金线莲多糖苯酚-硫酸法测定条件的优化

目的:从金线莲中提取多糖,并建立金线莲多糖含量测定方法。方法:用超声法提取金线莲多糖,以苯酚-硫酸法进行含量测定,以葡萄糖为对照品,检测波长为490nm,用L9(34)正交试验设计优选测定条件。结果:1.0mL样液,加5%苯酚液0.6mL、硫酸6.0mL,100℃水浴保温15min结果最佳,测得金线莲超声提取物中粗多糖含量为12.09%。结论:优化后的苯酚-硫酸法测定金线莲多糖,方法简单,重复性好,结果准确。     

石莼硫酸多糖的分离纯化及结构解析

目的:研究石莼硫酸多糖的分离纯化条件并对其结构进行解析。方法:对石莼水溶性硫酸多糖的分离、纯化条件进行优化,用苯酚-硫酸法测定粗多糖中多糖的含量;高效凝胶色谱测定多糖分子量;红外光谱和碳谱分析多糖结构。结果:石莼硫酸多糖最佳提取条件为材料粉碎20目,用20倍量水85℃煎煮3次,每次2h。多糖含量为22.64%,分子量为1156112。所得可溶性多糖结构中主要含有β-葡糖醛酸和鼠李糖2种单糖,且多糖中含有大量的硫酸根。结论:本方法操作简便、结果稳定,可为工业生产提供理论依据。     

绿藻石莼多糖的提取工艺

用正交设计法对绿藻石莼多糖成分提取工艺进行研究。采用苯酚-硫酸法测定石莼提取液中石莼多糖含量。结果显示在pH4、温度100℃条件下提取的提取液中石莼多糖含量最高，达55.19％。溶液pH和提取温度是提取石莼多糖的关键影响因素，提取次数和时间长短的影响不大。     

硫酸苯酚法测定金菊花中多糖的含量

［摘要］目的从金菊花中提取多糖成分，并用硫酸苯酚法测定多糖含量。方法用水提醇沉法提取多糖，用硫酸苯酚法测定多糖含量。结果提取的多糖为类白色疏松粉状固体，平均相对百分含量为86.59%，RSD为4.23%。结论水提醇沉法提取的多糖成分含量较高，硫酸苯酚法可用于金菊花中多糖成分的含量测定。     

红曲霉粗多糖的提取及含量测定

目的:从红曲霉发酵液和菌丝体中提取粗多糖并测定多糖含量。方法:将红曲霉发酵液和菌丝体用水提醇沉法提取粗多糖,用苯酚-硫酸法测定红曲霉多糖的含量。结果:红曲霉粗多糖中多糖含量为62.87%,平均回收率为99.35%,RSD=1.44%。结论:本实验方法可以提取出红曲霉多糖,多糖含量测定准确,苯酚-硫酸法可作为红曲霉多糖含量的测定方法。     

西番莲果皮多糖2种测定方法的比较研究

目的目的选择一种准确、稳定、简便的西番莲果皮多糖含量测定的方法。方法分别用苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法比色测定西番莲果皮中多糖的含量,比较2种方法的差异。结果苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法分别在2．9～17．4μg／mL（r=0．9994）和4．64～23．2μg／mL（r=0．9993）范围内与吸光度呈良好的线性关系;精密度实验RSD分别为0．43％和0．55％;苯酚-硫酸法在2h内稳定,蒽酮-硫酸法在1h内稳定;含量测定结果分别为54．63mg／g和48．19mg／g。结论苯酚一硫酸法测定西番莲果皮多糖含量显色灵敏,颜色稳定,操作简便,可作为测定西番莲果皮多糖含量测定的方法。     

蒽酮硫酸法与苯酚硫酸法测定竹节参多糖含量的比较研究

目的 考察蒽酮硫酸法与苯酚硫酸法测定竹节参多糖(Panax japonicus polysaccharides,PJPS)含量的可行性并比较其差异,建立竹节参多糖含量测定方法.方法 对蒽酮硫酸法和苯酚硫酸法测定竹节参多糖含量的显色条件和方法学进行研究,比较2种方法测定结果的差异.结果 蒽酮硫酸法含量测定结果高于苯酚硫酸法,其差异有统计学意义,蒽酮硫酸法的线性、重现性和稳定性都优于苯酚硫酸法.结论 蒽酮硫酸法比苯酚硫酸法更适合测定竹节参中多糖的含量.     

当归多糖的超声提取及含量测定

目的提取并测定当归多糖的含量。方法采用超声提取当归多糖,以苯酚-硫酸法测定其含量。结果当归中多糖含量为12.45%,平均回收率为99.85%,RSD为2.04%（n=6）。结论超声提取-分光光度法可以快速准确测定当归中多糖含量。     

南沙参中多糖含量测定方法的建立及比较

目的:建立南沙参中多糖含量的测定方法并进行比较.方法:采用水提醇沉法分离提取南沙参多糖,以葡萄糖为对照制备标准曲线;采用蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法,利用紫外分光光度计测定多糖含量.结果:蒽酮-硫酸法测定南沙参中多糖含量为16.37％,加样回收率为101.1％,RSD为2.1％;苯酚-硫酸法测定南沙参中多糖含量为15.26％,加样回收率为99.9％,RSD为1.8％.结论:两种方法操作简单,精密度高、重复性好,均可用于南沙参中多糖含量的测定.     

叠鞘石斛多糖含量测定两种方法的比较

目的:通过叠鞘石斛多糖的含量研究,比较改良苯酚硫酸法和传统苯酚硫酸法测定多糖的差异.方法:分别进行两种方法的准确度、重复性、精密度、稳定性等试验及测定6批次叠鞘石斛多糖含量.结果:改良苯酚硫酸法测定叠鞘石斛中多糖含量优于传统苯酚硫酸法.结论:改良苯酚硫酸法操作简便、稳定可靠,可用于叠鞘石斛多糖含量的检测.     

石莼、网地藻多糖含量与藻际微生物丰度关系研究

目的：研究石莼、网地藻藻际微生物丰度对多糖含量的影响。方法：通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术对石莼、网地藻所附着的藻际微生物丰度进行研究(细菌16S rDNA以及真菌18S rDNA丰度)。结果：石莼多糖含量、藻际微生物总DNA含量均显著高于网地藻(p <0.05)。石莼藻际微生物丰度(细菌1.04×1010-1.42×1010拷贝数/g干样,真菌1.01×107-1.38×107拷贝数/g干样) 显著高于网地藻(细菌2.05×108-6.9×108拷贝数/g干样、真菌2.59×105-4.79×105拷贝数/g干样)(p<0.01)。典型对应分析(CCA分析)表明石莼、网地藻多糖含量与藻际微生物(细菌、真菌)丰度显著相关。结论：石莼、网地藻藻际微生物丰度对多糖含量有一定影响。     

蜜环菌酒的研制

目的蜜环菌酒富含多糖,具有天麻酒的相似药理活性,可作为天麻酒的替代品。方法将富含多糖的蜜环菌发酵液进行蜜环菌酒生产工艺的优化,制备蜜环菌酒。结果蜜环菌酒的主要成分为酒精16%、多糖0.301mg/mL、蛋白质44.9mg/L、氨基酸3.30g/L、总酸4.8g/L、总酯3.21g/L。结论蜜环菌酒色、香、味、体纯正,含有功能成分。     

Optimization of fermentation process of Cordyceps militaris and antitumor activities of polysaccharides in vitro

The influence of medium composition and cultural conditions on simultaneous yield of mycelia, intracellular polysaccharide, adenosine, and mannitol by Cordyceps militaris CGMCC 2909 was investigated with desirability functions in this study. An optimization strategy based on the desirability function approach, together with response surface methodology (RSM) has been used to optimize medium composition, and the optimal medium was obtained via the desirability as follows: yeast extract 10.33 g/L, sucrose 27.24 g/L, KH₂PO₄ 5.60 g/L and the optimal culture conditions are initial pH 6, 25°C, rotation speed 150 r/minute, inoculum size 4%(v/v), and medium capacity 40 mL/250 mL. Under these conditions, the yield of mycelia, intracellular polysaccharide, adenosine and mannitol reached 12.19 g/L, 0.6 g/L, 61.84 mg/L, and 1.38 g/L, respectively, and the D value was 0.77. Furthermore, the polysaccharides showed significant antitumor activities against HeLa and HepG2 in vitro in a dose-dependent manner in 72 hours. At a concentration of 1000 mg/mL, the inhibition rate of polysaccharides was 92.38% and 98.79%. The IC50 for HeLa and HepG2 were 70.91 μg/mL and 97.63 μg/mL, respectively.     

风芍六君子汤不同配伍水煎液中多糖的含量测定

目的:测定风芍六君子汤不同配伍水煎液中多糖的含量。方法:以水提醇沉法分离出粗多糖,采用蒽酮-硫酸法制得有色糖醛衍生物,用分光光度法进行含量测定。结果:加入4mL0.2%的蒽酮-硫酸溶液,在水浴中加热15min、冷却10min的多糖含量测定条件最优。D-无水葡萄糖对照品进样量在0.01992～0.07968mg范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.9996);平均回收率为97.33%,RSD=1.52%(n=6)。结论:多糖主要来自六君子汤。本方法快速、准确、重复性好,可用于风芍六君子汤不同配伍水煎液中多糖的含量测定。     

苯酚-硫酸法测定猕猴桃根中多糖含量

目的：建立猕猴桃根中多糖含量的测定方法。方法：用水提醇沉法从猕猴桃根中提取多糖;采用苯酚-硫酸法测定其含量,并通过正交试验,确定最佳显色条件。结果：最佳显色条件为：5％苯酚1mL,浓硫酸4mL,反应温度100℃,反应时间30min。最大吸收波长（λmax）为486．8nm,平均回收率为102．49％,RSD为1．51％,线性范围为20．35～101．90mg·L^-1（r=0．9999）。结论：该法快速、准确、重复性好,可用于以多糖为有效成分的药物的质量控制。     

竞争ELISA法测定19A型肺炎链球菌发酵物中的多糖含量

 目的  建立检测19A型肺炎链球菌荚膜多糖的竞争ELISA方法,检测细菌发酵过程中多糖的表达量。方法   以19A型肺炎链球菌多糖为包被物,待测多糖为竞争物,建立间接竞争ELISA方法,并验证该方法的准确性和精密度。用建立的方法检测不同培养条件下发酵物中的多糖表达量。 结果   最佳多糖包被质量浓度为10 mg/L,多糖抗血清稀释度为1：4×104。当检测范围为39.06~5 000.00 μg/L时,决定系数为0.995。批内和批间相对标准差分别为5.08%~9.58%和5.28%~12.93%。培养物样品加标回收率为95.84%~110.07%。两种不同培养条件下培养物中的多糖表达量分别为312.17 mg/L和1 056.42 mg/L。 结论  新建的方法能用于19A型肺炎链球菌发酵物中多糖表达量的检测,对于优化培养条件及掌握培养物收获时间具有指导意义。     

苦豆子多糖硫酸化修饰工艺的研究

目的 确定氨基磺酸-甲酰胺法修饰苦豆子多糖的可行性,并应用正交试验法对苦豆子多糖硫酸化修饰工艺进行优化.方法 以硫酸根取代度为指标,采用L9(34)正交试验设计对氨基磺酸用量、甲酰胺用量、反应时间、反应温度进行优选.结果 苦豆子多糖硫酸化修饰过程中,取苦豆子多糖30 mg在氨基磺酸135mg,反应温度100℃,反应时间4h,甲酰胺20 mL的工艺条件下,苦豆子多糖可获得理想的硫酸根取代度,通过紫外光谱和红外光谱检测,苦豆子多糖的糖基单元已成功引入硫酸基团.结论 氨基磺酸-甲酰胺法适用于苦豆子多糖的硫酸化修饰,此方法有效可行,具有较好的硫酸化修饰效果.     

蒽酮-硫酸法测定复方白及乳膏中白及多糖的含量

目的:建立复方白及乳膏中白及多糖的含量测定方法.方法:以无水葡萄糖为对照品,氯仿-乙醇混合溶液为溶解介质,蒽酮-硫酸法测定,测定波长620 nm.结果:白及多糖在1.9～34.2 μg/mL范围内线性关系良好,A=0.033C-0.0067(γ =0.999 7),回收率为99.55％,RSD=1.12％ (n=6).结论:该方法便捷、重现性好,适用于复方白及乳膏中白及多糖的含量测定.     

石莼的化学成分

目的研究绿藻石莼的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH 20、HPLC等方法进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果得到6个化合物,分别鉴定为豆甾24R,28R环氧5烯3β醇(Ⅰ)、豆甾5,24(28)二烯3β醇(Ⅱ)、豆甾5,28(29)二烯3β醇(Ⅲ)、β谷甾醇(Ⅳ)、对羟基苯甲酸(Ⅴ)、琥珀酸(Ⅵ)。结论化合物除(Ⅱ)以外均为首次从石莼中分离得到。