Th17细胞在免疫性心肌炎中的作用机制

在经典的辅助性T细胞亚群Th1/Th2研究过程中,发现了一种新型的分化发育和功能特征显著不同的辅助性T细胞Th17。Th17细胞的分化发育依赖于局部微环境及特定细胞因子的作用,主要分泌效应分子白细胞介素(IL)17A/F和IL-22、IL-21。目前研究认为Th17与机体抗胞外菌感染和一些自身免疫疾病的关系密切,因此探索Thl7细胞的分化与调控将有助于认识其在抗感染免疫和自身免疫性疾病中的作用机制,也有利于自身免疫性疾病生物学治疗靶点的发现。     

辅助性T细胞17相关细胞因子与结肠癌的研究进展

辅助性T细胞17(T help 17cells,Thl7)是机体内存在的一种新型的不同于传统辅助性T细胞1(T help 1 cells,Thl)和辅助性T细胞2(T help 2 cells,Th2)的CD4+效应T细胞,该细胞是由初始T细胞前体分化而来,具有独立的分化和发育调节机制。活化的Th17细胞通过分泌白细胞介素(interleukin,IL)-17、IL-21、IL-22等细胞因子导致炎症和疾病的发生。Thl7细胞及其细胞因子在感染性疾病、自身免疫病以及移植排斥反应中发挥重要的作用,但在肿瘤免疫中的作用却知之甚少。目前已在人类多种恶性肿瘤组织及外周血中检测到Thl7细胞及其细胞因子的存在,关于Thl7细胞及其细胞因子在肿瘤发生发展中的作用,究竟是促进肿瘤还是抑制肿瘤仍存在较多争议,是近年来肿瘤免疫研究的热点。文中就Th17细胞并其相关细胞因子在肿瘤中的研究进展进行综述。     

Thl7细胞与结核性胸腔积液

Th17细胞是近年来发现的不同于Th1、Th2和调节性T细胞的一类特殊的新型CD4+T细胞亚群,通过分泌以白细胞介素17(IL-17)为主的一系列效应细胞因子参与多种慢性炎症反应和自身免疫性疾病。Th17细胞及相关细胞因子在结核性胸腔积液的免疫发病机制中起着非常重要的调节作用,因此探索Thl7细胞在结核性胸腔积液中的分化与调控将有助于认识其在疾病进展过程中的作用机制,也有利于生物学治疗靶点的发现。     

T-bet对Th1/Th2分化调节作用与恶性肿瘤的关系

T-bet是T-box基因家族的新型转录因子,选择性地表达于Th1细胞,能诱导干扰素γ的产生,在Th1细胞的分化中起决定性的作用。在生理条件下,机体Th1和Th2细胞的免疫功能处于动态平衡态,这种平衡的偏离,对肿瘤发生、发展有重要的影响。现已发现,肿瘤宿主体内Th1/Th2向Th2漂移,Th2优势状态与肿瘤的免疫逃逸密切相关。研究表明,将T-bet基因导入肿瘤细胞,可将Th2细胞逆转为Th1细胞,这将对肿瘤的免疫治疗具有重要的意义。     

转录因子T-bet/GATA-3对再生障碍性贫血免疫失衡的作用分析

目的 探讨外周血中 T-bet和GATA-3基因的表达在再生障碍性贫血（AA）的发病机制的意义。方法 采用流式细胞术检测23例AA患者和22例健康体检者外周血Th1和Th2,同时运用RT-PCR技术检测外周血单个核细胞（PBMCs）中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA基因表达。结果 与对照组相比,再障组的lg(T-bet/ -actin)和Th1(%)显著升高（P<0.05,P<0.01）,lg(GATA-3/ -actin)和Th2(%)显著降低（P<0.05,P<0.05）;SAA组的lg(T-bet/ -actin)、lg(GATA-3/ -actin)和Th1(%)、mAA组的lg(T-bet/ -actin)、Th1(%)明显升高（P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05）;SAA组的Th2(%)、mAA组的lg(GATA-3/ -actin)和Th2(%)显著降低（P<0.05,P<0.01,P<0.05）。结论 T-bet和GATA-3表达异常在AA发生、发展过程中发挥重要作用,可能机制为增强Th1细胞功能,抑制Th2细胞功能,导致患者免疫功能异常,最终引起再障发生。     

转录因子T-bet的诱导表达及调控与呼吸系统疾病的关系

转录因子T-bet是T-box家族的新型转录因子，含530个氨基酸，其中有1个189个氨基酸组成的能与T盒DNA结合的结构域；人类与小鼠T-bet存在88%的同源性。T-bet不仅控制Th1细胞特征性细胞因子IFN-γ的表达，而且抑制Th2细胞特征性转录因子IL-4的产生，因而被确认为Th1特异性转录因子，它能促进Th1型分化，在Th1细胞的分化中起着决定性的作用。     

银屑病患者皮损T-bet/GATA3表达的免疫组化研究

目的检测Th1/Th2细胞特异性转录因子T-bet/GATA3在寻常性银屑病患者皮损中表达,探讨T-bet/GATA3在银屑病发病机制中的作用及意义。方法采用免疫组化ABC法研究银屑病患者皮损中T-bet、GATA3表达,并以15例正常人作为对照组。通过图像分析技术进行定量分析。结果银屑病皮损中既可表达T-bet,又可表达GATA3,而在正常皮肤不表达。定量分析显示,皮损中T-bet表达水平显著高于GATA3(P<0.05)。结论T-bet/GATA3表达的失衡和T-bet高表达可能参与了银屑病发病过程。     

二期梅毒患者外周血Th1分化偏态性分析

目的探讨二期梅毒患者外周辅助性T淋巴细胞（Th）亚群的分化取向及其在梅毒发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测经三色荧光抗体染色的二期梅毒患者外周血CD4^＋／IFN-γ^＋（Th1）、CD4^＋ 1／IL-4^＋（Th2）、CD4^＋／IFN-γ^＋／IL-4^＋（Tho）细胞含量。结果梅毒组Thl细胞含量、Thl／Th2比值均明显低于正常对照组（P〈0．05），梅毒组存在Thl细胞分化偏态性。结论二期梅毒患者Th细胞亚群分化失衡，可能是机体不能完全清除T．p，造成T．p潜伏体内形成长期感染的关键因素。     

哮喘患儿转录因子T-bet/GATA-3 mRNA比值及其与Th1/Th2平衡间的关系

【目的】研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况,同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量,并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析,了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组,其中哮喘发作组显著低于缓解组（P〈0.05）;转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组（P〈0.05）。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组,其中哮喘发作组又显著低于缓解组（P〈0.05）;Th2细胞百分率显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组（P〈0.05）。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关（r=0.731）,与Th2细胞比率呈负相关（r=-0.685）;GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关（r=-0.692）,与Th2细胞比率呈正相关（r=0.717）;T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关（r=0.793）,与Th2细胞比率呈负相关（r=-0.639）,与Th1/Th2比值呈正相关（r=0.801）。【结论】哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调,与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关,可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。     

动态监测脓毒症患者辅助性T淋巴细胞亚群变化及其临床意义

目的:通过监测脓毒症患者外周静脉血中辅助性T淋巴细胞(Th)亚群的动态变化,评价患者的免疫状态及其与疾病的严重程度和预后的关系.方法:在患者被诊断为脓毒症后的第1、4、7、14、28天或出重症监护病房(ICU)及死亡前(将第28天或出ICU或死亡前作为最后一次)抽取外周静脉血,应用流式细胞仪检测细胞表面分子标记为CD3+和CD8-的T淋巴细胞中的白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ的含量,计算Thl、Th2百分率和Thl/Th2比值,判断外周血中的Thl/Th2漂移现象,并记录当天的急性生理和慢性健康状况评分Ⅱ(APACHE Ⅱ评分).结果:根据2011年美国危重病学会/欧洲危重病医学会/美国脚科医师协会/美国胸科协会/美国外科学会联席会议提出的脓毒症和重度脓毒症的诊断标准,本组22例患者中,脓毒症组9例,重度脓毒症组13例.重度脓毒症组总体的Thl百分率、Thl/Th2比值分别为(8.5±6.8)%、0.7±0.3,显著低于脓毒症组的(14.9±2.7)%,1.9±0.5(P值均<0.01);Th2百分率为(20.1±13.0)%,显著高于脓毒症组的(8.1±5.9)%(P<0.01),APACHEⅡ评分与Thl百分率(r＝-0.458,P<0.01),Thl/Th2比值(r=-0.439,P<0.01)呈负相关.重度脓毒症组患者人院第4天起Thl百分率及Thl/Th2比值随时间迁延呈下降趋势,Th2百分率呈上升趋势,与脓毒症组间的差异有统计学意义(P值均<0.01),结论重度脓毒症患者存在明显的Thl/Th2漂移现象.     

氯胺酮对离体人辅助T细胞分化的影响

目的:探讨氯胺酮对离体人辅助性T(Th)细胞分化和细胞内转录因子T-bet及GATA3活性的影响?方法:10例男性健康志愿者(20~45岁,BMI 15~25 kg/m2),分别采集空腹时外周静脉血20 ml,分离外周血单核细胞(PBMCs)?每份血样的PBMCs均随机加入佛波醇-十四酸酯-乙酸酯(PMA)25 ng/ml和离子霉素1 ?滋g/ml以及各种浓度(0?50?100?200 ?滋mol/L)的氯胺酮孵育4 h?然后测量Th细胞亚群百分数?上清液中的干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)的水平以及细胞内转录因子T-bet和GATA3的DNA结合活性?结果:在PMA和离子霉素刺激下Th1和Th2细胞计数?IFN-γ和IL-4水平均显著增加;在PMA和离子霉素刺激下,氯胺酮剂量依赖性降低Th1和Th2细胞计数?IFN-γ和IL-4水平,而增加Th1?Th2细胞计数的比值(Th1/Th2)和IFN-γ?IL-4的比值(IFN-γ/IL-4);同样经刺激后,细胞内T-bet和GATA3的活性显著增加;氯胺酮剂量依赖性降低T-bet和GATA3的活性,而增加T-bet与GATA3活性的比值(T-bet/GATA3)?结论:在PMA和离子霉素的刺激下,氯胺酮能够抑制Th细胞的分化,从而抑制各细胞因子的分泌,但Th1/Th2增加;氯胺酮增加Th1/Th2可能与调节增加T-bet/GATA3有关?     

丙泊酚对人离体Th细胞分化功能的影响

目的观察不同浓度的丙泊酚对离体辅助性T淋巴细胞（Th细胞）分化功能的影响。方法将人外周血与浓度分别为0、1、5、50μg/ml的丙泊酚溶液共同培养,采用三色免疫荧光标记和流式细胞术检测不同浓度丙泊酚组全血中Thl细胞及Th2细胞百分率,并计算Thl细胞与Th2细胞的比值（Th1/Th2）。结果浓度为50μg/ml时,丙泊酚明显增加Th1细胞百分率和Th1/Th2,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）,对Th2细胞的百分率影响不显著,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论丙泊酚能提高机体外周血中的Th1/Th2,有利于对抗围手术期的免疫抑制。     

再障小鼠骨髓淋巴细胞Th1/Th2细胞亚群漂移与转录因子T-bet和GATA-3的调控作用

目的:探讨再生障碍生贫血(再障)小鼠骨髓淋巴细胞的Th1/Th2细胞亚群的漂移与转录因子T-bet和GATA-3的调控作用.方法:建立再障小鼠模型,取再障和正常组小鼠骨髓淋巴细胞,在终浓度为15 mg/L植物血凝素(PHA)条件下培养,用双抗体夹心ELISA方法检测小鼠骨髓淋巴细胞培养上清Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4、IL-10水平;用RT-PCR技术检测小鼠骨髓淋巴细胞转录因子T-bet和GATA-3 mRNA表达强度.结果:再障小鼠IL-2、IFN-γ水平及转录因子T-bet mRNA表达显著高于正常组(P<0.01);而IL-4、IL-10水平及GATA-3 mRNA表达水平明显低于正常组(P<0.01).结论:再障小鼠出现Th细胞向Th1亚群漂移现象,导致机体Th1细胞的优势应答状态,从而诱导细胞毒性T淋巴细胞对造血干细胞的细胞毒作用,而T-bet表达增强与GATA-3低表达可能是再障Th1优势分化的重要原因.     

哮喘患儿转录因子T-bet/GATA-3 mRNA比值及其与Th1/Th2平衡间的关系

 【目的】 研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】 本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况，同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量，并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析，了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】 哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组，其中哮喘发作组显著低于缓解组（P<0．05）；转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组，哮喘发作组又显著高于缓解组（P<0．05）。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组，其中哮喘发作组又显著低于缓解组（P<0．05）； Th2细胞百分率显著高于正常对照组，哮喘发作组又显著高于缓解组（P<0．05）。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关（r＝0．731），与Th2细胞比率呈负相关（r＝-0．685）；GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关（r＝-0．692），与Th2细胞比率呈正相关（r＝0．717）；T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关（r＝0．793），与Th2细胞比率呈负相关（r＝-0．639），与Th1/Th2比值呈正相关（r＝0．801）。【结论】 哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调，与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关，可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。     

TIM-1与支气管哮喘

支气管哮喘是一种涉及Th1/Th2失衡的慢性气道过敏性疾病.Th2偏移是哮喘发病的主要原因之一.近年研究发现,T细胞免疫球蛋白和黏蛋白区域分子1(TIM-1)在调控哮喘发病过程中的T细胞活化及Th1/Th2分化中发挥重要作用,已成为当前研究热点之一.本文就TIM-1基因特点及其在支气管哮喘发病中的作用作一综述.     

儿童急性特发性血小板减少性紫癜转录因子的表达

目的：分析儿童急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）血中Thl／Th2特异性转录因子T-bet／GATA3mRNA的表达,可望揭示其部分发病机理。方法：选择急性ITP患儿发作期组30例,对照组20例。引入RT-PCR技术,测定血中T-bet和GATA3mRNA的表达。结果：①T-betmRNA的表达发作期组明显高于缓解期组和对照组,且缓解期组亦高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。②GATA3mR-NA的表达发作期组明显低于缓解期组和对照组,且缓解期组亦低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论：血中T-betmRNA增高,而GATA3mRNA降低,显示儿童急性ITP存在明显的Thl优势分化现象,且可能与转录因子T-bet和GATA3的调控作用有关;T-bet／GATA3与儿童急性ITP的发病有一定的关系。     

再生障碍性贫血患儿骨髓T-bet、GATA3蛋白和外周血细胞因子表达及意义

目的 检测调节Th1/Th2细胞分化的T-bet,GATA3蛋白在不同程度获得性再生障碍性贫血患儿骨髓中的表达,同时比较其治疗前外周血IL-2、IL-4、IFN-γ细胞因子水平,探讨获得性再生障碍性贫血的免疫病理机制.方法 将49例获得性再生障碍性贫血患儿根据临床表现分为非重型组和重型与极重型组.利用免疫组织化学方法检...     

卵巢癌患者外周血Th1/Th2及Treg/Th17细胞平衡关系

目的 探讨卵巢癌患者外周血中CD4+T细胞亚群:辅助T细胞(Th,包括Th1、Th2、Th17)及调节性T淋巴细胞(Treg)表达、平衡关系的变化,以及在卵巢癌发病机制中的作用.方法 流式细胞术检测30例卵巢癌疾病组及20例健康对照组外周血中Thl、Th2、Thl7、Treg表达占CD4+T细胞的百分率,并计算Th1/Th2、Th17/Treg的比值.结果 卵巢癌患者外周血中Th2、Th17及Treg亚群占CD4+T细胞的百分率明显高于健康对照组(P<0.05),而Th1百分率低于健康对照组(P<0.05),各亚群变化与临床分期相关,但与组织类型及细胞分化无关(P>0.05).卵巢癌组Th1/Th2比值降低,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),卵巢癌患者存在Th2方向极化;卵巢癌组Treg/Th17比值升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.05).结论 卵巢癌患者外周血中存在CD4+细胞亚群表达异常,存在Th1/Th2、Treg/Th17比值失衡,为卵巢癌临床免疫治疗提供理论支持.     

探讨沉默信号转导与转录激活因子-4及细胞因子信号负调控因子-3对辅助性T细胞分化的影响

目的 探讨沉默信号转导与转录激活因子4(STAT4)及细胞因子信号负调控因子-3(SOCS3)后对白细胞介素(IL)-12及IL-4诱导的辅助性T(Tn)淋巴细胞分化中的影响以及对于Th1及Th2细胞亚群分泌细胞因子的影响.方法 以IL-12和IL-4分别诱导初始Th细胞(Th0细胞)分化为Th1或Th2细胞;通过RNA干扰技术分别沉默ThO,Th1和Th2细胞中的STAT4和SOCS3的表达,然后继续给予相应的IL-12或IL-4刺激培养细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附分析(ELISA)分别检测Th1/Th2特异性细胞因子的mRNA及蛋白质的变化,通过比较沉默前后Th1/Th2细胞特异性细胞因子量的变化以评价沉默STAT4或SOCS3对于Th0细胞分化方向的影响以及对Th1/Th2细胞分泌细胞因子的影响.结果 沉默STAT4使Th0和Th1细胞的Th1型细胞因子明显减少,而Th0和Th2细胞的Th2型细胞因子增多;沉默SOCS3后,Th0,Th1和Th2细胞的Th1及Th2型细胞因子均无明显改变.结论 STAT4介导IL-12诱导的Thl分化、维持Th1细胞分泌细胞因子,并推测其可能具有直接抑制Th2分化的作用;而SOCS3在IL-12及IL-4诱导的Th0细胞分化中不具有关键性作用.