特发性肺间质纤维化中TGF-β1诱导上皮-间充质细胞转化的研究

目的探讨转化生长因子-β1(tansforming growth factor-β1,TGF-β1)在特发性肺间质纤维化(idiopathicpulmonary fibrosis,IPF)中上皮-间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EM T)的作用和机制。方法选择临床-影像-病理诊断的IPF患者25例肺石蜡组织制作组织芯片,应用免疫组化方法检测病灶组织中TGF-β1和β连环蛋白(β-catenin),间质标记物α-SMA、Desmin、Vim和上皮标记物E-cadherin及CK7的分布及表达情况。结果 TGF-β1主要分布于肌纤维母细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞和巨噬细胞,且其在成纤维细胞灶(fibroblast foci,FF)区域内各种细胞中的表达明显高于无FF区域(P<0.01);与无FF区域相比,β-catenin和E-cadherin在有FF区域增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞膜表达明显减弱(P<0.01),而胞浆的表达明显增加(P<0.01);同时发现有FF区域Ⅱ型肺泡上皮细胞表达间质标记物Vim,但未发现α-SMA的表达,而无FF区域两者均无表达。结论 TGF-β1和β-catenin有可能通过相互交叉作用诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生EMT,从而参与肺间质纤维化的发生。     

LncRNA GABPB1-AS1调控miR-150-5p表达对高糖诱导人肾小球系膜细胞纤维化的影响

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)GABPB1-AS1调控miR-150-5p表达对高糖诱导人肾小球系膜细胞（HMC）纤维化的影响。方法 采用qRT-PCR法检测高糖诱导的HMC细胞中LncRNA GABPB1-AS1、miR-150-5p表达情况,将对数期HMC细胞分为对照组（5.5 mmol/L葡萄糖）、高糖组（30 mmol/L葡萄糖）、高糖+pcDNA3.1-NC组、高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1组、高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1+mimic NC组、高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1+miR-150-5p mimic组,培养48 h后,CCK-8法检测各组细胞增殖率;qRT-PCR法检测细胞中纤维连接蛋白（FN）、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、纤维结缔组织生长因子（CTGF）mRNA表达水平;ELISA法检测细胞上清液白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot法检测FN、ICAM-1、CTGF蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因验证LncRNA GABPB1-AS1、miR-150-5p靶向...     

特发性肺间质纤维化1例

患，女性，51岁，因劳力性呼吸困难伴胸闷2月入院，入院查体：T36．8℃，P80次／min，R21次／min，BP144／80mmHg(1mmHg=0．133kPa)。神清，口唇无发绀。胸廓对称，语颤正常，双肺叩诊呈清音，呼吸音粗，肺底闻及湿性啰音。心、腹无特殊，双下肢无浮肿。血、尿、便常规正常，甘油三酯4．97mmol／L。     

LncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p促进糖尿病合并脑梗死大鼠血管生成的机制研究

目的：探讨lncRNA FUT8-AS1调控miR-139-5p对糖尿病（DM）合并脑梗死（CI）大鼠血管的影响。方法：将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM+CI组、Vector组、shFUT8-AS1组、miR-139-5p Agomir组、pcDNA-FUT8-AS1组和pcDNA-FUT8-AS1+miR-139-5p Agomir组。采用TTC染色检测CI面积,免疫组化染色检测血管内皮生长因子（VEGF）和FMS样酪氨酸激酶（FLT-1）蛋白表达,并检测内皮依赖性微血管密度（MVD）。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测FUT8-AS1、VEGF、FLT-1mRNA表达。Western blotting检测VEGF蛋白表达。双荧光素酶实验检测FUT8-AS1与miR-139-5p的靶向关系。结果：与对照组比较,DM+CI组CI面积显著增加,脑组织FUT8-AS1、FLT-1 mRNA表达上调,VEGF mRNA及蛋白表达上调,miR-139-5p表达下调（均P<0.05）。与Vector组相比,pcDNA-FUT8-AS1组FLT-1和VEGF mRNA及蛋白...     

特发性肺间质纤维化的诊断

目的特发性肺间质纤维化(idiopathic pulMonary fibrosis,IPF)也是特发性的间质性肺炎(idiopathic interstitial pneuMonias,I Ps)的一种类型,是一种不明原因的肺间质炎症性疾病.目的:讨论特发性肺间质纤维化的诊断.方法根据患者临床表现结合病史与检查结果进行诊断并鉴别.结论诊断主要根据临床特征、胸部X线表现、肺通气及弥散功能、病理活检及排除其他原因导致的ILD.依据有无肺活检结果,将确诊标准分为2种.     

FEZF1-AS1在恶性肿瘤中的表达及调控作用研究

长链非编码RNA(lncRNA)在多种人类肿瘤中发挥着重要作用。FEZF1-AS1作为一个新发现的lncRNA在结直肠癌、胃癌、肝癌等中高表达。异常表达的FEZF1-AS1与患者的临床特征密切相关,并且能够通过不同的机制调控肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭转移,可能成为肿瘤诊断和治疗的潜在靶点。文章就FEZF1-AS1在肿瘤发生发展中的功能及潜在的分子机制作一综述。     

LncRNA PINK1-AS调节miR-134-5p/SERPINE1轴对胃癌细胞增殖凋亡和上皮间质转化的影响

目的:探讨LncRNA PINK1-AS调节miR-134-5p/丝氨酸蛋白酶抑制剂分支E成员1(SERPINE1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR检测60例胃癌组织、癌旁组织中PINK1-AS、miR-134-5p、SERPINE mRNA的表达水平。体外培养胃癌细胞MKN28,将MKN28细胞分为control组、si-NC组、si-PINK1-AS组、pc-NC组、pc-PINK1-AS组、miR-NC组、miR-134-5p mimics组;qRT-PCR检测各转染组细胞PINK1-AS、miR-134-5p、SERPINE mRNA的表达水平,cck-8检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell实验细胞迁移和侵袭;western blot检测细胞SERPINE1、Ki-67、cleaved caspase-3、E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA PINK1-AS和miR-134-5p、miR-134-5p和SERPINE1的靶向关系。结果:胃...     

LncRNA DLG1-AS1调控miR-203/ZEB2轴诱导甲状腺乳头状癌细胞恶性化生长和转移的机制研究

目的:探讨LncRNA DLG1-AS1对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞恶性化生长和转移的影响,并对其可能的分子机制进行研究.方法:体外培养PTC细胞(TPC1、KTC-1、B-CPAP、HTori-3)和正常甲状腺上皮细胞Nthy-ori3-1,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中DLG1-AS1和...     

特发性肺间质纤维化的药物治疗

特发性肺纤维化(IPF)是一种慢性、进行性、高度致死性肺间质疾病,病理改变为寻常型间质性肺炎(UIP),中位存活时间仅为28年,是严重危害人类健康的主要疾病之一.目的讨论特发性肺间质纤维化的药物治疗.方法 根据患者具体病况选择不同药物进行治疗.结论 环磷酰胺可以在使用糖皮质激素治疗的同时开始使用,也可以用于糖皮质激素抵抗的患者.但由于担心其副作用,一定程度上限制了环磷酰胺的使用.硫唑嘌呤治疗原则与环磷酰胺相似.与大剂量糖皮质激素相比较,小剂量糖皮质激素加硫唑嘌呤疗效相似,并不能明显改善患者的肺功能,但不良反应不大,国外使用较广泛.环孢霉素A有研究表明,对糖皮质激素抵抗的患者及急性加重的患者使用本药有延长生存时间的可能,因此可以用于糖皮质激素使用无效的患者.N-乙酰半胱氨酸(NAC) 因不良反应小,适用于所有IPF患者,由于本品有化痰作用,痰多不易咳出的患者更能获益.     

干扰LncRNA OIP5-AS1对人乳腺癌细胞迁移、上皮间充质转化及Notch1表达的影响

目的 探讨干扰LncRNAOIP5-AS1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移、上皮间充质转化及Notch1表达的影响。方法 培养MDA-MB-231细胞,转染LncRNA OIP5-AS1 siRNA为LncRNA OIP5-AS1 siRNA组,转染NC siRNA的为NC siRNA组,未作任何处理的为Control组;采用RT-qPCR方法检测各组细胞LncRNAOIP5-AS1的表达水平;采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;Western blots法检测LncRNA OIP5-AS1被干扰后乳腺癌细胞上皮间充质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达变化;T-qPCR方法检测Notch1 mRNA的表达水平。结果 通过siRNA技术使LncRNA OIP5-AS1的表达受到抑制;LncRNA OIP5-AS1被干扰后,乳腺癌细胞的迁移能力降低,与Control组和NC siRNA组比,LncRNA OIP5-AS1 siRNA组细胞迁移能力受抑制更加明显(P<0.01);Western blots结果显示：与Control组和NC siRNA组相比...     

CircRNA＿000809通过miR-200c-3p对子宫内膜异位症间质细胞的增殖、迁移及上皮间质转化的影响

目的：探讨circRNA＿000809通过靶向mi R-200c-3p调控子宫内膜异位症间质细胞增殖、迁移及上皮-间质转化（EMT）的作用。方法：收集2020年1月至2022年1月于温州医科大学附属第二医院育英儿童医院行卵巢囊肿剥除术患者的卵巢巧克力囊肿组织25例,设为子宫内膜异位症组;收集25例正常子宫内膜组织,标本来自于因早期宫颈癌行子宫切除术或者行宫腔镜检查术的育龄期非子宫内膜异位症患者,设为正常子宫内膜组。采用qRT-PCR法检测正常子宫内膜、异位内膜组织中circRNA＿000809、miR-200c-3p的表达量;分别采用EdU实验和Transwell实验检测异位子宫内膜间质细胞的增殖及迁移;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测相关蛋白表达水平。结果：与正常子宫内膜组织比,异位子宫内膜中circRNA＿000809表达上调（P<0.05）,而miR-200c-3p的表达下调（P<0.05）;且Pearson相关性分析显示在异位子宫内膜组织中circRNA＿000809与miR-200c-3p的表达量呈负相关（P<0.05）;分别用siNC+in...     

lncRNA OIP5-AS1通过海绵吸附miR-143-3p调控COL1A1促进胃癌发展

目的 探究长链非编码RNA（lncRNA）Opa相互作用蛋白5反义RNA1（OIP5-AS1）对胃癌发展的调控机制。方法 qRT-PCR检测lncRNA OIP5-AS1在正常胃细胞系（GES-1）和胃癌细胞系（AGS和SGC7901）中的表达水平;构建OIP5-AS1敲低载体、miR-143-3p抑制剂（miR-143-3p inhibitor）以及Ⅰ型胶原α1（COL1A1）敲低载体并转染胃癌细胞系,运用CCK-8实验、伤口愈合实验、Transwell实验检测lncRNA OIP5-AS1、miR-143-3p、COL1A1在胃癌细胞增殖、迁移、侵袭中的作用;采用双荧光素酶报告基因、q RT-PCR、Western blot实验检测lncRNA OIP5-AS1以及miR-143-3p、COL1A1之间的靶向调控作用。结果 OIP5-AS1在胃癌细胞AGS、SGC7901中表达水平分别是GES-1细胞的6.10和5.53倍,差异有统计学意义（P<0.01）。同时,敲低OIP5-AS1会抑制胃癌细胞增殖[AGS:（0.71±0.07）比（1.20±0.11）;SGC7901:（...     

上皮间质转化在特发性肺纤维化及其信号通路中的研究进展

 特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）是一种慢性致死性疾病,其发病机制尚未完全阐明。上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是分化的肺泡上皮细胞失去上皮特征同时获得间充质细胞形态以及迁移性的生物学过程。阻断TGF-β-Smad、Wnt/β-catenin、Hippo等介导的信号转导,有利于抑制EMT,进而有助于抑制IPF进展。本文总结了EMT相关信号转导通路在IPF中的研究进展,为临床使用靶向EMT的药物诊疗肺纤维化患者提供一定的参考和依据。     

lncRNA MNX1-AS1通过调控miR-218-5p影响非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡及迁移

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1通过调控miR-218-5p的表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测MNX1-AS1和miR-218-5p在肺癌细胞系及肺正常上皮细胞系中的表达;采用双荧光素酶报告基因实验和RNA pull down实验验证MNX1-AS1和miR-218-5p之间的靶向关系;干扰A549细胞中MNX1-AS1和miR-218-5p的表达后,MTT、流式细胞术和Transwell实验检测MNX1-AS1靶向miR-218-5p对癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果与肺正常上皮细胞系相比,肺癌细胞系中MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低(P＜0.05);荧光素酶报告基因实验显示,MNX1-AS1可与miR-218-5p结合导致荧光素酶活性显著降低(P＜0.05);RNA pull down实验证实miR-218-5p能特异性结合MNX1-AS1(P＜0.05);抑制A549细胞中MNX1-AS1的表达后,miR-218-5p水平上调,细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,凋亡率显著升高;与MNX1-AS1抑制剂组相比,共抑制MNX1-AS1和miR-218-5p的细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,凋亡率下降(P＜0.05)。结论MNX1-AS1可以通过靶向下调miR-218-5p的表达影响非小细胞癌的增殖、凋亡、迁移和侵袭。     

抑制PARP1活性对博来霉素诱导的肺纤维化的改善作用

目的:探讨抑制聚ADP核糖多聚酶1(PARP1)活性对于博莱霉素导致的肺纤维化的改善作用,阐明抑制PARP1活化改善肺纤维化的作用机制。方法:48只雌性ICR小鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)和5、10、15 mg·kg^-1博莱霉素组(模型组)。3个模型组分别在第1、4、8、11、15、18、22和25天腹腔注射相应浓度的博莱霉素。60只雌性ICR小鼠随机分成对照组、10 mg·kg^-1博莱霉素模型组及不同剂量PARP1抑制剂PJ34治疗组(腹腔注射博来霉素20min前尾静脉注射1、5和10 mg·kg^-1 PJ34)。上述实验中,分别于第14、21和28天每组选取3只小鼠,处死后取肺。HE染色观察肺泡结构,Masson染色分析纤维化程度。肺上皮源性细胞A549用于博莱霉素刺激后,Real-time PCR法分析PJ34对上皮间充质转化(EMT)标志基因表达的影响。结果:与博莱霉素模型组比较,PJ34治疗组小鼠肺泡结构的破坏及胶原在肺间质中的沉积明显减轻;Real-time PCR法分析,与博莱霉素模型组比较,PJ34治疗组肺上皮细胞A549中E-cadherinmRNA表达水平升高(P<0.05),α-SMA和TGF-βmRNA表达水平下降(P<0.05或P<0.01)。结论:抑制PARP1活性可以影响EMT标志基因的表达及肺纤维化的产生,PARP1抑制剂可用于预防博来霉素治疗肿瘤过程中产生的肺纤维化。     

LncRNA CBR3-AS1在骨肉瘤中的表达和临床意义及对肿瘤生物学的影响

摘要：目的：探讨LncRNA CBR3-AS1在骨肉瘤患者中的表达、临床意义及对肿瘤生物学的影响。方法：回顾性收集2012年1月到2014年1月于我院骨科诊治的骨肉瘤66例患者病理组织样本和临床资料,qRT-PCR法检测病理组织中LncRNA CBR3-AS1表达,并将患者分为LncRNA CBR3-AS1高低表达两组,卡方检验LncRNA CBR3-AS1表达情况与骨肉瘤临床参数的相关性,Kaplan-Meier 生存分析法比较LncRNA CBR3-AS1高低表达骨肉瘤患者生存率的差异。体外实验敲低LncRNA CBR3-AS1表达对骨肉瘤细胞系U-2 OS肿瘤生物学行为影响。结果：LncRNA CBR3-AS1在骨肉瘤组织和细胞系中高表达（P<0.001）;LncRNA CBR3-AS1表达与Enneking分期（P<0.001）、远处转移（P=0.004）和组织学分级（P=0.036）显著性相关;LncRNA CBR3-AS1高表达与骨肉瘤患者总生存率呈负相关（P <0.01）;LncRNA CBR3-AS1高表达是骨肉瘤患者的不良预后因素（HR= 1.558, 95％CI:1.041-2.641,P=0.013）;敲低LncRNA CBR3-AS1表达可抑制骨肉瘤细胞系MG-63细胞增殖、迁移和侵袭、并促进细胞凋亡（P<0.001）;骨肉瘤组织中LncRNA CBR3-AS1和CBR3mRNA表达之间正相关（r=0.44,P=0.036）,敲低LncRNA CBR3-AS1对骨肉瘤细胞CBR3 mRNA和蛋白质表达降低。结论：LncRNA CBR3-AS1具有调节骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的致癌作用,是骨肉瘤患者预后独立危险因素。     

沙美特罗替卡松治疗特发性肺间质纤维化的临床观察

目的探讨沙美特罗替卡松对特发性肺间质纤维化(IPF)的治疗效果。方法 68例IPF患者分为对照组和治疗组,分别接受波尼松和沙美特罗替卡松治疗12周;比较治疗后两组患者临床症状、高分辨率CT(HRCT)计分以及肺功能的改变。结果治疗组患者吸入沙美特罗替卡松粉剂后,临床症状改善情况优于对照组;高分辨CT肺部扫描提示治疗组总有效率为80%,而对照组总有效率为65%;治疗组患者肺功能各项指标的改善情况也优于对照组患者。结论沙美特罗替卡松不仅能有效控制IPF患者的临床症状,同时也降低了糖皮质激素的用量。     

Advances in understanding of idiopathic pulmonary fibrosis

Our understanding of idiopathic pulmonary fibrosis （IPF） has undergone major changes in recent years. IPF is the most common of the idiopathic interstitial pneumonias. It remains the most often diagnosed, accounting for 50% to 60% of all cases. It is also associated with a worse prognosis than most of the interstitial lung diseases. The number of deaths related to IPF is nearly 14 times greater than those from asbestosis, while a recent estimate has suggested prevalence in the United States ranging from 14.0 to 42.7 cases per 100 000 population, depending on the criteria used for diagnosis,     

粉防己碱治疗肺纤维化作用机制及应用进展

肺纤维化(PF)是各种间质性肺疾病晚期的共同结局,目前尚没有有效的治疗方法。粉防己碱为汉防己的主要有效成分之一,在矽肺的治疗方面已经显示出良好的抗纤维化作用,且价格低廉、不良反应少。本文通过复习文献,总结了粉防己碱抗纤维化的主要作用机制包括:抑制炎症反应、改善氧化应激、影响细胞凋亡、干预转化生长因子β(TGF-β)的表达;并对近年来粉防己碱治疗特发性PF的临床报道进行介绍,为粉防己碱治疗特发性PF的临床应用提供理论依据。     

Cigarette smoking contributes to idiopathic pulmonary fibrosis associated with emphysema

Background Combined emphysema and pulmonary fibrosis,including idiopathic pulmonary fibrosis （IPF）,is a distinct disorder described with upper-lobe emphysema and lower-lobe fibrosis on chest computed tomography.Smoking appears to be the predominant risk factor for this disorder.We aimed to compare clinical features,smoking history,physiological and radiological findings between IPF with and without emphysema.Methods A sample of 125 IPF patients over a period of 48 months were evaluated.High resolution CT scans were reviewed blinded to clinical data.The IPF patients with or without emphysema were classified accordingly.Results The prevalence of emphysema in this IPF sample was 70/125.IPF with emphysema was significantly associated with smoking status （OR 63; 95％ CI 4.4 to 915; P=0.002） and smoking pack year （OR 1.1; 95％ CI 1.05 to 1.13; P=-0.000）.The patients with IPF and emphysema had a higher decrease in carbon monoxide diffusing capacity adjusted for alveolar volume （（58±19）％ pred vs.（66：±：21）％ pred; P=-0.021） and a higher prevalence of pulmonary hypertension （24/70 vs.7/55; P=0.006）.The two groups of patients had similar forced and residual volumes.No significant differences were found in cell differentials of bronchoalveolar lavage or the scores of fibrosis on chest CT.Survival of the patients with emphysema was significantly less than that of patients with IPF alone.Conclusions Cigarette smoking induces IPF combined with emphysema.Emphysema further impairs physiological function and increases the prevalence of pulmonary hypertension that leads to poor prognosis.The inclusion of the patients with combined pulmonary fibrosis and emphysema in IPF clinical trials may lead to under evaluation of the effect of treatment in patients.