YB-1蛋白对食管癌细胞恶性表型的影响

目的 探究YB-1蛋白对食管癌细胞恶性表型的影响。方法 利用Western blot法检测10株食管癌细胞系中YB-1蛋白的表达情况。将YB-1高表达质粒和siRNAs瞬时转染至KYSE450和YES2细胞系中,分别检测其mRNA及蛋白的变化量;利用Transwell检测YB-1蛋白对食管癌细胞侵袭迁移的影响;利用克隆形成及xCELLigence Real-time Cell Analyzer （RTCA）-MP系统检测YB-1蛋白对细胞克隆形成及细胞增殖的影响。结果 选取KYSE450和YES2作为实验对象,结果表明高表达YB-1可促进食管癌细胞的增殖,增强克隆形成能力,促进食管癌细胞的侵袭和迁移;敲降YB-1则结果相反。结论 YB-1蛋白影响食管癌细胞的恶性表型,具有促癌的作用。     

RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组（阴性对照）、si-RasGRF1组（沉默RasGRF1表达）、NG组（空白对照）。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高（P <0.05）,选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <...     

HOXA1基因反义寡核苷酸对食管癌细胞生长的影响

  目的  探讨同源异形盒A1(HOXA1)基因反义寡核苷酸（ASODN）对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及机制。  方法  采用蛋白免疫印迹（Western blot）检测正常食管上皮细胞Het-1A和人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白的表达,筛选高表达的食管鳞癌细胞进行后续实验;设计合成HOXA1 ASODN链、正义寡核苷酸(SODN)链及无义寡核苷酸（N-ODN）链;将筛选出的高表达的食管鳞癌细胞分为HOXA1 ASODN组（5、10、15 μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞）、对照组（细胞常规培养,不进行细胞转染）、SODN组（细胞转染15 μmol/L的SODN）和N-ODN组（细胞转染15 μmol/L的N-ODN）。采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell小室分别检测细胞活力、凋亡率及侵袭迁移能力;Western blot检测HOXA1、磷酸化的丝氨酸苏氨酸激酶（p-AKT）、细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、B细胞淋巴瘤-2蛋白（B-cell lymphoma 2,Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。  结果  与正常食管上皮细胞Het-1A比较,人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白表达均升高,差异有统计学意义（P<0.05）。HOXA1蛋白在Eca109细胞表达最高,因此选用Eca109细胞进行后续实验。转染HOXA1 ASODN的Eca109细胞HOXA1蛋白表达降低（P<0.05）。随着Eca109细胞转染HOXA1 ASODN浓度及时间增加,Eca109细胞活力降低,与对照、SODN、N-ODN组比较差异有统计学意义（P<0.05）。15 μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞后,与对照组比较,细胞侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高,p-AKT、PCNA和MMP-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高（P<0.05）。  结论  HOXA1基因反义寡核苷酸可抑制食管癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,并诱导凋亡,机制与抑制磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/AKT信号通路可能有关。     

人舌鳞癌细胞中SOCS1表达抑制对细胞侵袭及凋亡的影响

目的 研究细胞信号转导抑制因子1(SOCS1)基因表达抑制对人舌鳞癌细胞侵袭、迁移及凋亡的影响。方法 人舌鳞癌细胞系CAL27中SOCS1沉默效果采用实时定量PCR和Western blotting方法验证;应用Transwell侵袭小室模型观察舌鳞癌细胞的侵袭力;划痕试验检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平。结果 SOCS1干扰片段显著下调CAL27细胞SOCS1基因的蛋白和m RNA表达水平(P0.05)。沉默SOCS1表达后,干扰组和对照组细胞体外穿膜细胞数分别为(42±9)个和(91±17)个,迁移细胞数分别为(93±14)个和(184±3)个,干扰组均明显弱于对照组(P0.05);SOCS1表达抑制后CAL27细胞凋亡率(11.5±2.1)%明显大于对照组(1.3±0.4)%,且凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平下降,与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论 人舌鳞癌细胞株CAL27的SOCS1基因表达抑制后,体外侵袭、迁移能力下降,且促进舌鳞癌细胞凋亡。     

miR-154靶向HMGA2基因在人子宫内膜癌中的表达及其对癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 研究miR-154靶向HMGA2基因在人子宫内膜癌中的表达及其对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响。方方法 检测各组样本中HMGA2 mRNA、miR-154的表达水平和HMGA2蛋白表达水平。培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B、HHUA、hEEC和正常子宫内膜细胞株hESC,构建miR-154模拟物,检测各组细胞中HMGA2蛋白、miR-154及HMGA2 mRNA的表达情况,荧光素酶报告实验鉴定HMGA2与miR-154的靶向关系,检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭情况。结果 HMGA2 mRNA和蛋白在子宫内膜癌中高表达,miR-154在子宫内膜癌中低表达。miR-154的表达量与子宫内膜疾病的严重程度呈负相关关系,HMGA2的表达量与子宫内膜疾病的严重程度呈正相关关系。HMGA2基因的表达显著提高了子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力（P<0.05）。结论 miR-154可通过负调控HMGA2抑制子宫内膜癌细胞的恶性生物学行为。     

沉默环状RNAhsa_circ_0076535表达对食管鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探究circRNA hsa_circ_0076535在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的作用.方法 选取ESCC患者肿瘤组织及相匹配的癌旁组织、ESCC细胞(Het-1A、Eca109、KYSE170)进行研究.实时荧光定量聚合酶链反应检测hsa_circ_0076535在ESCC组织及细胞内的表达水平;利用siRN...     

miR-3188对胃癌细胞恶性生物学行为的作用及机制研究

目的 探究miR-3188对胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其潜在分子机制。方法 通过qRT-PCR法检测正常人胃黏膜细胞(GES-1)及人胃癌细胞系(HGC-27、MGC-803、BGC-823、MKN-45)中miR-3188表达水平,通过生物信息学分析及双荧光素酶报告实验确定NRAGE是否为miR-3188的靶基因,分别将miR-3188 mimic、miR-3188 inhibitor及阴性对照物miR-NC,antimiR-NC转染至胃癌细胞HGC-27中,通过Western blot及qRT-PCR法检测NRAGE蛋白及mRNA表达水平,将miR-3188 mimic, NRAGE过表达质粒(pc-NRAGE)及其阴性对照物miR-NC、pc-control分别或共转染至胃癌细胞HGC-27中,利用CCK-8、流式细胞术、Transwell实验检测各组细胞增殖活性、凋亡率、侵袭及迁移的能力,通过Western blot检测各组细胞上皮-间质转化(EMT)、增殖、凋亡、侵袭及迁移相关蛋白[细胞周期蛋白D 1(CyclinD 1),基质金属蛋白酶9(MMP 9),B-ce...     

过表达LRRFIP1对肝癌细胞Huh7生物学行为的影响

目的：探讨LRRFIP1表达上调对肝癌细胞Huh7的生物学行为影响,并初步探索其相关机制。方法：构建LRRFIP1过表达的稳定细胞株,实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和蛋白免疫印迹法（western blotting）检测过表达效率,细胞增殖实验（CCK-8）检测过表达LRRFIP11对Huh7细胞增殖能力的影响;平板克隆形成实验检测过表达LRRFIP1对Huh7细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术检测过表达LRRFIP1对Huh7细胞周期和凋亡的影响;划痕实验和Transwell实验检测过表达LRRFIP1对细胞迁移和侵袭能力的影响;检测与上皮间质转化（EMT）相关的蛋白E-cadherin、N-cadherin,Vimentin和Snail的表达;免疫共沉淀和蛋白质谱技术串联（CoIP-MS）法筛选可能与LRRFIP1互作蛋白。结果：过表达LRRFIP1促进了Huh7细胞的增殖（P<0.001）和克隆形成能力（P<0.001）,抑制了细胞凋亡（P<0.01）;过表达LRRFIP1导致Huh7细胞G0/G1期比例减少,S期增加（P<0.001,P&l...     

黏蛋白1C亚基对食管癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨黏蛋白1 C亚基(MUC1-C)在食管鳞癌中的表达定位及在肿瘤细胞恶性生物学行为中的作用。 方法 Western blotting检测MUC1-C在食管鳞癌组织及正常组织细胞核内的表达;运用穿膜肽Go-201抑制MUC1-C入核后,集落实验及CCK-8实验检测食管鳞癌细胞的活性、生长和增殖能力;划痕实验及Transwell小室实验检测食管鳞癌细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测食管鳞癌细胞凋亡率。 结果 MUC1-C在食管鳞癌组织细胞核内的表达高于正常组织,抑制MUC1-C入核后食管鳞癌细胞活性、生长、增殖、迁移、侵袭能力均降低,凋亡率增高。 结论 MUC1-C通过入核发挥作用,能诱导和促进食管鳞癌细胞的恶性生长、增殖、迁移、侵袭,抑制肿瘤细胞的凋亡。     

中期因子在食管鳞状细胞癌中的表达及生物学功能研究

目的:探讨中期因子(midkine,MDK)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其生物学功能.方法:收集本院胸外科行手术切除的食管鳞状细胞癌组织及对应癌旁组织60例,采用免疫组化染色方法检测肿瘤组织及对应癌旁组织中MDK的表达情况,统计分析MDK表达与肿瘤临床病理特征间的相关性;体外培养人食管鳞状细胞癌Eca-109细胞,利用siRNA特异性敲低细胞内MDK的表达水平,分别采用MTT及流式细胞仪检测Eca-109细胞增殖及凋亡能力的变化.结果:与癌旁组织相比,ESCC组织中MDK呈明显高表达趋势(P＜0.05);ESCC组织中MDK高表达与肿瘤体积增大(＞3 cm)、肿瘤淋巴结转移及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)相关(P＜0.05);在体外,敲低MDK表达可显著抑制Eca-109细胞增殖能力,并促进细胞凋亡的发生(P＜0.05).结论:中期因子与食管癌组织生长有关,特异性下调食管癌细胞内MDK的表达能够显著抑制食管癌细胞增殖并促进其凋亡的发生.     

LncRNA MIAT靶向miR-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用研究

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIAT靶向微小RNA(miR)-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。方法 将食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞分为ctrl组(正常培养的ESCC细胞)、si-NC组、si-MIAT组、si-MIAT+miR-NC组和si-MIAT+miR-206 inhibitor组。实时qRT-PCR检测各组细胞MIAT、miR-206表达;CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;蛋白质印迹技术检测PCNA、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证MIAT和miR-206的关系。结果 与ctrl组、si-NC组比较,si-MIAT组ESCC细胞中miR-206表达、细胞凋亡率升高,MIAT、OD₄₅₀值(24、48、72 h)、划痕愈合率、PCNA和MMP9蛋白表达降低(P<0.05);干扰LncRNA MIAT表达能降低ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力,提高细胞凋亡能力,MIAT靶向调控miR-206表达。结论 干扰LncRNA MIAT表达能够阻滞ESCC...     

“cell-in-cell”对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 探究胃癌肿瘤细胞与免疫细胞cell-in-cell的形成对胃癌细胞生物学行为的影响。 方法 胃癌细胞与单核淋巴细胞（PBMC）的共培养体系分为对照组、1∶1组和5∶1组。PBMC和BGC823细胞分别以1∶1和5∶1的接种到24 孔板中（共5×10 4个）。通过吉姆萨染色检测“cell-in-cell”构建情况。分别检测各组细胞增殖、凋亡和侵袭能力。 结果 1∶1组的“cell-in-cell”构建率为（8.65±1.06）%。5∶1组的“cell-in-cell”构建率为（12.92±1.32）%,显著高于1∶1组（P＜0.05）。3组细胞的生物学行为水平比较差异显著（P＜0.05）。1∶1组的增殖和侵袭能力显著高于对照组,而凋亡率显著低于对照组（P＜0.05）。5∶1组的增殖和侵袭能力显著高于1∶1组和对照组,而凋亡率显著低于1∶1组和对照组（P＜0.05）。 结论 胃癌细胞与免疫细胞形成的“cell-in-cell”结构会促进胃癌细胞的增殖和侵袭并抑制凋亡。     

CKLF样MARVEL跨膜结构域超家族7基因在食管癌中的表达及其过表达对食管癌细胞增殖的影响

目的 探讨CKLF样MARVEL跨膜结构域超家族7(CMTM7)基因在食管癌中的表达情况及其过表达对食管癌细胞增殖的影响.方法 收集97例食管癌患者的手术标本,包括食管癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测CMTM7在食管癌与癌旁组织组织中的表达情况.分别采用实时荧光聚合酶链式反应、Western Blot检测人食管癌细胞系CE81T和正常人食管鳞状上皮细胞Het-1A中CMTM7 mRNA及蛋白的表达情况.将食管癌细胞系CE81T分为两组,实验组加入转染过表达CMTM7的腺病毒表达载体(Ad-CMTM7),对照组加入空载体腺病毒,在培养24 h、48 h、72 h和96 h时,采用细胞活性检测法(CCK-8)检测两组细胞增殖情况.结果 免疫组化结果显示CMTM7在食管癌中低表达,在癌旁组织中高表达.正常食管上皮细胞Her-1A中的CMTM7 mRNA和蛋白表达水平明显高于食管癌细胞CE81T.CCK-8结果显示,各时间点CE81T细胞实验组的吸光值均低于对照组(P＜0.05).结论 食管癌的CMTM7表达水平下调,过表达CMTM7对食管癌细胞的增殖具有显著的抑制作用.     

食管鳞癌组织中β1整合素的表达及其与生物学行为的关系

目的检测β1整合素在食管鳞癌中的表达,探讨其与食管鳞癌临床生物学行为的关系,为食管鳞癌的基因治疗和预后判断提供理论依据。方法采用S-P免疫组织化学染色法检测10例正常食管粘膜和60例食管鳞癌组织中β1整合素的表达。结果β1整合素在食管鳞癌中的阳性表达率(61.67%)较正常粘膜(90.00%)低,但无显著性差异(P>0.05);在浸润至全层组β1整合素的阳性表达率(20.83%)显著低于浸润至肌层组(50.00%)(P<0.05);在淋巴结移组其阳性表达率(43.48%)显著低于无淋巴结转移组(72.97%)(P<0.05)。结论β1整合素的低表达可能是食管鳞癌浸润和淋巴结转移的原因之一。     

Caveolin-1在食管鳞癌中的表达及意义

目的：研究Caveolin-1在食管鳞癌各个节段及分化程度不同的病理标本中的表达情况,对食管癌发生、发展的作用机制及治疗、预后进行探讨。方法：采用SP免疫组织化学法检测食管鳞癌96例,分别检测颈段食管癌及胸上、中、下段、腹段食管癌的Caveolin-1表达情况,应用统计学参数阐明其不同强度的表达情况。结果：Caveolin-1在正常食管黏膜呈弱阳性表达,在食管高分化鳞癌呈强阳性表达,在食管中分化鳞癌呈中等强度阳性表达,在食管低分化鳞癌呈弱阳性表达,后3者之间比较有统计学意义（χ2=13.559,P〈0.001）,Caveolin-1在不同节段部位食管癌表达情况无统计学差异（χ2=2.658,P〉0.05）。结论：Caveolin-1在食管鳞癌组织中的不同表达,提示Caveolin-1在食管癌不同发生发展阶段产生了重要影响;在相同病理类型的病例中其表达无差异,表明Caveolin-1均参与各段食管癌的发生、发展、转移、浸润各个过程。     

LncRNA FOXD3-AS1在卵巢癌SKOV3细胞中的表达及对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响

目的 探究LncRNA FOXD3-AS1在卵巢癌SKOV3细胞中的表达及影响SKOV3细胞恶性生物学行为的作用机制。方法 收集2020年10月~2021年6月我院病理科经过临床确诊的55例卵巢癌患者,利用RT-qPCR技术分析卵巢癌组织、癌旁组织、SKOV3细胞和IOSE80细胞中FOXD3-AS1、miR-325和CDCA5的表达;siRNA靶向敲降FOXD3-AS1和CDCA5的表达,通过细胞克隆形成实验、细胞迁移实验和Western blot检测SKOV3细胞增殖、迁移及其EMT能力。miRanda、TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA FOXD3-AS1与miR-325、miR-325与CDCA5之间的关系。miR-325 inhibitor转染细胞,或pcDNA-FOXD3-AS1与miR-325 mimics共转染细胞后分析SKOV3细胞增殖、迁移和EMT情况。结果 与IOSE80细胞、癌旁组织对比,SKOV3细胞、卵巢癌组织内LncRNA FOXD3-AS1、CDCA5表达上调（P＜0.01）,miR-325表达下调（P＜0.01）。siRNA靶向敲降FOXD3-AS1和CDCA5的表达抑制了SKOV3细胞增殖、迁移与EMT;LncRNA FOXD3-AS1的下游作用靶点为miR-325,miR-325的作用靶点为CDCA5;pcDNA-FOXD3-AS1与miR-325 mimics共转染细胞后部分逆转了miR-325 mimics转染细胞对SKOV3细胞增殖、迁移和EMT的抑制作用。结论 LncRNA FOXD3-AS1在卵巢癌SKOV3细胞中表达上调及通过miR-325/CDCA5轴影响SKOV3细胞恶性生物学行为。     

siRNA沉默Msi1表达对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法针对Msi1基因mRNA序列设计合成siRNA,转染人宫颈癌Hela细胞;实验分Msi1siRNA组、空白对照组、脂质体组及阴性对照组;通过RT-PCR法检测Msi1基因在mRNA水平的表达;分别利用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色试验、群体倍增时间及平皿克隆实验分析干扰Msi1基因对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制效应;通过细胞划痕实验观察干扰Msi1对细胞迁移能力的影响;利用Transwell小室实验观察干扰Msi1对细胞侵袭能力的影响。结果Msi1siRNA能有效抑制人宫颈癌Hela细胞中Msi1基因的表达;Msi1siRNA转染Hela细胞24、48、72h后,与其他各组比较,Msi1siRNA组Hela细胞的生长、增殖速度明显减缓（均P＜0.05）。空白对照组Hela细胞群体倍增时间为（20.18±0.01）h,而干扰Msi1基因处理后的Hela细胞,群体倍增时间延长至（35.68±0.04）h（P＜0.05）;同时平皿克隆实验结果发现,Msi1siRNA处理后的Hela细胞与其他各组相比,Hela细胞生长明显减慢（均P＜0.05）;细胞划痕实验和Transwell小室实验分别显示处理后的Hela细胞其迁移和侵袭能力均明显下降,与其他各组相比差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭有负性调节作用。     

27-羟基胆固醇与胆固醇对裸鼠食管鳞癌和人食管癌细胞增殖的影响

目的 旨在探讨胆固醇和27-羟基胆固醇对食管鳞癌增殖、侵袭和迁移能力的生物学行为及对细胞因子MCP-1分泌的影响。 方法 动物体内实验:通过建立裸鼠食管鳞癌动物模型,给予高胆固醇饮食(高胆固醇饮食组,n=4)和正常饮食(对照组,n=4),观察胆固醇在体内对食管鳞癌肿瘤生长的影响,第5周实验终止时,对两组瘤体体积进行测量并计算抑瘤率。细胞实验:观察胆固醇(浓度分别为0、0.123、0.148、0.185、0.269、0.370 mg/mL)和27-羟基胆固醇(浓度分别为0、1、5、10、20 μmol/mL)对正常食管鳞癌细胞(ECA109)和基因cyp27a1、cyp7b1敲除后的ECA109细胞增殖能力的影响,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同药物浓度干预下细胞的增殖活性。采用划痕实验和侵袭实验(胆固醇0.185 mg/mL,27-羟基胆固醇1 μmol/mL)检测肿瘤细胞的侵袭效应。利用慢病毒转染敲除27-羟基胆固醇的上游基因cyp27a1和下游基因cyp7b1,重复上述实验,探讨27-羟基胆固醇合成或代谢基因敲除对ECA109细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并通过ELISA实验检测基因敲除后对肿瘤细胞单核细胞趋化因子-1(MCP-1)分泌的影响。两组不同时间瘤体体积和CCK-8吸光度值采用两因素方差分析,交互作用有统计学意义时进一步行简单效应分析。多组间数据均值差异比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用LSD法。 结果 动物实验结果表明:裸鼠异种移植肿瘤体积在高胆固醇饮食组与对照组分别为(5.055±0.774)cm³和(1.866±0.618)cm³,抑瘤率为-170.79%,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞实验结果表明:(1)胆固醇可以促进ECA109细胞和上游基因cyp27a1敲除后的ECA109细胞增殖,胆固醇低浓度下促进上游基因cyp27a1敲除后的ECA109细胞增殖(P均<0.05);27-羟基胆固醇可以抑制ECA109细胞增殖,但促进下游基因cyp7b1敲除后的ECA109细胞增殖(P均<0.05);(2)胆固醇和27-羟基胆固醇对于ECA109细胞迁移能力无影响(F=2.418,P=0.170),27-羟基胆固醇的上游基因cyp27a1和下游基因cyp7b1敲除对ECA109细胞迁移能力无影响(F=0.602,P=0.578);(3)基因敲除后细胞与对照组相比,细胞侵袭能力发生改变(F=3.992,P=0.047),其中下游基因cyp7b1敲除后,侵袭能力受到抑制(P<0.05);上游基因cyp27a1敲除对ECA109细胞侵袭能力无影响(P>0.05);(4)与正常ECA109细胞相比(151.883±2.948),基因敲除可以使肿瘤细胞MCP-1因子的分泌发生改变(F=553.538,P<0.001)。上游基因cyp27a1敲除后,细胞的MCP-1因子分泌增多(213.823±4.572),下游基因cyp7b1敲除后,细胞的MCP-1因子分泌减少(107.240±4.121)(P均<0.001)。 结论 胆固醇在体内外均可刺激ECA109细胞的增殖;27-羟基胆固醇抑制ECA109细胞增殖,胆固醇促进ECA109细胞的增殖,并且具有浓度依赖性;上游基因cyp27a1敲除可以增强胆固醇在低浓度下对细胞增殖能力的影响,但对细胞侵袭能力无影响;下游基因cyp7b1敲除可以改变27-羟基胆固醇对细胞增殖活性的影响,并抑制细胞的侵袭能力;27-羟基胆固醇上游基因cyp27a1敲除可促进细胞MCP-1因子的分泌,下游基因cyp7b1敲除抑制MCP-1因子的分泌。