高效液相色谱法测定甘草及其炮制品中5种活性成分的含量

 目的建立甘草及其3种炮制品中芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷和甘草酸的HPLC含量测定方法,并比较炮制前后5种主要活性成分含量的变化。方法采用依利特Hypersil ODS色谱柱,乙腈-3%乙酸梯度洗脱,流速为0.6mL·min^-1,检测波长为254nm,柱温为35℃,对甘草、炙甘草、蜜润甘草、清炒甘草中的5种活性成分进行含量测定。结果芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷和甘草酸分别在0.47～15.04μg(r=0.9996),0.13～4.16μg(r=0.9995),0.11～3.52μg(r=0.9999),0.13～4.16μg(r=0.9998),0.53～16.96μg(r=0.9990)内呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.7%,100.8%,99.7%,100.5%和99.6%,RSD分别为0.4%,1.8%,1.5%,2.1%,1.9%。测定甘草及其3种炮制品中5种活性成分的结果表明,除甘草苷含量蜜炙甘草高于蜜润甘草外,5种成分在4种样品中的含量依次为清炒甘草>生甘草>蜜润甘草>蜜炙甘草。结论炮制对甘草5种主要活性成分的含量有明显影响;本方法简便,快捷,可用于甘草及其炮制品的质量控制。     

泻白散的物质基准量值传递分析

目的 以指纹图谱、指标性成分含量、出膏率为指标,建立泻白散物质基准质量评价方法,考察其关键质量属性,探索饮片-物质基准的量值传递关系,初步拟定该经典名方物质基准质量标准。方法 依据古方记载制备泻白散物质基准,通过高效液相色谱法（HPLC）对15批饮片和物质基准的指纹图谱、指标性成分含量进行测定,流动相采用乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱;结合出膏率、指纹图谱相似度及指标成分转移率进行量值传递研究。结果 泻白散物质基准的指纹图谱中共归属了10个特征峰,其中2个来自炒桑白皮,4个来自焙地骨皮,4个来自炙甘草。以甘草苷、甘草酸及桑皮苷A作为指标性成分进行含量测定,泻白散物质基准中桑皮苷A的质量分数2.69%~4.26%,转移率（31.37±4.14）%;甘草苷质量分数0.09%~0.17%,转移率（36.12±4.03）%;甘草酸质量分数0.09%~0.16%,转移率（12.25±0.88）%。泻白散物质基准的指纹图谱相似度良好,14批物质基准与对照指纹图谱的相似度均>0.9;出膏率处于8.09%~11.29%。结论 建立的泻白散物质基准质量评价方法科学合理,饮片-物质基准量值传递传递过程稳定可控,拟定的物质基准质量标准可为后续泻白散现代制剂的开发提供实验依据与参考。     

巴戟天不同炮制品HPLC指纹图谱研究

目的 建立巴戟天Morinda officinalis不同炮制品蒽醌类成分指纹图谱,为巴戟天不同炮制品质量评价及炮制原理提供依据。方法 采用HPLC色谱法,色谱柱Ecosil ODS C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,柱温28 ℃,检测波长277 nm。对巴戟天4种炮制品进行指纹图谱研究,采用指纹图谱相似度软件进行分析。结果 建立了巴戟天不同炮制品的蒽醌类成分指纹图谱,分别指认了巴戟天、巴戟肉、盐巴戟5个色谱峰,制巴戟6个色谱峰。不同产地巴戟天质量差异显著。巴戟天不同炮制品间蒽醌类成分差异不大,但其量有变化,制巴戟由于炮制过程中使用了辅料甘草水溶液,新增了成分甘草素。结论 本法精密度、重复性、稳定性良好,利用HPLC指纹图谱分析方法,可较全面地反映巴戟天不同炮制品的差异。     

敦煌古医方大补肾汤标准煎液HPLC指纹图谱及多指标成分测定研究

目的 建立敦煌古医方大补肾汤（Dabushen Decoction,DD）标准煎液的HPLC指纹图谱及指标成分含量测定方法,并探寻其量值传递规律。方法 制备15批DD标准煎液,建立其HPLC指纹图谱,明确相似度及峰归属,测定指标成分5-羟甲基糠醛、甘草苷、肉桂酸、甘草酸、五味子醇甲的含量、全方出膏率及其转移率,分析饮片-标准煎液间的量值传递关系。结果 15批DD标准煎液指纹图谱的相似度均大于0.9,标定了28个共有峰,并指认5个色谱峰（5-羟甲基糠醛、甘草苷、肉桂酸、甘草酸、五味子醇甲）。指标成分5-羟甲基糠醛为1.173～1.404 mg/g,转移率为36.09%～40.79%;甘草苷为2.159～3.413 mg/g,转移率为31.91%～37.41%;肉桂酸为0.317～0.614 mg/g,转移率为32.74%～40.64%;甘草酸为4.175～6.559 mg/g,转移率为20.95%～28.48%;五味子醇甲为0.225～0.275 mg/g,转移率为3.52%～4.29%;出膏率为22.24%～26.75%,转移率为93.14%～111.01%。结论 采用指纹图谱、多指标含量及出膏率相结合的评价模式对DD标准煎液进行量值传递分析,科学合理,系统全面,可为后续DD的制剂开发和质量控制提供参考。     

经典名方当归四逆汤物质基准指纹图谱及关键质量属性量值传递规律研究

目的 建立经典名方当归四逆汤（Danggui Sini Decoction,DSD）指纹图谱并结合化学模式识别进行分析,建立多成分含量测定的方法,明确关键质量属性的传递规律。方法 采用HPLC法,乙腈-0.2%乙酸水溶液为流动相,建立指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）,结合层次聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）,寻找造成不同批次DSD物质基准质量差异的主要化学成分。制备15批物质基准,测定其指纹图谱相似度、指标性成分含量及干膏率。结果 建立了当归四逆汤指纹图谱,确定了16个共有峰,15批DSD物质基准相似度大于0.90,3种化学识别模式均将样品分为3类,造成主要差异的质量差异物来源于甘草苷。所建立的多成分含量测定方法耐用性良好。饮片-物质基准芍药苷、甘草苷、甘草酸的平均转移率分别为52.94%、48.79%、47.39%,干膏率平均传递率为86.40%。结论 建立了经典名方当归四逆汤指纹图谱,寻找出了造成批次差异的标志物及含量测定的方法,DSD物质基准的关键质量属性均可在饮片-水煎液-物质基准中稳定传递,初步构建DSD全过程质量控制体系,为后续制剂研究提供参考。     

半夏及其炮制品姜半夏HPLC特征指纹图谱系统性研究

目的 对半夏Pinelliae Rhizoma及其炮制品姜半夏Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Zingibere et Alumine不同提取部位的HPLC特征指纹图谱进行研究,阐明半夏炮制前后主要药效物质变化。方法 通过HPLC梯度洗脱建立半夏及其炮制品姜半夏的水及75%、95%乙醇提取部位的特征指纹图谱,并运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”和SPSS 17.0软件进行相似度和主成分分析（PCA）。结果 分别建立了半夏及其炮制品姜半夏不同部位的HPLC特征指纹图谱共有模式,指认了肌苷、鸟苷、腺苷、琥珀酸、盐酸麻黄碱、6-姜辣素6个特征峰。姜半夏与半夏HPLC特征指纹图谱相比,姜半夏在保留时间18.3、73.5 min附近新增2个峰（10号峰、19号峰6-姜辣素）。结论 首次建立了半夏及其炮制品姜半夏不同提取部位的HPLC特征指纹图谱,该方法稳定、简便、可靠,可有效地控制半夏药材及姜半夏饮片的质量。     

温胆汤UPLC-UV-MS/MS指纹图谱研究

目的 研究和建立温胆汤UPLC-UV指纹图谱,确定色谱峰药材来源,同时对各成分进行定性研究,为该方物质基础和质量控制提供科学依据.方法 UPLC-UV法进行温胆汤指纹图谱研究,对14批样品进行相似度分析;阴性液对照法进行共有峰药材来源研究;UPLC-MS/MS法对温胆汤中成分进行定性研究.结果 建立了温胆汤UPLC-UV指纹图谱,进行了方法学考察,结果显示该方法精密度、稳定性、重复性良好;对14批样品进行指纹图谱研究,得出共有峰指纹图谱,标记了22个共有峰;进行了14批样品相似度比较,相似度在0.863～0.998;通过与对照品保留时间比较,直接指认了橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、甘草苷和甘草酸铵;与药材阴性液比较,对22个共有峰药材来源进行了归属;UPLC-MS/MS法定性了橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、甘草苷和甘草酸铵5个成分,推断出了圣草枸橼苷、异柚皮苷、枸橘苷、乌拉尔甘草皂苷乙4个成分.结论 建立的指纹图谱方法准确、可靠,对温胆汤物质基础和质量控制研究提供了一定参考.     

炒火麻仁饮片标准汤剂特征图谱及有效成分的定量检测

目的 制备炒火麻仁饮片标准汤剂,进行质量标准研究。方法 选择20批不同产地火麻仁药材炮制成炒火麻仁饮片,经水煎煮后制备成标准汤剂,测定其总脂肪和胡芦巴碱的含量,计算出膏率和转移率,并建立特征图谱分析方法。结果 20批炒火麻仁饮片标准汤剂的出膏率为15.55%~22.04%,总脂肪转移率为5.61%~17.33%,胡芦巴碱转移率为83.93%~98.72%,并用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012版）进行特征图谱分析,标定了6个特征峰,并指认了其中的峰1、峰5和峰6分别为鸟苷、α-亚麻酸和亚油酸。对20批炒火麻仁饮片标准汤剂特征图谱进行相似度评价,其相似度均高于0.90。结论 建立了炒火麻仁饮片标准汤剂特征图谱和含量测定方法,该方法简便、稳定、重复性好,可为炒火麻仁配方颗粒质量控制提供参考。     

桂枝甘草汤HPLC指纹图谱

目的： 建立桂枝甘草汤的HPLC指纹图谱检测方法。 方法： 采用Agilent SB-AQ色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量10 μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”对10批桂枝甘草汤HPLC指纹图谱进行评价。 结果： 以桂皮酸为参照峰,确定了25个共有峰,指认其中4个共有峰分别为甘草酸、甘草苷、桂皮酸和桂皮醛。10批桂枝甘草汤的指纹图谱相似度均>0.95。 结论： 该方法灵敏度高、稳定性和准确性良好,为桂枝甘草汤质量标准建立提供了可靠的科学依据。     

金振口服液HPLC-UVD-ELSD特征指纹图谱及13个成分同时定量的整体质量控制研究

目的 建立金振口服液（Jinzhen Oral Liquid,JOL）高效液相色谱-紫外真空波-蒸发光散射检测器（HPLC-UVD-ELSD）特征指纹图谱,结合13个主要代表性成分（没食子酸、甘草苷、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、甘草素、黄芩苷、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、千层纸苷、汉黄芩苷、大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D葡萄糖苷、甘草酸、猪去氧胆酸、胆酸）同时定量的方法,对市售制剂进行整体质量控制。方法 采用Cosmosil-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;检测波长为254 nm;ELSD漂移管温度115℃;载气体积流量2.0 L/min;以甲醇-水（含0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱,建立JOL的HPLC-UVD-ELSD特征指纹图谱,对主要特征峰进行明确化学指认并确定组方中药来源,运用相似度软件对15批市售制剂进行相似度评价,同时在市售制剂批间差异小的前提下测定主要代表性成分的含量。结果 建立了JOL的HPLC-UVD-ELSD指纹图谱结合13个代表性成分同时定量的方法;覆盖该复方4味组方中药的15个主要特征峰得到明确化学指认,分别为没食子酸（1号峰）、甘草苷（5号峰）、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（7号峰）、甘草素（11号峰）、黄芩苷（13号峰）、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸（16号峰）、千层纸苷（17号峰）、汉黄芩苷（18号峰）、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷（19号峰）、大黄酚1-O-β-D-葡萄糖苷（20号峰）、大黄酸（24号峰）、甘草酸（26号峰）、（18β,20α）-甘草酸（27号峰）、猪去氧胆酸（28号峰）、胆酸（29号峰）,并初步确定了29个特征峰的组方中药来源分别为8、12、13、15～18号峰归属于黄芩,3～5、10、11、25～27号峰归属于甘草,1、6、7、9、14、19、20、24号峰归属于大黄,2号峰归属于平贝母,28、29号峰归属于人工牛黄,21～23号峰归属于辅料;15批市售制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.968～1.000;13个定量成分线性关系良好（R²＝0.999 0～0.999 9）,且平均回收率为96.90%～102.84%,15批市售制剂定量成分的质量浓度分别为没食子酸51.82～148.27 μg/mL、甘草苷75.04～130.00 μg/mL、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷31.72～39.84 μg/mL、甘草素14.24～43.65 μg/mL、黄芩苷610.37～867.40 μg/mL、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸12.87～34.09 μg/mL、千层纸苷62.45～101.48 μg/mL、汉黄芩苷155.41～205.86 μg/mL、大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷11.56～23.72 μg/mL、大黄酚-8-O-β-D葡萄糖苷16.14～36.87 μg/mL、甘草酸222.97～310.32 μg/mL、猪去氧胆酸177.48～239.70 μg/mL、胆酸98.54～132.85 μg/mL。结论 所建立的金振口服液HPLC-UVD-ELSD特征图谱和定量测定分析方法为进一步提升制剂整体质量标准提供了重要证据。     

甘草中黄酮类化学成分的研究进展

查阅近年有关文献,对甘草中黄酮类化学成分及其药理作用进行综述。甘草中黄酮类化合物分为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查尔酮类、双氢黄酮类、双氢查尔酮类等;药理研究证明其具有抑菌、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等广泛的药理作用,对其进行进一步的研究和开发具有重要意义。     

甘草止咳药效与其数字化颜色测量值的相关性分析

目的：通过色度计对甘草的颜色性状测定,对甘草断面颜色特性与甘草质量评价的相关性进行探讨。方法：运用分光光度计测定甘草颜色数字化测量值,并对甘草止咳药效进行评价。将甘草止咳药效与甘草断面颜色数字化测量值进行相关性分析。结果：阳性对照组、杭锦旗野生、玉门野生甘草大剂量组与空白组相比,小鼠咳嗽潜伏期时间延长,2分钟内咳嗽次数降低,与空白对照组比较差异有显著性意义（P < 0.01）。杭锦旗栽培大中小剂量组、玉门栽培大、中剂量组2分钟内咳嗽次数均有不同程度降低,与空白对照组比较存在显著差异。指标值L*、a*和甘草止咳作用之间不存在显著相关,指标值b*和止咳作用之间存在显著相关,b*值越大,药材的感官颜色越黄,甘草止咳效果越好。结论：可以通过颜色数字化信息推断甘草止咳作用的趋势,颜色测量在甘草质量评价中的应用得到了常用质量评价方法的支持。     

宁夏甘草栽培技术规程

甘草是重要的沙生药用植物资源，也是宁夏半荒漠草地自然植被的主要组成部分。人工种植甘草既能有效地缓解因过度采挖造成草场原生植被和资源的破坏，达到生态重建、修复环境的目的，又能实现节水，调整产业结构，促进农民增收和发展农村经济的目标。人工种植甘草已列入国家中药材现代化科技产业行动计划，宁夏人工种植甘草面积已达到了0．27万hm^2以上。     

中国药用甘草物种划分的分子基础研究

目的:阐明中国药用甘草物种之间的界限,为甘草资源开发和优良品种选育奠定基础。方法:PCR扩增、DNA序列测定、分支分析。结果:获得我国甘草属8种(变种)植物的ITS序列,得到中国药用甘草的系统发育树。结论:支持黄甘草归并入胀果甘草、密腺甘草归并入光果甘草;支持无腺毛甘草为独立的物种。     

基于LC-MS/MS法分析生、炙甘草中水溶性成分

目的 基于LC-MS/MS定性/定量分析生、炙甘草中水溶性成分.方法 采用LC-MS/MS正、负离子模式对生、炙甘草水溶性成分进行检测,并以Marker View软件分析甘草蜜炙前后的差异性成分;在此基础上采用梯度波长HPLC法对生、炙甘草8种主要差异性成分(4种黄酮及4种三萜皂苷)进行定量分析比较.结果 从中鉴定出30种水溶性差异性成分,其中包括12种黄酮类和18种皂苷类;其中黄酮类异甘草苷、芹糖异甘草苷在蜜炙后平均含有量分别上升5.11%、25.94%,甘草苷、芹糖甘草苷含有量分别下降21.77%、18.43%,而4种三萜皂苷平均含有量在蜜炙后均出现下降,幅度在10.07%~16.69%.结论 该方法准确稳定,重复性好,可为炙甘草的炮制及质量评价研究提供一定的参考.     

吸湿回干处理对甘草种子萌发的作用

吸湿回干处理对甘草种子的萌发有显著的促进作用,以吸湿2小时,处理4次后效果最好。     

经方运用甘遂配甘草的探索与实践

目的:探索经方甘遂半夏汤中甘遂配甘草的理论研究与临床应用。方法:通过研究甘遂配甘草的古代认识,历代沿袭,以及甘遂、甘草主治、化学成分及药理,甘遂配甘草是否产生新的毒性,甘遂配甘草之间的用量调配关系等,进而证实临床运用以甘遂半夏汤为主治疗肠结核,甲状腺炎的可行性与实用性。结果:探索甘遂配甘草在理论上是科学的,在临床中具有良好的治疗作用。结论:历史记载甘遂与甘草相反是缺乏理论假说的,临床中合理应用辨治诸多病证则是客观事实。     

史锁芳教授应用大剂量甘草治疗支气管哮喘探讨经验

哮喘是由多种细胞（嗜酸性细胞、肥大细胞、T细胞、中性粒细胞）和细胞成分参与的气道慢性炎症性疾病。这种慢性炎症导致气道反应性的增加,通常出现可逆性的气流受限,并引起反复发作性的喘息、气急、胸闷、咳嗽等症状。肾上腺糖皮质激素是目前最有效的抗炎药。甘草与其在结构和药理作用有相似性,故应用大剂量甘草配伍其他中药治疗支气管哮喘,不仅可以干预本病的发作,还减少了运用激素的不良反应。其大剂量甘草配合其他中药对治疗支气管哮喘有积极和深远的意义。     

加味麻杏石甘汤治疗支气管哮喘64例

[目的]观察加味麻杏石甘汤治疗支气管哮喘急性发作期的疗效。[方法]将128例随机分为两组,治疗组在西药治疗基础上,结合中药汤剂口服,对照组只用西药常规治疗。[结果]治疗组的疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]在西药治疗基础上配合加味麻杏石甘汤,可明显改善症状,缩短疗程。