恶性胸腹水和实体肿瘤患者多药耐药基因表达的检测及临床意义

目的：探讨多药耐药相关基因表达对肿瘤化学药物治疗（化疗）效果监测的指导意义;了解原发性乳腺癌多药耐药基因1（MDR1）谷胱甘肽S－转移酶（GST－π）mRNA共表达及其与临床和预后的关系。方法：采用半定量RT－PCR方法检测16例恶性胸腹水肿瘤细胞和102例实体肿瘤多药耐药基因MDR1的mRNA的表达,以及其中84例乳腺癌MDR1和GST－π的mRNA共表达。结果：（1）16例恶性胸腹水肿瘤细胞和18例实体肿瘤组织MDR1的mRNA表达的阳性率为79．8％,且中、高表达为33．3％;GST－π的阳性表达率33．3％,而中、高表达仅为4．8％,2组比较差异有非常显著的意义(P＜0．01）;术前化疗组的MDR1mRNA阳性率87．8％,与术前未化疗组的68．6％比较,差异有显著意义（P＜0．05）;MDR1mRNA表达阳性率在腋淋巴结转移组中89．1％,林巴结无转移组中为68．4％,2组比较差异有显著意义（P＜0．05）;在术后有复发转移 组中GST－πmRNA阳性率为71．4％,与无复发转移组的20．6％比较,差异有显著意义（P＜0．05）;GST－πmRNA表达阳性率在雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR0阳性组中,比ER、PR 阴性组高,2组比较差异有显著意义（P＜0．05）。结论：MDR1mRNA表达水平与临床化疗疗效具有较好的相关性,可望作为肿瘤化疗疗效的一项监测指标;MDR1是乳腺癌的主要耐药机制;术前化疗可诱导MDR1mRNA的表达;MDR1和GST－πmRNA表达是乳腺癌有意义的预后指标,对于患者的预后的评估具有指导.意义     

白血病患者体外药敏试验和P-糖蛋白的表达及临床意义

为建立体外预测化疗药物敏感性的试验方法，指导急性白血病化疗方案的设计。对急性白血病患者４２例进行了体外药敏检测（ＭＴＴ法），研究了白血病细胞多药耐药基因Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）的表达（ＡＰＡＡＰ法）与白血病化疗疗效的关系。结果显示，药敏试验与临床疗效明显相关，临床总符合率８２．９％，阳性符合率７８．９％，阴性符合率８６．９％。Ｐ－ｇｐ抗原的表达与临床疗效呈负相关，与临床耐药明显相关，阴性组患者缓解率（６７．９％）显著高于阳性组（２８．９％），Ｐ＜０．０５；复发率阳性组显著高于阴性组；Ｐ－ｇｐ的表达复发组患者较初诊组患者高（Ｐ＜０．０５）。提示多药耐药基因Ｐ－ｇｐ的表达和体外化疗药物敏感性的检测是判断临床耐药及指导临床化疗设计的重要指标     

急性白血病多药耐药相关蛋白的检测及临床意义

目的：探讨多药耐药相关蛋白（MRP）的表达与临床耐药的关系。方法：以免疫组化ABC法检测了53例急性白血病AL患者和15例对照组骨髓单个核细胞MRP的表达情况,并同时检测了P－170的表达。结果：（1）40例化疗后患者,MRP阳性表达23例,其中疗效差18例,疗效佳5例。MRP阴性表达17例,其中疗效差7例,疗效佳10例。MRP阳性组疗铲显著差于阴性组（P＜0．05）,（2）40例化疗后患者,P－170阳性组疗效显著差于阴性组（P＜0．01）,（3）化疗后患者MRP与P－170表达具有一定的一致性（Kappa系数－0．367,P＜0．01）,且两者与临床疗效有关。结论：MRP的过高表达是多药耐药（MDR（）产生机制中又一因素;（2）MRP与P－170表达有一定的一致性,且与临床疗效有一定关系;（3）MDR采用多项指标检测有助于AL疗效判断及预后预测。     

急性白血病病人白血病细胞Survivin基因的表达及其临床意义

目的观察Survivin基因在急性白血病（AL）病人白血病细胞中的表达,并分析其与预后关系。方法应用RT-PCR方法检测62例不同时期AL病人白血病细胞Survivin mRNA的表达情况,以10例健康人作为对照。结果62例AL病人白血病细胞Survivin mRNA阳性表达率为72．58％。ALL细胞Survivin mRNA阳性表达率（76．5％）与ANLL细胞（71．1％）比较差异无显著性,二者均高于正常对照组（x^2=6．01、7．02,P〈0．05）。初治和复发AL病人白血病细胞Survivin mRNA阳性表达率分别为78．95％、85．71％,明显高于对照组（x^2=．77、9．77,P〈0.05）。白血病细胞Survivin mRNA表达阴性者接受1个疗程化疗后骨髓缓解率（BMR）为77．78％,明显高于阳性表达者的31．03％（x^2=9,P〈0.05）。结论Survivin基因表达在白血病细胞的增殖分化和（或）抗凋亡过程中发挥了重要作用,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一,Survivin基因可作为靶向白血病治疗的一个潜在靶点。     

直肠癌组织及外周血中多药耐药基因的表达及其相关性的研究

目的：检测多药耐药相关基因（ MDR1）在直肠癌组织及外周血中的表达及其相关性,探讨其临床意义。方法：采用Real-time RT-PCR法检测62例直肠癌患者手术切除组织及外周血的MDR1 mRNA的表达水平。结果：直肠癌组织及外周血的MDR1 mRNA的阳性表达率分别为77．4％（48/62）和69．4％（43/62）,两者之间呈显著相关（r＝0．686,P＜0．01）。肿瘤组织中MDR1 mRNA表达与分化程度有关,外周血中MDR1与肿瘤大小密切相关。结论：在直肠癌患者的肿瘤组织和外周血中均可检测出MDR1 mRNA较高水平的表达,检测外周血中MDR1 mRNA表达能间接反映癌组织对化疗药物的耐受性。     

PRAME与WT1基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）PRAME（preferentially expressed antigen of melanoma）与WT1（Wilms’tumor）基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测54例AL患者PRAMEmRNA和WT1 mRNA的表达水平，并将两者检测结果进行比较。结果PRAME阳性表达率：ANLL为41．9％，ALL为38．5％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；WT1阳性表达率：ANLL为48．4％，ALL为46．2％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；而完全缓解组（complete remission，CR）及对照组PRAME和WT1的表达均阴性；有效组PRAME和WT1的表达水平显著低于无效组（P〈0．01）；对1例PRAME阳性和10例PRAME、WT1均阳性的患者进行随访，7例经化疗后PRAME表达水平不降，4例复发患者PRAME再次升高均早于临床复发，其中2例WT1的波动与PRAME同步，2例临床复发时才升高。结论与WT1基因一样，PRAME基因是急性白血病的一个重要标记基因，动态检测PRAME的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量，对AL患者的化学治疗、预后判断及监测微小残留病灶、防治复发有一定的意义。     

白血病患者体外药敏试验和P—糖蛋白的表达及临床意义

为建立体外预测化疗药物敏感性的试验方法，指导急性白血病化疗方案的设计。对急性白血病患者４２例进行了体外药敏检测，研究了白血病细胞多药耐药基因Ｐ－糖慢白的表达与白血病化职疗效的关系。结果显示，药敏试验与临床疗效明显相关，临床总符合率８２．９％，阳性符合率７８．９％，阴性符合率８６．９％。     

急性白血病患者WT1基因的表达及其意义

目的探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）WT1（Wilms＇tumor）基因的表达及其在AL患者微小残留病（MRD）的临床意义。方法采用半定量逆转聚合酶反应（RT-PCR）方法检测54例AL患者BMMNC WT1的表达水平，分析WT1表达与疗效关系，并与对照组检测结果进行比较。结果WT1阳性表达率：ANLL为48．4％，ALL为46．2％，两者比较，无显著性差异（P〉0．05）；完全缓解组（CR）及对照组WT1的表达均阴性，对初治时WT1阳性患者进行半定量分析：有效组WT1表达水平低于复发难治组（P〈0．05）；高表达组CR率显著低于低表达组（P〈0.05），两组复发率比较，无显著性差异（P〉0.05）。结论初治AL患者治疗前高水平表达CR率低、CR时间短、易复发；AL患者CR时WT1转阴，复发时再次升高，动态检测WT1的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量，对AL患者的化学治疗、预后判断及监测MRD、防治复发提供实验依据。     

急性白血病患者骨髓Livin、Smac mRNA的表达

目的：研究急性白血病（AL）患者凋亡蛋白抑制因子Livin及其促凋亡因子Smac基因的表达及临床意义。方法：选取52例AL患者（初治组。化疗1疗程后，52例AL患者中有28例达完全缓解（缓解组），其中6例于观察期间复发（复发组））和10名健康人（正常对照组）。取骨髓液并分离单个核细胞，提取细胞总RNA，并以白血病HL-60细胞株为阳性对照，采用RT—PCR方法检测Livin、SmacmRNA表达情况。分析Livin和SmacmRNA表达的相关性和2者的表达与AL缓解率的关系。结果：初治组中Livin、SmacmRNA的阳性表达率（40．3％、59．6％）较正常对照组（0％、10．0％）明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。缓解组中LivinmRNA的阳性表达率（0％）与复发组的阳性率（50．0％）相比，差异有统计学意义（，=9．769，P〈0．05）。缓解组中SmacmRNA阳性表达率（14．2％）与复发组的阳性率（60．7％）相比差异有统计学意义（X2=4．905，P〈0．05）。AL患者Livin、SmacmRNA的表达具有关联性（r=0．267，X2=4．020，P=0．045）。在初治组中，Livin、SmacmRNA表达阳性患者的完全缓解率均低于表达阴性的患者。44例可进行疗效评估的患者中，LivinmRNA表达阳性者与表达阴性者完全缓解率相比差异有统计学意义（X2=4．762，P=0．029）。SmacmRNA表达阴性者与表达阳性者完全缓解率相比差异有统计学意义（X2=5．135，P=0．023）。结论：Livin、SmacmRNA过度表达和急性白血病的发病呈正相关；Livin、Smac高表达的患者完全缓解率低，预后不良。     

环孢菌素A联合经典化疗方案治疗难治性急性白血病临床观察

目的：探讨环孢茵素A（CsA）作为耐药逆转剂联合化疗逆转难治性急性白血病（RAL）多药耐药（MDR）的临床疗效。方法：56例RAL患者随机分为逆转剂组30例（予CsA加经典化疗）和对照组26例（予经典化疗）。所有患者治疗前行耐药糖蛋白P-糖蛋白（P-gP）检测,比较两组MDR的逆转情况。结果：P—gP在RAL中高表达（62．5％）。逆转剂组治疗完全缓解（CR）率43．33％。总有效率66．67％;其中P-gP高表达者CR率52．63％,总有效率68．42％。对照组CR率19．23％,总有效率38．46％。逆转剂组总有效率明显高于对照组,差异有显著性（P〈0．05）。结论：CsA能够逆转RAL的耐药性,CsA联合经典化疗方案治疗RAL特别是P—gP高表达者有良好的应用价值。     

多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白表达与初治急性白血病预后的关系

目的 探讨多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白表达与初治急性白血病 (AL)患者化疗效果的关系.方法 用流式细胞仪检测 29 例初诊未治AL患者多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白表达.结果 初治AL患者多药耐药蛋白和bcl-2蛋白表达率分别为 37.9% 和 83%;bcl-2 蛋白阳性与阴性患者的首次完全缓解(CR)情况经统计学分析显示差异无显著性(P＞0.05);而多药耐药蛋白阳性与阴性患者的首次完全缓解(CR)情况经统计学分析显示有显著性差异(P＜0.05);多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白两者之间无相关性.结论 多药耐药蛋白可作为预测初治AL患者化疗效果的敏感性指标.     

急性白血病患者P~(170)糖蛋白过度表达的临床意义

为探讨多药耐药基因的表达产物P170 糖蛋白在急性白血病异常表达的临床意义 ,用免疫细胞化学间接免疫荧光法 (APAAP法 )检测 30例急性白血病 (AL)患者。结果 :P170 糖蛋白在 30例急性白血病患者中有 9例表达 ,其中15例难治复发性白血病患者有 10例表达 ,其阳性表达率明显增高 ,化疗缓解率较阴性者明显减低 (P <0 0 5 )。表明P170 糖蛋白异常表达与肿瘤生物学行为关系密切 ,已成为提示急性白血病患者预后的有用指标之一。     

环孢素联合化疗逆转急性白血病多药耐药的临床研究

目的: 探讨环孢素(cyclosporinA,CsA)联合化疗逆转急性白血病(acute leukemia,AL)多药耐药(multi drug resistance,MDR)的临床疗效。方法: 28例急性白血病患者随机分成逆转组(CsA联合化疗)和对照组(单用化疗),且对16例逆转组患者进行P-糖蛋白(P-gp)测定。结果: 逆转组总有效率68.8%,复治患者的完全缓解(CR)7/10,均高于对照组的总有效率(25.0%)和复治患者CR(1/8),差异均有显著性(P<0.05)。结论: CsA联合化疗可以克服白血病细胞的MDR,而且随着白血病细胞P-gp阳性表达率增高,CsA的耐药逆转作用可能会越明显。     

P糖蛋白在乳腺癌原发性耐药过程中的表达

目的:研究乳腺癌原发性耐药过程中P糖蛋白(Pglycoprotein,P-gp)的表达特征,初步探讨乳腺癌原发性耐药的发生机制.方法:采用免疫组织化学及逆转录多聚酶链反应技术,对25例接受术前新辅助化疗的乳腺癌患者、15例未接受术前化疗的乳腺癌患者、10例乳腺腺病患者组织标本内P-gp和MDR1 mRNA的表达情况进行检测.结果:P-gp表达阳性率在乳腺癌术前化疗组患者和未化疗组患者中分别为84.0%(21/25)和46.7%(7/15),对照组未见P-gp表达;MDR1表达阳性率在三组则分别为84.0%(21/25)、53.3%(8/15)和10%(1/10),组间差异均显著(P＜0.01).结论:部分乳腺癌细胞在恶性变的过程中同时伴有对化疗药物耐受能力的增加,肿瘤细胞内极低水平的MDR1 mRNA表达即可导致多药耐药,MDR1/P-gp与乳腺癌的内源性耐药相关.     

急性白血病患者多药耐药基因MDR1的表达及临床意义的研究

目的探讨急性白血病(AL)患者多药耐药基因MDR1的表达和化疗敏感性的关系.方法应用实时荧光定量RT-PCR技术测定45例初治AL患者MDR1水平的表达. 结果耐药组MDR1阳性表达(56.52%)明显高于敏感组(13.64%),P＜0.01,两组差异显著,有统计学意义.结论 MDR1基因表达是AL临床耐药的因素之一.     

Correlation between Cyclin A Gene Expression in Adult Patients with Acute Leukemia and Drug Resistance

Adultacuteleukemia (AL)isoneofthemostcommonmalignanttumorsofhematology .Withtherecentprogressinchemotherapyandsupportivether apy ,theremissionandsurvivalrateinALhavebeenmarkedlyimproved .However ,drugresistanceandrelapsearestillimportantfactorsaffectinglongsur vivalofthese patients .Theabnormalregulationofcellcycleisanotherfactorthatcannotbeignoredex ceptformultipledrugresistance (MDR) .WedetectcyclinA ,multidrugresistantgene (mdrl) ,topoiso meraseⅡα(TopⅡα)andbcl 2inadultpatientswithA…     

多重耐药因子3与胆囊胆固醇结石形成关系的研究

目的:探讨多重耐药因子3(MDR3与胆囊胆固醇结石形成的关系.方法:胆囊胆固醇结石病人的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例,应用RT-PCR技术检测MDR3mRNA.结果:实验组MDR3mRNA的光密度值为1.02±0.24,对照组光密度值为1.94±0.80,两组之间存在显著差异(P＜0.01).结论:MDR3与胆囊胆固醇结石的形成可能存在一定关系.     

小分子干扰RNA片段逆转KBv200细胞多药耐药的实验研究

目的：研究小分子干扰RNA片段（siRNA）对舌癌多药耐药（MDR）细胞系KBv200细胞的MDR1基因表达及其功能的影响，探讨siRNA作为未来化疗增敏剂的可能性。方法：运用针对MDR1基因序列的siRNA（MDR1-siRNA）在脂质体的介导下转染KBv200细胞；用RT—PCR分析MDR1 mRNA的表达水平；流式细胞术检测P-糖蛋白（P-gP）的表达；荧光分光光度法检测细胞内多柔比星（Dox）的积蓄；MTT法检测KBv200细胞对长春新碱（VCR）和Dox的敏感性变化。结果：MDR1-siRNA作用24和48h能抑制MDR1基因的表达（P〈0．05），其mRNA水平和P-gP水平均明显下降，同时使KBv200细胞对VCR和Dox的敏感性显著增加（P〈0．01），并显著增加细胞内Dox的蓄积（P〈0．01）。结论：MDR1-siRNA能显著抑制KBv200细胞内MDR1基因介导的MDR。     

腺病毒介导p53基因逆转乳腺癌耐药的实验研究

目的探讨腺病毒介导p53基因（Ad-p53）对人乳腺癌阿霉素（ADM）耐药细胞株MCF-7／ADM的耐药性及多药耐药基因1（MDR1）的影响。方法以Ad-p53转染MCF-7／ADM细胞株,流式细胞术检测p53蛋白变化;锥虫蓝活细胞拒染法观察细胞生长情况;MTT法观察MCF-7／ADM细胞对阿霉素耐药性的变化,实时荧光RT—PCR法检测MDR1 mRNA变化。结果流式细胞术观察到MCF-7／ADM细胞经MOI50的Ad-p53作用48h后,p53蛋白表达率由10．24％升高到36．20％;细胞抑制率为7．4％（P=0．003）;逆转MCF-7／ADM对ADM的耐药倍数11．6倍（P=0．001）;实时荧光RT-PCR检测结果显示MDR1 mRNA相对表达量由1．25±0．01下降至0．91±0．01（P=0．011）。结论腺病毒介导p53基因能抑制MCF-7／ADM细胞MDR1基因的表达,并能部分逆转MCF-7／ADM的耐药性,增加阿霉素化疗敏感性。