGFBP-3表达阳性［O^R=0.220（95% CI：0.075,0.642）］是NSCLC患者预后的保护因素（P <0.05）。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%（95% CI：0.512,0.797）、60.00%（95% CI：0.496,0.781）、87.50%（95% CI：0.725,0.963）,特异性分别为69.74%（95% CI：0.534,0.825）、76.32%（95% CI：0.603,0.892）、72.37%（95% CI：0.576,0.861）,曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组（P <0.05）。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组（P <0.05）。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。     

MicroRNA-30a、microRNA-181a在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义

目的 检测原发免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血单个核细胞（PBMC）microRNA-30a（miR-30a）、microRNA-181a（miR-181a）的表达,并分析其临床意义。方法 选取2020年1月—2020年12月昆明医科大学第一附属医院收治的ITP患者48例作为ITP组,另取同期该院40例化疗后骨髓抑制血小板减少患者作为对照组,体检健康者45例作为健康组。检测3组血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中miR-30a、miR-181a的表达,分析miR-30a、miR-181a与血小板参数的相关性,以及对ITP的诊断价值。结果 ITP组miR-30a、miR-181a相对表达量高于对照组和健康组（P <0.05）;ITP组PLT、MPV低于对照组和健康组（P <0.05）。miR-30a与PLT、MPV呈负相关（r =-0.278和-0.247,P <0.05）,与出血分级呈正相关（r =0.221,P <0.05）;miR-181a与PLT、MPV呈负相关（r =-0.224和-0.301,P <0.05）,与出血分级呈正相关（r =0.236,P <0.05）。miR-30a［O^R=1.876（95% CI：1.230,6.336）］和miR-181a［O^R=2.665（95% CI：1.365,8.558）］升高是发生ITP的独立危险因素（P <0.05）。以miR-30a、miR-181a及其回归系数建立临床模型的多元回归方程Logistic（P）=-4.115+1.305×MPV-1.258×miR-30a-1.664×miR-181a。该临床模型诊断ITP的标准误为0.055,AUC为0.889（95% CI：0.662,0.956）,敏感性为75.25%（95% CI：1.123,2.084）、特异性为88.24%（95% CI：1.672,2.583）。结论 miR-30a、miR-181a与ITP发生相关,通过miR-30a、miR-181a建立个体化临床模型可准确判断ITP的发生,且具有较高的临床实用价值。     

磁共振成像联合血清microRNA-221对前列腺癌的诊断价值

目的 探讨磁共振成像（MRI）结合血清microRNA-221-221（miR-221）检测在前列腺癌诊断中的价值。方法 回顾性分析2019年5月—2023年1月襄阳市中心医院收治的103例疑似前列腺癌患者的临床资料，将前列腺穿刺病理结果作为金标准。所有患者行磁共振弥散加权成像（MRI-DWI）、动态增强磁共振成像（MRI-DCE）及血清miR-221检测，分析MRI参数、miR-221诊断前列腺癌的价值。结果 穿刺活检病理诊断结果显示，103例前列腺癌疑似患者中，73例诊断为前列腺癌。前列腺癌患者表现弥散系数（ADC）值低于非前列腺癌患者（P <0.05）。前列腺癌患者容积转运常数（K_trans）高于非前列腺癌患者（P <0.05），前列腺癌与非前列腺癌患者的速率常数（K_ep）、细胞外间隙对比剂容积分数（V_e）比较，差异均无统计学意义（P >0.05）。前列腺癌患者miR-221相对表达量高于非前列腺癌患者（P <0.05）。ROC曲线分析结果显示，ADC、K_trans、miR-221及3者联合诊断前列腺癌的敏感性分别为72.60%（95% CI：0.607，0.821）、69.86%（95% CI：0.578，0.798）、73.97%（95% CI：0.622，0.832）、82.19%（95% CI：0.711，0.898），特异性分别为80.00%（95% CI：0.609，0.916）、73.33%（95% CI：0.538，0.870）、70.00%（95% CI：0.504，0.846）、86.67%（95% CI：0.684，0.956），AUC分别为0.756（95% CI：0.651，0.860）、0.741（95% CI：0.633，0.848）、0.739（95% CI：0.631，0.846）、0.907（95% CI：0.842，0.972）。结论 ADC、K_trans、miR-221联合诊断前列腺癌效能较高，3者联合诊断前列腺癌可提供更加精确可靠的量化参数。     

mCTA侧支循环评分及血清microRNA-134、VEGF、bFGF水平预测AIS大脑中动脉闭塞患者预后的价值

目的 探究多时相计算机断层扫描血管成像（mCTA）侧支循环评分及血清microRNA-134（miR-134）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）水平预测急性缺血性脑卒中（AIS）大脑中动脉闭塞患者预后的价值。方法 选取2020年2月—2023年2月在江苏大学附属武进医院住院治疗的AIS大脑中动脉闭塞患者108例。检测患者治疗期间的mCTA侧支循环评分及血清miR-134、VEGF、bFGF水平，并进行随访。根据患者出院后3个月的改良Rankin量表评分，分为预后良好组（改良Rankin量表评分≤ 2分，47例）、预后不良组（改良Rankin量表评分> 2分，61例），对可能影响患者预后的因素进行分析，并绘制ROC曲线分析其诊断价值。结果 预后不良组最终梗死体积大于预后良好组（P <0.05），mCTA侧支循环评分低于预后良好组（P <0.05）；预后不良组miR-134相对表达量高于预后良好组（P <0.05），VEGF、bFGF水平均低于预后良好组（P <0.05）。预后不良组年龄、低密度脂蛋白水平高于预后良好组（P <0.05）。多因素一般Logistic回归分析结果显示：mCTA侧支循环评分［O^R=0.804（95% CI：0.729，0.974）］、VEGF［O^R=0.618（95% CI：0.397，0.963）］、bFGF［O^R=0.608（95% CI：0.402，0.919）］为AIS大脑中动脉闭塞患者预后良好的保护性因素（P <0.05）；miR-134［O^R=1.941（95% CI：1.802，3.480）］、低密度脂蛋白［O^R=1.349（95% CI：1.051，1.730）］是AIS大脑中动脉闭塞患者预后不良的危险因素（P <0.05）。ROC曲线分析结果表明，mCTA侧支循环评分、miR-134、VEGF、bFGF预测AIS大脑中动脉闭塞患者预后不良的曲线下面积分别为0.843、0.946、0.937和0.892，敏感性分别为7.66%（95% CI：0.695，0.837）、9.36%（95% CI：0.900，0.972）、8.72%（95% CI：0.823，0.921）、7.23%（95% CI：0.661，0.785），特异性分别为83.6%（95% CI：0.770，0.902）、82.0%（95% CI：0.770，0.870）、86.9%（95% CI：0.818，0.920）、93.4%（95% CI：0.896，0.972）。结论 预后不良患者最终梗死体积较大，mCTA侧支循环评分较低，血清miR-134、VEGF和bFGF水平较低。mCTA侧支循环评分、血清miR-134、VEGF、bFGF水平对AIS大脑中动脉闭塞患者预后不良有较好的预测价值，可作为预后评估的指标。     

缺血缺氧性脑病新生儿microRNA-21表达及临床价值

目的 探讨新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）患儿血清microRNA-21（miR-21）表达水平的变化，以及恢复期miR-21与神经行为检测（NBNA）评分的相关性。方法 选取2018年3月—2019年6月西安医学院第二附属医院56例HIE患儿（HIE组）及同期60例正常新生儿（对照组），检测患儿出生后24 h血清miR-21表达水平的差异，进行统计学检验并绘制ROC曲线。检测HIE患儿接受常规治疗7 d后miR-21表达水平及治疗30 d后的NBNA评分，并进行相关性分析。结果 HIE组miR-21表达水平较对照组升高（P <0.05）；血清miR-21对缺氧缺血性脑病的AUC值为0.758（95% CI：67.32，85.78），敏感性为89.47%（95% CI：0.972，2.641），特异性为92.83%（95% CI：0.953，2.487）；HIE患儿治疗7 d后血浆miR-21表达水平与治疗30 d后的NBNA评分呈负相关（r =-0.746，P <0.05）。结论 miR-21对HIE具有早期诊断意义，miR-21对HIE的病情进展具有早期预测效果，为HIE的早期诊断和病情进展提供新的依据和生物学标志物。     

糖尿病患者血清microRNA-152表达水平与血脂代谢、胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病患者血清microRNA-152（miR-152）表达水平与血脂代谢、胰岛素抵抗的相关性。方法 选取2018年1月—2018年11月在攀枝花市中西医结合医院就诊的血糖异常患者109例,分为2型糖尿病（T2DM）前期组（Pre-T2DM组）45例和T2DM组64例;另取同期该院门诊部健康体检者70例为对照组。检测血清空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹血糖（FBG）水平,评估稳态胰岛素评价指数（HOMA-IR）与胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）;并分析miR-152与血脂水平及FBG、FINS、HOMA-IR、HOMA-β的相关性。结果 与对照组相比,Pre-T2DM组、T2DM组患者血清miR-152、FBG、FINS、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR较高（P <0.05）,HDL-C、HOMA-β较低（P <0.05）;与Pre-T2DM组相比,T2DM组患者血清miR-152、FBG、FINS、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR较高（P <0.05）,HDL-C、HOMA-β较低（P <0.05）。T2DM患者miR-152与TG、TC、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关（r =0.844、0.755、0.833、0.528、0.576和0.635,均P <0.05）,与HDL-C、HOMA-β呈负相关（r =-0.655和-0.603,均P <0.05）。多因素一般Logistic回归分析结果显示,血清FBG ［R=2.305（95% CI：1.369,3.882）］和miR-152 ［R =2.831（95% CI：1.736,4.618）］升高是影响胰岛素抵抗的危险因素。结论 T2DM患者血清miR-152上调,其可能通过调节血脂代谢影响T2DM病情发展。     

多囊卵巢综合征患者血清microRNA-27a、microRNA-320的表达及其临床意义

目的 探讨血清microRNA-27a（miR-27a）、microRNA-320（miR-320）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月—2020年8月海南西部中心医院收治的180例PCOS患者,根据胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）分为IR组113例（HOMA-IR≥ 2.58）和NIR组67例（HOMA-IR< 2.58）;另选取该院体检的健康女性80例作为对照组。于月经第3～5天采集静脉血,检测血清miR-27a、miR-320的表达,以及性激素、糖脂代谢、胰岛素抵抗指标。经阴道超声测量卵巢体积并计数卵泡数。分析miR-27a、miR-320表达与BMI、性激素、糖脂代谢、胰岛素抵抗、卵巢体积、卵泡数的相关性及PCOS发病的影响因素。结果 IR组BMI、血清睾酮（T）、总胆固醇（TC）、胰岛素抵抗（HOMA-IR）、miR-27a mRNA的相对表达量高于NIR组和对照组（P <0.05）,miR-320 mRNA的相对表达量低于NIR组和对照组（P <0.05）。NIR组BMI、血清T、TC、HOMA-IR、miR-27a mRNA的相对表达量高于对照组（P <0.05）,miR-320 mRNA的相对表达量低于对照组（P <0.05）。血清miR-27a的表达与BMI、卵泡数、卵巢体积、T、TC、HOMA-IR呈正相关（r =0.749、0.835、0.764、0.867、0.907和0.882,均P <0.05）,血清miR-320表达与卵泡数、卵巢体积、T、HOMA-IR呈负相关（r =-0.791、-0.808、-0.768和-0.752,均P <0.05）。卵泡数增加［R=1.865（95%CI：1.252,2.776）］、T水平升高［R=1.536（95% CI：1.179,2.001）］、HOMA-IR增加［R=1.702（95% CI：1.185,2.446）］、miR-27a高表达［R=1.933（95% CI：1.278,2.923）］、miR-320低表达［R=0.610（95% CI：0.467,0.796）］是PCOS易感因素（P <0.05）。联合miR-27a、miR-320诊断PCOS的AUC为0.917（95% CI：0.869,0.964）,高于单独诊断的0.708（95% CI：0.637,0.779）和0.676（95% CI：0.602,0.750）。结论 PCOS患者血清miR-27a表达上调,miR-320表达下调,miR-27a高表达、miR-320低表达与PCOS易感和胰岛素抵抗有关,可作为PCOS诊断指标。     

非小细胞肺癌组织长链非编码RNA LINC00265、microRNA-98-5p的表达及其临床意义

目的 探究长链非编码RNA（lncRNA）LINC00265、microRNA-98-5p（miR-98-5p）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其临床意义。方法 选取2016年1月—2017年12月乐山市人民医院收治的97例NSCLC患者的癌组织、相应癌旁正常组织进行研究。利用实时荧光定量聚合酶链反应测定癌组织及癌旁正常组织lncRNA LINC00265、miR-98-5p相对表达量;分析癌组织lncRNA LINC00265、miR-98-5p与患者临床病理特征及预后的关系;采用Pearson法分析癌组织lncRNA LINC00265与miR-98-5p的相关性;Cox回归分析影响NSCLC患者预后的因素。结果 NSCLC患者癌组织lncRNA LINC00265相对表达量高于癌旁正常组织（P <0.05）,miR-98-5p相对表达量低于癌旁正常组织（P <0.05）。有无淋巴结转移、不同临床分期和分化程度患者癌组织的lncRNA LINC00265和miR-98-5p表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）。癌组织lncRNA LINC00265与miR-98-5p呈负相关（r =-0.580,P =0.000）。lncRNA LINC00265高表达、miR-98-5p低表达NSCLC患者36个月总生存时间、无病生存期较短（P <0.05）。淋巴结转移［R=2.152（95% CI：1.431,3.235）］、临床分期［R=2.136（95% CI：1.429,3.192）］、lncRNA LINC00265［R=2.533（95% CI：1.552,4.135）］是NSCLC患者死亡的独立危险因素（P <0.05）,而miR-98-5p［R=0.618（95% CI：0.506,0.755）］是NSCLC患者死亡的独立保护因素（P <0.05）。结论 NSCLC患者癌组织lncRNA LINC00265相对表达量升高,miR-98-5p相对表达量降低,其可能共同调控NSCLC的发生、发展,检测其相对表达量有利于判定NSCLC患者的预后。     

不同疾病活动度炎症性肠病患者血清microRNA-146a-5p、microRNA-145水平的变化及与免疫调节的相关性

目的 探讨不同疾病活动度炎症性肠病（IBD）患者血清microRNA-146a-5p (miR-146a-5p)、microRNA-145(miR-145)水平的变化及与免疫调节的相关性。方法 选取2021年6月—2022年6月在西南医科大学附属中医医院就诊的88例IBD患者作为IBD组,其中溃疡性结肠炎（UC）43例,克罗恩病（CD）45例。另取同期该院86例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清和肠黏膜组织miR-146a-5p、miR-145表达,流式细胞术检测Th1、Th2,酶联免疫吸附试验测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)水平。Pearson法分析患者miR-146a-5p、miR-145表达与Th1/Th2的相关性。结果 与对照组比较,UC组和CD组miR-145相对表达量降低（P <0.05）,Th1、Th1/Th2升高（P <0.05）;与UC组比较,CD组miR-145相对表达量降低（P <0.05）,Th1、Th1/Th2升高（P <...     

小鼠miRNA-203慢病毒过表达载体的构建及病毒包装与滴度测定

目的构建microRNA-203（miR-203）过表达慢病毒载体,并对其进行病毒包装、鉴定与滴度测定。方法利用化学合成miR-203发夹前体结构RNA（small hairpin RNAs,hRNA）,并将其克隆入pSicoR质粒中,经双酶切及测序鉴定;利用脂质体将鉴定的阳性重组pSicoR-miR-203表达载体、pCMV-VSV-G和pCMV-dR8.91三个质粒共转染到HEK-293T细胞,分别在48h和72h收获上清,包装产生慢病毒。将所得病毒悬液梯度稀释后感染293T细胞,检测病毒滴度,并将制备的病毒颗粒尾静脉注射Balb/c小鼠,检测miR-203在小鼠体内的表达与分布情况。结果酶切及测序结果证明成功构建了pSicoR-miR-203重组质粒,并成功的包装成慢病毒,病毒滴度为5×107 TU.mL-1。重组病毒在Balb/c小鼠肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有表达。结论成功构建miR-203慢病毒表达载体,获得高效表达miR-203的慢病毒颗粒,为miR-203靶基因筛选及其功能的研究奠定了基础。     

尿毒症患者血清中 miR-155 的表达及前列地尔对其的影响

目的：观察尿毒症透析患者外周血血清microRNA-155(miR-155)的表达水平及前列地尔(alprostadil,A)对 其的影响,探讨miR-155在尿毒症透析患者炎症状态中的临床意义。方法：按研究标准纳入慢性肾脏病尿毒症患者 81例,其中腹膜透析组(PD组)20例,腹膜透析+前列地尔治疗组(PD+A组)20例,维持性血液透析组(HD组)21例,维 持性血液透析+前列地尔治疗组(HD+A组)20例,另设健康人群对照组(NC组)16例。采集各观察对象外周血并提取血 清,采用实时荧光定量PCR技术检测血清中miR-155的表达水平,ELISA检测血清IL-6水平。收集各观察对象的一般 临床资料并检测血脂、血红蛋白、白蛋白、超敏C-反应蛋白、血清铁蛋白等血液生化指标。结果：4组透析患者血 清miR-155及IL-6水平均显著高于NC组(P<0.05);PD+A组miR-155水平较PD组或HD组显著下调(P<0.05),PD+A组及 HD+A组血清IL-6水平均低于PD组或HD组(P<0.05)。相关分析显示：血清miR-155水平与炎症因子IL-6水平呈显著正相 关(P<0.01);同时,血清miR-155水平与超敏C-反应蛋白水平呈正相关,而与HDL及白蛋白水平呈负相关(P<0.01);血 清白蛋白与miR-155呈独立负相关,超敏C-反应蛋白与miR-155呈独立正相关。结论：尿毒症患者外周血清miR-155和 IL-6表达水平明显上调;前列地尔可能通过抑制IL-6表达改善尿毒症透析患者炎症状态;血清miR-155有可能成为尿毒 症透析患者炎症状态早期诊断及干预的新靶点。     

miRNA-31在高糖诱导内皮细胞功能障碍中的作用

目的 探讨miRNA-31在高糖诱导的内皮细胞功能障碍中的作用机制.方法 体外培养人冠状动脉内皮细胞系,不同浓度高糖刺激24h后检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达及培养上清液NO含量;Real-time PCR检测高糖刺激后miRNA-31表达变化;microRNA在线分析软件预测并应用双荧光素酶报告基因系统和Western blot验证eNOS是否为miRNA-31的直接靶基因;通过转染miRNA-31 antagomir观察miR-NA-31对内皮细胞功能障碍的影响.结果 不同浓度的高糖刺激内皮细胞24h后,eNOS蛋白表达和培养液NO含量呈剂量依赖性下降.高糖刺激内皮细胞miRNA-31表达明显增加.microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告基因实验提示eNOS的翻译水平受miRNA-31直接调控.转染miRNA-31 antagomir明显上调高糖刺激后内皮细胞eNOS蛋白和培养液NO含量.结论 miRNA-31上调进而抑制eNOS表达可能是高糖诱导内皮细胞功能障碍的作用机制之一.     

Expression of miRNA-140 in Chondrocytes and Synovial Fluid of Knee Joints in Patients with Osteoarthritis

Objective To investigate the expression of miRNA-140 in chondrocytes and synovial fluid of osteoarthritis (OA) patients, and explore the relationship between the miRNA-140 expression and OA severity.
Methods This study enrolled 30 OA patients who underwent total knee arthroplasty for chondrocytes sampling and 30 OA patients who underwent intra-articular injection for synovial fluid sampling. All OA patients were grouped intomild [Kellgren and Lawrence (KL) grade 1-2], moderate (KL grade 3) and severe (KL grade 4), with 10 in each subgroups for each sampling purposes. 7 non-OA patients and 10 patients with knee injury were collected for cartilage and synovial fluid sampling respectively as control groups. Chondrocytes were isolated from the cartilage tissue and culturedin vitro. Quantitative real time PCR for miRNA-140 in chondrocytes and synovial fluid were performed, and the U6 snRNA was used as internal control. The expression difference of miRNA-140 among groups and correlation between the expression and the KL grade of OA were analysed using one-way ANOVA and Spearman test respectively.
Results The expression of miRNA-140 in chondrocytes of knees in OA patients was reduced than that in normal knees, and the between-group difference was statistically significant (F=305.464,P<0.001). miRNA-140 could be detected in synovial fluid of both normal knees and OA knees, its relative expression level was reduced in synovial fluid of OA group compared with normal group, and the between-group difference was statistically significant as well (F=314.245,P<0.001). The relative expression level of miRNA-140 in both chondrocytes and synovial fluid were negatively correlated with the KL grade of OA(r=-0.969,P<0.001;r=-0.970,P<0.001).
Conclusion miRNA-140 could be detected in chondrocytes and synovial fluid of OA patients, and its expression was negatively correlated with the severity of OA.     

食管鳞状细胞癌患者血清miRNA-183的表达及其诊断价值

目的：探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者血清的microRNA- 183(miRNA-183)水平变化、临床意义及其对ESCC的诊断价值。方法：选择中南大学湘雅二医院胸外科住院治疗的51 例ESCC患者及55例健康体检者血清标本作为研究对象。采用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)测定血清标本miRNA-183表达水平;采用χ2检验及相关分析检测血清miRNA-183水平与ESCC 临床及病理指标间的关联;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析miRNA-183及其联合癌 胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)对ESCC的诊断效率。结果：1)MiR-183在健康体检者和ESCC患者中的相对表达 量为(2.03±0.96)和(4.47±1.54),两者之间差异有统计学意义(t=9.700,P<0.01)。2)ESCC患者血清miR-183相对表达量在 不同的肿瘤恶性程度分期中的差异有统计学意义(χ2=4.049;P<0.01);在不同性别、年龄、吸烟与否、饮酒与否、肿 瘤部位、肿瘤直径、淋巴结转移、浸润深度、分化程度上差异均无统计学意义(均P>0.05);miR-183的相对表达量与 血清CEA表达无关(P>0.05)。3)采用ROC曲线分析,以miR-183相对表达量4.502为诊断ESCC的最佳临界值,灵敏度为 78.9%,特异度为76.2%,ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.762,95%置信区间为0.830~0.922。联合检测 血清miR-183与CEA诊断ESCC,灵敏度为82.3%,特异性为92.6%,AUC为0.877,95%置信区间为0.814~0.935。结论： ESCC患者血清miRNA-183水平出现上调,血清miRNA-183与CEA联合测定可提高对ESCC的诊断效率。血清miRNA-183 水平与肿瘤TNM分期有关,这有助于肿瘤病情进展判断和疗效预测。     

miRN A-125b在鼻咽癌中的表达及与顺铂化疗敏感性研究

目的：探讨微小RNA‐125b（miRNA‐125b）在鼻咽癌组织、血清中的表达及与顺铂化疗敏感性的相关性。方法收集34例临床确诊鼻咽癌完整病例资料及组织和血清标本,另取患者癌旁组织为组织对照,同时收集34例健康体检者血清标本为血清对照,运用实时荧光定量聚合酶链反应（real‐time qPCR）法检测miRNA‐125b在癌组织、癌旁组织、血清中的表达,并进行统计学分析。结果 miRNA‐125b在癌组织的表达显著低于癌旁组织（P＝0．006）,在鼻咽癌患者血清中的表达显著低于健康体检者（P＝0．000）;miRNA‐125b在患者癌组织与血清中的表达无相关性（r＝0．112,P＝0．528）。miRNA‐125b在癌组织中的表达与病理分型、T分期、N分期有关（P＜0．05）,在患者血清中的表达仅与N分期相关（P＜0．05）。miRNA‐125b在癌组织中表达与顺铂化疗敏感性呈负性相关（P＜0．05）,在患者血清中的表达与顺铂化疗敏感性无明显相关性（P＞0．05）。结论 miRNA‐125b的低表达可能参与了鼻咽癌的发生、发展,对鼻咽癌诊断、分型、分级有一定意义,在癌组织中的表达水平可作为筛选顺铂化疗方案的指标之一。     

miRNA-205在食管鳞状细胞癌患者组织中的表达及临床意义

目的 探讨miRNA-205在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者组织中的表达情况.方法 收集56例经病理确诊的ESCC患者的手术切除组织(癌组织及其癌旁组织),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miRNA-205的表达,并分析miRNA-205在不同临床病理资料之间的差异.结果 ESCC患者组织中miRNA-205相对表达量为1.475(0.444～5.478),显著高于癌旁组织(Z=-3.067,P=0.002);miRNA-205在不同TNM分期ESCC患者组织中存在差异,TNM分期越高,miRNA-205表达量越高,差异具有统计学意义(F=36.335,P＜0.001);miRNA-205在淋巴结转移阴性/阳性组织中存在差异,淋巴结转移阳性组miRNA-205表达量显著高于淋巴结转移阴性组(Z=-3.353,P=0.001).结论 miRNA-205在ESCC患者癌组织中表达升高,并可能参与ESCC的发生与发展.     

miRNA-155在大鼠脑缺血/再灌注损伤早期大脑皮层组织中的表达及其意义

目的：探讨微小RNA-155（miRNA-155）在大鼠脑缺血/再灌注损伤早期大脑皮层组织中的表达,初步阐明miRNA-155对脑缺血/再灌注损伤的影响。方法：48只健康成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组和脑缺血/再灌注组,每组24只。脑缺血/再灌注组通过Longa等改良线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉建立脑缺血/再灌注模型,假手术组大鼠只分离血管。采用TTC染色评估各组大鼠脑缺血梗死体积,采用qRT-PCR法检测各组大鼠脑皮层组织中miRNA-155表达水平。结果：与假手术组比较,再灌注24、48和72h时脑缺血/再灌注组大鼠脑缺血梗死体积明显增大（P<0.05）,并且随着再灌注时间延长,脑缺血梗死体积逐渐减少。与假手术组比较,再灌注24、48和72 h时脑缺血/再灌注组大鼠脑皮层组织中miRNA-155表达水平明显升高（P<0.05）,并且随着灌注时间延长,表达水平逐渐降低。结论：在大鼠脑缺血/再灌注早期大脑皮层组织中miRNA-155高表达,其参与了脑缺血/再灌注损伤过程。     

上调miRNA-101表达对人肝癌HepG2细胞系增殖的影响

目的通过上调人肝癌HepG2细胞株中miRNA-101表达,探讨miRNA-101抑制靶基因EZH2对肝癌细胞增殖的影响。方法人工合成miRNA-101模拟体并转染至HepG2肝癌细胞株中,利用MTT法检测细胞增殖抑制、流式细胞仪检测细胞周期、实时荧光定量PCR检测EZH2 mRNA表达。结果 miRNA-101模拟体转染组HepG2细胞增殖活性明显低于阴性对照组及空白对照组(P<0.05),miRNA-101模拟体组G0/G1期细胞明显增多,为(74.71±4.6)%,S期细胞减少,为(14.57±1.1)%(P均<0.05);miRNA-101模拟体组EZH2 mRNA较阴性对照组和空白对照组表达下降(P<0.05)。结论上调miRNA-101可抑制EZH2基因表达,对人肝癌细胞增殖活性具有负调控作用。