地塞米松对感染柯萨奇B-2病毒的人胚心肌细胞保护作用的实验研究

该研究拟从细胞水平观察地塞米松对感染ＣｏｘＢ－２病毒的人胚心肌细胞的作用效果。采用培养的人胚心肌细胞接种ＣｏｘＢ－２病毒，观察细胞生长、搏动情况及超微结构，测定心肌细胞释放的ＬＤＨ（乳酸脱氢酶）活性。发现地塞米松治疗组的心肌细胞搏动较感染组者维持时间长，心肌细胞病变发展亦较缓慢，且ＬＤＨ值明显低于感染组。说明地塞米松对感染ＣｏｘＢ－２病毒的人胚心肌细胞有明显的保护作用，提示临床上在重症病毒性心肌炎，特别是早期阶段，应用激素治疗能减轻心肌病变，对进一步的抢救病人有重要意义。     

牛磺酸对大鼠培养心肌细胞感染病毒后钙离子内流的影响

观察牛磺酸对心肌细胞感染ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３病毒后Ｃａ＾２＋内流的影响。取新生ＳＤ大鼠心室肌制备培养搏动心肌细胞，１８ｈ后接种１００ＴＣＩＤ５０的ＣＶＢ３作为实验性病毒心肌炎模型，并采用放射性同位素＾４５Ｃａ＾２＋示踪技术，观察了１－２０ｍｍｏｌ／Ｌ牛磺酸对正常及感染ＣＶＢ３后心肌细胞Ｃａ＾２＋内流的影响。     

当归对氧化低密度脂蛋白所致血管内皮细胞损伤的保护作用

通过培养人脐静脉内皮细胞,观察当归对氧化低密度脂蛋白损伤的内皮细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的漏出量及扫描电镜下ＥＣ形态结构的影响,并观察当归在体外对Ｃｕ＾２＋诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的作用。结果显示;在作用２４ｈ后,ｏｘ－ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出明显增加,超微结构明显受损。当归＋ｏｘ－ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出显著减少,超微结构基本正常。     

牛磺酸对大鼠培养心肌细胞感染病毒后钙离子内流的影响

观察牛磺酸对心肌细胞感染 ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３病毒（ＣＶＢ３）后 Ｃａ２＋内流的影响。取新生 ＳＤ大鼠心室肌制备培养搏动心肌细胞， １８ ｈ后接种 １００ ＴＣＩＤ５０的 ＣＶＢ３作为实验性病毒性心肌炎模型，并采用放射性同位素４５Ｃａ２＋示踪技术，观察了 １～２０ ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸对正常及感染 ＣＶＢ３后心肌细胞 Ｃａ２＋内流的影响。结果：（ｌ）１０～２０ ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸对正常心肌细胞不同胞外 Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］０， ０．５、 １．５和 ４．０ ｍｍｏｌ／ Ｌ）下的 Ｃａ２＋内流均有抑制作用，而 １ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸只抑制高［Ｃａ２＋］０（４．０ ｍｍｏｌ／ Ｌ）时 Ｃａ２＋内流，对低［Ｃａ２＋］０（０．５ ｍｍｏｌ／ Ｌ）和正常［Ｃａ２＋］０（１．５ ｍｍｏｌ／ Ｌ）时 Ｃａ２＋内流无明显作用；（２） ｌ～２０ ｍｍｏｌ／ Ｌβ－丙氨酸对 Ｃａ２＋内流无明显影响；（３）感染ＣＶＢ３后Ｃａ２＋内流增加，加用１ｍｍｏｌ／ Ｌ牛磺酸后能减少感染ＣＶＢ３后的Ｃａ２＋内流。结论：牛磺酸具有抑制培养心肌细胞感染ＣＶＢ３后Ｃａ２＋内流的作用，这可能是牛磺酸能减轻ＣＶＢ３所致细胞损伤的机理之一。     

当归对氧化低密度脂蛋白所致血管内皮细胞损伤的保护作用

通过培养人脐静脉内皮细胞,观察当归对氧化低密度脂蛋白（ｏｘ ＬＤＬ）损伤的内皮细胞（ＥＣ）乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的漏出量及扫描电镜下ＥＣ形态结构的影响,并观察当归在体外对Ｃｕ２＋诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的作用。结果显示：在作用２４ｈ后,ｏｘ ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出明显增加,超微结构明显受损。当归＋ｏｘ ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出显著减少,超微结构基本正常。在体外,当归能明显抑制Ｃｕ２＋介导的ＬＤＬ氧化,且随着当归浓度的增高显示抑制作用增强。结果表明：当归对ｏｘ ＬＤＬ所致血管ＥＣ损伤具有保护作用,其机制可能与当归抗氧化作用有关。     

实验性病毒性心肌炎药物治疗及凋亡的机制

目的以病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞感染模型为基础，研究柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）细胞感染与心肌细胞凋亡的关系，并观察板蓝根对实验性ＶＭＣ的治疗效果。方法第一步建立稳定的ＶＭＣ细胞感染模型；第二步在ＣＶＢ３病毒感染心肌细胞后２４ｈ电镜观察超微结构改变，流式细胞仪检测“凋亡峰”，ＥＬＩＳＡ法定量检测ＣＶＢ３病毒感染后１，２，４，７，２４ｈ心肌细胞凋亡的情况；第三步将不同浓度的板蓝根与ＣＶＢ３病毒作用后在心肌细胞上检测病毒的ＴＣＩＤ５０。根据药物毒性测定的结果，取最大无毒浓度以下两种不同浓度的板蓝根按两种方式加药：（１）ＣＶＢ３病毒感染细胞后加药；（２）病毒先与药物作用后再感染细胞进行实验。以黄芪作为治疗阳性对照组，另设病毒感染组、正常细胞对照组。于药物作用４８ｈ后观察各组细胞搏动百分比、细胞病变（ＣＰＥ）、超微结构变化，并测定培养液中心肌酶水平，进行体外、细胞内药物疗效观察。结果（１）对ＣＶＢ３病毒感染后细胞的形态学检测（ＣＰＥ３＋～４＋），电镜下细胞内见包涵体，病毒颗粒及细胞培养液心肌酶（ＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫ、ＣＫＭＢ、ＨＢＤＨ）水平升高，证实所建立的ＶＭＣ细胞感染模型是稳定的。（２）电镜观察ＣＶＢ３病毒感染心     

柯萨基B3病毒感染对心肌细胞ICAM-1表达和粘附作用的影响

目的：探讨柯萨基Ｂ３病毒（ＣｏｘＢ３）感染心肌细胞对细胞膜细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）表达和与淋巴细胞粘附的影响。方法：采用ＥＬＩＳＡ法观察心肌细胞ＩＣＡＭ－１的表达；采用粘附试验和单克隆抗体抑制观察受染心肌细胞与淋巴细胞的粘附。结果：１００和２００ＴＣＩＤ５０／ｍｌＣｏｘＢ３感染心肌细胞２４～４８ｈ，均可明显诱导ＩＣＡＭ－１表达（Ｐ＜０．０５）；增强受染心肌细胞与活化淋巴细胞的粘附（Ｐ＜０．０１，０．０５）。抗白细胞相关抗原１（ＬＦＡ－１）或抗ＩＣＡＭ－１单克隆抗体均可抑制淋巴细胞与心肌细胞的粘附，抑制率为２６．４５％～４０．４６％。结论：ＣｏｘＢ３感染增强受染心肌细胞与淋巴细胞的粘附效应，与病毒感染诱导心肌细胞ＩＣＡＭ－１表达增多有关     

多烯康对脑血栓病人血清高密度脂蛋白及其亚组分的影响

①目的观察多烯康对脑血栓病人血清高密度脂蛋白及其亚组分的影响。②方法给３５例脑血栓病人口服多烯康２８ｄ，观察血清高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）及其亚组分（ＨＤＬ２－Ｃ，ＨＤＬ３－Ｃ）改变，并取４０例健康成年人为对照组。③结果治疗前病人血清ＨＤＬ－Ｃ，ＨＤＬ２－Ｃ，ＨＤＬ２－Ｃ／ＨＤＬ３－Ｃ均明显低于对照组。服用多烯康２８ｄ后，ＨＤＬ－Ｃ浓度有所升高，但无统计学意义。ＨＤＬ亚组分ＨＤＬ２－Ｃ浓度和ＨＤＬ２－Ｃ／ＨＤＬ３－Ｃ比值均升高，治疗前后相比均具有显著差异（ｔ＝２．５２，Ｐ＜０．０１；ｔ＝１．８５，Ｐ＜０．０５）。３５例病人服药前后未见肝功能改变，也无恶心呕吐症状出现。④结论多烯康可提高ＨＤＬ，特别对ＨＤＬ２－Ｃ的作用较明显，本药为一种较有前途的防治缺血性脑血管病的药物。     

柯萨奇B组病毒感染患儿细胞免疫状态及对干扰素疗效的影响

系统探讨柯萨奇病毒Ｂ感染血症的机体免疫特征及干扰素应用的评价。采用ＥＬＩＳＡ法测定ＣＶＢ－Ａｇ和ＣＶＢ－ＩｇＭ，采用单克隆抗体标记的间接ＡＢＣ免疫组化法测定Ｔ细胞亚群；＾３Ｈ－ＴｄＲ标记法测定，ＮＫ细胞和ＬＡＫ细胞活性。结果：１．ＣＶＢ感染机体ＮＫ细胞活性。ＬＡＫ细胞活性和ＣＤ４／ＣＤ８比值明显低于对照组；２．机体ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性轻中度降低，ＣＶＢ－Ａｇ可自然清除或应用α干扰素清除．若ＮＫ和Ｌ     

LAK细胞治疗慢性活动型乙型肝炎的疗效与机理研究

目的观察淋巴因子激活杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）治疗慢性活动型乙型肝炎（ＣＡＨ）的疗效，探讨治疗机理。方法ＬＡＫ细胞治疗４０例患者，治疗前、疗程结束时，分别检测ＨＢＶＭ，ＡＬＴ，Ｔ细胞亚群，Ｂ细胞，ＩＬ－２，ｍＩＬ－２Ｒ，ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性。疗程结束１ａ复查ＨＢＶＭ。对照组４０例。结果ＬＡＫ治疗组疗程结束时，ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别为２２．５％和４０．０％，与对照组相比差异显著（Ｐ均＜０．００１）。疗程结束１ａ复查ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别达４０．０％和６８．６％。治疗后患者ＣＤ＋４细胞数及ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值，ＩＬ－２水平及ｍＩＬ－２Ｒ表达，ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞活性均较治疗前明显升高（Ｐ均＜０．０１）。尤以ＨＢｅＡｇ转阴者，ＩＬ－２升高更显著（Ｐ均＜０．００５）。结论ＬＡＫ细胞疗法有增强免疫功能、调节免疫紊乱和清除乙肝病毒的效用，但主要不是ＬＡＫ细胞的溶细胞作用。     

αB—晶状体蛋白在保护过氧化氢所致心肌细胞损伤中的作用

采用热休克对新生大鼠心肌细胞进行预处理,以诱导αＢ－晶状体蛋白的表达,并观察其对１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１的过氧化氢所致心肌细胞损伤的保护作用。发现：热休克预处理组心肌细胞中αＢ－晶状体蛋白表达明显增加,Ｈ２Ｏ２所致的细胞死亡率及ＬＤＨ释放率降低,总抗氧化能力增强;Ｈ２Ｏ２可引起αＢ－晶状体蛋白从胞浆向胞核及微丝位。     

HCMV—兔胚肺细胞体外感染模型的建立

为探讨人巨细胞病毒（Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＷ）ＡＤ１６９毒株体外感染兔胚肺细胞（Ｒａｂｂｉｔ Ｅｍｂｒｙｏ Ｌｕｎｇ ｃｅｌｌ,ＲＥＬ）的敏感性,建立ＨＣＭＶ ＡＤ１６９毒株感染模型,将ＨＣＭＶ ＡＤ１６９毒株定量接种于ＲＥＬ,观察细胞病理变化;用单克隆抗体－免疫组化方法检测细胞内ＨＣＭＶ抗原;电镜检测细胞内病毒颗粒,用ＥＬＩＳＡ方法检测经ＲＥＬ增殖病毒培养物ＨＣＭＶ抗     

肝癌细胞清除乙型肝炎病毒的非免疫机制

背景和目的肝细胞感染ＨＢＶ后的清除主要由免疫细胞经包括ＣＤ９５途径的细胞毒效应，我们发现乙型肝炎时肝细胞也表达ＣＤ９５Ｌ。试图用肝癌细胞体外培养试验，推测肝细胞表达ＣＤ９５Ｌ是否也能自身通过调亡以清除ＨＢＶ。方法诱导ＨｅｐＧ２细胞表达ＣＤ９５Ｌ，与转染ＨＢＶ、表达ＣＤ９５的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞共培养，以荧光显微镜和流式细胞仪检测后者的凋亡。结果表达ＣＤ９５Ｌ的ＨｅｐＧ２细胞杀伤表达ＣＤ９５的ＨｅｐＧ；２．２．１５细胞，２４ｈ调亡１６．５％，４８ｈ凋亡４３．０％，这-作用可用抗ＣＤ９５Ｌ抗体阻断。推论乙型肝炎时可能肝细胞自身经非免疫机制清除病毒。     

力力康胶囊降脂的实验及临床研究

以口服力力康胶囊者为治疗组，服月见草油胶丸者为对照组，观察力力康胶囊的降脂作用。结果显示力力康胶囊可使高脂模型大鼠血清ＬＤＬ－Ｃ和ＶＬＤＬ－Ｃ下降，ＡＩ明显下降，ＨＤＬ－Ｃ升高。且ＨＤＬ－Ｃ的升高主要是由于ＨＤＬ２－Ｃ的升高，而ＨＤＬ３－Ｃ无显著变化。临床观察治疗后ＴＣ、ＴＧ、ＡＩ下降，ＨＤＬ－Ｃ升高。且ＨＤＬ－Ｃ的升高主要是由于ＨＤＬ２－Ｃ的升高，而ＨＤＬ３－Ｃ无显著变化。临床观察治疗后ＴＣ、Ｔ     

H CM V 兔胚肺细胞体外感染模型的建立

为探讨人巨细胞病毒（ＨｕｍａｎＣｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＷ）ＡＤ１６９毒株体外感染兔胚肺细胞（ＲａｂｂｉｔＥｍｂｒｙｏＬｕｎｇｃｅｌ,ＲＥＬ）的敏感性,建立ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株感染模型,将ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株定量接种于ＲＥＬ,观察细胞病理变化;用单克隆抗体－免疫组化方法检测细胞内ＨＣＭＶ抗原;电镜检测细胞内病毒颗粒,用ＥＬＩＳＡ方法检测经ＲＥＬ增殖病毒培养物ＨＣＭＶ抗原滴度,用人胚肺细胞（ＨｕｍａｎＥｍｂｒｙｏＬｕｎｇｃｅｌ,ＨＥＬ）滴定病毒毒力变化。结果表明,接种病毒后,ＲＥＬ于４８ｈ出现细胞肿胀,胞浆内出现折光性颗粒,逐渐变圆、脱落,其病变特征与该病毒在ＨＥＬ增殖出现的病变一致;用免疫组化法在胞浆及其核内查到ＨＣＭＶ抗原;用透射电镜观察,在细胞核内查到大量病毒颗粒;用ＥＬＩＳＡ方法在ＲＥＬ病毒培养物中查到ＨＣＭＶ抗原,抗原滴度与ＨＥＬ增殖的病毒一致;与ＨＥＬ增殖物比较,经ＲＥＬ增殖的病毒培养物毒力降低１００ＴＣＩＤ５０。表明ＲＥＬ是ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株的敏感宿主细胞。     

鼠视网膜的免疫原性

为探讨视网膜的免疫原性,选择ＤＢＡ／２鼠（ＭＨＣ为Ｈ－２＾ｄ）为供体,Ｃ５７ＢＬ／６（ＭＨＣ为Ｈ－２＾ｂ）或ＢＡＬＢ／Ｃ鼠（ＭＨＣ为Ｈ－２＾ｄ）为受体,把ＤＢＡ／２鼠的半个视网膜移植于受体鼠的皮下,２周后检测迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）。结果示移植组的迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和细胞介导的细胞毒效应（ＣＴＬ）均低于阳性对照ＤＢＡ／２鼠脾细胞组,高于阴性对照假手术组。提示ＤＢ     

LDL－阿克拉霉素复合物对白血病HL－60细胞的生长抑制作用

选择人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０进行体外培养，以正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）作为对照细胞，观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对ＨＬ－６０细胞生长的影响、ＬＤＬ与抗癌药物阿克拉霉素（ＡＣＭ）复合物的入胞作用以及对ＨＬ－６０细胞株的选择性杀伤作用。结果表明：１．ＬＤＬ对ＨＬ－６０细胞的生长无明显影响；２．ＬＤＬ作为载体可增加ＡＣＭ进入ＨＬ－６０细胞的量，但对ＰＢＬ的影响不明显；３．ＬＤＬ载体可增强ＡＣＭ对ＨＬ－６０细胞的杀伤力，而对ＰＢＬ无明显影响。提示ＬＤＬ是脂溶性抗肿瘤药物的良好载体     

热休克对缺氧复氧损伤的心肌细胞产生一氧化氮的影响

目的 探讨热休克预处理对心肌细胞保护作用的机理。方法作者在培养的新生大鼠心肌细胞的模型上，观察缺氧、复氧对培养心肌细胞产生和释放一氧化氮（ＮＯ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和磷酸肌酸激酶（ＣＰＫ）的影响。实验共分为４组：１．对照组；２．损伤组（加无糖无氧Ｈａｎｋ＇ｓ液，充入氮气以置换瓶内空气）；３．热休克处理组（细胞培养瓶放入４２℃水浴箱中孵育１小时）；４．地塞米松组（在无氧Ｈａｎｋ＇ｓ液中加入地塞米松）。结果培养心肌细胞缺氧３小时、复氧３０分钟后ＮＯ的产生显著增加，ＣＰＫ、ＬＤＨ的释放也显著升高。热休克（细胞在４２℃水浴１小时，恢复２４小时）或地塞米松（１０ｍｏｌ／Ｌ）预处理可显著减少心肌细胞ＮＯ、ＬＤＨ和ＣＰＫ的产生和释放。结论提示心肌细胞在缺氧、复氧过程中产生的大量ＮＯ对培养心肌细胞是有毒的。热休克预处理对缺氧、复氧损伤的培养心肌细胞的保护作用与抑制过量ＮＯ的产生有关。     

低密度脂蛋白对体外培养的人肾小球系膜细胞产生活性氧的影响

观察了人低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的人行小球系膜细胞（ＧＭＣ）Ｈ２Ｏ２和Ｏ２－产生的影响，并与经ＬＤＬ刺激后ＧＭＣ的增殖水平及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平相比较，结果发现：经ＬＤＬ刺激３０ｍｉｎ，浓度≤１００ｍｇ／Ｌ时，ＬＤＬ能明显促进ＧＭＣ释放Ｈ２Ｏ２和Ｏ２－，＞１００ｍｇ／Ｌ时，ＧＭＣ上清中该类物质的浓度并不随之增加。ＬＤＬ刺激ＧＭＣ释放Ｈ２Ｏ２和Ｏ２－的浓度曲线与经ＬＤＬ刺激４８ｈ后ＧＭＣ的增殖曲线以及ＬＤＨ释放曲线相符合。说明ＬＤＬ除可直接影响ＧＭＣ增殖外，尚可通过对ＧＭＣ释放或产生活性氧和ＬＤＨ等炎性介质来间接损伤肾小球。     

人类巨细胞病地人胚肺细胞HOX基因表达的影响

应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ技术研究人胚肺（ＨＥＬ）细胞ＨＯＸ基因的表达状态及人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）对ＨＥＬ细胞ＨＯＸ基因表达的影响。结果发现：ＨＥＬ细胞表达ＨＯＸＢ７基因;ＨＣＭＶ感染后,其表达上调;用全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）处理ＨＥＬ细胞,ＨＣＭＶ对ＨＯＸＢ７基因表达的上调作用更强。提示ＨＣＭＶ可能通过影响ＨＯＸＢ７基因的表达导致胚胎发育畸形。