奥曲肽联合顺铂对人胃癌细胞株成瘤的影响

<正>奥曲肽和顺铂对MGC-803细胞在体外都有抑制生长和诱导凋亡的作用。本实验是通过观察奥曲肽和顺铂对人胃癌MGC-803裸鼠种植瘤的成瘤情况及生长的影响,进一步研究奥曲肽联合顺铂对胃癌生长的     

奥曲肽对人胃癌细胞株诱导凋亡的研究

目的 研究奥曲肽对人胃癌MGC-803细胞诱导凋亡的作用。方法 应用荧光显微镜、流式细胞仪研究奥曲肽对人胃癌MGC-803细胞诱导凋亡的作用。结果 奥曲肽作用人胃癌MGC-803细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩、染色质凝集成新月状紧贴于核膜周边,核碎裂、染色质片断化、凋亡小体形成等,流式细胞仪上出现亚二倍体凋亡峰。结论 奥曲肽对人胃癌MGC-803细胞有诱导凋亡作用。     

奥曲肽对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的观察奥曲肽对MKN45胃癌细胞株增殖及凋亡的影响。方法MTT法检测奥曲肽对MKN45细胞增殖的影响;免疫细胞化学染色检测奥曲肽MKN45细胞c-er bB2、p53、bax基因表达的作用;透射电镜、流式细胞术观察奥曲肽对MKN45细胞超微结构及凋亡的影响。结果奥曲肽对MKN45细胞的增殖有抑制作用,以1×10-6mol/L最为明显;奥曲肽组细胞c-erbB2的表达无改变;奥曲肽作用后MKN45细胞表面超微结构发生改变,奥曲肽组细胞凋亡比例未见明显增加。结论奥曲肽在体外对胃癌细胞MKN45增殖有抑制作用,但并不诱导其凋亡。     

迷迭香酸类似物-11通过抑制ERK/MAPK通路诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡

目的对迷迭香酸类似物-11(rosmarinic acid analogue-11,RAA-11)诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡及其机制进行初步探究。方法 MTT法和克隆形成法观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色法观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞核凋亡形态学的影响;流式细胞术检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡率的影响;Western blot观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2、Bax及通路蛋白ERK、p-ERK表达的影响。结果 MTT结果提示RAA-11可以抑制人胃癌MGC-803细胞增殖(P<0.01),且呈时间浓度依赖性;克隆形成实验结果提示,RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的集落形成能力;Hoechst 33258染色结果提示,RAA-11干预人胃癌MGC-803细胞48 h后,细胞核呈现典型凋亡形态学改变;流式细胞术结果提示,RAA-11对人胃癌MGC-803细胞有明显的促凋亡作用; Western blot结果显示,RAA-11上调人胃癌MGC-803细胞促凋亡相关蛋白caspase-3、Bax(P<0.01),下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平,并降低了通路蛋白ERK、p-ERK的表达水平(P<0.01)。结论 RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,并能够诱导凋亡,其机制可能与抑制ERK/MAPK通路有关。     

罗汉松种子提取物对人胃癌细胞的体外抑制作用

目的初步研究罗汉松种子提取物对人胃癌细胞MGC-803的抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度梯度的罗汉松种子提取物作用人胃癌MGC-803细胞24,48,72 h的增殖抑制率。采用RT-PCR检测MGC-803细胞凋亡相关基因bcl-2和p53 mRNA的表达。结果不同质量浓度罗汉松种子提取物对MGC-803细胞均有增殖抑制作用,且随着质量浓度的增加和作用时间的延长,抑制率呈上升趋势。RT-PCR结果显示,不同质量浓度罗汉松种子提取物作用于MGC-803细胞,bcl-2 mRNA水平随质量浓度的增加而明显下降,而p53 mRNA水平则随质量浓度的增加而显著增强。结论罗汉松种子提取物对人胃癌细胞MGC-803有明显的体外抑制作用,其抑制作用与药物的质量浓度和作用时间呈正相关,可能与其调控相关凋亡基因的表达有关。     

抗癌多肽A38对胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响

目的:探讨经计算机辅助药物设计的抗癌多肽A38,或与顺铂联合应用对人胃癌细胞株SGC-7901的体外生长抑制作用及对肿瘤细胞早期凋亡的影响。方法:将人胃癌细胞株SGC-7901与不同浓度的A38、顺铂及A38+顺铂(DDP)分别进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝法测定不同浓度的A38、顺铂及联合用药组在作用24,48,72 h后对SGC-7901细胞的生长抑制率;流式细胞仪分析细胞的凋亡率。结果:不同浓度A38、顺铂及联合用药后,SGC-7901细胞生长抑制率在不同浓度不同时段较对照组均显著增加(P均<0.01),联合用药组细胞生长抑制率较两单药组也明显增强(P均<0.01),呈现明显时效和量效关系。流式细胞仪检测凋亡结果显示:A38、顺铂及联合用药后,SGC-7901细胞的凋亡率在不同浓度不同时段较对照组均显著增加(P均<0.01),联合用药组细胞的凋亡率较两单药组也明显增加(P均<0.01)。结论:A38能抑制人胃癌细胞株SGC-7901细胞生长,诱导肿瘤细胞早期凋亡,小剂量顺铂与A38联用具有协同抑制作用,且效果比高浓度下的单用A38或单用顺铂的抑制作用明显。     

大蒜油联合顺铂诱导人腺样囊性癌细胞株ACC-M凋亡

目的探讨大蒜油联合顺铂对人腺样囊性癌细胞株ACC—M细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法采用不同浓度大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂分别处理人腺样囊性癌细胞株ACC—M细胞24、48、72h后,MTT法检测肿瘤细胞体外增殖抑制情况;选取2、8、32μg/mL的大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂处理肿瘤细胞4、8h后,流式细胞术分析肿瘤细胞周期分布和凋亡率。结果8、16、32μg／mL大蒜油及2、4、8、16、32μg／mL顺铂、大蒜油联合顺铂作用24、韶、72h对ACC-M细胞均有明显抑制作用,随浓度及时间增加,抑制率呈上升趋势。联合组用药肿瘤细胞抑制率明显高于单一用药组。流式细胞术结果显示,不同浓度的大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂作用能使ACC．M细胞发生G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡,随浓度增高及作用时间延长,周期分布越明显,凋亡率增高,联合组用药细胞周期阻滞和促凋亡作用明显强于单一用药组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论不同浓度的大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂均能有效抑制ACC-M细胞生长．阻滞细胞于G2／M期并诱导肿瘤细胞凋亡,大蒜油联合顺铂对ACC—M细胞生长抑制作用明显强于大蒜油、顺铂单独应用。     

蒙药巴特尔-7体外对胃癌细胞生长的影响

目的观察蒙药巴特尔-7对体外培养的人胃癌MGC-803细胞生长的影响。方法 MGC-803细胞经不同浓度蒙药处理后,通过MTT比色法分析蒙药作用后细胞的增殖情况。在倒置光显微镜及荧光显微镜下,观察细胞形态的变化;应用琼脂糖凝胶电泳分析诱导凋亡作用。结果巴特尔-7能抑制MGC-803细胞的增殖,且抑制作用随药物浓度的增加而增加。光镜下见部分细胞呈现凋亡的形态改变,琼脂糖凝胶电泳未见明显的梯状带。结论巴特尔-7对胃癌MGC-803细胞生长具有明显的抑制作用。     

奥曲肽对西咪替丁抑制SGC-7901细胞的增效作用

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽能否增强西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用。方法将不同浓度奥曲肽和西咪替丁作用于人胃癌细胞SGC-7901,运用四氮唑盐法（MTT法）检测奥曲肽和西咪替丁单独及联合作用48h后对SGC-7901细胞生长的影响,每个药物浓度6个复孔,实验重复3次,结果取平均值,并用Isobologram分析评价药物联合应用的作用性质。结果 MTT法结果显示奥曲肽和西咪替丁对SGC-7901细胞的生长起抑制作用。奥曲肽在浓度1.3～166.7mg/L范围内,呈剂量依赖性;西咪替丁在浓度500～3000mg/L范围内,呈剂量依赖性。奥曲肽和西咪替丁共同作用后,对SGC-7901的抑制作用明显增高,较两药单独作用差异具有统计学意义（P〈0.05）,其IC50的效应点落在Isobologram图中的协同区域。结论在体外实验中,奥曲肽及西咪替丁能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,且两药联合后对SGC-7901细胞生长抑制作用增强,为协同作用。奥曲肽能增强西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用。     

塞来昔布顺铂对卵巢癌细胞HO-8910增殖与凋亡影响的研究

目的探讨选择性环氧化酶(COX)-2抑制剂塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的影响及Survivin、增殖细胞核抗原(PCNA)、COX-2蛋白表达情况。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度塞来昔布单用及其与顺铂联用时HO-8910细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Survivin、PCNA、COX-2蛋白的表达情况。采用方差分析和LSD-t检验进行统计分析。结果塞来昔布、顺铂均可抑制HO-8910细胞的生长(P<0.01);当两者合用时G0/G1期细胞增加,凋亡率增高更加明显(P<0.01),Survivin、PCNA、COX-2蛋白表达下调(P<0.01)。结论塞来昔布、顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910均有抑制作用,塞来昔布能增强顺铂的抗卵巢癌作用。     

重组人p53腺病毒注射液逆转人耐药胃癌MGC-803细胞耐药性的体外试验研究

目的:研究重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)对体外人耐药胃癌MGC-803细胞的逆转作用及其可能的机制。方法:通过紫杉醇由低到高剂量诱导人胃癌MGC-803细胞内多耐药基因表达;不同剂量rAd-p53作用于人耐药胃癌MGC-803细胞不同时间后,MTT法检测细胞增殖抑制率,并计算半数有效抑制浓度(IC50),流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,免疫组织化学法和蛋白质印迹法测定多药耐药基因mdr1表达蛋白P糖蛋白(MDR1-Pgp)的表达。结果:rAd-p53可明显抑制人耐药胃癌MGC-803细胞增殖,呈时间-剂量依赖关系,作用24、48、72h的IC50分别为1889.85、998.44、354.91MOI;rAd-p53可阻滞人耐药胃癌MGC-803细胞周期于G2/M期并诱导其凋亡,可下调MDR1-Pgp蛋白表达。结论:人耐药胃癌MGC-803细胞的耐药性可能与MDR1-Pgp的高表达有关;rAd-p53可显著抑制人耐药胃癌MGC-803细胞的增殖并诱导耐药细胞凋亡,且呈剂量和时间依赖关系。     

AG490联合顺铂对人宫颈癌HCEI细胞增殖凋亡的作用

目的研究酪氨酸激酶抑制剂AG490联合顺铂对人宫颈癌细胞株HCEI细胞增殖和凋亡的作用。方法(1)培养宫颈鳞癌细胞株HCEI,观察活细胞生长情况并摄片。(2)实验分组及检测:①终浓度为20、40、80μmol/L的AG490培养HCEI细胞;②终浓度为20、40、80μg/ml顺铂培养HCEI细胞;③AG490联合顺铂培养HCEI细胞,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测培养24、48、72 h后细胞增殖活力,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪分别检测24、48、72 h不同时间点的细胞凋亡发生率,并分析细胞周期改变。(3)各实验中对照组除加入同等浓度的二甲基亚砜(DMSO)外,均不加任何干扰因素,统计学方法采用方差分析和χ~2检验。结果①JAK激酶抑制剂AG490处理后凋亡细胞明显增多,细胞缩小变圆,细胞膜出泡等。②AG490和顺铂以时间和剂量依赖性特点抑制宫颈癌细胞的增殖,AG490联合顺铂对人宫颈癌HCEI细胞的增殖抑制具有协同作用。③流式细胞仪细胞周期分析表明,AG490处理组G_1期细胞比例有所增加,S期细胞比例明显降低,顺铂处理组G。期细胞比例明显降低,S期细胞比例明显升高,AG490联合顺铂处理组G期细胞比例和S期细胞比例介于AG490处理组和顺铂处理组之间。④细胞凋亡分析表明,AG490处理组细胞凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性;顺铂处理组细胞凋亡率较对照组也升高,呈时间和剂量依赖性;AG490联合顺铂处理组细胞凋亡率较单药处理组高。结论①AG490使凋亡细胞明显增多,并以时间和剂量依赖性抑制宫颈癌HCEI细胞的增殖,改变细胞周期分布、促进细胞凋亡。②AG490与顺铂联合对宫颈癌HCEI细胞的抑制作用明显增强,提示AG490与顺铂联合对宫颈癌HCEI细胞的增殖抑制有协同作用。     

重楼皂苷Ⅱ诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的体外研究

目的初步探讨重楼皂苷Ⅱ抑制人胃癌MGC-803细胞增殖并诱导其凋亡的作用及机制。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ作用于细胞后其存活率;DAPI染色观察细胞凋亡;AV/PI双染检测细胞凋亡率;比色法检测天冬氨酸蛋白水解酶caspase-3的活性;Western blot法检测Cyt-c的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,重楼皂苷Ⅱ可降低MGC-803细胞的存活率,且呈剂量与时间依赖性;镜下可见细胞核破碎,具有明显凋亡特征,凋亡率随着浓度的增大而增加(P <0.01);细胞内caspase-3的活性增加(P <0.01),Cyt-c蛋白的表达量明显增加(P<0.01)。结论重楼皂苷Ⅱ可明显抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,并诱导细胞发生凋亡。     

奥曲肽联合奥美拉唑体外对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

目的探讨联合奥曲肽与奥美拉唑在体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测奥曲肽和奥美拉唑对SGC-7901细胞生长的影响,根据中效原理判断联合用药的效果;流式细胞仪检测联合用药对SGC-7901细胞的细胞周期、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果奥曲肽联合奥美拉唑在体外能显著抑制SGC-7901细胞的生长,联合用药对SGC-7901细胞的抑制作用强于单独用药,两药联合应用在高水平效应合用指数小于1,具有明显的协同作用;联合用药能使SGC-7901细胞周期停滞于G0/G1期,下调Bcl-2且上调Bax蛋白的表达。结论奥曲肽联合奥美拉唑在体外可以抑制SGC-7901细胞的生长,具有协同效应,其机制可能与下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达有关。     

迷迭香酸类似物-11通过EGFR-JNK通路抑制人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移

目的基于EGFR-JNK通路,探讨RAA-11对人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移的抑制作用。方法 MTT法检测RAA-11对人胃黏膜上皮GES-1细胞和人胃癌MGC-803细胞活力的影响;划痕实验检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞迁移能力的影响;实时荧光定量PCR检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞EGFR mRNA表达的影响;Western blot检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2、Bax及通路蛋白EGFR、JNK、p-JNK表达的影响。结果 MTT结果表明,与人胃黏膜上皮GES-1细胞相比,RAA-11明显抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖(P<0.01),提示RAA-11对MGC-803细胞有选择作用;划痕实验结果提示,RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的迁移能力;实时荧光定量PCR结果提示,RAA-11降低了人胃癌MGC-803细胞EGFR mRNA的表达;Western blot结果提示,RAA-11上调人胃癌MGC-803细胞促凋亡相关蛋白caspase-3、Bax,并促进通路蛋白JNK、p-JNK的表达(P<0.01),下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,并降低了通路蛋白EGFR的表达水平(P<0.01)。结论 RAA-11通过作用于EGFR-JNK通路,抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖和迁移,并能够诱导其凋亡。     

姜黄素和顺铂联用对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3作用

目的:研究姜黄素和顺铂联用抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖的影响.方法:MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化及检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构变化.结果:姜黄素能显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的体外生长,呈时间与剂量依赖性;细胞周期主要阻滞于G2/M期,部分细胞出现凋亡形态学改变.顺铂和不同浓度姜黄素联合可显著抑制PC-3细胞增殖.姜黄素和顺铂在一定程度上均可诱导PC-3细胞凋亡,两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用增强.结论:姜黄素可与顺铂协同抑制人前列腺癌细胞株PC-3的增殖.     

槲皮素对胃癌MGC-803细胞生长及凋亡作用的研究

目的研究槲皮素对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响及诱导凋亡作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度槲皮素对MGC-803细胞的增殖活性的效应;原位末端核苷标记(TUNEL)法检测槲皮素诱导细胞凋亡的凋亡指数(AI)。结果槲皮素浓度为40~100μmol/L时对MGC-803细胞增殖有显著的抑制效应,且呈剂量依赖性;细胞加入槲皮素诱导48h后AI明显高于未加入组(P<0.05)。结论槲皮素在一定浓度范围内能显著抑制MGC-803细胞的增殖并能诱导其凋亡,其作用呈浓度依赖性。     

奥曲肽对人肝癌细胞Huh-7增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的探讨奥曲肽对人肝癌细胞Huh-7增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法 Huh-7细胞用不同浓度奥曲肽(0、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L,分别为A、B、C、D、E、F组)处理,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western blot法检测半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达。结果与A组相比,其余各组Huh-7细胞的生长抑制率、G1期细胞的比例、凋亡率及Caspase-3蛋白表达均以浓度依赖性的方式明显增加。结论奥曲肽可显著抑制Huh-7细胞的生长,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡;且奥曲肽可能通过启动Caspases途径诱导人肝癌细胞Huh-7凋亡。     

甲磺酸伊马替尼增加顺铂对耐药卵巢癌细胞作用的研究

目的探讨靶向治疗药物甲磺酸伊马替尼(Imatinib mesylate)对耐顺铂人卵巢腺癌细胞株SKOV3/DDP的增殖抑制和诱导凋亡作用以及与顺铂合用的效果。方法 MTT法检测不同浓度甲磺酸伊马替尼、DDP以及联合用药对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的增殖抑制情况,采用双染色流式细胞术检测甲磺酸伊马替尼对SKOV3/DDP的诱导凋亡作用。结果 MTT法检测出不同药物浓度的甲磺酸伊马替尼作用于SKOV3/DDP细胞呈现细胞生长抑制作用,甲磺酸伊马替尼与不同浓度顺铂联合用药对细胞生长抑制率分别为38.63%、51.55%、66.54%,明显高于DDP单用药组的8.30%、16.68%、30.83%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两药合用后的IC50为9.57,是单用顺铂组的4.13倍。甲磺酸伊马替尼与顺铂合用后,早期凋亡率由1.25%增加到12.31%(P<0.05)。结论甲磺酸伊马替尼可以抑制卵巢癌耐DDP细胞株SKOV3/DDP的增殖和诱导细胞凋亡,并显著增强其对DDP的敏感性。     

米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP细胞凋亡和性激素受体的影响

目的 探讨米非司酮配伍顺铂对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP增敏作用以及凋亡率、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的影响.方法 采用RPMIl640培养液时CAOV3/DDP细胞株进行培养,将CAOU3/DDP细胞株分5组:对照组(不加任何药物)、顺铂组(2μg/ml)、高剂量米非司酮加顺铂组(15μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、中剂量米非司酮加顺铂组(10μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、低剂量米非司酮加顺铂组(5μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂).培养结束后采用MTT法观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株增殖活力的影响;采用流式细胞术观察不同浓度的米非司酮配伍顺铂对CAOV3/DDP细胞株凋亡率、ER、PR的影响.结果 与对照组比较,顺铂组对细胞增殖活力、细胞凋亡率以及ER、PR阳性率的影响,差异均无统计学意义(P>0.05);与顺铂组比较,各剂量米非司酮加顺铂组对细胞增殖活力、生存率以及细胞凋亡率、PR阳性率的影响,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且随着米非司酮浓度的升高,对CAOV3/DDP细胞抑制作用逐渐增强,细胞凋亡率显著上升,PR阳性率下降(P<0.05,P<0.01),各组ER阳性率无统计学意义(P>0.05).结论 米非司酮联合顺铂对CAOV3/DDP细胞增殖活力均具有显著抑制作用,且与米非司酮的浓度呈剂量依赖关系,米非司酮可提高顺铂化疗的敏感性,其增敏作用与抑制孕激素分泌,促进卵巢癌细胞凋亡有关