可调性Cem-Ostetic^TN人工骨浆和自体富血小板血浆复合物修复骨不连的实验研究

目的探讨复合富血小板血浆（PRP）和可调性Cem-Ostetic^TM人工骨浆对管状骨骨不连的修复作用。方法新西兰大白兔28只,在双侧前臂桡骨中上段截除1．5cm骨段（包括骨膜）,骨断端用骨蜡封闭髓腔,制成骨不连模型。取其中24只,一侧桡骨作实验侧,骨不连处填入复合PRP的人工骨浆;另一侧为对照侧,仅填人人工骨浆,另外4只作为空白对照组。分别在术后第2、4、8和12周通过大体观察、X线片、组织学及生物力学检测等手段观察桡骨愈合情况。结果术后第2周,实验侧和对照侧的新生纤维组织和骨组织均主要集中在截骨端,实验侧新生组织略多于对照侧。第4、8周,实验侧人工骨表面及孔隙内被大量新生骨组织覆盖和填充,人工骨与宿主骨桥接紧密;对照侧的新生骨组织主要限于人工骨两端,且相对实验侧较幼稚。第12周,实验侧骨缺损完全修复,髓腔再通;对照侧断端间新骨形成骨桥,但尚未见到髓腔再通,空白对照组均未见骨痂。结论复合富血小板血浆（PRP）和可调性Cem-Ostetic^TM人工骨浆对管状骨骨不连的修复有促进作用。     

生物活性纳米骨浆复合自体红骨髓经皮注射修复实验性兔尺骨骨不连

背景:纳米科技的发展和对自体红骨髓的深入认识为治疗骨不连提供了新的思路.目的:探讨经皮注射生物活性纳米骨浆复合自体红骨髓微创治疗兔尺骨骨不连的可行性.方法:取4月龄新西兰大白兔制备尺骨不连模型成功后随机分为4组,于骨不连处经皮植入生物活性纳米骨浆复合自体浓缩红骨髓、生物活性纳米骨浆、自体浓缩红骨髓或不做任何处理(空白对照组).术后进行X射线片检查并进行放射学骨愈合评分,12周动物处死后取材,进行大体观察,生物力学测定和组织学观察.结果与结论:放射学评分显示新骨形成的速度:生物活性纳米骨浆复合自体浓缩红骨髓组>生物活性纳米骨浆组>自体浓缩红骨髓组>空白对照组(P<0.01).生物力学测定显示生物活性纳米骨浆复合自体浓缩红骨髓形成新骨的生物力学强度高于生物活性纳米骨浆(P<0.01),但低于正常骨组织(P<0.01).组织学观察显示生物活性纳米骨浆复合自体浓缩红骨髓组新生骨量较多,骨不连处形成了新的骨性连接;生物活性纳米骨浆组新生骨量多,骨不连处有软骨团形成,部分形成骨性连接;自体浓缩红骨髓组有部分软骨样组织形成,无骨性连接;空白对照组尺骨骨不连处纤维组织形成,无骨性连接.结果提示生物活性纳米骨浆复合自体浓缩红骨髓后具有一定的骨诱导作用,注入体内后成骨速度、形成新骨的质量及力学强度明显优于单纯的纳米骨浆或红骨髓,可用于经皮注射修复实验性骨不连.     

冻干硬脑膜内骨形成蛋白-自固化磷酸钙复合移植修复骨缺损

背景:骨形成蛋白和自固化磷酸钙各自有着良好的成骨能力,冻干硬脑膜内骨形成蛋白和自固化磷酸钙复合移植存在优化成骨效能的可能性.目的:以冻干硬脑膜为膜材料,观察膜内充填材料骨形成蛋白复合自固化磷酸钙移植修复节段性骨缺损的效果.设计、时间及地点:随机分组设计,动物体内组织病理学对照观察,于2006-07/2007-07在广西医科大学动物实验室完成.对象:健康成年新西兰大白兔28只,雌雄不限,体质量1.5～2.5 kg.方法:实验兔28只,其中4只用于取硬脑膜.其余24只随机分成A,B两大组,每组12只.A组制造双侧兔桡骨中段10 mm的骨缺损.一侧骨缺损用骨形成蛋白、自固化磷酸钙、冻干硬脑膜复合移植修复,为骨形成蛋白组, 另一侧不予处理作为空白对照组.B组制造单侧兔桡骨中段10 mm的骨缺损,用骨髓、自固化磷酸钙、冻干硬脑膜复合移植修复称骨髓组.主要观察指标:于术后第1,2,4,6,8,10,12周分别行双侧桡骨X射线检查.观察骨缺损处的新骨形成及骨修复情况.并于术后第2,4,8,12周切取标本行组织学检查及成骨面积分析.结果:在术后第4,8,12周,骨形成蛋白组的成骨面积大于骨髓组(P＜0.05),而在实验早期(术后2周)两组间差异无显著性意义(P＞0.05);在实验的各个时期,骨形成蛋白组和骨髓组的成骨面积均明显大于空白组(P＜0.01).X射线结果显示,骨形成蛋白组在10～12周出现明显骨痂塑形现象;组织学病理切片结果显示,骨形成蛋白组在12周时桡骨可见成熟骨髓,骨缺损处为成熟的板层骨连接.结论:骨形成蛋白复合自固化磷酸钙与冻干硬脑膜移植具有良好的成骨作用.     

人骨形态发生蛋白2基因活化纳米骨浆的成骨能力

背景：纳米骨浆在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力。目的：观察人骨形态发生蛋白2（human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2）基因活化纳米骨浆的异位诱导成骨能力和修复骨缺损效果。时间及地点：实验于2006-06/2007-03在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室和协和医院骨科实验室完成。材料：将纳米骨浆与hBMP-2基因真核表达质粒相复合,形成hBMP-2基因局部释放系统。方法：实验一：昆明种小鼠24只右侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋hBMP-2质粒作为实验侧,其中12只小鼠左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋空白质粒为对照侧1,另12只左侧注射纳米骨浆为对照侧2。实验二：新西兰白兔54只,其中6只作左桡骨中段骨缺损,不植入材料,为空白对照;另48只制成双侧桡骨中段15mm骨缺损模型,随机分成3组,缺损处分别植入hBMP-2＋纳米骨浆、空白质粒＋纳米骨浆、纳米骨。主要观察指标：实验一：采用放射学、分子生物学和组织形态学等方法检测成骨基因hBMP-2表达和诱导成骨效应。②实验二：取桡骨标本作影像学检查、组织学观察和生物力学检测。结果：实验一：小鼠术后2,4周实验侧有hBMP-2表达。实验侧术后2周出现大量软骨组织和呈岛状散在分布的骨组织,术后4周可见大量成骨组织,新生骨相互融合生长并形成较为成熟的板层骨和骨小梁结构;对照侧未见骨组织形成。实验侧碱性磷酸酶活性明显高于对照侧（P〈0.01）。实验二：术后12周空白对照组骨缺损无愈合,其余3组骨缺损均修复。植入hBMP-2＋纳米骨浆组的碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨力学强度均明显优于植入空白质粒＋纳米骨浆或纳米骨组（P〈0.05）。结论：经组织学、影像学及生物力学的综合检测验证,纳米骨浆复合hBMP-2质粒后,具有一定的骨诱导作用,植入体内后成骨速度、质量及力学强度较单纯的纳米骨浆明显增强,能够有效修复骨缺损。     

游离骨膜骨髓磷酸钙复合移植应用于膜引导性骨再生的实验研究

目的:将游离骨膜骨髓自固化磷酸钙calciumphosphatecement,CPC应()用于膜引导性骨再生,为临床修复节段性骨缺损探索一条有效的途径。方法:实验兔28只,分成A,B两大组,每组14只,制造两侧兔桡骨中段10mm的骨缺损。A组一侧骨缺损用自体游离骨膜(freeperiosteum,FP)、骨髓bonemarrow,BM和CPC复合移植修复简称FPBMC组,()()另一侧作为空白对照组。B组一侧用自体游离骨膜及吸附骨髓的明胶海绵修复(简称FPBM组),另一侧用硅胶膜(silastic)及吸附骨髓明胶海绵修复(简称SBM组)。于术后第1,2,4,6,8,10,12周分别行双侧桡骨X射线检查及X射线影像评分。于术后第2,4,8,12周切取标本行组织学检查及成骨面积分析。结果:FPBMC组疗效最好,FPBM组及SBM组次之,空白对照组最差。结论:①FPBMC复合移植具有良好的成骨作用,可有效促进骨缺损的修复。②膜下间隙的保持是膜引导性骨再生顺利进行的条件。     

自体游离骨膜骨髓自固化磷酸钙复合移植治疗低负重或非负重部位节段性骨缺损的实验研究

背景骨膜移植及骨移植是目前治疗节段性骨缺损的常用方法,疗效尚未令人满意.目的探讨自体游离骨膜骨髓自固化磷酸钙(FP-BM-CPC)复合移植修复节段性骨缺损的效果.设计自身对照的前瞻性研究.地点和对象实验由桂林医学院附属医院骨科和广西医科大学第一附属医院创伤骨科共同完成,研究对象为新西兰兔15只,雌雄不限,体质量1.5～2.5 kg,由广西医科大学动物实验室提供.方法制造实验兔双侧桡骨中段10mm的骨缺损模型.实验组一侧骨缺损用FP-BM-CPC复合移植修复;对侧作为对照组.主要观察指标术后1,2,4,6,8周行双侧桡骨X线平片及组织学检查.结果实验组兔桡骨骨缺损处在8周时均获得骨性修复,对照组均为骨不连.结论FP-BM-CPC复合移植具有良好的成骨作用,可望成为修复低负重或非负重部位节段性骨缺损的有效方法.     

纳米陶瓷人工骨复合血管内皮生长因子修复完全性骨缺损

背景:血管内皮生长因子和骨形态发生蛋白是目前公认的对骨生成具有明显促进作用的细胞因子,分别与纳米陶瓷人工骨支架复合,希望可以制造出更好的骨修复材料.目的:比较复合血管内皮生长因子和复合骨形成蛋白的纳米陶瓷人工骨修复骨缺损能力.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-08/2007-11在深圳市第二人民医院中心实验室和深圳市药品检验所动物实验室完成.材料:复合重组鼠血管内皮生长因子人工骨中含血管内皮生长因子约300 ng/cm3,能有效缓释约10 d.复合重组鼠骨形成蛋白人工骨中含骨形成蛋白约80 ng/cm3,能有效缓释约12 d.方法:将60只新西兰大白兔随机分为2组,在右前下肢中上段用钢锯切除一段2.0 cm带骨膜的桡骨后,分别植入复合血管内皮生长因子的纳米陶瓷人工骨(复合血管内皮生长因子组)和复合骨形成蛋白的纳米陶瓷人工骨(复合骨形成蛋白组).主要观察指标:在术后不同时期行组织切片并染色计算新生骨量及免疫组化血管染色测局部血管的数量.结果:在术后8周前,成骨体积、血管数均是复合血管内皮生长因子组>复合骨形成蛋白组,组织学切片发现在血管长入、骨生成、骨塑型等方面复合血管内皮生长因子组均略早于复合骨形成蛋白组.结论:血管内皮生长因子能明显促进纳米陶瓷人工骨的早期血管化和成骨,复合血管内皮生长因子的纳米陶瓷人工骨骨修复能力与复合骨形成蛋白的纳米陶瓷人工骨相当甚至略强.     

自身骨泥能否成为骨缺损或骨间隙修复的植骨材料:兔桡骨空白对照实验研究

目的探讨自身骨泥有无骨诱导活性及对长管状骨缺损修复的影响.方法22只兔骨泥股部肌肉内植入,24只兔做桡骨缺损模型,一侧骨泥回植、对侧空白对照;2周做ECT检查,术后不同时间取材摄X线片并做组织学检查及碱性磷酸酶(ALP)测定.结果肌袋植入侧1周软骨生长,3周网织骨形成;ALP水平2周最高;骨缺损骨泥植骨侧术后12周出现皮质骨及成熟的骨髓组织.对照侧骨不连形成.术后2周ECT检查,植骨侧的放射性计数明显高于对侧(P<0.05).结论长管状骨内固定产生的自身骨泥具有诱导成骨活性,可做为植骨材料.     

带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损临床研究

目的应用带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损,探讨其治疗效果及可行性。方法将26例骨缺损骨不连患者分为3组:第1组8例,采用带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损;第2组8例,采用Cem-OsteticTM人工骨浆植入;第3组10例,采用单纯自体骨植骨。结果均无毒副作用及异物反应等不良反应。第1组术后均达到骨折愈合优良,第2组有2例、第3组有1例愈合可,第2组有1例愈合差。结论带骨膜自体骨联合Cem-OsteticTM人工骨浆修复骨缺损有促进骨折愈合的作用,有临床应用价值。     

游离骨膜骨髓磷酸钙复合移植应用于膜引导性骨再生的实验研究

目的：将游离骨膜骨髓自固化磷酸钙(calcium phosphate cement，CPC)应用于膜引导性骨再生，为临床修复节段性骨缺损探索一条有效的途径。方法：实验兔28只，分成A，B两大组，每组14只，制造两侧兔桡骨中段10mm的骨缺损。A组一侧骨缺损用自体游离骨膜(free periosteum，FP)、骨髓(bone marrow，BM)和CPC复合移植修复(简称FPBMC组)，另一侧作为空白对照组。B组一侧用自体游离骨膜及吸附骨髓的明胶海绵修复(简称FPBM组)，另一侧用硅胶膜(silastic)及吸附骨髓明胶海绵修复(简称SBM组)。于术后第1，2，4，6，8，10，12周分别行双侧桡骨x射线检查及X射线影像评分。于术后第2，4，8，12周切取标本行组织学检查及成骨面积分析。结果：FPBMC组疗效最好，FPBM组及SBM组次之，空白对照组最差。结论：①FPBMC复合移植具有良好的成骨作用，可有效促进骨缺损的修复。②膜下间隙的保持是膜引导性骨再生顺利进行的条件。     

同种异体骨治疗良性骨肿瘤摘除术后骨缺损

[目的]观察同种异体骨治疗良性骨肿瘤摘除术后骨缺损的愈合情况.[方法]对分别发生在肱骨、桡骨远端、股骨粗隆部、股骨颈、股骨干、胫骨以及跟骨部位且确诊为骨囊肿、骨性纤维结构不良、非骨化性纤维瘤和内生软骨瘤等良性骨肿瘤的37例患者在肿瘤摘除后应用同种异体骨移植修复骨缺损.随访时间8个月至10年.[结果]36例临床愈合,1例骨不连.随访中1例已临床愈合的病人发生再骨折.[结论]同种异体骨治疗良性骨肿瘤摘除术后骨缺损疗效可靠,但一些影响移植骨愈合的因素仍需进一步研究.     

骨折预处理对兔骨髓来源间充质干细胞的影响

目的探讨骨折预处理对兔骨髓来源间充质干细胞（MSC）的影响。方法将10只兔按随机数字表法分为2组,每组5只。骨折预处理组截断兔股骨骨干后采用克氏针内固定,7 d后从另一侧股骨无菌抽取骨髓1～2 mL;对照组未进行任何处理。采用全骨髓贴壁法对2组兔进行骨髓来源的间充质干细胞的原代培养、酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察、细胞周期测定及MTT实验,研究骨折预处理对MSC的影响。结果骨折预处理后可较快地获得纯化的MSC,且MSC的增殖能力在P2、P3代时均高于对照组（均P〈0.05）;随着时间的延长,P4代时2组MSC增殖能力比较差异无统计学意义（P〉0.05）。对P4代进行细胞周期测定,骨折预处理组MSC中G0/G1期细胞为70.65%,对照组MSC中G0/G1期细胞为72.40%,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论骨折预处理全骨髓贴壁法可在更短的时间内成功地培养出稳定的MSC,并且该细胞具有更强的增殖能力。     

Bone marrow-derived mesenchymal cells can rescue osteogenic capacity of devitalized autologous bone

In clinical cases, many orthopaedists have been troubled with bone fragility, such as fractures after devitalization therapy for bone tumour, pathological fractures and metastatic tumours. The aim of this study was to determine whether loss of osteogenic capacity of devitalized autologous bones can be rescued using cultured bone marrow-derived mesenchymal cells. A devitalized bone model was produced from rat femur by irradiation and three groups were prepared: intact bone, irradiated bone and irradiated bone combined with cultured mesenchymal cells. Each bone was transplanted subcutaneously into a syngeneic rat. At 2 or 4 weeks after transplantation, biochemical analyses [alkaline phosphatase (ALP) activity and osteocalcin mRNA expression] and histological measurement were performed. Moreover, we verified the origin of newly formed bone, using the sex-determining region Y (sry) gene as a marker to distinguish between donor and recipient. In both intact bone and irradiated bone with mesenchymal cells, ALP activity and osteocalcin mRNA expression were detected and living osteoblasts together with newly formed bone were clearly seen histologically. Furthermore, analysis of the origin of de novo formed bone indicated that newly formed bone in irradiated bone with mesenchymal cells was derived from cultured bone marrow-derived mesenchymal cells. These results proved that the osteogenic capacity of devitalized autologous bone can be rescued using tissue-engineering techniques. This procedure should contribute to various clinical treatments, such as local metastatic tumours, pathological fracture after devitalization therapy and reconstruction after wide-margin tumour resection. The benefits would be applicable to all types of devitalized bone.     

骨髓抽吸-活检双标本一步法取材在骨髓转移癌诊断中的应用

本研究旨在探讨骨髓抽吸-活检双标本一步法取材在骨髓转移癌诊断中的价值。对我院46例骨髓转移癌患者采用骨髓抽吸-活检双标本一步法取材,同步分析骨髓穿刺涂片及骨髓活检组织切片结果。结果表明,骨髓抽吸-活检双标本一步法取材成功率95.7%。46例患者中45例(97.8%)骨髓活检组织切片中可观察到多少不等的成团、成簇的转移癌细胞,且可见形态异常改变。骨髓涂片中可观察到癌细胞团者占54.3%。转移癌患者骨髓活检中有不同程度的骨髓纤维组织增生,以轻中度增生为主。除食管癌中骨髓活检诊断阳性率为83.3%外,其余转移癌骨髓活检诊断阳性率为100%。骨髓涂片在卵巢肿瘤、胸椎肿瘤、肺癌、胃癌、乙状结肠癌、食管癌及不明原发灶转移癌中诊断阳性率分别为33.3%、50%、72.2%、60%、50%、33.3%和25%。骨髓活检诊断阳性率高于骨髓涂片。结论:骨髓抽吸-活检双标本一步法取材成功率高;骨髓活检在骨髓转移癌诊断方面优于骨髓涂片,将两者结合同步分析能提高诊断准确率。     

先天性小耳畸形颞骨HRCT诊断

目的：探讨先天性小耳畸形颞骨HRCT表现。方法：分析54例66耳先天性小耳畸形患者的颞骨HRCT影像，观察颞骨各部的异常表现。结果：64耳（97．0％）有骨性外耳道狭窄或闭锁；51耳（77．3％）鼓室狭窄或闭锁；58耳（87．9％）听骨链发育畸形或缺如；11耳（16．7％）卵圆窗缺如或部分缺如；3耳（4．5％）圆窗缺如；6耳（9.1%）内耳畸形；9耳（13．6％）面神经鼓室段走向异常；36耳（54．5％）面神经乳突段前移；20耳（30．3％）为高位颈静脉球；10耳（15．2％）表现为乙状窦前位；23耳（34．8％）中颅窝低位。结论：先天性小耳畸形颞骨HRCT多表现为骨性外耳道及鼓室的狭窄或闭锁、听骨链发育畸形或缺如、面神经乳突段前移，此外卵圆窗缺如或部分缺如、面神经鼓室段走向异常、高位颈静脉球、乙状窦前位、中颅窝低位亦不少见，而内耳畸形、圆窗闭锁少见。     

骨促结缔组织增生性纤维瘤的临床病理

  目的  探讨骨促结缔组织增生性纤维瘤的临床表现、病理形态特征及鉴别诊断要点。  方法  报告4例骨促结缔组织增生性纤维瘤并进行组织形态学、免疫组织化学研究, 结合文献对其临床表现、病理形态特点及鉴别诊断进行探讨。  结果  骨促结缔组织增生性纤维瘤病变由梭形细胞(纤维母细胞/肌纤维母细胞)构成, 背景是丰富的胶原纤维, 有程度不等的玻璃样变。细胞数量不等, 没有或仅有轻度的细胞不典型性和多形性, 少见核分裂象。  结论  骨促结缔组织增生性纤维瘤是一种罕见的良性骨肿瘤, 呈进行性、侵袭性, 有时复发。     

用胎骨 胎骨膜行骨移植手术的配合

采用中止中晚期妊娠胎儿的胎骨和胎骨膜行骨移植手术１４例，用于骨折延迟愈合、骨不连、骨缺损、良性骨肿瘤搔刮术后、恶性骨肿瘤早期刮除术后的患者，经随访均获满意效果。     

幼鼠废用性骨质戕主松症骨量与骨质量的相关实验研究

目的：建立并评价幼鼠废用性骨质疏松症实验模型。方法：20只4周龄SD雄性幼年大鼠。随机分为模型组与假手术组。8周后2组比较，采用骨量及骨质量的检测指标对幼鼠废用性骨质疏松症作出评价。结果：与模型组术侧比较，假手术组同侧胫骨骨矿含量。骨密度，骨小梁体积密度，股骨几何参灵敏以及结构力学性均不同程度高于模型组。结论：切断幼鼠坐骨神经可成功建立术侧废用性骨质疏松症，其不仅有骨量的减少而且有骨质量的退化。     

自体骨髓移植大量采髓的护理体会

采集骨髓是白体骨髓移植(ABMT)非常重要的环节。作阐述了自体骨髓移植大量采髓的术前用物准备、病员准备及骨髓采集、输注的护理，强调充分的移植前准备，确保全环境保护质量，把握好采髓过程中的关键：严格无菌技术操作；采髓过程中抽吸骨髓负压适度；盛入保养液内及取拿时避免剧烈震动以免破坏细胞；采舶时应确保输液通道藏畅，及时补充血容量，适时回输自体血，维护血液动力学稳定；严密监测T．P、R、BP，仔细观察病情变化，及时妥善处理。     

Mechanism of Bone Turnover

Bone remodelling is a cellular mechanism behind the bone turnover. It renews the old bone piece by piece and thus ensures the correction of possible microdamage and enables the regulation of mineral homeostasis. The basic mechanism of bone remodelling is similar in all types of bone and includes the resorption of old bone and the formation of equal amount of new bone at the same place. Histomorphometric studies have revealed the cellular details of remodelling and have shown that it is composed by the temporally and spatially regulated action of different bone cells and their precursors. Recent in vitro studies with osteoclasts and osteoblasts have increased our knowledge of the molecular mechanisms of bone remodelling. Molecular characterization of bone matrix proteins have suggested new functions to many of them and thereby increased our possibilities of understanding the local regulation mechanisms of remodelling. Bone matrix has been shown to contain several biologically active compounds which have effects on bone forming and resorbing cells and their precursors. Details of the functional mechanism of osteoclasts are also in the process of being discovered. However, several questions concerning bone remodelling still remain open: the molecular explanation for selection of the remodelling site; the coupling of bone resorption to formation, and the interactions between different cell types during the remodelling cycle.