荧光原位杂交技术在尿路上皮肿瘤诊断中的临床应用

目的探讨通过荧光原位杂交检测3、7和17号染色体及p16位点异常在预测尿路上皮肿瘤的临床应用价值。方法收集尿路上皮肿瘤患者和健康成人作正常对照组尿液,同时行尿脱落细胞学及FISH检测3、7、17号染色体及p16位点异常。采用正常对照组各染色体异常数据设定阈值用于肿瘤患者的实验室诊断。分别计算FISH和尿脱落细胞对尿路上皮肿瘤诊断的敏感度和特异度。分析各染色体畸变与尿路上皮肿瘤病理分级的关系。结果 1尿脱落细胞学检查的肿瘤阳性检出率为11.5%,FISH为97.1%,两者差异有统计学意义(P<0.01)2各染色体及区带均呈现较高的畸变发生率,其中多体畸变发生率由高到低依次为82.6%(7号)、71.7%(17号)、66.6%(3号)和49.2%(p16位点),单体畸变发生率由高到低依次为53.6%(p16位点)、36.9%(7号)、34.7%(3号)和28.9%(17号),单体缺失畸变p16位点17.3%。37号染色体的多体畸变与肿瘤的病理分级间呈正相关(r=18.632,P<0.001),其余三种染色体畸变与肿瘤的病理分级无相关性。结论对尿路上皮肿瘤患者进行FISH检侧是一种无创、有效的检测方法。尿路上皮肿瘤在3、7和17号染色体及p16位点同时存在多种畸变类型,7号染色体多体畸变可预测尿路上皮肿瘤的进展。     

荧光原位杂交检测尿脱落细胞染色体异常诊断膀胱肿瘤的研究

目的 探讨通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测3、7、9、17号染色体数目畸变诊断国人膀胱尿路上皮癌的可行性和有效性.方法 采用3、7、17号染色体着丝粒探针和9p21区带探针对140例患者尿液脱落细胞核行荧光原位杂交,并同时行经腹部超声和尿脱落细胞学检查,以膀胱镜病理检企确诊,比较分析各种方法的敏感性和特异性.结果 ①肿瘤组80例膀胱尿路上皮癌全部经病理检杏确诊,其中68例FISH结果阳性,26例尿脱落细胞学阳性,71例经腹部超声诊断为膀胱癌.②非肿瘤对照组30例,其中29例FISH结果阴性,1例假阳性;尿脱落细胞学检查全部阴性;绛腹超声检查23例阴性,7例假阳性.FISH、尿脱落细胞学、经腹部超声的灵敏度分别为85.00%、32.50%、88.75%,特异度分别为96.67%、100.00%、76.67%.结论 使用FISH技术检测尿脱落细胞3、7、9、17号染色体数目畸变具有敏感度高、特异性强的优点,并具无创性,对国人膀胱尿路上皮癌的诊断具有重要的临床应用价值.     

支气管镜刷取细胞染色体异倍性的研究

目的：探讨间期核荧光原位杂交（FISH）检测支拨管镜刷取细胞染色体异倍体和将其应用于肺癌早期诊断的可行性。方法：选取7、8、9和12号染色体特异着丝探针,用FISH技术检测14例肺癌患者支气管镜刷取细胞上述染色体异倍体。结果：在细胞诊断为癌或可疑癌细胞的7例中均发现染色体异倍体,主要特征为7、8和12号染色体增多及9号染色体丢失;而在细胞学未发现恶性证据的7例中,有3例存在7、8和9号染色体异倍体。结论：间期核FISH可以检测出支气管刷取细胞中染色体异倍体,在传统细胞学诊断标准下不能定为恶性的细胞中发现染色体异倍体,可将这种方法用于肺癌的早期诊断。     

膀胱癌尿脱落细胞周期及细胞DNA含量的临床意义

目的 探讨膀胱癌患者尿脱落细胞周期及细胞DNA含量的临床意义。方法 采用流式细胞术（FCM）对24例膀胱癌患者尿脱落细胞进行检测。结果 全组24例病理诊断均为膀胱癌，其中单发13例，多发肿瘤11例。FCM检查尿脱落细胞示正常二倍体11例，异倍体13例（54％），DI值平均1．6。单／多发肿瘤出现异倍体各为7例（53％）、6例（54％），病理分级Ⅰ-Ⅲ级。结论 膀胱癌细胞的分化程度影响异倍体的出现，异倍体是判断膀胱癌病理分级及细胞分化程度的重要依据；膀胱癌单发或多发不影响尿脱落细胞异倍体的出现。     

荧光原位杂交技术检测对复发性膀胱癌的诊断价值

目的:探讨荧光原位杂交(FISH)技术在膀胱癌复发检测中的价值。方法:经尿道膀胱肿瘤电切或者钬激光切除术后患者49例,分别采用膀胱镜、FISH技术和尿脱落细胞学方法检测膀胱癌复发情况。结果:检测结果发现,膀胱癌术后复发31例。FISH技术、尿脱落细胞学检查对膀胱癌复发诊断的特异性均为100%。FISH技术检测敏感性为83.9%,高于尿脱落细胞学检测的敏感性(38.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:FISH技术较细胞学检测对诊断膀胱癌复发更为有效,具有广阔的临床应用前景。     

双色荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮癌诊断中的应用

目的 比较双色荧光原位杂交技术与尿脱落细胞学技术在膀胱尿路上皮癌检测中的作用.方法 采用3、7、17号染色体着丝粒及9p21区带探针对78例膀胱移行细胞癌患者尿液、30例正常对照尿液中的脱落细胞核进行荧光原位杂交(FISH)研究,并同时对所有标本做尿脱落细胞学检查.结果 细胞学检查对于Ta 期、T1期及T2～T4期肿瘤的敏感度分别为35.5%(11/31)、54.1%(13/24)及69.6%(16/23),总敏感性为51.3%.FISH对于TTa期、T1期及T2～T4期肿瘤的敏感性分别为64.5%(20/31)、87.5%(21/24)及95.7%(22/23),总敏感性为80.8%.对于T1期肿瘤(P=0.047)、T2～T4期肿瘤(P=0.023)、GⅡ(P=0.004)、GⅢ(P=0.002)以及所有肿瘤总体(P=0.001),FISH的敏感性均显著高于细胞学检查.细胞学检查和FISH的特异性分别为96.6%和93.3%(P=0.612).结论 FISH用于检测膀胱癌的敏感性高于细胞学检查,而特异性无显著性差异.FISH技术能明显改进膀胱癌的诊断,对于膀胱癌的筛查有重要意义.     

荧光原位杂交技术在上尿路上皮癌早期监测中的应用

目的 探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在诊断和监测早期上尿路上皮癌中应用的可行性.方法 收取20例健康志愿者的新鲜晨尿,应用FISH检测尿液脱落细胞3、7、17号染色体着丝粒探针及9号染色体p16位点探针,建立健康人群的阈值.其后顺序留取20例初步诊断为上尿路上皮癌患者的新鲜晨尿,进行FISH检测和尿脱落细胞学检查,并进行泌尿系超声、多层螺旋CT检查(MMCT),将FISH结果和其他检查结果进行比较.留取20例术前诊断为肾癌患者的新鲜晨尿作为对照组,进行FISH检查和尿脱落细胞学检查,统计分析两者的特异性.结果 20例患者中术后病理诊断上尿路上皮癌18例,肾癌浸润肾盂1例,肾结石合并肾盂肾炎引起的肾盂上皮炎性增生1例.泌尿系超声、MMCT、尿脱落细胞学和FISH检查的敏感性分别为44.4%(8/18)、94.4%(17/18)、38.9%(7/18)、83.3%(15/18).FISH诊断上尿路上皮癌的敏感性和MMCT相似(P>0.05),高于泌尿系超声和尿脱落细胞学检查(P<0.05).20例对照组术后病理诊断均为肾透明细胞癌,FISH和尿脱落细胞学检查的特异性分别为95.0%和90.0%.结论 FISH诊断上尿路上皮癌具有较高的敏感性和特异性,且可以发现早期的上尿路上皮癌,可用于上尿路上皮癌的诊断和早期监测.     

子宫内膜癌瘤组织DNA定量检测的临床意义

目的:探讨流式细胞术(FCM)定量检测肿瘤组织DNA含量对子宫内膜癌的临床价值。方法:采用FCM技术对30例子宫内膜癌(FC)患者术中肿瘤组织中DNA含量进行检测,Mcycle分析软件进行DNA倍体分析,计算DNA相对含量(DI值)、S期细胞比率(SPF)及增殖指数(PI),并与正常组织相比。结果:17例EC患者发现存在DNA异倍体,异倍体率56.7%;22例SPF异常增高,异常率73.3%;50岁以上者异倍体率、SPF及PI指数均明显增高(P<0.05);肿瘤组织中DNA异倍体检出率与SPF明显升高,显著高于对照组(P<0.05),PI指数略有上升,但差异无显著性(P>0.05);随病理分级级数与临床期别的增高,异倍体率、SPF及PI指数呈增高的趋势;复发者异倍体率、SPF及PI明显高于未复发者(P<0.05)。结论:FCM技术定量检测肿瘤组织DNA含量的变化,并与临床病理诊断有机结合,将为子宫内膜腺癌的诊断、治疗和预后提供全面客观的指标。     

荧光原位杂交技术检测尿液脱落上皮细胞染色体畸变对膀胱癌的诊断价值

目的探讨应用荧光原位杂交（FISH）技术检测尿液脱落上皮细胞3、7、9、17号染色体畸变对于膀胱癌诊断的价值。方法分别对30例膀胱癌患者和20例非肿瘤血尿患者应用FISH试剂盒检测膀胱癌,使用荧光标记的DNA探针与3、7和17号染色体的着丝粒区以及9p21位点相结合,检测尿路上皮细胞基因的改变。在组织学诊断的基础上评估FISH检测的价值。结果30例膀胱癌患者FISH检测的特异性和敏感性分别为100％和97％。结论FISH是一种无创的膀胱癌诊断方法,具有快速、准确、灵敏度高的优点,对膀胱癌的诊断具有重要的临床应用价值。     

荧光原位杂交技术预测膀胱癌复发的临床研究

目的探讨荧光原位杂交（FISH）技术预测膀胱癌复发的临床应用价值。方法对40例膀胱癌术后患者行FISH检测尿液脱落细胞染色体,观察FISH检测结果与肿瘤复发的关系。结果FISH检测后平均随访1年,肿瘤复发18例,其中FISH阳性16例（88．9％）,阴性2例（11．1％）;无肿瘤复发22例,其中FISH阳性12例（54．5％）,阴性10例（45．5％）。总体而言,57．1％（16／28）的FISH阳性患者出现肿瘤复发,而FISH阴性患者出现肿瘤复发仅为16．7％（2／12）。 FISH阳性患者肿瘤复发率较阴性者高（P＜0．05）。结论FISH在预测膀胱癌术后复发中具有重要的临床参考价值,是一种有效且简便的预测膀胱癌术后复发的实验室检查方法。     

吡柔比星与丝裂霉素膀胱内灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效比较

目的：比较膀胱内灌注吡柔比星（THP）与丝裂霉素（CMMC）在预防浅表性膀胱癌术后复发上的疗效。方法我院于2008年2月至2010年3月接收进行尿道膀胱癌电切术后的浅表性膀胱癌肿瘤患者106例,随机分为吡柔比星组（A组）和丝裂霉素组（B组）,每组各53例。A组采用THP作为膀胱内灌注药物,B组则给予CMCC作为膀胱内灌注药物,比较两组患者3个月、6个月、12个月、24个月后的复发率,分析两组患者的不良反应。结果 A组患者3个月、6个月、12个月后的复发率分别为5.66%、9.43%、11.32%,与B组的5.66%、15.09%、20.75%比较差异无统计学意义（P〉0.05）。A组24个月后的复发率（11.32%）与B组（35.85%）比较差异有统计学意义（P〈0.05）。A组和B组患者经过1个月时间的治疗后不良反应发生例数分别为7例（13.21%）和10例（18.88%）,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论吡柔比星作为膀胱内灌注药物预防浅表性膀胱癌术后复发与丝裂霉素具有较好的临床疗效,可以显著降低术后复发率,也可以作为临床上的一线药物使用。     

尿端粒酶检测在膀胱癌诊断及术后监测中的意义

目的探讨尿端粒酶活性检测在膀胱癌早期诊断及术后复发监测中的意义.方法采用PCR银染法于术前检测85例表浅膀胱癌患者尿液中脱落细胞端粒酶活性,并在行膀胱部分切除或经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBt)后3个月和6个月时再检测尿端粒酶活性,同时行膀胱镜检查.结果术前85例表浅膀胱癌患者尿脱落细胞端粒酶活性阳性表达率为81.18%(69/85);术后67例获随访,6个月内尿端粒酶检测持续阳性者复发率为55.56%(20/36),持续阴性者复发率为19.23%(5/26),两组相比有显著性差异(P＜0.01);2例3个月为阴性而6个月转阳性者均复发,而3例3个月为阳性而6个月转阴性者均未复发.结论尿脱落细胞端粒酶活性检测可作为表浅膀胱癌早期诊断和术后复发监测的一种有效手段.     

Survivin分子信标检测膀胱尿路上皮癌的临床研究

目的研究Survivin分子信标检测膀胱尿路上皮癌的临床价值。方法收集280例血尿患者的尿液标本进行Survivin分子信标检测,其中膀胱尿路上皮癌177例,非膀胱尿路上皮癌患者103例。对73例膀胱尿路上皮癌患者的肿瘤组织进行免疫组织化学染色。结果 Survivin分子信标检测膀胱尿路上皮癌的灵敏度和特异度分别为81.4%和73.8%,免疫组织化学染色检测Survivin表达的阳性率是90.4%(66 of 73)。Survivin分子信标检测膀胱尿路上皮癌与患者的临床分期密切相关。结论 Survivin分子信标是一种具有较高灵敏度和特异度的检测膀胱尿路上皮癌的非侵入性检查方法,比尿脱落细胞学检查具有更高的灵敏度,有望成为一种检测膀胱尿路上皮癌和膀胱尿路上皮癌术后随访的新的检测手段。     

初发和复发膀胱尿路上皮癌中miR-21和miR-205的表达

目的检测microRNA-21(miR-21)与microRNA-205(miR-205)在初、复发膀胱尿路上皮癌中的表达情况,探讨microRNAs(miRNAs)在膀胱尿路上皮癌中的表达意义及是否与肌层浸润有关。方法采用基于2-△△CT的实时定量PCR(Real-time PCR)方法检测40例初、复发癌组织miR-21及miR-205的表达情况。结果与初发癌相比,复发癌miR-21表达上调(P<0.05),miR-205表达下调(P<0.05);与非肌层浸润性癌相比,肌层浸润性癌miR-21表达上调(P<0.05),miR-205表达下调(P<0.05);肌层浸润性癌miR-21与miR-205表达量的比值5倍于其在非肌层浸润性癌中表达量的比值。结论 miR-21高表达、miR-205低表达可能参与膀胱尿路上皮癌复发并与肌层浸润有关。     

膀胱癌尿脱落细胞中细胞角蛋白20的表达及临床意义

目的 :以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测尿中膀胱移行癌细胞 ,研究尿脱落细胞中细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )的表达及其临床意义 .方法 :应用RT PCR方法检测 4 5例膀胱癌患者以及 18例非肿瘤患者的尿脱落细胞CK2 0 .结果 :4 5例膀胱癌 39例CK2 0表达阳性 ,非肿瘤组 18例中 1例CK2 0表达阳性 ,RT PCR方法检测膀胱癌尿脱落细胞中CK2 0敏感度 86 .7% ,特异度 94 .4 % .G1,G2 及G3 膀胱癌阳性率分别为82 .8% (2 4 /2 9) ,91.7% (11/12 ) ,10 0 .0 % (4 /4) ,各级间无显著差异 (P >0 .0 5 ) .CK2 0的表达同肿瘤的分期、分级无关 .结论 :CK2 0是一种较为理想的膀胱肿瘤标记物 ,RT PCR方法检测膀胱癌尿液中CK2 0可用于膀胱癌的诊断     

膀胱癌尿脱落细胞P16、cyclin D_1、P53、mdm2蛋白表达及其意义

目的 :检测P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白在膀胱移行细胞癌 (TCC)尿脱落细胞中的表达 ,以探讨其临床意义。方法 :用免疫组织化学S -P法检测 2 1例膀胱TCC尿脱落细胞及组织中P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白的表达。结果 :膀胱TCC尿脱落细胞中 ,P16蛋白阳性表达率为 71.4 % (15 / 2 1) ;cyclinD1蛋白阳性表达率为 2 8.6 % (6 / 2 1) ;P5 3蛋白阳性表达率为 33.3% (7/ 2 1) ;mdm2蛋白阳性表达率为 2 3.8% (5 / 2 1)。对照组P16蛋白表达均为阳性 ,cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白表达均为阴性。P16、cyclinD1、P5 3、mdm2基因在尿脱落细胞中异常表达均与相应的组织中表达相吻合。多基因蛋白联合表达肿瘤检出率为 81% (17/ 2 1) ,常规尿细胞学检查肿瘤检出率为19.1% (4/ 2 1)。两种方法比较差异有显著性意义 (χ2 =18.0 8,P <0 .0 0 5 )。结论 :尿脱落细胞的P16、cyclinD1、P5 3、mdm2多基因蛋白联合检测可作为膀胱TCC诊断有意义的参考指标。     

不同化疗药物膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效比较

目的：比较吉西他滨与丝裂霉素进行膀胱灌注预防浅表性膀胱癌患者术后复发的效果。方法随机选择2014年10月＿2016年5月青岛大学医学院泌尿外科收治的84例浅表性膀胱癌患者,分为观察组和对照组,每组各42例,所有患者均于术后7 d进行膀胱灌注化疗,观察组药物为吉西他滨进行灌注,对照组为丝裂霉素,7 d/次,治疗56 d,此后每月治疗1次,共治疗1年,对比两组患者治疗效果。结果观察组复发率为7.14%显著低于对照组的33.33%,两组对比差异有统计学意义(P<0.05﹚。且观察组和对照组患者不良反应发生率分别为7.14%和38.10%,对比差异具有统计学意义(P<0.05﹚。结论应用吉西他滨进行膀胱灌注对于浅表性膀胱癌术后复发预防效果较好,且不良反应发生率低,具有重要的临床应用价值。     

吉西他滨灌注联合经尿道钬激光切除术对浅表性膀胱癌患者血清CXCL5及尿NMP22水平的影响

目的 探究吉西他滨灌注联合经尿道钬激光切除术对浅表性膀胱癌患者血清趋化因子配体5（chemokine ligand-5,CXCL5）及尿核基质蛋白22（nuclear matrix protein 22,NMP 22）水平的影响。 方法 选取浅表性膀胱癌患者104例,根据随机数字表法分为对照组和观察组各52例。对照组给予尿道钬激光切除术治疗,观察组在对照组的基础上联合吉西他滨灌注治疗。比较2组术后复发率、平均复发时间、平均生存时间;治疗前后比较2组血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor,FGF）水平、CXCL5及尿NMP22水平。 结果 观察组术后1年和术后3年复发率低于对照组,平均复发时间和平均生存时间长于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。治疗后,2组血清VEGF、αFGF、βFGF、CXCL5和尿NMP22水平均低于治疗前,观察组血清VEGF、αFGF、βFGF、CXCL5和尿NMP22水平均低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。 结论 吉西他滨灌注联合经尿道钬激光切除术治疗浅表性膀胱癌,能有效降低术后复发率,延长平均生存时间,显著降低血清CXCL5及尿NMP22水平。     

尿脱落细胞MMP-9 mRNA在膀胱移行癌的诊断价值

目的:探讨尿脱落细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA检测在膀胱移行癌诊断和监测复发中的应用价值。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测51例膀胱移行癌、33例膀胱良性疾病患者和10例健康体检者晨尿中脱落细胞MMP-9 mRNA的表达,并与尿脱落细胞学结果进行比较。结果:MMP-9检测膀胱移行癌的敏感性(98.04%)显著高于尿脱落细胞学(62.75%,P<0.05),但特异性无明显差异(P>0.05)。膀胱移行癌患者MMP-9 mRNA表达强度明显高于膀胱良性疾病患者和对照组(P<0.05);且随肿瘤恶性程度的增加逐渐升高。结论:尿脱落细胞MMP-9 mRNA检测具有高度敏感,对膀胱移行癌早期诊断和术后监测复发具有重要的临床应用价值。