酶免疫法(ELISA)快速检测大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)

<正> 产毒大肠杆菌(ETEC)是致婴幼儿腹泻的重要病原菌,在小儿腹泻病原中检出率高达26.5％。ETEC产生不耐热(LT)和耐热性(ST)两种肠毒素。检测LT有动物试验、细胞培养和免疫血清学方法,其中多数方法需要特殊的仪器设备和试验动物,难以在基层医疗单位普遍推广使用。我们用双抗体夹心ELISA法对403株大肠杆菌和30     

经皮肤免疫产肠毒素型大肠杆菌疫苗的安全性和免疫原性

产肠毒素型大肠杆菌 ( ETEC)是婴幼儿和旅行者急性腹泻最常见的致病原因 ,ETEC首先通过定居因子 ( CF)与宿主肠上皮细胞受体结合 ,然后 ETEC表达不耐热肠毒素 ( LT)和耐热肠毒素 ( ST)而致水泻 ,研究证明 CF和 LT均具有免疫原性 ,3种 CF( CFA/ 、CS3、CS6 )中 CS6是最常见的一种。经皮肤免疫是一种新的免疫接种方法 ,它是将佐剂和抗原一起涂于皮肤表面来诱导免疫应答。　　成人志愿者分别在 0、2 8和 84天经皮肤接种重组 CS6蛋白和 LT或 CS6蛋白。分组情况为 :CS6 2 50μg和 LT 50 0μg( 5人 ) ;CS650 0 μg和 LT50 0 μ…     

产毒大肠杆菌不耐热肠毒素单克隆抗体的临床应用研究

<正> 产毒大肠杆菌(ETEC)产生不耐热(LT)和耐热(ST)两种肠毒素,是引起小儿腹泻的重要病原菌。近年来,用免疫学方法检测大肠杆菌LT有很大发展,但这些方法均需应用抗-LT血清。由于LT提纯复杂,大批量生产抗-LT血清还存在一定困难。为了解决这个问题,我们对解放军302医院研制的抗人源产毒大肠杆菌LT单克隆抗     

SPA菌协同凝集试验检测LT大肠杆菌的初步报告

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)与腹泻发病关系十分密切,以往国内对ETEC不耐热肠毒素(LT)的检测大多是采用动物体内法,但该法不易推广。我们为了寻找简便快速的方法,曾试用SPA菌协同凝集(COA)试验对已知LT阳性和末知的分离株共62株进行了LT检测,同时用兔肠攀法做对比,结果满意。材料与方法 (一)菌株:包括已知LT阳性的12株(其中9株来自上海、太原市及福建省卫生防吐站,3株是我室从腹泻病人分离得的),和1984年从婴劝儿呢泻病人所分离得的大肠杆菌50株。     

检测大肠杆菌肠霉素快速方法的比较

产毒性大肠杆菌(ETEC)是引起人和动物腹泻病的重要病因。ETEC能产生两种类型的肠毒素,即不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)。目前已建立检测大肠杆菌肠毒素的方法有:兔肠结扎、家兔皮肤试验、Y-1细胞测定、ELISA法等,然而这些都不是常规实验室筛选产毒性大肠杆菌的理想方法。近几年新的检测技术,包括Oxoid 毒素测定试剂盒(反向被动乳胶凝集试验)和Ph-adeabet ETEC-LT试验(协同凝集试验)。     

产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析

目的:用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法:利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果:DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论:成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.     

用交联的类毒素菌苗免疫大鼠对人和猪的产肠毒素性大肠杆菌株的防御作用

无论用大肠杆菌不耐热毒素(LT)或耐热毒素(ST)免疫动物,其抗毒素应答只限于同种毒素,因而对产肠毒素性大肠杆菌株(ETEC)的防御作用局限于所产生的毒素类型。为此,作者制备了ST-LT B亚单位交联类毒素菌苗,以便能防御所有ETEC菌株,并产生两种抗毒素应答。     

用大肠杆菌耐热肠毒素免疫大鼠的保护作用

产生耐热(ST)及/或不耐热(LT)肠毒素的大肠杆菌是引起人类急性腹泻的常见病因。由于用 ST 肠毒素作主动免疫对产生 ST肠毒素的活菌是否有防御作用尚无有价值的报导,因此,作者用大鼠作模型进行了这方面的实验。     

抗产肠毒素性大肠杆菌的耐热和不耐热肠毒素交联菌苗的研制

作者用碳化二亚胺使耐热(ST)和不耐热(LT)肠毒素结合的方法,研制 ST 和 LT 毒素交联菌苗,这种菌苗对产生 LT 或 ST 肠毒素的不同血清型的大肠杆菌都有防御作用。用 Clements 等方法从大肠杆菌711株提取纯化的 LT 全毒素,用 Staples 等方法提     

产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析

目的：用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌（ETEC）不耐热肠毒素（LT）和耐热肠毒素（ST）基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法：利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果：DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论：成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.     

检测产毒性大肠杆菌耐热肠毒素三种方法的比较

产毒性大肠杆菌是发展中国家引起肠胃炎及引起旅行者腹泻的最常见的病原菌。它亦可引起发展中国家腹泻病的暴发。该菌可产生1或两种肠毒素,即耐热肠毒素(ST)与不耐热肠毒素(LT)。其中与人类疾病最密切有关的ST是STa。乳鼠试验是检测STa的标准方法。但不适宜于大规模的研究。近几年来,DNA重组和合成的寡核苷酸探针已经制成。酶联免疫法亦己应用于STa的检测。本文将上述三种试验方法进行了比较。从183例3岁以下腹泻患儿但无其它肠道病原菌的粪便标本中分离细菌。选取在麦康凯平板上疑似大肠杆菌者进行生化检查。     

志贺菌减毒疫苗株表达的4型产肠毒素性大肠杆菌菌毛和不耐热肠毒素突变体诱导的免疫应答

志贺菌和产肠毒素性大肠杆菌 ( ETEC)是引起245 7T株的gua BA突变株 )为载体株 ,以 p GA2质粒为 ETEC基因的表达载体。将编码 4型不同 ETEC菌毛 ( CFA/ 、CS2、CS3、CS4)和脱毒的人 ETEC不耐热肠毒素 ( LT)变体 ( LTh)的突变体 ( LTh K63)的操纵子分别克隆到 p GA2质粒中 ,再将每个质粒分别电穿孔到 2 a型福氏志贺菌疫苗株 CVD1 2 0 4中 ,构建表达 CFA/ 、 CS2、 CS3、 CS4菌毛和LTh K63抗原的 CVD1 2 0 4株。　　菌株培养过夜后制成 1 0 9CFU/1 0 0 μl的菌液。将豚鼠分为 7组 ( A～G) ,鼻内接种 ,每鼠 1 0 0 μl…     

口服接种母猪对乳猪抗大肠杆菌病的保护作用:菌毛作为保护性抗原的证据

作者用产生K99或987P菌毛和耐热(ST)肠毒素、而不产生不耐热(LT)肠毒素的大肠杆菌菌株,制成两种菌苗。一种是肉汤培养于37℃16小时的培养物,每天给母猪喂200ml,(每天大肠杆菌量为10~(11)),连续3天;另一种是大肠杆菌加福尔马林(按容量加至0.5％),在37℃处理4小时制成的死菌苗,每天给小母猪灌服10~(13)死菌。小母猪在口服     

大肠杆菌耐热毒素与不耐热毒素B亚单位交联菌苗对家兔的保护作用

大肠杆菌的耐热肠毒素(ST)和不耐热肠毒素(LT)可引起急性腹泻。LT及其B亚单位都是全抗原,而ST是半抗原,只有与大分子载体偶联时才有免疫原性。将有毒性的ST与无毒性的LT的B亚单位交联,其产物不但具有两者的抗原性,而且使ST的毒性降低600多倍。作者最近将合成的ST用碳化二亚胺法与LT的B亚单位交联,制成ST-B菌苗,免疫家兔和大鼠。     

一种完全合成的含有大肠杆菌耐热毒素和不耐热毒素B亚单位抗原决定簇的类毒素菌苗

产肠毒素性大肠杆菌能引起剧烈腹泻,此菌株具有两种免疫原性不同的肠毒素:耐热毒素(ST)和不耐热毒素(LT),类毒素菌苗必须兼有这两种毒素的抗原性.作者用SamII自动肽合成仪合成了LTB亚单位含124个氨基酸顺序的13个片段,用ELISA测定这些片段的抗原性,其中抗原性最强的仅为天然B亚单位的36%.若将由化学交联产生的ST的18个氨基酸顺序与其中一些肽连接,能增强B亚单位的抗原性.B     

口服ETEC-霍乱毒素B亚单位灭活菌苗在埃及成人中的安全性和免疫原性

产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)是发展中国家青少年细菌性腹泻的主要原因.埃及是ETEC腹泻的流行区.本研究在埃及人群中评价了由ETEC全菌体和重组霍乱毒素B亚单位(rCTB)组成的口服ETEC灭活菌苗的安全性和免疫原性.74名来自埃及本哈两所卫生服务机构的健康成人被随机分组后,分别服用两剂ETEC/rCTB菌苗(E003)或安慰剂.每剂ETEC/rCTB菌苗(4ml)含1.0mg rCTB和～2×10~(10)福马林灭活的ETEC,并洗去SBL101和SBL105株所有耐热肠毒素(ST)活性;每剂安慰剂(4ml)含～1×10~(11)加热灭活的大肠杆菌K-12.两剂的间隔时间为两周,服用前后至少禁食90分钟.服用前向菌苗制剂中加入150ml碳酸氢钠(4g)-柠檬酸缓冲液(1.45g).     

产肠毒素性大肠杆菌肠炎

近年来,腹泻病的病原学方面有了新的进展。经研究证实,产肠毒素大肠杆菌(ETEC)为发展中国家婴幼儿腹泻发病和死亡的重要病因,也是旅游者腹泻的常见病原体。研究ETEC所致的症状和其致病因素,对防治ETEC肠炎     

用大肠杆菌不耐热肠毒素的全毒素或B亚单位免疫大鼠的保护作用

[Klipstein FA et al:Infect Immun 31(1):144,1981(英文)] 由于霍乱弧菌和大肠杆菌的产肠毒素性菌株通过在肠腔内产生肠毒素而引起腹泻,因此考虑用免疫学方法来预防这些疾病。试验是将三种免疫原性相关的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)、全毒素(HT)和其B亚单位以及多粘菌素释放型LT(PM LT)作比较,各以不同的剂量免疫大鼠,分别用三种途径作初次     

从两株大肠杆菌分离的不耐热肠毒素的免疫和理化特性

本文比较了从两株大肠杆菌(人型 H10407株和猪型711株)提纯的肠毒素(LT)的亚单位结构和免疫学的相互关系,作者还进行了 LT 质粒的株间转移试验;即将H10407株的 LT 质粒转移到711株上,从而使一个菌株能同时表达两种质粒的特性。     

孟加拉腹泻病研究国际中心部分研究工作进展

一项重要的技术突破于1980年在实验室中得到证实。采用了一种用同位素标记的化学探头,能特异地鉴别产生致腹泻毒素[不耐热(LT)或耐热(ST)]的大肠杆菌集落。已经分离到产生 LT 或 ST 编码基因的 DNA,并使成单链。这些 DNA“基因探头”是以~(32)p 标