鉴别HCV C蛋白上HLA—A2限制的CTL识别表位的研究

本文先用计算机预测，后用＾５１Ｃｒ４ｈ释放分析证实的方法，对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区蛋白（Ｃ蛋白）上，ＨＬＡ－Ａ２限制性ＣＴＬ识别表位进行了鉴别。结果发现，２名感染ＨＣＶ和ＨＬＡ－Ａ２阳性供血员的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对ＡＬＡＨＧＶＲＡＬ（ｃｏｒｅ１５０－１５８）肽段标记的自体靶细胞有溶解作用，杀伤率分别为３７．５％和１５．８％，用抗ＣＤ４ｍＡｂ阻断后杀伤率无明显变化，而用抗ＣＤ８ｍＡｂ     

应用S基因转染的Sp2/0细胞作为靶细胞研究HBV基因疫苗的细胞免疫应答

构建编码ＨＢｓＡｇ 蛋白的重组真核表达质粒ｐＣＲ３－１Ｓ作为ＨＢＶ 基因疫苗, 免疫接种Ｂａ１ｂ／ｃ 小鼠。以重组质粒ｐＣＲ３－１Ｓ转染的Ｓｐ２／０ 细胞作为靶细胞, 采用５１Ｃｒ ４ｈ 释放法, 体外检测免疫小鼠的淋巴细胞杀伤功能。结果显示, 与空载体对照组相比较, ＨＢＶ基因疫苗可诱导Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠产生ＨＢＶ 特异性细胞毒性Ｔ 细胞应答（ Ｐ＞ ０－０５） , 提示以Ｓｐ２／０ 基因转染的细胞作为靶细胞, 检测免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠淋巴细胞的杀伤功能是可靠的。     

应用S基因转染的Sp2／0细胞作为靶细胞研究HBV基因疫？…

构建编码ＨＢｓＡｇ蛋白的重组真核表达质粒ｐＣＲ３．１－Ｓ作为ＨＢＶ基因疫苗,免疫接种Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,以重组质粒ｐＣＲ３．１－Ｓ转染的Ｓｐ２／０细胞作为靶细胞,采用＾５１Ｃｒ ４ｈ释放法,体外检测免疫小鼠的淋巴细胞杀伤功能。结果显示,与空载体对照组相比较,ＨＢＶ基因疫苗可诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生ＨＢＶ特生细胞毒性Ｔ细胞应答,提示以Ｓｐ２／０基因转染的细胞作为靶细胞,检测免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠淋巴细胞     

抗人黑素瘤双特异性抗体增强LAK细胞毒效应的实验研究

抗肿瘤单克隆抗体的高度特异性与杀伤细胞对肿瘤的细胞毒效应相互结合起来，是增强ＬＡＫ细胞抗肿瘤作用的重要途径。本研究用化学连接法制备了既可识别淋巴细胞表面ＣＤ３抗原又可识别ＬｉＢｒ黑素瘤细胞表面肿瘤相关抗原的双特异性抗体ＣＤ３－ＨＢ８７５９。ＦＡＣＳ分析证实，ＣＤ３－ＨＢ８７５９具有结合两种抗原的活性。４ｈ５１Ｃｒ释放细胞毒实验结果表明，ＣＤ３－ＨＢ８７５９在诱导相可显著增强ＬＡＫ对ＬｉＢｒ细胞的细胞毒效应，也能使非ＬＡＫ细胞获得细胞毒性；在杀伤相加入ＣＤ３－ＨＢ８７５９对ＬＡＫ细胞的细胞毒作用也具有促进作用。上述结果表明，ＣＤ３－ＨＢ８７５９是一种抗人黑素瘤的双特异性抗体，为体内应用提供了良好的实验基础。     

重组rAAV-LMP诱导的特异性细胞毒T细胞对LMP阳性靶细胞的识别与杀伤

在正常个体中Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ（ＥＢ）病毒是由病毒特异性细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）所控制，虽不能清除病毒，却对于控制细胞处于潜伏感染状态是必需的。抽取病人血分离淋巴细胞，在实验室制备ＥＢ病毒特异性ＣＴＬ，然后回输到病人体内，具有预防和治疗ＥＢ病毒相关疾病的意义。我们将ＥＢ病毒潜伏感染膜蛋白（ＬＭＰ）基因重组到腺病毒伴随病毒载体ｐＡＣＰ中去，与包装质粒Ａｄ８共转染已感染了Ⅱ型腺病毒的２９３细胞，获得重组病毒ｒＡＡＶ－ＬＭＰ，用此病毒感染淋巴细胞并表达ＬＭＰ，用高能Ｘ线照射灭活，与自体淋巴细胞共培养产生特异性ＣＴＬ。以ＥＢ病毒转化的类淋巴母细胞作靶细胞与ＣＴＬ反应，用ＢＬＴ活性法测定ＣＴＬ活性。结果表明，４株ＣＴＬ均能够识别和杀伤对应的靶细胞，并且随着ＣＴＬ数量的增加和反应时间的延长，上清中ＢＬＴ活性也增强。     

THE FOUNDER OF BCG IN CHINA——Wang Liang（1891—1985）

Ｄｒ .ＷａｎｇＬｉａｎｇｗａｓｂｏｒｎｉｎＣｈｅｎｇｄｕ ,Ｓｉｃｈｕａｎｐｒｏｖｉｎｃｅｉｎ 1891.ＳｉｎｃｅｇｒａｄｕａｔｉｏｎｆｒｏｍＨａｎｏｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ,Ｖｉｅｔｎａｍ ,ｉｎ 1913ｓｅｅｉｎｇｑｕｉｔｅａｌｏｔｏｆｐｅｏｐｌｅｉｎｃｌｕｄｉｎｇｈｉｓｂｒｏｔｈｅｒａｎｄｓｉｓｔｅｒｄｉｅｄｏｆｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ(ＴＢ) ,ｈｅｍａｄｅｈｉｓｍｉｎｄｔｏｄｅｖｏｔｅｈｉｍｓｅｌｆｔｏｔｈｅｗａｒａｇａｉｎｓｔｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓｉｎＣｈｉｎａ .Ｄｒ.ＷａｎｇＬｉａｎｇｈｅ…     

抗人黑素瘤双特异性抗体增强LAK细胞毒效应的实验研究

抗肿瘤单克隆抗体的高度特异性与杀伤细胞对肿瘤的细胞毒效应相互结合起来，是增强ＬＡＫ细胞抗肿瘤作用的重要途径。本研究用化学连接法制备了既可识别淋巴细胞表面ＣＤ３抗原又可识别ＬｉＢｒ黑素瘤细胞表面肿瘤相关抗原的双特异性抗体ＣＤ３－ＨＢ８７５９。ＦＡＣＳ分析证实，ＣＤ３－ＨＢ８７５９具有结合两种抗原的活性，４ｈ＾５１Ｃｒ释放细胞毒实验结果表明，ＣＤ３－ＨＢ８７５９在诱导相可显著增强ＬＡＫ对ＬｉＢｒ细胞的     

人脐带血抗巨细胞病毒和EB病毒的特异性细胞毒？…

目的：探讨用人的脐带血单个核细胞体外同时扩增对抗ＥＢ病毒（ＥＢＶ）和巨细胞病毒（ＣＭＶ的特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞的可行性。方法：利用人的脐带血单个核细胞（ＣＢＭＣ）,通过ＥＢＶ感染转化成Ｂ成淋巴细胞细胞株（ＢＬＣＬ）,再通过逆转录病毒载体,将ＣＭＶ蛋白基因ｐｐ６５导入ＢＬＣＬ,用这种细胞体外刺激同一供者脐带血的ＣＢＭＣ产生细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）,经「＾５１Ｃｒ」释放实验（ＣＲＡ）检测产生的ＣＴＬ     

健康人外周血中CD8~+颗粒酶B~+T细胞亚群含有活化的和易于凋亡的细胞

有关健康人外周血淋巴细胞上颗粒酶存在的问题有一些争论的报道,此文的研究是应用针对人类天然ＧｒＢ的单克隆抗体分析了健康人Ｔ细胞中ＧｒＢ的表达,并分析了ＣＤ８＋ＧｒＢ＋Ｔ细胞亚群的表型及对自发凋亡和Ｆａｓ介导的凋亡的易感性。方法：从人类ＮＫＣ系ＹＴＩＮＤＹ中纯化的天然ＧｒＢ免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备ＩｇＧ１ＭｃＡｂＧｒＢ１１。经放免及ＥＬＩＳＡ分析此ＭｃＡｂ仅与ＧｒＢ特异性结合,以免疫细胞化学方法用此单克隆抗体检测健康人ＰＢＭＣ中的ＧｒＢ＋细胞。ＧｒＢ＋细胞表型的分析采用ＦＩＴＣ标记的针对不同淋巴…     

慢性丙肝患者外周CTL对HCV抗原位点的特异性识别及 …

研究丙型肝炎病毒感染后外周血中细胞毒Ｔ细胞对ＨＣＶ的识别杀伤。 方法用ＨＣＶ ＮＰ合成肽Ａ链和Ｂ链从ＰＢＭＣ中经反复刺激产生ＨＬＡ Ｂ４４限制的的ＨＣＶ抗原特异ＣＴＬ，对５合资 人类白细胞抗原Ｂ４４分子阳性的丙肝患者，６位ＨＬＡ Ｂ４４阴性的丙肝患者及５位ＨＬＡ Ｂ４４阳性，但ＨＣＶ阴性的对照者外周ＣＴＬ对ＨＣＶ核壳蛋白的反应进行研究。     

DECONVOLUTION METHOD BASED ON THE DOUBLE PASS THROUGH THE HUMAN EYE

ＤＥＣＯＮＶＯＬＵＴＩＯＮＭＥＴＨＯＤＢＡＳＥＤＯＮＴＨＥＤＯＵＢＬＥＰＡＳＳＴＨＲＯＵＧＨＴＨＥＨＵＭＡＮＥＹＥＹｅＤａｔｉａｎ，ＺｈｅｎｇＬｉｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｌｅｃｔｒｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＴｓｉｎｇｈｕａＵｎｉｖｅｒｓｉ...     

霍乱毒素对淋巴细胞活化增殖的影响及其机制

研究探讨霍乱毒素（ＣＴＸ）对淋巴细胞活化、增殖的影响及可能的作用机制。研究结果表明，　　ＣＴＸ可显著升高静息ＰＢＭＣ和／或ＣＤ３单抗激活的琳巴细胞内ｃＡＭＰ水平，该效应与ＣＴＸ抑制淋巴细胞增殖和ＩＬ－２的作用密切相关；　　ＡＣ激活剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ通过升高细胞内ｃＡＭｐ水平，对于ＣＤ３单抗激活的淋巴细胞增殖有明显的抑制作用；ＣＴＸ不能干扰ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ细胞的增殖效应，也不影响ＣＴＬＬ细胞内ｃＡＭＰ水平。实验结果提示，ＣＴＸ敏感的Ｇ蛋白亚类参与了ＣＤ３单抗对淋巴细胞活化的调节，ＣＴＸ的抑制作用与其升高细胞内ｃＡＭｐ水平有关。     

慢性粒细胞白血病树突状细胞激活抗白血病免疫的实验研究

树突状细胞 (ＤＣｓ)是体内功能最强的抗原提呈细胞 (ＡＰＣ) ,在抗肿瘤免疫中发挥重要作用[1] 。Ｃｈｏｕｄｈｕｒｙ[2 ] 用荧光原位杂交 (ＦＩＳＨ)研究表明 ,在慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ) ,外周血获得的ＤＣｓ含ＢＣＲ/ＡＢＬ融合基因 ,在ｒｈＩＬ 2存在下能刺激自体外周血Ｔ细胞杀伤白血病细胞并抑制白血病细胞的生长。由于骨髓中含一定数量的Ｔ细胞 ,我们设想 ,在ＣＭＬ病人骨髓中加入自体ＤＣｓ可以活化这些Ｔ细胞 ,产生抗白血病免疫反应。1　材料与方法1 1　病人选择　为 3例经临床、血液学及细胞遗传学确诊的ＣＭＬ病人 ,其中女性 2…     

重组BCG疫苗和结构杆菌HSP65 DNA疫苗免疫原性的 …

目的 研究重组ＢＣＧ（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＢＣＧ，ｒＢＣＧ）疫苗和人结核杆菌热休克蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＳＰ）６５ ＤＮＡ疫苗对小鼠免疫应答的影响，评价两种疫苗；的免疫原性。方法 用ｒＢＣＧ疫苗和ＨＳＰ６５ ＤＮＡ疫苗免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，免疫８周时，采血、取腹腔巨噬细胞和脾脏进行０实验，以释放量检测巨噬细胞吞噬活性，以淋巴细胞刺激指数（ＳＩ）反应细胞增殖能力，以ＥＬＩ     

淋巴因子激活的骨髓细胞对混合淋巴细胞培养的抑制作用

采用单向混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）方法，从不同主要组织相容性抗原（Ｈ－２）单型小鼠的多种组合中，验证淋巴因子激话的骨髓细胞（ＬＡＢＭＣ）的Ｖｅｔｏ效应。结果表明：ＬＡＢＭＣ于培养当天加入单向ＭＬＣ，在与反应细胞低比例时可特异住抑制与其带有相同Ｈ－２单型的刺激细胞参与组合的增殖应谷和杀伤效应的诱导；在与反应细胞高比例时其抑制不具特异住，但对与其带有相同Ｈ－２单型的刺激细胞参与组合的抑制较强，提示ＬＡＢＭＣ在低比例时具Ｖｅｔｏ活性，在高比例时同时具Ｖｅｔｏ和自然抑制（ＮＳ）活性。ＬＡＢＭｃ于培养第二天加入单向ＭＬＣ则不显示抑制效应，提示ＬＡＢＭＣ对ＭＬＣ的抑制具有时相效应，流式细胞术（ＦＣＭ）显示ＬＡＢＭＣ中ｌｙｔ－２（＋）细胞成分明显增加．     

合成多肽体外诱导乙肝病毒抗原特异性CTL杀伤机制研究

为探讨合成多肽体外诱导乙肝病毒抗原特异性Ｔ细胞杀伤机制，应用免疫组化检测ＨＧＶ－ＣＴＬｓＦａｓ配体表达情况，燕分析培养上清一氧化氮含量与细胞毒活性的关系。结果显示，ＨＢＶ－ＣＴＬｓ对转染ＨＢＶ ＤＮＡ的肝癌细胞存在明显的特异性细胞毒活性，其Ｆａｓ配体表达阳性率分别为５８％，５６％，明显高于ＣＤ３－ＡＫ细胞组，细胞培养上清ＮＯ含量动态分析显示，ＨＢＶ－ＣＴＬｓ细胞培养上清ＮＯ含量与细胞毒活性存在正相     

慢性丙肝患者外周CTL对HCV抗原位点的特异性识别及受HLA的限制

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染后外周血中细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）对ＨＣＶ的识别杀伤。方法用ＨＣＶＮＰ合成肽Ａ链和Ｂ链从ＰＢＭＣ中经反复刺激产生ＨＬＡＢ４４限制的ＨＣＶ抗原特异ＣＴＬ，对５位人类白细胞抗原（ＨＬＡ）Ｂ４４分子阳性的丙肝患者，６位ＨＬＡＢ４４阴性的丙肝患者及５位ＨＬＡＢ４４阳性，但ＨＣＶ阴性的对照者外周ＣＴＬ对ＨＣＶ核壳蛋白（ＮＰ）的反应进行研究。结果发现ＣＴＬ能识别一个ＨＣＶＮＰ位点，该位点位于ＨＣＶ核壳蛋白的第８１～１００个氨基酸残基之间。而此位点的识别受ＨＬＡⅠ类分子Ｂ４４的限制。在５位ＨＬＡＢ４４阳性的患者，其ＣＴＬ对此位点有明显的细胞毒作用，而其余６位ＨＬＡＢ４４阴性的患者及５位正常对照者，均无此种细胞毒作用。结论在慢性丙肝患者外周血存在ＣＤ８＋的ＣＴＬ，这种ＨＣＶ特异的ＣＴＬ能够识别一个ＨＣＶ的核壳蛋白（ＮＰ）位点，此位点位于ＨＣＶＮＰ残基第８１到１００之间。并且识别此位点的ＣＴＬ受ＨＬＡⅠ类分子Ｂ４４的限制。本文结果为ＨＣＶ感染后，体内细胞免疫在病毒清除中的作用及发病机理的研究提供了方法和线索。     

9.1C3分子抑制杀伤性细胞的细胞毒作用及其机制

目的 探讨９．１Ｃ３分子对杀伤细胞功能的影响。方法 以新鲜分离的ＰＢＭＣ或混合淋巴细胞培养活化的淋巴细胞为效应细胞,采用重导向杀伤实验（Ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ｋｉｌｌｉｎｇ ａｓｓａｙ,ＲＫＡ）观察９．１Ｃ３抗体效应细胞杀伤Ｐ８１５细胞作用及其杀伤过程中ＴＮＦ－α分泌的影响。结果 ９．１Ｃ抗体能显著抑制杀伤细胞对靶细胞的细胞毒作用,并使效应细胞分泌ＴＮＦ－α水平降低。结论：９．１Ｃ３分子是一种抑制     

异基因嵌合体与移植耐受关系的研究Ⅱ.成年小鼠联体共生诱导耐？…

将ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠及Ｃ５７ＢＬ／Ｈ（Ｈ－２＾ｄ,Ｂ６）小鼠的脾细胞分别经尾静脉注射给对方,２ｄ后再分别腹腔注射环磷胺（ＣＹ）１５０ｍｇ／ｋｇ,ＣＹ注射后１ｄ对ＢＡＬＢ／ｃ及Ｂ６小鼠进行联体（ｐａｒａｂｉｏｓｉｓ）,１周后分开并进行相互间的植皮。发现ＢＡＬＢ／ｃ小鼠对Ｂ６小鼠的皮肤耐受期明显延长（ＭＳＴ＝２５．７ｄ）,但是Ｂ６对ＢＡＬＢ／ｃ及Ｂ６小鼠在联体分开后的第１天和第３０天进行胸     

柯萨奇B3病毒对心肌细胞钙平衡的影响

目的 探讨柯萨奇Ｂ３病毒（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ｂ３,ＣＶＢ３）对膜离子通道及离子交换载体的影响,了解病毒感染导致细胞内钙超载的原因。方法 酶灌注法获得单个心肌细胞后用光聚焦显微镜和钙离子荧光探针（Ｆｌｕｏ ３／ＡＭ）检测ＣＶＢ３感染对心肌细胞内游离钙离子浓度的影响及利用模片钳全细胞电流记录技术观察ＣＶＢ３对Ｌ型钙通道电流,钠通道电流和钠钙交换电流的影响。结果 ＣＶＢ３感染使细胞内的游离钙