氧化应激介导的NF-κB信号通路对猪小梁细胞MMPs/TIMPs表达的作用研究

目的研究氧化应激对猪眼小梁细胞NF-κB信号通路相关蛋白P65及MMPs/TIMPs表达的影响,探讨氧化应激介导的NF-κB信号通路在猪小梁细胞外基质重塑中的作用。方法传第三代的猪眼小梁细胞血清饥饿培养24 h后,利用NF-κB的特异抑制剂吡咯二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithocarbamate,PDTC)进行预处理,或直接用H2 O2进行干预,细胞免疫组化和RT-PCR检测猪眼小梁细胞NF-κB P65、M M P-2、M M P-3和TIM P-1的表达。结果 H2O2处理组猪眼小梁细胞NF-κB P65、MMP-2、MMP-3和TIMP-1的表达明显增加,与对照组比较,差异均有统计学意义。PDTC组H2O2诱导的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3的表达,但仍高于对照组猪眼小梁细胞的表达。PDTC对H2O2诱导的猪眼小梁细胞TIMP-1的表达无影响。结论氧化应激可能通过诱导猪眼小梁细胞NF-κB信号通路的激活,参与猪小梁细胞外基质的重塑,可能还有其他的信号通路参与这一过程。     

杨梅黄酮对皮肤光老化及NF-κB信号通路表达的抑制作用

目的 探讨杨梅黄酮(Myr)对小鼠皮肤和人皮肤角质形成(HaCaT)细胞光老化的抑制作用及其对核转录因子(NF-κB)信号通路表达的影响.方法 将50只小鼠按随机数字表法分为空白对照组(未经紫外线照射和Myr处理)、模型对照组(背部涂抹0.9％氯化钠溶液2 ml)、低剂量组(背部涂抹5 mg/ml Myr 2 ml)、...     

BAFF-R介导的NF-κB信号通路对多发性骨髓瘤细胞增殖及存活的作用研究

目的 研究B淋巴细胞刺激因子受体(BAFF-R)介导的NF-κB信号通路在多发性骨髓瘤(MM)中的作用,并进一步研究NF-кB信号通路对MM细胞存活的影响。 方法 应用Western blot法分析BAFF-R对NF-κB信号通路相关蛋白的激活情况;同时通过RT-PCR、ELISA、WST-1检测NF-κB信号通路抑制剂(BAY11-7082)干预前后BAFF-R mRNA和蛋白表达水平以及对MM细胞增殖的影响。 结果 BAFF-R阻断性抗体(0、1、5和15μg/ml)能够减少p52和p65蛋白的入核,增加IκB-α蛋白表达量,即BAFF-R能够激活NF-κB信号通路。BAY11-7082(1、2和4μmol/L)显著降低BAFF-R mRNA、蛋白表达水平,减少MM细胞增殖和存活。 结论 BAFF-R激活NF-κB信号通路促进多发性骨髓瘤细胞的增殖及存活,进而参与多发性骨髓瘤的发生、发展。     

NF-κB信号通路在椎间盘退行性变中的机制研究探讨

随着人口老龄化的日益加剧,椎间盘退行性变造成的下腰痛已经成为严重的医疗和社会问题.基础研究表明,椎间盘退行性变的本质不仅是基质合成和分解代谢过程之间的失衡,还有炎症反应的不断进行.而这两种生物学进程均需特定的信号通路介导,特别是核因子-κB(NF-κB)介导的通路.目前NF-κB通路已经被认为是一些肌肉骨骼疾病中炎症和...     

中药调控NF-κB信号通路干预胃溃疡研究进展

胃溃疡(gastric ulcer, GU)是一种临床常见多发病。GU易反复发作,长期应用抑酸药治疗不良反应大。中医药对于GU的治疗具有多靶点、多疗效、不良反应少等优点。研究表明,胃溃疡发生机制与氧化应激、炎性反应等密切相关,核因子-κB (nuclear factor-kappa B,NF-κB)作为炎性反应的核心因子,参与多种炎性、氧化反应。故本文以中医药为基础,NF-κB为切入点,总结中医药干预NF-κB信号通路治疗GU相关文献,发现抑制NF-κB信号通路,可通过调控炎症、氧化、细胞凋亡等机制,下调肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)等因子,降低超氧化物歧化酶(auperoxide dismutase, SOD)、过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO),促细胞凋亡蛋白、caspase-3活性,增加还原型谷胱甘肽(glutat...     

老龄小鼠急性心肌梗塞后NF-κB信号通路表达的变化

目的研究不同年龄小鼠急性心肌梗塞后NF-κB信号通路的表达差异,探讨急性心肌梗塞后心脏破裂的年龄异质性机制。方法选择3月龄（低龄组）和18月龄（老龄组）雄性C57/BL小鼠各48只,结扎左冠状动脉建立急性心肌梗塞（acute myocardial infarction,AMI）模型。分为对照组（shamoperations,SH）及心梗后3、7、14d（MI3、7、14d）组,免疫组织化学及Western blot法测定左室心肌p65表达、细胞间粘附分子（ICAM）-1、血管粘附分子（VCAM）-1表达。结果心梗后p65表达较对照组高,老龄组表达高于低龄组。心梗后3d ICAM-1表达高于对照组,但不同年龄组间表达无差异。心梗后VCAM-1表达高于对照组,老龄对照组及心梗14d时表达高于低龄组。结论急性心肌梗塞后左室心肌NF-κB信号通路相关蛋白表达存在年龄异质性,其可能是老龄鼠急性心肌梗塞后心脏破裂率高和心室重构重的机制之一。     

中药调控NF-κB信号通路干预椎间盘退行性变的作用机制

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路是介导椎间盘炎症反应发生的重要通路之一。中药可以不同程度干预NF-κB信号通路的活化,阻断细胞中IκBα磷酸化,减少p65的核转移,下调促炎因子的大量释放,减轻炎症反应,从而降低基质降解酶的表达,使聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达基本恢复到正常水平,抑制髓核细胞凋亡,改善椎间盘代谢的紊乱,达到保护椎间盘、治疗椎间盘退行性变的目的。     

TIPE2在类风湿性关节炎患者中的表达及其对NF-κB信号通路的影响

目的检测类风湿性关节炎患者中TIPE2表达的变化,并探讨其相关的临床意义。方法收集2010年10月~2012年12月该院风湿免疫科收治的类风湿关节炎病例88例,分为中高活动期50例,低活动38例,另取该院体检中心健康体检者80例作为正常对照组。TIPE2 mRNA表达使用荧光定量PCR检测,C反应蛋白(CRP)使用乳胶增强免疫比浊法检测,抗链球菌O(ASO)使用快速乳胶凝集试验检测,类风湿因子(RF)和P65使用ELISA法。结果对照组和类风湿关节炎患者NF-κB信号通路中P65蛋白的表达分别为(1.54±0.41)和(3.44±1.02)μg/mL,各组之间差异具有显著性(P<0.05),类风湿关节炎患者外周血单核细胞TIPE2mRNA的表达水平为(0.24±0.08)显著低于对照组的(0.43±0.12)(P<0.05)。类风湿关节炎高活动期和低活动期患者在年龄、性别等临床资料方面差异无显著性(P>0.05),中高活动期患者DAS评分显著高于低活动患者(P<0.01)。非急性期患者TIPE2表达水平为(0.34±0.11)显著高于急性期患者的(0.16±0.06)(P<0.05),而CRP、RF、ASO的低活动组均显著低于中高活动期组(P<0.01)。结论 TIPE2的低表达参与了类风湿关节炎病变的发生、发展,TIPE2表达下调激活了NF-κB信号通路可能是其致病的主要机制。     

中医药调控NF-κB信号通路治疗抑郁症研究进展

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路与抑郁症的发生发展密切相关,在抑郁症所致炎症、应激反应、细胞分化和增殖及细胞凋亡过程中发挥着重要作用。中医药能够通过调控NF-κB信号通路有效治疗抑郁症,包括常见的黄酮类、酚类及三萜类等化合物单体,经典的中医方剂及针灸、功法、耳穴等其他中医疗法。现有研究存在一定的局限性,如NF-κB信号通路与其他信号通路之间的相关性尚未明确,今后可进一步设计多角度的实验研究,丰富实验结果;中药复方作用于NF-κB信号通路的具体成分并不确定,可通过生物信息学、代谢组学和高通量质谱等新型生物技术进行深入的探究,为抑郁症的防治提供新思路和新方向。     

金铁锁基于NF-κB信号通路的体外抗炎作用机制研究

目的金铁锁具有较好的抗炎镇痛的药理作用,但对金铁锁的抗炎作用及机制尚不明确。本研究旨在通过LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型对金铁锁进行抗炎作用及机制研究。方法采用LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型,在给予金铁锁三萜类化合物干预后,采用ELISE试剂盒检测细胞上清液中NO、PGE₂的水平,PCR检测细胞中COX-2,i NOS,IL-6,TNF-αm RNA的表达,用western blot分别检测细胞总蛋白、细胞质及细胞核内NF-κB信号通路相关蛋白(IKKβ、photo-IκBα、NF-κBp65、photo-NF-κBp65)的表达情况,考察金铁锁三萜类化合物的抗炎作用机制。结果金铁锁能明显降低RAW264.7细胞活化后细胞上清液中NO和PGE₂的水平,对细胞上清液中NO和PGE₂的水平无明显影响,能明显降低对RAW264.7细胞活化后COX-2、i NOS m RNA的表达水平;金铁锁能明显抑制IKKβ的活化,抑制p-IκBα蛋白的降解,同时也能降低总蛋白中p-NF-κB p65的表达量,从而抑制细胞质...     

keap1-Nrf2与NF-κB信号通路相关性研究进展

keap1是细胞内信号通路中一种非常重要的调节蛋白,其最常见的靶标蛋白是核转录因子Nrf2,主要介导细胞抗氧化应激反应。keap1除了能调节Nrf2,还能直接影响NF-κB信号通路,与炎症、肿瘤、白血病、神经系统疾病等关系密切。keap1可以介导不同的信号通路,协调不同信号通路的反应。本文主要就keap1-Nrf2与NF-κB信号通路相关性的研究进展做一简要综述。     

PDTC抑制NF-κB的表达对兔蛛网膜下隙出血后脑血管重构的影响

目的 观察兔蛛网膜下隙出血模型基底动脉核因子κB （NF-κB）的表达及其对脑血管重构的影响。方法 16只雄性新西兰大白兔随机分为SAH组和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）组,各8只。SAH组枕大池二次穿刺并注入自体动脉血造模,PDTC组在SAH后应用PDTC注入枕大池进行干预。模型制作完成后7 d处死动物,取其基底动脉测量平滑肌厚度。免疫组化法及蛋白质印迹法检测基底动脉中NF-κB、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达。结果 与SAH组相比,PDTC干预后,基底动脉中NF-κB与PCNA蛋白表达减少,平滑肌厚度变薄,与SAH组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 PDTC可通过抑制NF-κB的激活减轻SAH后脑血管壁平滑肌增殖性改变。     

NF-κB/IκB信号通路与皮肤病

核因子-κB (nuclear factor kappa binding,NF-)是广泛存在于细胞中的具有多向调节作用的蛋白质分子,可调节100多种靶基因的表达,其中的大多数均参与了宿主的免疫和炎症反应.NF-κB抑制蛋白 (inhibitor of NF-κB,IκB) 是NF-κB的抑制因子.本文主要就NF-κB/IκB信号通路的概况及其在某些皮肤病发病机制中的作用进行综述.     

PCSK9介导NF-κB信号通路致小鼠肝脏脂肪变性的机制研究

目的 探讨PCSK9对小鼠肝脏脂肪变性的机制。方法 以腺相关病毒8.2(adeno-associated virus 8.2,AAV8.2)为载体构建绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)和人源PCSK9经尾静脉转染至小鼠肝脏表达。将36只C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为空白组、GFP组和PCSK9组,每组各12只,共饲养24周。通过苏木精-伊红(hematoxylin eosin, HE)染色观察肝脏组织形态,天狼星红染色(sirius red staining, SRS)观察肝脏纤维化程度,油红O(oil red O,ORO)染色观察肝脏脂质浸润程度。通过酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清PCSK9、白细胞介素(interleukin, IL)-1β,流式细胞术检测肝脏单核细胞胞内炎性细胞因子,包括IL-2、IL-4、γ-干扰素(interferon-γ,INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、颗粒酶B(gra...     

基于NF-κB信号通路探讨补肾活血法治疗腰椎间盘退行性变的作用机制

髓核细胞数量的减少和细胞外基质代谢失衡、炎性反应、细胞因子氧化应激反应是腰椎间盘退行性变的主要表现。其主要病理机制是各种刺激下激活核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路,调节椎间盘内多种细胞因子、趋化因子、黏附分子、炎性介质和基质降解酶的表达,从而诱发腰椎间盘退行性变。补肾活血类中药延缓腰椎间盘退行性变的作用机制是减少由NF-κB信号通路活化后出现的炎性反应和氧化应激反应,从而保护髓核细胞及细胞外基质,减缓疾病进程。但目前机制研究仍存在一些局限：大量实验动物模型采用手术方式破坏椎间盘内结构,退变速度快于正常速度;实验研究的干预方式为单纯抑制某一个炎性因子,很难完全阻止疾病的进展;实验动物大多选用大鼠和兔的髓核细胞,与人的髓核细胞对某些刺激反应存在较大差异;抑制剂干预阻断某一细胞因子的再生,影响髓核再生功能的疗效持续时间短;由于中药成分的复杂性,很难明确阐释其影响NF-κB信号通路的具体机制;补肾活血法影响氧化应激反应方面的研究还有待深入。     

NF-κB信号通路与胃癌的研究进展

胃癌是全球常见的一种癌症,具有较高的发病率和病死率,目前关于胃癌发病机制的研究很多,但其确切机制迄今仍不清楚.核转录因子κB (nuclear factor kappa B,NF-κB)广泛存在于细胞中,并与肿瘤细胞分化、增殖、凋亡、免疫应答等应激反应息息相关,而胃癌的发生发展、浸润转移、治疗预后都涉及NF-κB信号通路的紊乱.本文就近年来NF-κB信号通路在胃癌发病机制中的研究进展作一综述.     

辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞凋亡过程中NF-κB通路的分子变化

目的:探讨辛伐他汀在裸鼠体内引起的K562细胞NF-κB信号通路的分子变化,以说明辛伐他汀是否依赖NF-κB信号通路参与K562细胞凋亡发生.方法:体外培养慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,接种于18只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下,构建移植瘤模型.随机分为3组,每组6只.对照组腹腔注射生理盐水0.2 ml,两个处理组分别注射0.2 g/L的辛伐他汀0.25 ml(0.05 mg)和0.4 ml(0.08 mg).均隔日注射,连续6次.采用TUNEL法检测K562细胞早期凋亡的变化,RT-PCR检测K562细胞中NF-κB信号通路IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的差异表达.结果:不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的凋亡,且高剂量组凋亡率高于低剂量组(P＜0.01);不同剂量的辛伐他汀能够引起 IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的表达下调(P＜0.01).结论:辛伐他汀可诱导K562细胞凋亡,可能与NF-κB通路基因的表达下调有关.