紫外辐射对白血病HL-60细胞增殖的影响

目的 探讨不同方案紫外线(UV)照射对白血病HL-60细胞增殖的影响,寻找合适的UV照射方法和照射量。方法 以HL-60细胞株为研究对象,并设置对照组和UV照射组(简称UV组),对照组为不接受UV照射的HL-60细胞,UV组细胞用波长为254 nm的UV照射,照射量分别为2 m Joules(m J)、6 m J、10 m J和15 m J;将UV组和HL-60对照组细胞置于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,用台盼蓝染色法测定各组细胞的死亡率。结果 未接受照射的对照组HL-60细胞增殖未受影响,未出现明显凋亡;用2~10 m J UV照射1次,可对HL-60细胞的增殖产生抑制,细胞部分凋亡;经15m JUV照射1次或2~10 m J照射2次(每次间隔5 d),多数HL-60细胞出现裂解或细胞完全死亡,不能再恢复增殖;10 m J组细胞UV照射1次后第1天开始出现死亡,细胞死亡率在照射后第3天达最高值,随着培养的继续,细胞死亡率逐渐降低,照射后第3天细胞死亡率与其他时间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 UV照射对HL-60细胞具有显著的杀伤效果,与高剂量UV照射治疗相比,较低UV照射剂量的重复照射也能杀伤HL-60细胞,诱导HL-60细胞的死亡。     

炔类黄酮对白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响

在体外设定的不同浓度梯度和作用时间，以炔类黄酮分别作用于白血病HL-60细胞，倒置相差显微镜观察细胞形态学变化；MTT法检测细胞生长抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率；琼脂糖凝胶电泳（DNA ladder）检测染色体DNA断裂情况。发现实验组细胞出现皱缩、黏附性降低、染色体凝集和边集现象；细胞生长受到明显抑制；细胞凋亡率为29．74％；DNA Ladder可见明显梯形条带。提示炔类黄酮对HL-60细胞具有显著的抑制增殖及诱导凋亡作用。     

三氧化二砷对肝癌细胞增殖的影响

为探讨三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用 ,应用台盼蓝拒染法、MTT比色法及细胞克隆形成试验 ,研究As2 O3 对肝癌细胞的增殖抑制和细胞毒作用。结果发现As2 O3 能显著抑制肝癌细胞的生长 ,5 μmol/LAs2 O3 抑制程度明显强于 1μmol/L。 5 μmol/L和 1μmol/LAs2 O3 作用后细胞克隆形成率分别为 1.5± 1.2 %和 12 3± 2 .2 % ,明显低于对照组的 30 .0± 4.2 % (P <0 .0 1)。As2 O3 对肝癌细胞有较强的细胞毒作用 ,且呈显著剂量和时间依赖性。其对于肝癌细胞的杀伤率高于 5 氟脲嘧啶 ( 5 FU )和丝裂霉素 (MMC) ,但无显著差异。As2 O3 与 5 FU及MMC存在协同效应 ,联合应用 ,对肝癌细胞的杀伤率明显升高。说明As2 O3 具有明显的抑制肝癌细胞增殖的作用 ,有必要进一步探讨其对肝癌的治疗价值     

三氧化二砷对人髓性白血病HL-60细胞作用机制

目的：为临床治疗提供实验依据；方法：用MTT方法检测了不同浓度的三氧化二砷（As2O3）对人髓性白血病HL－60细胞的生长抑制作用。结果：As2O3对HL－60细胞的抑制作用主要发生于一定浓度［（1～5）×10－5M）］和一定时间（24h内），在此期间形态学出观凋亡小体，DNA电泳可见典型的梯状带，流式细胞学分析出现亚二倍体峰；且发现低浓度的As2O3（10－6～10－7M）对HL－60细胞有诱导分化作用，As2O3对耐维甲酸的HL－60细胞亚系仍有诱导凋亡及分化作用。结论：As2O3主要通过诱导凋亡而使HL－60细胞死亡，低浓度也有诱导分化作用，且与维甲酸之间无交叉耐药性。     

三氧化二砷对HL-60细胞活性及NF-κB表达的影响及意义

收集1．0、2．5、5．0mmol／L三氧化二砷（ATO）体外作用48h后的急性髓系白血病细胞株（HL-60细胞），MTT法分析细胞活性，RT-PCR法检测NF-κB基因表达水平。结果HL-60细胞均有明显凋亡；1．0μmol／LATONF-κB表达上调，2．5μmol／LATO作用后NF-κB基因表达明显降低，5．0μmol／LATO作用后细胞数减少，未作NF-κB检测。认为ATO可促进HL-60细胞凋亡；NF-κB活性高表达对HL-60细胞凋亡起一定作用；临床应用ATO时应注意用量，保证有效药物浓度。     

三氧化二砷对HL-60细胞活性及NF-кB表达的影响及意义

收集1.0、2.5、5.0 mmol/L三氧化二砷(ATO)体外作用48 h后的急性髓系白血病细胞株(HL-60细胞),MIT法分析细胞活性,RT-PCR法检测NF-кB基因表达水平.结果 HL-60细胞均有明显凋亡;1.0 μmol/L ATO NF-кB表达上调,2.5 μmol/L ATO作用后NF-кB基因表达明显降低,5.0 μmol/L ATO作用后细胞数减少,未作NF-кB检测.认为ATO可促进HL-60细胞凋亡;NF-кB活性高表达对HL-60细胞凋亡起一定作用;临床应用ATO时应注意用量,保证有效药物浓度.     

三氧化二砷对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的试用三氧化二砷(As2O3)以提高胰腺癌的疗效。方法分别比较对照组和As2O3组裸鼠原位胰腺癌模型肿瘤体积、细胞增殖指数和细胞凋亡率。结果As2O3组肿瘤体积较对照组缩小31.2%。胰腺癌细胞增殖指数对照组为(21.05±2.18)%,As2O3组为(10.03±2.86)%(P<0.05);胰腺癌细胞凋亡率对照组(4.7±1.4)%,As2O3组(13.4±1.8)%(P<0.05)。结论As2O3体内能显著抑制胰腺癌的生长,其机制与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

三氧化二砷对人骨肉瘤U2-OS细胞增殖和周期的影响

目的观察三氧化二砷（As2O3）在体外对人骨肉瘤U2-OS细胞增殖及周期的影响。方法将对数生长期人骨肉瘤U2-OS细胞分为两组,实验组分别加入0.51、.01、.5μmol/L As2O3,阴性对照组加入同体积培养液,阳性对照组加入5-Fu 15 mg/L,采用MTT比色法检测各组24、48、72 h增殖抑制率,流式细胞仪检测48 h后细胞周期变化。结果各浓度的As2O3对骨肉瘤U2-OS细胞均具有抑制增殖作用,且呈剂量和时间依赖性;随着As2O3浓度的升高,细胞周期发生S期阻滞,与正常对照组相比有统计学差异（P〈0.05）。结论 As2O3能抑制骨肉瘤U2-OS细胞增殖,其机制可能为使细胞发生S期阻滞。     

1,25-二羟基维生素D3和维生素K2联合诱导HL-6O细胞分化及凋亡的研究

目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3,简称D3]与维生素K2(VK2)联合应用对HL-60细胞分化及凋亡的影响.方法通过四唑氮蓝(MTT)比色,细胞形态,流式细胞仪(FCM)测定细胞周期、凋亡率及CD14的表达,观察D3、VK2对HL-60细胞的影响.结果D3与VK2都能抑制HL-60细胞增殖,并且联合使用抑制作用显著.10-8mol/L D3与10 μmol/L VK2联合处理HL-60细胞72 h后CD14的表达率为63.15%,且G0/G1期细胞显著增多,与单独一种比较差异有统计学意义(P＜0.05).10 μmol/L、20 μmol/L VK2作用于HL-60细胞72 h凋亡率分别为11.31%、20.36%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);而10 μmol/LVK2与10-8 mol/L D3联用72 h细胞的凋亡率为5.41%,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论D3与VK2联合使用可以使D3诱导分化作用加强,而VK2诱导凋亡作用受到抑制.     

维生素K2对成骨细胞增殖和分化的影响

目的探讨维生素Ｋ２对体外培养的新生大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法从新生大鼠颅骨分离出成骨细胞，采用细胞计数、３Ｈ－胸腺密啶核苷掺合试验、放免法测定细胞内骨钙素（ｂｏｎｅγ－ｃａｒｂｏｘｙｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＧＰ）浓度，观察维生素Ｋ２对成骨细胞的影响。结果实验中加入维生素Ｋ２１０－５、１０－６、１０－７及１０－８ｍｏｌ／Ｌ，成骨细胞生长数量分别为２８×１０５、２６×１０５、２９×１０５及３０×１０５／ｍｌ，ＢＧＰ分别为３８．１２±６．４７、４６．６５±４．５９、３４．３８±５．２２及３２．２２±４．８６ｎｇ／１０６细胞；而对照组为３２×１０５／ｍｌ及１９．９２±３．６７ｎｇ／１０６细胞。表明维生素Ｋ轻度抑制成骨细胞增殖，但可明显增加ＢＧＰ的含量。结论维生素Ｋ有望作为治疗骨质疏松的新药物。     

茶多酚对H_2O_2诱导HL-60细胞癌基因表达的影响

目的　观察茶多酚对 H2 O2 诱导 HL- 60细胞癌基因表达的影响 ,同时观察细胞 DNA片段化程度的变化。方法　用二苯胺法对小片段 DNA进行分析 ,流式细胞仪观察癌基因表达变化。结果　 H2 O2 打断 DNA的能力与其作用浓度及时间有关 ,H2 O2 可使细胞 c- fos,c- jun,c- myc,bcl- 2 ,p53表达发生变化 ,茶多酚可以影响 H2 O2 诱导的 DNA损伤及癌基因表达。结论　茶多酚在一定浓度下 ,可以抑制 H2 O2 诱导的 DNA氧化损伤 ,并抑制癌基因表达的变化。高浓度茶多酚可以增强 H2 O2 的效应     

高剂量维生素K2对大鼠主动脉钙化的影响

目的 研究高剂量维生素K2(Vit K2)对华法令(Warfarin,WFN)诱导大鼠主动脉钙化的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组、6周(W)钙化组、6W钙化+6W正常饲料组、12W钙化组及6W钙化+6W Vit K2组。用Von Kossa染色法检测胸主动脉组织中钙结节,测定颈总动脉组织中的钙沉积含量及检测血清中碱性磷酸酶的活性。结果 WFN干预12周期间动脉中钙沉积含量呈线性增加（P<0.01）。6W钙化+6W Vit K2组钙沉积含量与6W钙化组相比减少39%（与12W钙化组相比减少60%,P<0.01）,治疗后主动脉钙化约40%的预成型的钙盐被移除。6W钙化+6W Vit K2组碱性磷酸酶的活性与6W钙化组、12W钙化组比较均明显降低（P<0.01）。结论 高剂量的Vit K2对大鼠主动脉钙化具有抑制和（或）逆转的作用。     

硝苯地平联合维生素K1治疗小儿喘息性疾病60例观察

小儿喘息性疾病包括毛细支气管炎（毛支）儿童哮喘和部分支气管肺炎,主要表现为呼气相通气功能障碍。2005年1～12月,我科采取硝苯地平联用维生素K1治疗小儿喘息性疾病60例,疗效满意。现报告如下。     

三氧化二砷对类风湿关节炎滑膜细胞增殖及分泌作用的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对体外培养的RA滑膜成纤维细胞的增殖及分泌功能的影响.方法 体外培养RA滑膜成纤维细胞,用含As2O3浓度分别为0、0.5、2、5 μmol/L的培养液分别作用于培养细胞,24 h后检测上清液TNF-α和IL-1的水平;采用TUNEL法和流式细胞仪测定细胞增殖情况.结果 As2O3作用组TNF-α及IL-1水平均较对照组降低(P<0.05),随浓度梯度的增加作用增强.TUNEL法检测细胞增殖,As2O3作用第3天后各实验组均明显低于对照组(P<0.05),且其作用呈剂量依赖性.滑膜细胞细胞周期在As2O3作用组均与对照组有明显差异,其变化亦呈剂量依赖性.结论 As2O3可促进RA滑膜B型细胞增殖,抑制TNF-α及IL-1的表达.     

维生素K2对老年去卵巢大鼠血管钙化的影响

目的在老年去卵巢大鼠模型上探讨维生素K2对血管钙化的影响。方法 36只10个月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组、去卵巢组、去卵巢+维生素K2组。去卵巢手术后3周,去卵巢+维生素K2组给予维生素K2灌胃30 mg/kg,每周5次,持续12周。各组大鼠在术前及药物干预后每3周留取血清及尿液,18周后处死大鼠,HE染色观察子宫、血管组织变化,酶联免疫吸附法检测血清和尿液基质Gla蛋白(MGP)含量及雌激素水平变化,荧光实时定量PCR检测胸主动脉MGP mRNA的表达,免疫组织化学法观察血管未羧化MGP(ucMGP)的表达,Von Kossa染色观察动脉钙化,原子分光光度计测定血管总钙含量。结果去卵巢后大鼠子宫和血管组织切片呈现明显不同,血中雌激素水平下降,表明去卵巢大鼠模型构建成功。去卵巢前各组大鼠血清及尿液中MGP含量无明显差异(P>0.05);去卵巢后,假手术组MGP含量无明显变化,去卵巢组MGP含量下降,去卵巢+维生素K2组MGP含量先下降后上升。去卵巢+维生素K2组血管中MGP mRNA表达量较假手术组高(P<0.01),较去卵巢组低(P<0.01)。血管ucMGP表达出现在血管钙化周围区域,去卵巢+维生素K2组未见明显ucMGP的表达。去卵巢+维生素K2组血管总钙含量明显低于去卵巢组(P<0.01),高于假手术组(P<0.05)。结论 MGP在绝经后血管钙化的发病中有重要作用,维生素K2可能通过调节MGP羧化及基因表达抑制血管钙化。     

原花青素对HL-60细胞分化及凋亡的影响

目的探讨原花青素(PAC)对HL-60细胞增殖、诱导分化及凋亡的影响。方法 HL-60细胞经不同浓度的PAC作用相应时间后,用CCK-8法检测细胞生长状况,分析PAC对HL-60细胞增殖抑制;Wright染色,光学显微镜观察细胞形态变化;通过流式细胞仪检测分析细胞周期变化和测定髓系较成熟阶段细胞分化抗原CD14、CD11b的表达。结果用不同终浓度PAC在体外与HL-60细胞共培养,细胞抑制率随浓度增加而明显增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中浓度为20 mg/L的PAC作用HL-60细胞24 h,增殖抑制率为(72.3±1.8)%,高浓度PAC与HL-60体外培养72 h,部分细胞死亡;20 mg/L的PAC诱导HL-60细胞24 h,少数细胞出现核凹陷变形,作用48 h部分细胞分化为较成熟阶段细胞,40 mg/L的PAC作用HL-60细胞48 h,细胞出现凋亡改变;20 mg/L的PAC诱导HL-60细胞24 h,细胞周期G0/G1期百分比明显增高,S期细胞数明显减少,而40 mg/L的PAC作用HL-60细胞24 h,细胞周期G2/M期细胞百分比明显增高,并出现凋亡峰。20 mg/L的PAC诱导HL-60细胞24 h,流式细胞检测髓系细胞分化抗原CD14表达明显增高,CD11b表达稍增高。结论 PAC能抑制HL-60细胞增殖,低浓度PAC诱导其分化为较成熟阶段细胞,高浓度PAC则可能诱导HL-60细胞发生凋亡。     

猪苓多糖对HL-60和K562癌细胞株的诱导分化作用

猪苓多糖是由中药猪苓中提取的一种多糖,研究证实其具有抑制肿瘤生长和增强肿瘤患者机体免疫功能的作用,与化学药物伍用可增强疗效和减轻副作用。2002年12月至2003年9月,我们观察了猪苓多糖对HL-60、K562癌细胞株的体外诱导分化作用。现将结果报告如下。     

三氧化二砷对培养的兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的研究中药三氧化二砷(As2O3)对兔血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及迁移的影响。方法采用四氮唑蓝(MTT)还原反应和3H-TdR掺入率观察该药对细胞增殖和DNA合成的影响;相差显微镜下测量细胞迁移。结果As2O3对VSMC增殖具有抑制作用,作用呈剂量及时间的依赖性;随着As2O3浓度增加体外培养的VSMC迁移距离缩短。结论适宜浓度的As2O3可明显抑制体外培养的兔VSMC的增殖、迁移。     

维生素A对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

目的观察维生素A对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测5、7．5、10、15μg／ml维生素A处理后的人宫颈癌Caski细胞的增殖抑制率;采用流式细胞术检测维生素A处理后的Caski、Siha、Hela细胞的细胞周期,荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位;TUNEL法检测维生素A处理后Caski细胞的凋亡情况。结果5、7．5、10、15μg／ml维生素A处理24h后的Caski细胞增殖抑制率分别为32．1％±2．6％、47．3％±1．1％、66．4％±2．1％、70．8％±2．7％,处理48h后分别为38．3％±2．8％、52．6％±3．1％、72．5％±2．4％、80．0％±4．9％,其增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性（P均〈0．05）;维生素A处理后,Caski、Siha、Hela细胞G0／G1和G2／M期细胞数量明显减少,S期细胞增多,细胞内线粒体电位分别为2．21±0．29、2．05±0．35、2．38±0．22,与处理前的0．32±0．08、0．24±0．15、0．41±0．06相比,P均〈0．05;维生素A处理后Caski细胞发生凋亡。结论维生素A可抑制宫颈癌细胞增殖,并诱导其凋亡。