三氧化二砷对人骨髓瘤细胞株U266作用的研究

目的研究三氧化二砷（As2O3）对多发性骨髓瘤细胞株U266的作用。方法应用不同浓度的As2O3处理U266,采用细胞培养、流式细胞测定、原位杂交和酶联免疫吸附测定技术检测As2O3对U266的细胞活力、细胞凋亡、癌基因bcl-2表达和血管内皮细胞生长因子（VEGF）分泌的影响。结果As2O3可抑制U266的细胞活力,诱导细胞凋亡,抑制细胞bcl-2表达和VEGF的合成,VEGF可部分阻断As2O3的作用。结论As2O3可以通过多种机制发挥抗肿瘤作用。     

蜕皮甾酮对内皮细胞凋亡保护作用的研究

目的　初步探讨缺氧对培养人脐静脉内皮细胞 (HU VECs)凋亡的影响及蜕皮甾酮的干预性作用。方法　①人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定 ;②建立人脐静脉内皮细胞缺氧模型 ,TUNEL法观测不同的缺氧时间 ( 0、12、2 4、4 8h)及蜕皮甾酮对内皮细胞凋亡的影响 ;③内皮细胞在常氧与缺氧状态下 ,实验组分别给于蜕皮甾酮 ( 10 0mg·L-1)刺激 ,2 4h后检测细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。结果　随缺氧时间延长 ,HUVECs凋亡率显著升高 ;蜕皮甾酮能抑制缺氧导致的内皮细胞凋亡 ;蜕皮甾酮刺激内皮细胞VEGF表达上调。结论　缺氧作为一种致病因素 ,对内皮细胞凋亡的促发作用是随缺氧时间的延长而加重的。内皮细胞的过度凋亡是引起内皮功能障碍的一个重要因素 ,蜕皮甾酮通过抑制内皮细胞凋亡而具有内皮细胞保护作用 ,而此作用是由蜕皮甾酮刺激内皮细胞VEGF表达上调所介导的。     

舒脉汤对血管内皮细胞VEGF、bFGF表达的影响及其信号通路

目的研究舒脉汤对血管内皮细胞生成因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生成因子（bFGF）的影响及其可能参与的信号通路。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,以舒脉汤刺激内皮细胞,部分给予PI3K抑制剂,LY294002预处理,收集细胞测定VEGF、bFGF基因表达,收集上清液测定VEGF、bFGF蛋白表达。结果舒脉汤可以明显增加人脐静脉内皮细胞VEGF、bFGF基因及蛋白表达,且这一过程可被LY294002所阻断。结论舒脉汤通过上调内皮细胞VEGF、bFGF表达来发挥促血管新生作用,PI3K信号通路参与此过程。     

杜鹃素对H_2O_2诱导的内皮细胞凋亡的保护作用研究

目的研究杜鹃素对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的保护作用。方法采用M TT法检测细胞活力,相差显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化。结果采用5、10、20μg/m L浓度的杜鹃素处理细胞后,内皮细胞活性呈浓度依赖性增加,细胞存活率提高;与H2O2组相比,细胞皱缩明显减少。杜鹃素20μg/m L可抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡。结论杜鹃素具有抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的作用。     

阿魏酸对活化内皮细胞粘附分子表达的抑制作用

目的　观察阿魏酸对活化的人脐静脉内皮细胞表达粘附分子的影响 ,以探讨其抗动脉粥样硬化的部分分子机制。方法　用脂多糖 10mg·L- 1刺激培养的人脐静脉内皮细胞 4h诱导其表达E 选择素、刺激 18h诱导其表达血管细胞粘附分子 1;用过氧化氢 3 0 0 μmol·L- 1刺激 2h诱导其表达P 选择素 ,部分细胞在刺激前 3 0min用阿魏酸 0 2 1、0 41或 0 62mmol·L- 1预处理 ,用流式细胞术检测内皮细胞粘附分子表达水平。结果　阿魏酸抑制内皮细胞E 选择素及P 选择素表达 ,轻度抑制血管细胞粘附分子 1表达 ,同时抑制内皮细胞vWF的释放。结论　阿魏酸可通过抑制内皮细胞粘附分子表达而发挥抗动脉粥样硬化作用     

重组人可溶性血管内皮细胞

血管内皮细胞生长抑制因子（Vascular Endothelial GrowthInhibitor,VEGI）是从人脐静脉内皮细胞（HUVEC）cDNA文库筛选到的一个TNF超家族新成员。为研究重组可溶性人VEGI对新生血管形成抑制活性,检测了重组可溶性人VEGI对建株人脐静脉内皮细胞（ECV304）增殖抑制活性以及对兔角膜诱生血管、鸡胚尿囊膜（CAM）血管的抑制活性。表明可溶性人VEGI可以直接抑制ECV304内皮细胞的增殖,抑制兔角膜诱生血管、CAM血管形成。VEGI是一种新的血管内皮细胞生长抑制因子,强烈抑制新生血管形成,有望应用于肿瘤的治疗。     

乙醇诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对ICAM-1蛋白表达影响的研究

目的:研究乙醇体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡,及对细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的影响。方法:以不同浓度乙醇(50、100和200mmol/L)作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞24h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定各组细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法检测ICAM-1蛋白表达。结果:乙醇能抑制内皮细胞活力,促进细胞凋亡,增加ICAM-1表达,并呈浓度依赖性。结论:乙醇能诱导内皮细胞损伤,其机制可能与促进细胞凋亡、影响ICAM-1蛋白表达有关。     

三氧化二砷对人大肠癌LoVo细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)在人大肠癌细胞株LoVo中的表达及三氧化二砷(As2O3)对其表达的影响.方法 应用实时定量PCR法和免疫细胞化学法检测As2O3干预前后LoVo结肠癌细胞中VEGF mRNA及VEGF蛋白表达.结果 LoVo大肠癌细胞表达VEGF,VEGF基因表达与蛋白表达呈正相关,且VEGF表达随着As2O3剂量的增加而下降.结论 VEGF在人结肠癌细胞LoVo中表达,As2O3可显著抑制VEGF的表达,呈剂量依赖性,表明As2O3具有抑制肿瘤血管生成的作用.     

蝎毒多肽提取物抗肿瘤血管生成作用的实验研究

目的探讨东亚钳蝎蝎毒的多肽提取物PESV的抗血管生成活性和对肿瘤生长的抑制作用。方法①用不同浓度的PESV(4～20mg·L-1)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用BrdU参入的ELISA法观察HUVEC增殖活性和凋亡水平变化,流式细胞术检测凋亡细胞比例,免疫组化法检测Bal和Bax表达。②观察PESV对鸡胚尿囊膜(CAM)新生血管生成的影响。③皮下注射PESV(0.3mg·kg-1),观察对S180肉瘤和H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长、肿瘤血管生成和血管生成因子(VEGF和bFGF)表达的影响。结果①体外实验显示,PESV在8～20mg·L-1范围明显抑制HUVEC的增殖活性(与对照组比较,P<0.01),而对乳腺癌细胞MDAMB231的增殖无影响;PESV作用后HUVEC凋亡细胞比例较对照组增加,P<0.05,Bax表达增加;Bcl2表达降低。②0.5mg/CAM和0.8mg/CAM的PESV能明显抑制CAM新生血管的形成。③体内实验显示PESV能明显抑制小鼠S180肉瘤和H22肝癌的肿瘤生长和血管生成水平,并降低肿瘤组织内血管生成相关因子VEGF和bFGF的表达。结论PESV具有良好的体内和体外抗肿瘤血管生成活性,并籍此抑制肿瘤的生长。     

PI3K/Akt抑制剂CCT128930抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖与血管生成的实验研究

目的探讨一类新的PI3K/Akt抑制剂CCT128930对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖与血管生成的影响。方法采用MTT法检测CCT128930对HUVEC存活的影响;流式细胞术分析细胞周期变化;AnnexinⅤ-FITC试剂盒检测细胞凋亡;体外小管形成实验观察CCT128930对HUVEC体外小管形成的影响;免疫印迹法检测蛋白表达水平。结果CCT128930可通过阻滞细胞于G1期而抑制HUVEC的增殖,且抑制作用呈剂量依赖性,但对HUVEC的凋亡无影响;HUVEC经CCT128930处理后,体外小管形成能力受到明显抑制;低浓度的CCT128930抑制内皮细胞中VEGF的表达,但对Akt的磷酸化水平无影响。结论 CCT128930能够抑制HUVEC的增殖与血管生成,其抑制血管生成活性可能与其调控VEGF的表达水平相关。     

MG132诱导人血管内皮细胞凋亡及对caspase-3表达的影响

目的　观察蛋白酶体抑制剂MG132对人血管脐静脉内皮细胞(ECV -304)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3表达的影响。方法　采用两个浓度(2, 5μmol·L-1 )的蛋白酶体抑制剂MG132处理ECV -304细胞;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;RT -PCR检测细胞内凋亡相关基因caspase -3的转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达。结果　对照组ECV -304细胞凋亡率低于5%,在2μmol·L-1MG132作用下,凋亡率为11. 3%,MG132浓度升至5μmol·L-1,细胞凋亡率增致44 .5%,MG132诱导ECV 304细胞凋亡具有量-效关系;RT -PCR检测发现细胞内凋亡相关基因caspase 3mRNA表达上调;免疫细胞化学检测细胞caspase- 3蛋白表达水平升高。结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导血管内皮细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制UPP活性,促进caspase- 3基因转录,使细胞内caspase -3增加而促进细胞凋亡。     

苏黄止咳胶囊对老年患者动态血压的影响

目的观察苏黄止咳肢囊对老年患者动态血压的影响。方法对80例老年感冒后咳嗽患者于应用苏黄止咳胶囊前、应用后第3天和第7天进行动态血压监测各参数进行对比分析,包括24 h平均收缩压（24hSBP）、24h平均舒张压（24hDBP）、日间平均收缩压 （dSBP）、日间平均舒张压（dDBP）、夜间平均收缩压（nSBP）、夜间平均舒张压（nDBP）和昼夜平均动脉压差值百分率（d-nMAP/dMAP）。结果用药后第3天和第7天动态血压24hSBP,24hDBP,dSBP, dDBP, nSBP,nDBP和d-nMAP/dMAP与用药前的比较无统计学差异 （p〉0.05）。结论苏黄止咳胶囊可以安全用于无高血压、心脏病及肝肾肺疾病的老年感冒后咳嗽患者。     

五氧化二砷体外对NB4细胞增殖及程序化死亡作用的研究

目的：探讨五氧化二砷（As2O3)对急性早幼粒白血病（APL）细胞NB4增殖及细胞程序化死亡的影响。方法：用细胞生长曲线，集落培养，流式细胞仪检测，DNA电泳，bcl-2蛋白和P53蛋白表达等方法观察NB4细胞增殖，凋亡和癌基因表达情况。结果：As2O5能显著地抑制NB4细胞增殖和细胞生长活力，诱导NB4细胞程序化死亡，下调p53,bcl-2蛋白表达，并能抑制造血祖细胞集落形成。结论：As2O5对APL细胞NB4具有较强的抑制和诱导凋亡作用，可能成为治疗APL有效的药物之一。     

二苯乙烯苷对H_2O_2诱导血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞P-selectin、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为空白对照组、H2O2组、辛伐他汀组、TSG组,运用逆转录聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验分别检测P-selectin、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1 mRNA与蛋白的表达。结果 200μmol·L-1的H2O2作用内皮细胞24 h后,P-selectin、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的mRNA和蛋白表达水平均明显上调;经TSG预处理内皮细胞4 h后,再加200μmol·L-1的H2O2作用内皮细胞24 h,结果显示:TSG能抑制H2O2诱导的内皮细胞P-selnecti、E-se-lectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的mRNA和蛋白的表达。结论 TSG可抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞黏附分子的表达。     

Effects of bleomycin A5 on caspase-3, P53, bcl-2 expression and telomerase activity in vascular endothelial cells

Objective:The aim of this study was to investigate the molecular mechanism of bleomycin A5 in inducing the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells (ECV304).Results:After treatment with different concentrations of bleomycin A5, the expression of caspase-3 in ECV304 cells was increased. It was significantly decreased with the increase of bleomycin A5 concentration, but the difference between 75 μg/ml and 150 μg/ml groups was not significant. Bleomycin A5 could significantly increase the expression of p53, with concentration dependence. It had no obvious effect on bcl-2 expression. There was high expression of telomerase in control group. After treatment with different concentration of bleomycin A5, the telomerase activity was significantly decreased.Conclusion:Bleomycin A5 can increase caspase-3 and p53 levels and inhibit telomerase activity to induce ECV304 apoptosis.KEY WORDS: Apoptosis, bleomycin A5, caspase-3, hemangioma, p53, vascular endothelial cell     

Levamisole induced apoptosis in cultured vascular endothelial cells

To better understand the anticancer activity of Levamisole (LMS), which serves as an adjuvant in colon cancer therapy in combination with 5-Fluorouracil, this study analyses LMS' ability to induce apoptosis and growth arrest in cultured human micro- and macrovascular endothelial cells (ECs) and fibroblasts. Cells exposed (24 h) to Levamisole (range: 0.5 - 2 mmol l(-1)) alone or in combination with antioxidants (10 mmol l(-1) glutathione or 5 mmol l(-1) N-Acetylcysteine or 0.1 mmol l(-1) Tocopherol) were evaluated for apoptosis ((3)H-thymidine assays, in situ staining), mRNA/protein expression (Northern/Western blot), and proliferation ((3)H-thymidine incorporation). Levamisole dose-dependently increased apoptosis in ECs to 230% (HUVECs-human umbilical vein ECs), 525% (adult human venous ECs) and 600% (human uterine microvascular ECs) but not in fibroblasts compared to control cells (set as 100%). Levamisole increased in ECs integrin-dependent matrix adhesion, inhibited proliferation (-70%), reduced expression of survival factors such as clusterin (-30%), endothelin-1 (-43%), bcl-2 (-34%), endothelial NO-synthase (-32%) and pRb (Retinoblastoma protein: -89%), and increased that of growth arrest/death signals such as p21 (+73%) and bak (+50%). LMS (2 mmol l(-1))-induced apoptosis was inhibited by glutathione (-50%) and N-Acetylcysteine (-36%), which also counteracted reduction by Levamisole of pRb expression, suggesting reactive oxygen species and pRb play a role in these processes. The ability of LMS to selectively induce apoptosis and growth arrest in endothelial cells potentially hints at vascular targeting to contribute to Levamisole's anticancer activity.     

芪参益气滴丸促血管新生的实验观察

目的：观察芪参益气滴丸对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响,测定其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响,探讨该药促进血管生成的可能机制。方法实验分组：生理盐水组、空白血清组、bFGF 组、芪参益气滴丸组;建立鸡胚尿囊膜（CAM）模型,计数各组 CAM 上血管数;体外培养人脐静脉内皮细胞,应用血管内皮细胞增殖实验（MTT）法测定各组 A 值。结果与生理盐水组及空白血清组比较,芪参益气滴丸组具有明显的促 CAM 血管生成作用（P ＜0．05）,并促进人脐静脉内皮细胞增殖（P ＜0．05）。结论芪参益气滴丸具有促血管生成作用,其机制可能与该药促进内皮细胞增殖有关。     

高糖对HUVEC功能的影响及机制研究

目的观察葡萄糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性功能的影响及机制研究。方法内皮细胞培养液体外培养HUVEC,用不同浓度(10、20、30、40、50mmol/L)的葡萄糖作用于HUVEC,用NO含量、eNOS活性检测、细胞凋亡测定和细胞内ROS检测方法,观察不同浓度葡萄糖作用后的HUVEC功能活性的影响。结果高糖对HUVEC的增殖活性具有剂量依赖性抑制作用。高糖剂量依赖性抑制HUVEC细胞eNOs活性、NO的产生,增强细胞凋亡和细胞内ROS的生成。结论葡萄糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性功能具有抑制作用,其机制与增强细胞凋亡和增加细胞内ROS有关。     

多奈哌齐对人脐静脉内皮细胞损伤的防护作用研究

目的 探讨多奈哌齐对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的防护作用,并研究其作用机制.方法 将实验细胞平均分为对照组、模型组、多奈哌齐组,通过过氧化氢建立细胞损伤模型,采用细胞计数试剂盒( CCK-8)法检测细胞存活率,通过光镜观察细胞形态,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化,蛋白质印迹测定细胞中锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达.结果 多奈哌齐组与模型组比较,细胞存活率明显增加,且差异有统计学意义[(60.8±12.2)％比(44.7±9.3)％,P＜0.05];多奈哌齐组皱缩细胞数量介于模型组和对照组处理组之间;而多奈哌齐组细胞凋亡数量和程度均较模型组降低,差异有统计学意义[(30.8±10.4)％比(45.1±14.1)％,P＜0.05];此外,蛋白质印迹试验结果表明,多奈哌齐组细胞MnSOD蛋白表达强于对照组.结论 多奈哌齐可以明显减少过氧化氢诱导的HUVEC损伤,提高细胞存活率.多奈哌齐对于过氧化氢诱导的内皮细胞损伤的防护作用可能通过上调MnSOD的表达来实现.