熊果酸抑制肿瘤生长机制研究进展

熊果酸广泛分布于天然植物中,具有抑制肿瘤细胞增殖、增强药物毒性、诱导肿瘤自噬及凋亡、抗侵袭和转移、肿瘤药物增敏、逆转肿瘤细胞对化疗药物耐药等多个方面抑制肿瘤的作用的中药单体。近期研究表明,熊果酸衍生物可以通过多种途径抑制肿瘤细胞的活性,且能降低对正常细胞的毒副作用,是一种有效的化学治疗和化学预防药物。熊果酸作为一种理想的天然化疗药物,其高效低毒抗肿瘤作用,为临床发展新药物带来希望。     

四物汤基于雌激素受体亚型介导的雌激素样效应及其分子机理的研究

目的:利用在体动物实验和体外雌激素受体(ER)阳性MCF7细胞培养实验研究四物汤的雌激素样效应及其分子机理。方法:40只未性成熟SD大鼠,体质量50 g,21 d,按照随机分组的原则分为4组:正常对照组、雌激素组、四物汤高剂量组和四物汤低剂量组。灌胃给药,2次/d,持续4 d后取材,称量子宫重量,计算子宫系数,并制备药理血清。用四物汤药理血清作用于MCF7细胞,并分别加入ERα和ERβ特异性拮抗剂MPP和PHTPP作为工具药,通过MTT法检测四物汤对MCF7细胞增殖的影响; Western blot法检测四物汤对MCF7细胞ERα、ERβ蛋白表达的影响。结果:四物汤可发挥雌激素样效应,增加未性成熟大鼠的子宫系数(P 0. 05或0. 01);四物汤药理血清可促进细胞增殖(P 0. 05或0. 01),该促增殖作用在加入MPP或PHTPP后均被减弱,且加入PHTPP后拮抗作用更显著(P 0. 01)。Western blot检测发现四物汤药理血清可提高MCF7细胞ERα、ERβ的表达水平,并可降低ERα与ERβ比值(P 0. 01)。结论:四物汤在整体动物水平可表现出雌激素样效应;体外实验进一步证实四物汤可通过ER通路,特别是ERβ途径影响ER阳性细胞的增殖活性,并可改变ERα与ERβ比值。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

甘草酸、18β-甘草次酸、熊果酸和齐墩果酸抗人肺癌细胞侵袭作用及其机理的研究

目的 :探讨甘草酸、18β -甘草次酸、熊果酸和齐墩果酸抗人肺癌细胞增殖和侵袭的作用 ,并探讨其抗侵袭作用的机理。方法 :用 4种单体药物分别作用于高转移人肺癌细胞 (PGCL3) ,用细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、侵袭试验、运动试验、粘附试验以及组织蛋白酶B活性测定观察细胞侵袭能力的变化。结果 :甘草酸、18β -甘草次酸、熊果酸和齐墩果酸处理 96h均可降低PGCL3细胞增殖能力并呈剂量依赖性 ,均能抑制PGCL3 细胞的侵袭能力 (P <0 0 1)且有剂量依赖性。抗侵袭作用机理的分析结果显示上述的 4种药物对细胞的运动、粘附能力及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用 (P <0 0 5和P <0 0 1) ;软琼脂集落形成率也显著降低 (P <0 0 1)。结论 :甘草酸、18β -甘草次酸、熊果酸和剂墩果酸均有抗PG CL3 人肺癌细胞增殖和侵袭作用 ,其抗侵袭机理是通过对癌细胞趋化运动、对层粘连蛋白的粘附作用和组织蛋白酶B分泌的抑制实现的     

川芎嗪通过抑制circ_0026462调控先兆子痫发展中滋养层细胞增殖、侵袭和迁移

目的 探讨川芎嗪对先兆子痫发展中滋养层细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法 用左旋硝基精氨酸甲酯建立先兆子痫动物模型,并随机分为对照组、模型组和川芎嗪组,采用苏木素-伊红染色观察胎盘组织病理学变化。人绒毛膜滋养层HTR8/SVneo细胞和人绒毛膜癌JEG3细胞给予川芎嗪干预后,采用CCK-8实验、EdU实验、Transwell实验以及划痕实验检测细胞增殖、侵袭及迁移能力;利用NCBI在线数据库（GSE165324）分析先兆子痫患者来源的人脐静脉血管内皮细胞和正常人脐静脉血管内皮细胞中前8个上调的circRNAs;qRT-PCR法检测川芎嗪对HTR8/SVneo和JEG3细胞circRNA表达的影响,以及先兆子痫患者和对照组胎盘组织中的circ_0026462表达量;利用RNase R分析circRNA稳定性。circRNA过表达后,检测川芎嗪对HTR8/SVneo和JEG3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果 川芎嗪可以改善左旋硝基精氨酸甲酯诱导的大鼠胎盘组织细胞肿胀、空泡化增加以及炎症细胞浸润现象,并促进滋养层细胞增殖、侵袭和迁移（P＜0.05）。与对照组比较,circ_0026462在先兆子痫患者胎盘组织中高表达（P＜0.05）。川芎嗪抑制滋养层细胞中circ_0026462的表达（P＜0.05）。circ_0026462过表达抑制滋养层细胞增殖、侵袭和迁移（P＜0.05）。此外,circ_0026462过表达能够逆转川芎嗪对滋养层细胞增殖、侵袭和迁移的促进作用（P＜0.05）。结论 川芎嗪通过抑制circ_0026462的表达促进滋养层细胞增殖、侵袭和迁移。     

白芍总苷对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用研究

目的:探究白芍总苷对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:选择人胰腺癌细胞ASPC-1细胞,采用CCK8检测不同浓度白芍总苷的细胞毒性,选择合适的浓度将ASPC-1细胞分为白芍总苷低剂量组、白芍总苷中剂量组和白芍总苷高剂量组,另外将正常培养、不做任何处理的细胞作为空白对照组.采用CCK8和平板克隆实验检测各组细胞的增...     

槲皮素通过抑制β-catenin入核抑制人宫颈癌细胞增殖、迁移的实验研究

[目的]探讨槲皮素通过Wnt/β-catenin信号通路对人宫颈癌上皮细胞增殖及迁移的影响及其可能的作用机制,为抑制宫颈癌进展的临床治疗提供新的靶点。[方法]人宫颈癌上皮细胞系HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度槲皮素处理24 h后,通过CCK-8实验检测槲皮素对HeLa细胞增殖能力的影响。采用Transwell及细胞划痕实验检测槲皮素对HeLa细胞垂直及水平运动能力的影响。免疫荧光法检测β-catenin表达及TopFlash荧光素酶报告系统检测槲皮素对HeLa细胞Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用。[结果] CCK-8检测表明,槲皮素处理组HeLa细胞增殖率明显低于对照组(P0.01),且抑制作用具有浓度依赖性。槲皮素处理组HeLa细胞垂直及水平运动能力均较对照细胞降低,差异有统计学意义(P0.01)。对照组HeLa细胞中β-catenin蛋白密集分布于胞核和胞质中,而槲皮素处理组中β-catenin蛋白主要分布于细胞质中。TopFlash荧光素酶报告系统表明槲皮素处理组HeLa细胞Wnt/β-catenin信号通路受到抑制。[结论]槲皮素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移。     

石榴皮多酚通过调控miR-4316表达抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭实验研究

目的：探讨石榴皮多酚在肺癌中的抗肿瘤作用及可能机制。方法：RT-qPCR 检测肺癌组织中 miR-4316 表达水平。将肺癌细胞A549 分为石榴皮多酚-低组、石榴皮多酚-中组、石榴皮多酚-高组、对照 组、miR-NC 组、miR-4316 组、石榴皮多酚+anti-miR-NC 组、石榴皮多酚+anti-miR-4316 组。细胞迁移、增 殖及侵袭分别采用划痕愈合实验、平板克隆实验和CCK-8 法、Transwell 实验检测。结果：肺癌组织中miR- 4316 表达水平显著降低（P＜0.05）。石榴皮多酚（低、中、高） 组A549 细胞抑制率、miR-4316 水平较对照 组高,克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数较对照组低（P＜0.05）。与miR-NC 组比较,miR-4316 组较miRNC 组A549 细胞抑制率更高（P＜0.05）,克隆形成数、划痕愈合率及侵袭数miR-4316 组较miR-NC 组 低（P＜0.05）。石榴皮多酚+anti-miR-4316 组较石榴皮多酚+anti-miR-NC 组A549 细胞抑制率更低（P＜ 0.05）,克隆形成数、划痕愈合率及侵袭数石榴皮多酚+anti-miR-4316 组较石榴皮多酚+anti-miR-NC 组 高（P＜0.05）。结论：石榴皮多酚通过上调miR-4316 表达来抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。     

坤泰胶囊对围绝经期综合征患者雌激素及其受体表达的影响

目的:探讨坤泰胶囊对围绝经期综合征患者外周血雌激素含量及其受体ERα、ERβ表达水平的影响。方法:回顾性分析本院收治的围绝经期综合征患者98例,其中52例采用坤泰胶囊进行治疗(观察组),46例采用激素替代疗法进行治疗(对照组);对比临床疗效和不良反应,并分别于治疗前后抽取空腹肘静脉血,以ELISA试剂盒测定E2、LH及FSH的血清含量,以RT-PCR和Western blot实验测定全血的ERα、ERβ表达水平。结果:两组患者的临床有效率无统计学差异(χ2=0.025,P=0.875),但观察组不良反应发生率较低(χ2=7.225,P=0.007)。治疗前,血清E2、LH、FSH含量无组间差异;治疗后,两组患者的E2均较治疗前显著上升(t观察组=2.523,P观察组=0.041;t对照组=2.779,P对照组=0.037),LH、FSH含量则显著降低(t观察组=3.014、3.438,P观察组=0.031、0.022;t对照组=3.022、4.027,P对照组=0.029、0.016),且对照组FSH水平显著低于观察组(t组间=2.401,P组间=0.046)。治疗前,两组患者的ERα、ERβ表达水平无组间差异;治疗后两组患者的mRNA(t观察组=11.749、7.526,P观察组=0.000;t对照组=12.712、6.725,P对照组=0.000)和蛋白(t观察组=5.947、2.984,P观察组=0.006、0.034;t对照组=5.826、3.012,P对照组=0.007、0.032)表达水平均有显著上升,且亦无组间差异。结论:坤泰胶囊在提高围绝经期综合征患者外周血雌激素和上调其受体ERα、ERβ表达方面具有与激素替代疗法相近的效果,且无阴道出血、乳房胀痛等不良反应,具有较高临床推广价值。     

苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用研究

目的 探讨苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞的抑制作用,为苦丁茶的深加工提供研究依据.方法 从苦丁茶老叶中提取熊果酸并纯化与鉴定,用5,10,20,40,80,100μmol·L-6个梯度浓度的熊果酸,持续作用于在培养的鼻咽癌细胞24,48,72,96,120 h后,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测熊果酸对鼻咽癌细胞的抑制作用情况,流式细胞术分析其细胞周期和凋亡率.结果 不同浓度的苦丁茶熊果酸在不同时间内对鼻咽癌细胞均具有较强的抑制作用,并随浓度的升高及作用时间的延长而作用增强;流式细胞术结果显示,苦丁茶熊果酸阻滞鼻咽癌细胞于G0/G1期;40 μmol/L熊果酸作用48 h后抑制效果逐渐明显.结论 从苦丁茶提取的熊果酸对鼻咽癌细胞有较强的抑制作用,能阻滞癌细胞于G0/G1期,并诱导肿瘤细胞凋亡,苦丁茶极具开发前景.     

凤尾草提取物通过调控lncRNA PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭

目的探讨凤尾草提取物通过调控lncRNA PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭。方法凤尾草提取物(20、40、80μg/mL)处理肝癌细胞HCC9204 48 h,将si-NC、si-PGM5-AS1分别转染至细胞HCC9204中再用20μg/mL凤尾草提取物处理48 h。Western blot检测Cyclin D1、p21、E-cadherin、MMP-2蛋白表达; MTT检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;RT-PCR检测PGM5-AS1表达。结果凤尾草提取物(20、40、80μg/mL)抑制肝癌细胞HCC9204中Cyclin D1、MMP-2表达,促进p21、E-cadherin表达,细降低胞存活率,降低细胞迁移和侵袭数量,促进PGM5-AS1表达(P<0.05)。过表达PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。抑制PGM5-AS1逆转了凤尾草提取物对细胞HCC9204增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论凤尾草提取物可能通过上调PGM5-AS1抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

黄连素通过基因调控对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的:探究黄连素通过长链非编码RNA HNF1A-AS1调控miRNA-363对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:将骨肉瘤细胞系U2OS分为对照组、黄连素组、黄连素+HNF1A-AS1组和HNF1A-AS1 组.黄连素+HNF1A-AS1 组和 HNF1A-AS1 组转染 pcDNA-HNF1A-AS1 质粒,黄...     

镰形棘豆抑制人肝癌细胞增殖和侵袭作用及机制研究

目的:研究镰形棘豆总黄酮对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖和侵袭的影响。方法:利用MTT检测100、250、350、500μg/m L作用细胞48 h后,镰形棘豆总黄酮对SMMC-7721细胞增殖和侵袭的影响。Transwell侵袭实验检测350μg/m L总黄酮处理SMMC-7721细胞48 h对其侵袭能力的影响。实时定量PCR,Western blot检测镰形棘豆总黄酮处理SMMC-7721细胞后MMP-9 mRNA和蛋白质表达水平的变化。结果:MTT结果表明镰形棘豆总黄酮能够显著抑制SMMC-7721细胞的增殖,并表现出一定的浓度依赖性。350μg/m L镰形棘豆总黄酮处理细胞48 h后,SMMC-7721细胞侵袭能力降低,且MMP-9 mRNA和蛋白质表达水平均有所下降。结论:镰形棘豆总黄酮对SMMC-7721细胞增殖和侵袭具有抑制作用,并下调了MMP-9分子的表达水平,该分子可能参与了细胞的增殖和侵袭等生物学行为。     

金丝桃苷对卵巢癌细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭的影响

目的探讨金丝桃苷(hyperin)对卵巢癌细胞SKOV3的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法将SKOV3细胞分为:正常对照组、金丝桃苷组和阳性对照顺铂组。MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western Blot检测cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、Bcl-2、p65和p-IκB-α的蛋白表达;划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果与正常对照组相比,金丝桃苷处理显著抑制SKOV3的细胞增殖(P0.05),促进细胞凋亡(P0.05),上调cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9而下调Bcl-2的蛋白水平(P0.05),降低细胞的迁移和侵袭能力(P0.05),减少p65和p-IκB-α的蛋白水平(P0.05),抑制NF-κB信号通路的激活,且以上作用均随金丝桃苷处理浓度的增大而增强。结论金丝桃苷抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,这可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

秦皮素通过下调p70S6K抑制人黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭研究

目的研究秦皮素对人黑色素瘤A375细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法 A375细胞给予秦皮素和核糖体S6蛋白激酶(ribosome S6 protein kinase,P70S6K)抑制剂PF-4708671进行干预,采用细胞计数法考察秦皮素和PF-4708671对A375细胞增殖能力的影响;采用Western blotting法检测秦皮素和PF-4708671对m TORC1/p70S6K/S6通路关键蛋白及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验考察秦皮素和PF-4708671对A375细胞迁移和侵袭的影响。结果秦皮素与PF-4708671均可显著抑制A375细胞的增殖、迁移和侵袭(P0.05、0.01)。秦皮素与PF-4708671均显著抑制p70S6K/S6通路活性,下调间质细胞标志蛋白和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)表达水平(P0.05、0.01)。结论秦皮素可能通过下调p70S6K抑制A375细胞的增殖、迁移与侵袭。     

基于Hedgehog信号通路的熊果酸诱导结直肠癌SW480细胞凋亡的机制研究

目的 研究熊果酸通过经典Hedgehog信号通路影响人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法 通过显微镜观察熊果酸对SW480细胞形态的影响;采用MTT比色法检测熊果酸对细胞活力的影响;细胞划痕实验检测熊果酸对细胞迁移的影响;Hoechest/PI染色法观察熊果酸对细胞凋亡的影响;荧光探针法检测熊果酸对细...     

回乳抑增一号对乳腺增生大鼠激素受体及细胞增殖、凋亡的影响

目的 观察回乳抑增一号对乳腺增生大鼠激素受体及细胞增殖、凋亡的影响.探讨其对乳腺增生的作用机制.方法 雌性未孕SD大鼠56只随机分成7组,即正常组,模型组,回乳抑增一号低、中、高剂量组,乳癖散结组,他莫昔芬组,采用外源性激素苯甲酸雌二醇和黄体酮复制乳腺增生大鼠模型,造模完成后给予相应药物治疗,荧光定量PCR法检测大鼠乳...     

熊果酸通过PPARα/γ改善HepG2细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的机制

目的:观察熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的影响并探讨其机制。方法:通过高浓度葡萄糖诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,采用葡萄糖氧化酶法,氚标记-葡萄糖法和硫酸蒽酮比色法检测熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗、摄取和糖原合成量的影响;采用Real time-PCR和Western blot法检测熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型PPARα、PPARγ、PEPCK的mRNA转录水平以及蛋白表达的影响。结果:12.5μmol/L和25μmol/L熊果酸处理HepG2细胞胰岛素抵抗模型后,其葡萄糖消耗量、摄取量和糖原合成量明显高于模型对照组。与正常对照组相比,熊果酸可降低HepG2细胞胰岛素抵抗模型PEPCK的mRNA转录水平和蛋白表达量,提高PPARα的mRNA转录水平和蛋白表达量。结论:熊果酸可改善HepG2细胞胰岛素抵抗模型的糖代谢,其作用机制可能是通过激动PPARα/γ、抑制PEPCK的表达来实现。     

苦参素通过sHH信号通路抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力研究

目的:研究苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及机制。方法:在体外培养胰腺癌细胞株,不同浓度的苦参素在不同时间点干预胰腺癌细胞,在现象层面,应用MTT法检测胰腺癌细胞的增殖能力; 应用Transwell小室检测细胞的侵袭能力。在机制层面,应用Real time PCR和Western blot在转录水平和蛋白水平检测程度,并通过基因转染技术构建高表达sHH的胰腺癌细胞株,进一步验证苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及sHH通路的作用。结果:高浓度组(40 μmol/L)苦参素与低浓度组(20 μmol/L)相比,明显抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力。在mRNA和蛋白水平,苦参素可明显抑制肿瘤细胞sHH信号通路,降低sHH(P<0.05)和 GLI-1的表达水平(P<0.05)。构建高表达sHH的胰腺癌细胞株Panc-1-sh-sHH,苦参素对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的抑制程度明显强于高表达sHH的胰腺癌细胞Panc-1-sh-sHH。结论:苦参素通过抑制sHH信号通路,减弱胰腺癌细胞增殖和侵袭能力。