加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对Lewis肺癌小鼠耐药相关基因及IL-7介导的Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 通过建立气阴两虚型Lewis肺癌小鼠模型,观察加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对Lewis肺癌小鼠免疫功能、耐药相关基因及白细胞介素-7（IL-7）介导的Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响,阐明加味龟鹿二仙胶汤的抗癌机制,为其临床应用提供依据。方法 建立气阴两虚型Lewis肺癌小鼠模型,分为正常组（不造模）,模型组（等体积生理盐水）,顺铂组（顺铂,2 mg·kg^-1）,中药组（加味龟鹿二仙胶汤,19.63 g·kg^-1·d^-1）,联合组（加味龟鹿二仙胶汤,19.63 g·kg^-1·d^-1+顺铂,2 mg·kg^-1）,每组10只,分别给药,干预21 d。观察小鼠一般情况、脏器指数,计算抑瘤率,流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞（CD4⁺ CD25⁺Treg）,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中细胞因子水平IL-7,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中耐药相关基因P-糖蛋白（P-gp）,多药耐药相关蛋白1（MRP1）mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果 与模型组比较,中药组及联合组摄食量增加,精神状态较好,反应灵敏,体质量增加。与顺铂组比较,联合组胸腺指数、脾脏指数显著升高（P<0.01）,联合组抑瘤率明显升高（P<0.01）。与顺铂组比较,中药组、联合组CD4⁺ CD25⁺Treg /CD4⁺明显降低（P<0.05,P<0.01）,中药组、联合组IL-7水平显著升高（P<0.01）。与顺铂组比较,中药组、联合组P-gp,MRP1 mRNA表达明显降低（P<0.05,P<0.01）,中药组、联合组Wnt1,β-catenin蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 加味龟鹿二仙胶汤与顺铂联用可明显抑制Lewis肺癌小鼠体内肿瘤的生长,其作用机制可能与其能够解除机体免疫抑制状态,促进机体产生IL-7,调节IL-7介导的Wnt/β-catenin信号通路,减少肺癌组织中耐药相关基因的表达有关。     

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD炎性焦亡途径探讨参芪抑瘤方联合顺铂对H22肝癌荷瘤小鼠的作用机制

目的 探讨参芪抑瘤方干预细胞焦亡在抗肿瘤效应中的作用机制。方法 随机抽取10只BALB/c小鼠（雄性）作为正常组,余40只建立肝癌小鼠异位移植瘤模型,建模5 d后随机分为模型组、顺铂组［2.5×10^-3 g·kg^-1·（3 d）^-1］、参芪抑瘤方组（27 g·kg^-1·d^-1）、联合组（参芪抑瘤方+顺铂）。正常组与模型组以等量生理盐水灌胃,连续干预10 d,观察各组小鼠一般情况,干预结束后,称量小鼠瘤体质量,计算抑瘤率,采用苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤组织病理变化;检测小鼠肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平;原位末端标记法（TUNEL）检测小鼠肿瘤组织细胞DNA损伤情况;免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测瘤组织中NOD样受体蛋白3（NLRP3）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、消皮素D（GSDMD）蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测瘤组织中白细胞介素（IL）-1β和IL-18的含量。结果 与正常组比较,模型组小鼠精神状态差,倦卧懒动,毛色暗淡;肝功能检测血清ALT、AST水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,各给药组小鼠精神状态明显好转,且各给药组均可不同程度抑制瘤体生长,肿瘤质量均下降,其中联合组抑瘤率最强（P<0.01）;HE染色示,模型组小鼠肿瘤组织病理形态学病变显著,各给药组均有一定程度改善,以参芪抑瘤方组及联合组细胞核,溶解破裂更为明显;肝功能检测中,参芪抑瘤方组及联合组小鼠血清ALT、AST水平均下降显著（P<0.01）;各给药组炎症因子IL-1β和IL-18均下降（P<0.05,P<0.01）;TUNEL染色示各给药组干预后TUNEL染色阳性降低（P<0.05,P<0.01）,以顺铂组和参芪抑瘤方组降低显著（P<0.01）;Western blot、免疫组化、免疫荧光在肿瘤组织中检测发现,各给药组NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平均下降（P<0.05,P<0.01）。与顺铂组比较,参芪抑瘤方组和联合组小鼠精神状态佳,瘤体形态规则,联合组小鼠肿瘤质量下降（P<0.05）;参芪抑瘤方组ALT和AST水平下降（P<0.05）;参芪抑瘤方组和联合组IL-1β和IL-18均下降（P<0.05,P<0.01）,以联合组最为明显（P<0.01）;免疫组化结果显示,联合组小鼠肿瘤组织中GSDMD蛋白表达显著降低（P<0.01）;免疫荧光检测发现参芪抑瘤方组NLRP3在肿瘤组织中表达显著降低（P<0.01）;Western blot结果显示参芪抑瘤方组及联合组NLRP3蛋白表达水平下降显著（P<0.01）,联合组Caspase-1蛋白表达水平下降显著（P<0.01）;GSDMD蛋白表达下降不明显,差异无统计学意义。结论 参芪抑瘤方联合顺铂具有明显抑瘤作用,其抗肿瘤作用可能是通过下调NLRP3/Caspase-1/GSDMD炎性焦亡途径抑制细胞焦亡,缓解肝癌小鼠的炎症反应,达到抗肿瘤的作用。     

鼻康复调控IL-35/STAT3抑制嗜酸性粒细胞活化及免疫功能抗变应性鼻炎作用机制

目的 探究鼻康复调控白细胞介素-35（IL-35）/信号转导及转录激活因子3（STAT3）、抑制嗜酸性粒细胞活化抗变应性鼻炎作用机制研究。方法 100例患者随机分为对照组和观察组,各50例。对照组给予糠酸莫米松鼻喷雾剂,观察组给予鼻康复鼻腔填塞治疗,疗程均为28 d。治疗前后分别观察两组临床疗效、鼻部分类及症状视觉模拟量表（VAS）评分变化;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测两组患者血清及鼻分泌物中炎性因子（IL-4、IL-10、IL-17、IL-35）表达水平及嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）、趋化因子受体3（CCR3）含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测STAT1、STAT3、STAT4表达水平;分别采用ELISA及流式细胞术检测患者血清中免疫球蛋白G（IgG）含量及CD4⁺/CD8⁺。结果 治疗后,与本组治疗前比较,两组患者血清及鼻分泌物中IL-4、IL-17水平降低,IL-10、IL-35水平升高（P<0.05,P<0.01）;鼻分泌物中STAT1、STAT2、STAT3 mRNA水平均明显降低（P<0.05）;IgG、CD4⁺/CD8⁺均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。治疗后,与对照组比较,观察组的血清及鼻分泌物中IL-4、IL-17水平降低,IL-10、IL-35水平升高（P<0.05）;治疗后,与对照组比较,观察组显著抑制STAT1、STAT3、STAT4表达（P<0.05）;治疗后,与对照组比较,观察组血清CD4⁺/CD8⁺及免疫球蛋白G（IgG）水平降低（P<0.05,P<0.01）。项目执行期间两组患者心、肝、肾功能及血尿常规未出现异常改变。结论 鼻康复对变应性鼻炎具有良好疗效,其作用机制可能与调控IL-35/STAT3通路、抑制嗜酸性粒细胞活化及改善相关免疫功能有关。     

基于HGF/C-Met信号通路探讨乌梅丸对寒热错杂证Lewis肺癌小鼠的抑癌作用及机制

目的 基于肝细胞生长因子及其受体（HGF/C-Met）信号通路探讨乌梅丸对寒热错杂证Lewis肺癌小鼠的抑癌效果及作用机制。方法 将20只健康雄性小鼠分为正常组、模型组、顺铂组和乌梅丸组,每组5只。通过丙硫氧嘧啶+知母石膏水煎液+番泻叶灌胃、冰水游泳与干酵母混悬液皮下注射,联合Lewis细胞悬液右侧腋窝皮下注射的方式制备寒热错杂证Lewis肺癌小鼠模型。模型制备完成后,顺铂组予以4.0 mg·kg^-1顺铂腹腔注射,乌梅丸组予以12.5 mL·kg^-1乌梅丸灌胃,模型组予以等体积蒸馏水灌胃,连续6周。取材检验,测量和计算瘤质量、瘤体积、抑癌率和抑制肺癌转移率,采用苏木素-伊红（HE）染色观察肺癌组织病理学形态,采用免疫组化法分析肿瘤组织生长状态,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测HGF、C-Met mRNA表达,采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HGF、C-Met、存活素（Survivin）和X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）的蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组HGF、C-Met mRNA表达显著升高（P<0.01）,HGF、C-Met、Survivin和XIAP的蛋白表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较,乌梅丸组的阳性细胞比率、阳性细胞密度、阳性评分降低（P<0.05）,组织化学评分、瘤质量、瘤体积显著降低（P<0.01）,HGF、C-Met mRNA表达显著降低（P<0.01）,HGF、C-Met、Survivin和XIAP的蛋白表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较,顺铂组的阳性细胞率、阳性细胞密度明显降低（P<0.05）,阳性评分、瘤质量、瘤体积显著降低（P<0.01）,HGF、C-Met mRNA表达显著降低（P<0.01）,HGF、C-Met、Survivin、XIAP蛋白表达显著降低（P<0.01）;组织化学评分相当,差异无统计学意义。与顺铂组比较,乌梅丸组HGF mRNA表达升高（P<0.01）;阳性细胞率、阳性细胞密度、组织化学评分、阳性评分、瘤质量、瘤体积相当,C-Met mRNA表达及HGF、C-Met、Survivin、XIAP蛋白表达相当,差异均无统计学意义。结论 乌梅丸能够通过抑制HGF/C-Met信号通路减缓寒热错杂证Lewis肺癌小鼠的肺癌进展。     

补肾生血方治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效及对T细胞亚群、T-bet与GATA3表达的影响

目的 探讨补肾生血方与益气养血方治疗慢性再生障碍性贫血疗效及T细胞亚群与T-box家族的新型转录因子（T-bet）、Gata转录因子家族的转录因子3（GATA3）表达的影响。方法 收集2018年5月至2021年6月，在全国19家医院就诊的慢性再生障碍性贫血患者共585例，利用前瞻性、双盲、随机对照方法，采用分层区组随机法将患者分为3组，肾虚组、气血两虚组、对照组，中药治疗分别予补肾生血方颗粒、益气养血方颗粒、安慰剂（半量补肾生血方颗粒），均联合口服西药环孢素及雄激素。每组治疗以3个月为一疗程，连续观察2个疗程，分析治疗前后检测患者血常规，T细胞亚群及融合基因T-bet、GATA3，并监测安全性指标。结果 观察期间共脱落75例，剔除18例，最终肾虚组161例，气血两虚组164例，对照组167例，共492例完成治疗。治疗6个月后，肾虚组的总有效率98.8%（159/161）高于气血两虚组的79.9%（131/164）（χ²=30.135，P<0.01）；肾虚组明显高于对照组的总有效率61.7%（103/167）（χ²=70.126，P<0.01）；气血两虚组总有效率高于对照组（χ²=13.232，P<0.01）。与本组治疗前比较，治疗后3组患者的血红蛋白（HGB）明显提升（P<0.05，P<0.01），且肾虚组HGB含量提高更为显著（P<0.01）；治疗后与气血两虚组比较，肾虚组与对照组的白细胞（WBC）及血小板（PLT）均显著升高（P<0.01）；3组患者治疗后的中性粒细胞（ANC）差异无统计学意义。3组患者在相同时间点进行比较，肾虚组T辅助细胞1（Th1）、Th1/Th2水平均明显降低（P<0.05），且肾虚组CD4⁺水平明显下降，CD4⁺/CD8⁺明显降低（P<0.05）。肾虚组与其余两组CD19^-、HLA/DR⁺、CD25⁺比较差异无统计学意义，肾虚组与对照组T-bet均低于气血两虚组（P<0.05）。结论 补肾生血方治疗再生障碍性贫血可能通过改善免疫调节机制，抑制免疫系统活性，调节T细胞亚群，抑制Th1及CD4⁺水平，促进骨髓造血，且安全、不良反应小，方案值得进一步推广。     

痛泻要方调节T淋巴细胞亚群改善慢性应激下大肠癌免疫微环境的机制

目的 探讨痛泻要方对慢性应激下小鼠大肠癌免疫微环境的影响及可能的作用机制。方法 取SPF级BABL/C雄性小鼠40只,随机分成正常组、应激组、痛泻要方组（13.65 g·kg^-1）、痛泻要方应激组（13.65 g·kg^-1）,每组10只。采用慢性束缚应激方法构建应激性小鼠模型,应激7 d后治疗组给予痛泻要方灌胃,在第14天通过强迫游泳实验和悬尾实验检测痛泻要方对应激后小鼠的行为学改变情况,同时对各组小鼠进行大肠癌皮下瘤种植。观察痛泻要方对小鼠体质量、肿瘤体积的影响;末次给药后,收集小鼠血清、瘤体样本。用免疫组化、流式细胞术检测瘤体内T淋巴细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺及CD4⁺/CD8⁺）含量变化;用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠外周血中皮质酮（CORT）、血清白细胞介素（IL）-2、γ干扰素（IFN-γ）、IL-6和IL-10含量;并用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠核转录因子-κB（NF-κB）抑制蛋白（IκB）激酶α/β（IKKα/β）、NF-κB抑制蛋白α（IκBα）、NF-κB p65、磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白表达。结果 与正常组比较,应激组小鼠瘤体体积增大（P<0.05）;CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺数量下降（P<0.05,P<0.01）;CD8⁺数量有上升趋势;辅助性T细胞1（Th1）细胞因子IFN-γ含量降低（P<0.05）;辅助性T细胞2（Th2）细胞因子IL-10含量升高（P<0.05）;CORT含量升高（P<0.05）;p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白表达升高,但差异无统计学意义;IKKα/β蛋白表达升高（P<0.05）;IκBα蛋白表达明显下降（P<0.05）。与正常组比较,痛泻要方组瘤体生长速度下降,但差异无统计学意义;CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺数量显著上升（P<0.01）;CD8⁺数量下降（P<0.05）;Th1细胞因子IL-2、IFN-γ含量升高（P<0.05）;Th2细胞因子IL-6、IL-10含量降低（P<0.05）;CORT含量降低,但差异无统计学意义;p-NF-κB p65蛋白表达下降,但差异无统计学意义;NF-κB p65、IKKα/β蛋白表达明显下降（P<0.05）;IκBα蛋白表达显著升高（P<0.01）。与应激组比较,痛泻要方应激组瘤体生长速度下降,但差异无统计学意义;CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺数量上升（P<0.01）;CD8⁺数量下降（P<0.05）;Th1细胞因子IL-2、IFN-γ含量升高（P<0.05）;Th2细胞因子IL-6、IL-10含量降低（P<0.05）;CORT含量降低（P<0.05）;p-NF-κB p65、NF-κB p65、IKKα/β蛋白表达明显下降（P<0.05,P<0.01）,IκBα蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论 痛泻要方可阻延慢性应激下大肠癌生长,有效改善大肠癌免疫微环境的恶化,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路,调节T淋巴细胞亚群功能,从而抑制促炎因子分泌有关。     

加味生脉饮辅助化疗对气血两虚证急性淋巴细胞白血病患儿的影响

目的 观察加味生脉饮辅助化疗对气血两虚证急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿营养情况和免疫功能的调节效果。方法 将100例ALL化疗患儿按随机数字表法分为观察组和对照组各50例。两组患儿均给予长春新碱（泼尼松）+柔红霉素+左旋门冬酰胺酶（VDLD）方案进行诱导缓解治疗和环磷酰胺+阿糖胞苷+6-巯基嘌呤（CAM）方案进行早期强化治疗。对照组口服生脉饮,10 mL/次,3次/d。观察组口服加味生脉饮,1剂/d。两组疗程均为3个月。进行治疗前后微型营养评定（MNA）,并检测治疗前后血清总蛋白（TB）,白蛋白（ALB）,前白蛋白（PAB）,T细胞CD4⁺,CD8⁺,免疫球蛋白G（IgG）,免疫球蛋白M（IgM）,免疫球蛋白A（IgA）水平,计算CD4⁺/CD8⁺;进行治疗前后中医证候评分,Piper疲乏修订量表（PFS-R）和儿童生活质量普适性核心量表（PedsQL）评分;评价治疗前后白细胞（WBC）,红细胞（RBC）,血红蛋白（Hb）和血小板（PLT）变化。结果 治疗后观察组营养状况高于对照组（Z＝2.018,P<0.05）;观察组疲乏程度低于对照组（Z＝2.029,P<0.05）;观察组MNA评分高于对照组（P<0.01）,PFS-R和气血两虚证评分均低于对照组（P<0.01）;观察组TB,ALB,PAB,CD4⁺水平和CD4⁺/CD8⁺均高于对照组（P<0.01）,CD8⁺低于对照组（P<0.01）;观察组IgM和IgA水平均高于对照组（P<0.01）;观察组RBC,Hb和PLT水平均高于对照组（P<0.01）。结论 加味生脉饮内服辅助用于ALL化疗患儿,可提高营养状况,改善免疫功能,促进免疫平衡,减轻临床症状,促进造血系统的恢复,提高生活质量。     

黄芪-白花蛇舌草抑制肺癌A549细胞增殖机制

目的 从细胞水平观察黄芪-白花蛇舌草对人肺腺癌A549细胞增殖及白细胞介素-6（IL-6）,磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）,蛋白激酶B（Akt）,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）,雷帕霉素靶蛋白（mTOR）,缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）,细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）表达量的影响,并探讨其作用的分子机制。方法 设立空白组（完全培养基）,黄芪-白花蛇舌草低、中、高质量浓度组（20,40,60 mg·L^-1）,顺铂低、中、高质量浓度组（5,10,20 mg·L^-1）,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测黄芪-白花蛇舌草（0,20,40,60 mg·L^-1）和顺铂（0,5,10,20 mg·L^-1）干预A549细胞24,48,72 h后的细胞活性,计算各组细胞增殖能力,筛选出各药物组最佳浓度;分别用完全培养基,黄芪-白花蛇舌草（40 mg·L^-1）,顺铂（10 mg·L^-1）,联合药物（40 mg·L^-1+10 mg·L^-1）干预肺腺癌A549细胞,设置为空白组、黄芪-白花蛇舌草组、顺铂组、联合组,计算各组在24,48,72 h后对A549细胞增殖抑制影响;采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测各组72 h后细胞培养上清中IL-6的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测HIF-1α,Cyclin D₁ mRNA水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组蛋白PI3K,Akt,p-Akt,mTOR,HIF-1α,Cyclin D₁表达的变化情况。结果 在作用细胞24 h后,各黄芪-白花蛇舌草组对细胞增殖未表现出明显抑制,作用48 h,与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草组对肿瘤细胞有明显增殖抑制作用（P<0.05）,表现出时间依赖性,在作用细胞72 h,黄芪-白花蛇舌草各浓度组未表现出明显差异,故选用40 mg·L^-1为中药最佳浓度组,用于后续实验。与空白组比较,经过不同浓度顺铂干预后,细胞增殖均受到不同程度抑制（P<0.05）,表现出明显的时间依赖性,基于细胞存活率考虑,选用顺铂10 mg·L^-1为最佳浓度。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草与顺铂联合应用明显抑制肺腺癌A549细胞增殖,增殖抑制率表现出明显的时间依赖性（P<0.05）,且药物作用72 h,联合组与其他两组比较差异更加显著（P<0.01）;与空白组比较,各用药组细胞培养液IL-6分泌显著降低（P<0.01）,以联合组下降更加突出。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草、顺铂均能降低HIF-1α,Cyclin D₁ mRNA水平（P<0.05,P<0.01）,且联合用药降低幅度更加明显;各用药组PI3K,p-Akt,mTOR,HIF-1α,Cyclin D₁蛋白均明显降低（P<0.05,P<0.01）,且联合组各蛋白表达量明显低于顺铂组（P<0.01）。结论 黄芪-白花蛇舌草对肺癌A549细胞增殖具有抑制作用,潜在机制可能与其抑制IL-6/PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α轴的表达与分泌有关。     

基于内质网应激探讨扶正解毒方联合5-Fu对胃癌荷瘤小鼠术后复发及转移的影响

目的 研究扶正解毒方联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对胃癌荷瘤小鼠术后复发转移的抑制作用，并通过肿瘤微环境中CD4⁺ T细胞，CD8⁺ T细胞，调节性T（Treg）细胞含量的改变，内质网应激途径及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路，探讨其可能的分子机制。方法 40只615小鼠随机分为模型组，扶正解毒方（25 g·kg^-1）组，5-Fu（25 mg·kg^-1）组，联合组（扶正解毒方25 g·kg^-1+5-Fu 25 mg·kg^-1），每组各10只，将小鼠前胃癌细胞（MFC细胞）接种于左后肢内侧爪垫下，通过手术切除移植瘤建立术后复发模型。苏木素-伊红（HE）染色法观察术后复发胃癌荷瘤小鼠肺转移病理形态的改变；流式细胞术检测复发瘤中CD4⁺/CD8⁺ T值及脾脏中Treg细胞［CD4⁺，CD25⁺，叉头框蛋白P3（FOXP3）⁺细胞］的含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）及免疫组化法（IHC）检测内质网应激相关蛋白［葡萄糖调节蛋白78（GRP78），肌醇需求酶1α（IRE1α），激活转录因子6（ATF6），蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）］含量，以及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达。结果 与模型组比较，联合组复发抑制率明显升高（P<0.05）；各治疗组复发瘤重均明显降低（P<0.05）；各治疗组肺转移数均降低，转移率均有所降低，联合组肺转移总数最少，转移率最低，但差异无统计学意义；扶正解毒方组、联合组CD4⁺/CD8⁺ T值明显升高（P<0.05），Treg细胞含量明显降低（P<0.05）；5-Fu组Treg细胞含量明显升高（P<0.05）。IHC结果显示，与模型组比较，各治疗组ATF6蛋白表达明显下降（P<0.05，P<0.01），IRE1α表达明显下降（P<0.05），Akt表达显著下降（P<0.01）；5-Fu组及联合组mTOR表达明显下降（P<0.05）。Western blot结果显示，与模型组比较5-Fu组GRP78表达明显下降（P<0.05），5-Fu组及联合组PI3K，磷酸化Akt（p-Akt），mTOR表达明显下降（P<0.05）。结论 扶正解毒方联合5-Fu可以抑制荷瘤小鼠术后复发转移，机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR的信号通路，下调内质网应激，改善肿瘤免疫抑制微环境有关。     

基于PI3K/Akt/NF-κB信号通路探讨加味三仁汤对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的 观察加味三仁汤对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的干预作用，探讨其改善免疫球蛋白A肾病（IgAN）大鼠炎症病变的相关机制。方法 采用血清药理学方法，将18只大鼠分为3组，正常组，加味三仁汤高、低剂量（20.70，10.35 g·kg^-1·d^-1）组，每组6只，加味三仁汤高、低剂量组给予加味三仁汤相应溶液灌胃，正常组灌胃等体积蒸馏水。分别灌胃5 d后，采血制取含药血清。采用大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1），分为正常组，模型组，贝那普利组（50 μmol·L^-1），加味三仁汤高、低剂量组。釆用噻唑蓝（MTT）比色法检测各组细胞增殖情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原（ColⅣ）的含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）分别检测PI3K/Akt/NF-κB通路相关蛋白表达量和mRNA表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠肾小球系膜细胞增殖显著（P<0.01），ColⅣ分泌显著增多（P<0.01），磷酸化（p）-Akt，p-p65蛋白表达显著增加（P<0.01）；与模型组比较，加味三仁汤高剂量组显著抑制细胞增殖（P<0.01）和ColⅣ分泌（P<0.01），降低Akt磷酸化水平（P<0.01），降低NF-κB p65阳性表达（P<0.01）。结论 加味三仁汤能够抑制脂多糖诱导的HBZY-1细胞增殖，降低ColⅣ蛋白含量，可能与其抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活密切相关。