CYP2E1介导的脂质过氧化在脂肪性肝病发病机制中的作用

脂肪性肝病包括酒精性脂肪性肝病和非酒精性脂肪性肝病,是由多种原因引起的肝脏脂蛋白代谢紊乱所致.细胞色素氧化酶P450的2E1亚型(CYP2E1)的个体差异大,具有基因多态性,其不仅参与了药物的代谢,而且还能催化乙醇、四氯化碳的代谢.CYP2E1氧化乙醇时产生活性氧是酒精性脂肪性肝病导致肝损伤的重要机制;在非酒精性脂肪肝的"两次打击学说"中,CYP2E1介导的脂质过氧化亦发挥重要的作用.通过对CYP2E1介导的脂质过氧化在脂肪性肝病发病机制中作用的进一步深入研究,有可能探索出有效治疗脂肪性肝病的新途径.     

三氯乙烯对3种细胞色素P450酶基因表达的影响

目的 探讨三氯乙烯（Trichloroethylene,TCE)对人体淋巴细胞瘤细胞株（MCL-5）中3种细胞色素P450酶基因（CYP1A1、CYP2E1、CYP3A4）表达的影响,并研究剂量反应关系和时间反应关系,方法 用常规的细胞培养方法,0.5、1.0、1.5、2.0mmol/L TCE处理细胞12、24、48、72h。利用提纯RNA和cDNA的药盒,合成cDNA,然后逆转录聚合酶反应（RT-PCR）表达3种CYP450基因,以β-Actin作为内对照,分析不同处理剂量和时间时基因表达的强度。结果 在MCL-5细胞株中都有基本的表达,CYP1A1表达在用1.0、1.5、2.0mmol/LTCE处理48h后有被上调的趋势,而且上调趋势随处理时间延长耐加强;CYP2E1、CYP3A4表达不受TCE处理时间长短的影响。3种CYP450酶基因的表达受TCE剂量的影响。3随0.5mol/L,1.0、1.5、2.0mmol/L剂量的增加有上调的趋势,结论 TCE对CYP450酶系统中的CYP2E1、CYP1A1、CYP3A4基因有明显的诱导作用。这些基因被诱导后的结果。可能会导致相对应酶活性的增加,同时加强对TCE的代谢,使TCE的代谢产物增加。     

山楂对正常大鼠肝脏CYP2E1活性的影响

目的:探讨山楂对大鼠肝脏CYP2E1活性的影响,为山楂的药食同源应用提供依据.方法:实验分为正常对照组、山楂高剂量组和山楂低剂量组,给予山楂水提取液14天后,抽取肝微粒体酶,利用高效液相色谱检测CYP2E1代谢低物的能力.结果:山楂高剂量和低剂量组均能显著抑制CYP2E1的活性.结论:山楂是一种良好的药食同源的中药,能通过抑制CYP2E1活性对机体起保护作用.     

炎性细胞因子在继发性脑损伤中作用的研究进展

脑创伤(traumatic brain injury，TBI)尤其重型TBI是人类创伤死亡的第一原因。重型TBI后发生一系列继发性脑损伤，其中炎症反应尤其是炎性细胞因子．在继发性脑损伤中的作用已引起人们的重视，是近年来较为活跃、发展较快的研究领域之一。本文主要对脑创伤后TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1、TGF-B、IL-10等炎性细胞因子在继发性脑损伤中的作用予以综述。     

抗坏血酸对成骨细胞生长作用的研究

目的观察不同浓度的抗坏血酸对鼠成骨细胞生长的作用。方法在体外培养小鼠成骨细胞的过程中,分别加入不同浓度的抗坏血酸,通过检测碱性磷酸酶的含量观察其对成骨细胞的促进作用。结果抗坏血酸10ng/ml组、15ng/ml组对成骨细胞的生长均有较明显的促进作用,其中又以10ng/ml组最明显,25ng/ml组对成骨细胞的生长有抑制作用。结论抗坏血酸对成骨细胞的生长是剂量依赖性的,在10ng/ml这个浓度中对成骨细胞生长的促进作用是最显著的。     

丹参-红花药对配伍前后对大鼠肝药酶亚型CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的 研究丹参、红花药对配伍前后对大鼠肝药酶亚型CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响。方法 分别选用咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑作为CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4的探针药物。将大鼠随机分为4组,即空白对照组、丹参（1.2 g生药/kg）组、红花（0.4 g生药/kg）组、丹参（1.2 g生药/kg）+红花（0.4 g生药/kg）组,按上述剂量ig给药7 d。于末次给药后30 min,尾iv探针药物咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑溶液,在不同的时间点取血进行检测;以甲硝唑为内标,采用HPLC法检测探针药物咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑的量,评价各药物组对大鼠CYP3A4、CYP2E1和CYP1A2活性的影响。结果 与空白对照组比较,丹参组咖啡因、氯唑沙宗和咪达唑仑的清除率（CL）有所增强,曲线下面积（AUC）减少,其半衰期（t_1/2）有减少趋势,但差异均不显著;红花组咖啡因和氯唑沙宗的CL有所降低,但差异不显著,咪达唑仑的CL显著降低（P<0.01）,氯唑沙宗的AUC增加,但差异不显著,咖啡因和咪达唑仑的AUC明显增加（P<0.05、0.01）;丹参+红花组咖啡因和氯唑沙宗的CL明显降低（P<0.05）,曲线下面积（AUC）明显增加（P<0.05）,其t_1/2有延长趋势,但差异不显著。结论 丹参、红花配伍后对CYP450亚型CYP1A2和CYP2E1有抑制作用,这可能是丹参、红花配伍协同增效的作用机制之一。     

当归多糖对不同化学性肝损伤的干预作用

目的观察纯化当归多糖对酒精性及四氯化碳性肝损伤的干预作用,并探讨其初步机制。方法分别采用乙醇及四氯化碳制造小鼠肝损伤模型,给予纯化当归多糖,按100mg/kg和200mg/kg口服给药进行干预。观察血清sALT、sAST的变化;测定抗氧化指标SOD、MDA、GSH的含量;以苯胺羟化酶反映CYP2E1活性。结果当归多糖两剂量组均可降低酒精性及四氯化碳性肝损伤模型组的sALT、sAST,减轻肝脏损伤;两组引起的抗氧化功能下降均可被当归多糖不同程度的抑制;当归多糖可抑制乙醇所致的CYP2E1上调,但对四氯化碳所致的CYP2E1酶活性降低却无明显影响。大剂量组的上述作用更为明显。结论纯化当归多糖对不同化学性肝损伤均有明显的干预作用,但其干预能力因保护机制不同而有所差别。     

恩诺沙星对小鼠肝微粒体细胞色素P450影响的研究

恩诺沙星(errofloxacin,EF)是动物专用药,有抗菌谱广、杀菌力强、速效等特点,广泛应用于兽医临床[1].细胞色素 P450(P450)是最重要的肝微粒体混合功能氧化酶,对阐明药物代谢及相互作用和指导临床用药有重要意义.已有大量研究报道,EF 可抑制鸡、猪、鱼等 P450 [2-3],而对小鼠 P450 研究较少,且 EF 对其 CYP2B6、2C9 的影响尚未见报道.本文以小鼠为研究对象,观察 EF 对小鼠 CYP2B6、2C9 等 P450 酶系的影响,从而揭示药物与机体的相互作用,同时也为临床合理用药提供理论参考.     

复方银杏叶制剂对酒精性肝损伤的防护作用及机制

目的观察银杏叶制剂(CGB)对酒精性肝损伤的防护作用。方法白酒-玉米油混悬液ig给予大鼠造肝损伤模型,连续10周,造模同时分别ig给予银杏叶提取物(GBE)0.8 g·kg-1,CGB 2.4,0.8和0.4 g·kg-1或联苯双酯0.15 g·kg-1。取血测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)。并观察肝组织病理及肝细胞线粒体超微结构变化。采用"cocktail"探针药物法测定大鼠ig给予CGB前后血浆中相应的CYP2E1和CYP3A4酶探针氯唑沙宗和氨苯砜的血药浓度,并计算药代动力学参数。通过药代动力学参数的变化,评价CGB对CYP2E1和CYP3A4酶活性的影响。结果连续ig给予乙醇后,大鼠血清转氨酶显著高于正常对照组(P<0.01),与模型组比较,CGB 0.8和2.4 g·kg-1组ALT和AST显著降低(P<0.05);CGB 0.8和2.4 g·kg-1组肝匀浆MDA显著降低、GSH和SOD明显升高(P<0.05)。ig给予CGB前,模型组大鼠氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24,cmax均较正常对照组显著降低(P<0.05);CGB可使正常大鼠血浆氯唑沙宗和氨苯砜AUC0-24下降(P<0.05),使模型组大鼠血浆氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24和cmax显著升高(P<0.05)。结论 CGB对酒精性肝损伤有防护作用,其机制与氧化应激干预相关。     

Cocktail探针药物法评价生、醋莪术对CYP450酶亚型的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究生、醋莪术对大鼠CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响并进行比较,探讨其通过炮制增强或改变作用的趋向性。方法将SD大鼠随机分组,生、醋莪术组分别给予生、醋莪术提取液(9 g.kg-1),以生理盐水为空白对照,在一定时间点采集血样,用HPLC检测探针药物在大鼠体内的代谢情况,以评价生、醋莪术对CYP450酶的影响。结果生莪术的茶碱、氨苯酚和氯唑沙宗的代谢情况与空白组相比差异无显著性;但醋莪术与空白组相比,茶碱和氯唑沙宗的T12、Tmax和AUC明显增加,CL/F明显降低;氨苯酚的T12变化不明显,AUC明显降低,CL/F明显增加;氯唑沙宗的T12、Tmax、AUC明显增加,CL/F明显降低。结论单次给予大鼠生、醋莪术后,生莪术对CYP450酶的作用不明显,醋莪术对CYP1A2和CYP2E1具有抑制作用,对CYP3A4具有诱导作用。     

大鼠脑二次损伤凋亡相关基因的表达

目的 探讨大鼠脑二次损伤(SBI)c-fos、bcl-2、bcl-xL基因表达和细胞凋亡关系.方法 40只大鼠随机分为正常对照组10只、脑缺血组10只、颅脑损伤组10只和SBI组10只,以免疫组织化学方法,检测脑神经细胞中c-foe、bcl-2、bcl-xL的表达水平;以原位细胞凋亡(TUNEL)法检测神经细胞凋亡水平.结果 颅脑损伤组、SBI组皮层区c-fos基因表达(23.6±9.4)、(37.1±5.5)阳性细胞数/个/H均明显高于脑缺血组(5.6±1.4)阳性细胞数/个/H(t=3.458,t=3.648,均P<0.01);颅脑损伤组、SBI组皮层区bcl-2基因表达(18.2±4.6)、(15.6±3.7)阳性细胞数/个/H低于脑缺血组(23.6±4.3)阳性细胞数/个/H(t=2.345,t=2.447,均P<0.05);脑缺血组、颅脑损伤组和SBI组bcl-xL基因表达变化不大;SBI组皮层区细胞凋亡(36.6±5.3)个细胞/0.1mm2高于颅脑损伤组(21.6±4.4)个细胞/0.1mm2(t=2.378,P<0.05);细胞凋亡水平与bcl-2表达均呈负相关(r=-0.857,P<0.01).结论 脑二次损伤c-fos、bcl-2、bcl-xL基因表达增加并与神经细胞凋亡水平密切相关.     

Diphenyl diselenide and ascorbic acid changes deposition of selenium and ascorbic acid in liver and brain of mice

Sodium selenite (Na2SeO3) is the selenium form used in the composition of dietary supplements, and diphenyl diselenide (PhSe)2 is an important intermediate in organic synthesis, which increases the risk of human exposure to this chemical in the workplace. These compounds have been reported to inhibit the cerebral and hepatic aminolevulinic acid dehydratase (ALA-D) in vitro, and now we show that ascorbic acid can reverse some alterations caused by in vivo selenium exposure, but not ALA-D inhibition. The effect of Na2SeO3 or (PhSe)2 and ascorbic acid on selenium distribution, total non-protein thiol, ascorbic acid content (liver and brain) and haemoglobin was also examined. Mice were exposed to 250 micromol/kg (PhSe)2, or 18.75 micromol/kg Na2SeO3 subcutaneously, and to ascorbic acid, twice a day, 1 mmol/kg intraperitonially, for 10 days. Hepatic ALA-D of mice treated with (PhSe)2 was inhibited about 58% and similar results were observed in the animals that received ascorbic acid supplementation (P<0.01, for (PhSe)2-treated and (PhSe)2+ascorbic acid-treated mice). The haemoglobin content decreased after treatment with (PhSe)2 (P<0.01). However, the haemoglobin content of the (PhSe)2+ascorbic acid group was significantly higher than in the (PhSe)2-treated mice (P<0.05), and similar to control (P>0.10). Ascorbic acid treatment decreased significantly the hepatic and cerebral deposition of Se in (PhSe)2-exposed mice (P<0.01). Hepatic non-protein thiol content was not changed by treatment with (PhSe)2, ascorbic acid or (PhSe)2+ascorbic acid. Hepatic content of ascorbic acid was twice that in mice that received (PhSe)2, independent of ascorbic acid treatment (P<0.001). The results of this study suggest that vitamin C may have a protective role in organodiselenide intoxication.     

四氯化碳致大鼠肝损伤的机理

给大鼠一次po四氯化碳(CCl_4)23 mmol/kg后,血清ALT分别于3和12 h起逐渐增高;肝微粒体细胞色素P450同时下降。染毒后24和48 h肝线粒体GSH明显降低,胞液GSH则未见明显变化。血清脂质过氧化物丙二醛(MDA)经时过程呈双相,即染毒后3～24 h明显降低,至48 h则显著增高。染毒后12～48 h肝线粒体和微粒体MDA明显增高;同时膜脂流动性增高.8-甲氧补骨脂素预处理可显著降低CCl_4引起的肝匀浆MDA和血清ALT增高。结果提示CCl_4均裂产物启动的膜脂过氧化和流动性增高可能是CCl_4致肝损伤的二次反应。     

熊果酸对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的影响

目的探讨熊果酸对蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤的保护作用。方法 48只成年雄性SD大鼠分成4组(假手术组、模型组、低剂量给药组、高剂量给药组),每组12只。采用颈内动脉穿刺法建立大鼠SAH模型,造模后24 h进行神经功能缺陷评分;造模后72 h检测脑含水量、脑血管通透性;造模后72 h检测血清中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。结果熊果酸给药可有效改善SAH大鼠的神经功能缺损(P<0.05);降低脑含水量和脑血管通透性(P<0.05);降低血清MDA含量(P<0.05);增强SOD和GSH-Px活性(P<0.05)。结论熊果酸对SAH后早期脑损伤有显著保护作用,其机制可能与提高脑组织抗氧化能力有关。     

Some behavioural and EEG effects of ascorbic acid in rats

Ascorbic acid (50–200 mg/kg IP) activated gross behaviour and EEG of rats. The behavioural excitation induced by d-amphetamine (2.5 mg/kg SC) was significantly potentiated by ascorbic acid (100–200 mg/kg IP). Catalepsy induced by haloperidol (0.25 mg/kg IP) was attenuated by ascorbic acid (50–200 mg/kg IP) while pentobarbitone (20 mg/kg IP)-induced sleep in rats was dose-dependently antagonised by ascorbic acid (50–400 mg/kg IP). Ascorbic acid (50–400 mg/kg IP) desynchronized the EEG of the frontal cortex and optic cortex while the EMG activity was slightly enhanced in the rat. Ascorbic acid (100 mg/kg IP) potentiated d-amphetamine (2.5 mg/kg SC)-induced EEG desynchronization and EMG activation in the rat. These results indicate that ascorbic acid exerts stimulatory effects in rats. The results also suggest that dopaminergic mechanism may contribute indirectly or directly to the observed behavioural and EEG effects of ascorbic acid.     

Role of ascorbic acid in counteracting ferric nitrilotriacetate-induced nephrotoxicity in rats

Abstract

Context: Ascorbic acid (AA) is a naturally occurring organic compound with antioxidant properties. It is necessary for normal growth and development, and has been shown to protect against tissue toxicity and oxidative stress.

Objective: The protective effect of AA against nephrotoxicity induced in albino rats by ferric nitrilotriacetate (Fe-NTA) was evaluated.

Materials and methods: Male albino rats of Wistar strain (4–6 weeks old) weighing 125–150?g were used in this study. Animals were given a single dose of Fe-NTA (9?mg/kg body weight, intraperitoneal) after a week of treatment with AA (1 and 2?mg/animal/day).

Results: Fe-NTA treatment enhanced microsomal lipid peroxidation (LPO) and hydrogen peroxide (H₂O₂) generation to 1.7- to 2.2-fold, glutathione (GSH) levels were decreased by two-fold and the activities of GSH metabolizing enzymes decreased to a range of 2.2- to 2.5-fold in renal tissue. These changes were reversed significantly in animals receiving pretreatment of AA. Treatment of rats with AA prior to the treatment with Fe-NTA decreased microsomal LPO and H₂O₂ generation to 124 and 172%, and also resulted in the recovery of reduced levels of GSH, GSH-metabolizing enzymes to almost 92% at the higher dose level of AA.

Discussion and conclusion: AA protects against Fe-NTA-induced nephrotoxicity and renal damage. AA has a beneficial impact on Fe-NTA-induced toxicity due to its scavenging and antioxidant effect in albino rats.     

重型颅脑外伤后二次脑损伤相关因素临床观察

目的：探讨引起重型颅脑外伤二次脑损伤的相关因素。方法：回顾性分析2004年6月～2009年6月本科治疗的重型颅脑损伤168例患者的临床资料;比较死亡组与存活组的WBC计数、体温、血压、血糖、血钠水平差异。结果：168例患者死亡49例（29.17%）;两组比较死亡组WBC计数、体温、血糖、血钠水平高,血压低。结论：影响重型颅脑损伤预后二次损伤因素较多,应高度重视监测和严格控制二次脑损伤相关因素。