谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤的作用

 目的：探讨谷氨酰胺对大鼠缺血再灌注肠黏膜的作用及其可能机制。方法：成年雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组（sham组）、缺血再灌注损伤组（I/R组）和谷氨酰胺治疗组（Gln组）。Gln组给予谷氨酰胺1 g·kg-1·d-1连续灌胃7 d。Sham组和I/R组以同等剂量生理盐水灌胃7 d。Sham组仅分离肠系膜上动脉（SMA）而不夹闭根部。I/R组和Gln组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部,30 min后放松血管夹形成再灌注损伤模型。各组大鼠均于制模后24 h采集静脉血和回肠标本。检测血清D-乳酸、内毒素、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平,HE染色法观察肠组织病理损伤情况。结果：I/R组的D-乳酸、内毒素、MDA水平和Chius病理评分均高于sham组和Gln组（P<0.05）,血清SOD活力均低于sham组和Gln组(P<0.05)。结论：谷氨酰胺对缺血再灌注损伤的肠黏膜屏障具有保护作用,其机制可能与抗氧化应激反应有关。     

缺血预处理对大鼠肥大心脏缺血再灌注损伤的影响

本实验用一氧化氮合成抑制剂－左旋硝基精氨酸复制大鼠高血压心脏肥大模型并作缺血再灌注处理，以观察缺血预处理对高血压肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及ＮＯ在其中的作用。结果显示：ＩＰＣ能减轻大鼠高血压有肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤，其程度与ＩＰＣ对正常心脏Ｉ／Ｒ损伤的保护相近，表明高血压肥大心脏同样具有ＩＰＣ保护现象，但ＮＯ在本模型中未起作用。     

缺血后处理减轻大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤及其微循环机制研究

目的：观察缺血后处理(I-postC)对大鼠后肢骨骼肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响，并探讨其微循环机制。方法:健康雄性Wistar大鼠48只，随机分为I/R组、I-postC组和预处理(IPC)组(n=16)，无创动脉夹夹闭股动脉4 h，松夹再灌注12 h或24 h建立大鼠后肢I/R模型。于再灌注结束时分别检测大鼠胫前肌血氧饱和度(StO₂)、血流量、微循环以及血流动力学变化，并测定骨骼肌湿干重比值(W/D)，观察骨骼肌超微结构变化。结果:(1) I-postC 12 h组W/D较I/R 12 h组低6.7% (P＜0.05)，骨骼肌肌原纤维水肿、溶解、分离和线粒体空泡样变性显著减轻；再灌注24 h I-postC组左室压最大下降速率(-dp/dtmax)较I/R 24 h组高10.46%(P＜0.05)，与IPC组无显著差异。(2)再灌注24 h I-postC组实验侧细静脉血流速度较I/R组高11.3% (P＜0.05)，细动、静脉收缩减轻(细动、静脉内径较I/R组分别高39.8% 和24.1%，P＜0.01)，与IPC的保护效果接近(P＞0.05)。结论:I-postC显著减轻骨骼肌I/R损伤，其保护机制与改善微循环有关。     

核黄素预处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤

目的: 探讨核黄素对肝缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法: 将24只SD大鼠随机分为3组,每组8只。假手术对照组(sham组)和缺血再灌注组(I/R组)大鼠喂以正常饲料,核黄素预处理组(R+I/R组)大鼠补充核黄素。喂养4周后,阻断大鼠肝门1 h,再灌注1 h建立I/R模型。术后采血并收集肝脏标本,分别检测血清及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平和血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;蛋白印迹法检测肝组织血红素加氧酶-1(HO-1) 表达情况;HE染色观察肝组织病理学改变。结果: 与sham组比较,I/R组大鼠血清AST、ALT活性及MDA水平均明显升高,SOD活性显著降低(P<0.01);肝组织中SOD活性亦明显下降(P<0.01),MDA水平及HO-1蛋白表达则显著增高(P<0.05)。而R+I/R组较I/R组大鼠血清AST、ALT活性及MDA水平均明显下降,SOD活性显著增强(P<0.01);肝组织中MDA水平亦明显降低,SOD及HO-1蛋白表达显著增高(P<0.01)。组织切片显示I/R组大鼠肝细胞肿胀,炎症细胞浸润,小叶结构紊乱;R+I/R组大鼠肝细胞仅轻度肿胀,几乎无气球样变,小叶结构清晰。结论: 核黄素预处理对缺血再灌注肝脏具有显著的保护作用,其作用机制可能与核黄素通过降低MDA水平、提高SOD活性及HO-1蛋白表达,增强肝脏的抗氧化能力,减轻脂质过氧化反应有关。     

缺血预处理通过抑制铁死亡减轻大鼠肺缺血-再灌注损伤

目的：探讨铁死亡是否参与大鼠肺缺血-再灌注损伤（LIRI）,以及缺血预处理（I-pre-C）是否通过抑制铁死亡而减轻LIRI。方法：将SPF级雄性SD大鼠随机分成4组：对照组（control组）,缺血-再灌注（IR）30 min组（IR组）、铁死亡抑制剂去铁胺（DFO）组（IR+DFO组）和I-pre-C组,进行指标检测及肺脏病理观察。使用光镜、电镜和二氢乙啶（DHE）染色等评估大鼠肺组织的损伤程度;Western blot等方法检测缺血-再灌注肺组织铁死亡的相关指标。结果：与control组相比,IR组肺组织的活性氧（ROS）水平升高,丙二醛（MDA）和Fe水平升高,谷胱甘肽（GSH）水平下降,铁死亡相关蛋白酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)和转铁蛋白受体1(TFR1)水平升高,铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)下降（P<0.01）;与IR组相比,IR+DFO组肺组织的ROS水平显著下降,铁死亡的线粒体形态有所改善,MDA水平下降,GSH水平上升（P<0.01）;与IR组相比,I-pre-C明显改...     

缺血预处理通过抑制白三烯C4生成减轻大鼠肝缺血再灌注损伤

 目的：研究缺血预处理（IP）减轻大鼠肝脏缺血再灌注（I/R）损伤是否涉及前炎症因子白三烯C4(LTC4)。方法：健康成年雄性SD大鼠随机分为3组(每组6只)。I/R组： 采用大鼠部分（70%左右）肝脏缺血60 min再灌注5 h模型,缺血前15 min开始至复灌5 h经颈外静脉输注生理盐水（3 mL·kg-1·min-1）;假手术组：只麻醉开腹,不阻断肝脏血流;IP组：在I/R前先阻断肝左、中叶血流10 min,然后开放血流10 min,余步骤同I/R模型组。应用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）检查肝组织LTC4含量,同时生化检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性和肝组织谷胱甘肽（GSH）含量,以及HE染色法检查肝组织学损伤。结果：肝脏IP处理完全逆转了再灌注5 h所致肝组织LTC4含量增加（P<0.05）;同时增加肝组织GSH含量,明显降低血清ALT和AST活性（P<0.05）,并减轻肝脏组织结构损伤。结论：IP处理减少肝脏I/R期间LTC4堆积,同时伴随血清肝酶释放减少和肝组织结构损伤降低,以及保护肝组织氧化还原状态,表明IP的有利影响可能涉及其在肝脏I/R损伤期间抑制LTC4生成。     

肠缺血再灌注损伤的防治研究

<正>缺血再灌注损伤(Ischemia-Reperfusion Injury,IRI)是指在缺血基础上恢复血流后,不仅未减轻原有组织的缺血性损伤,反而使其功能障碍或结构损伤进一步加重的现象。肠道是对缺血反应最敏感的组织之一,严重创伤、失血等原因均可引起肠缺血再灌注损伤(Intestinal Is-chemia-Reperfusion Injury,IIRI)。研究发现     

失血性休克大鼠早期肠黏膜缺血/再灌注损伤的形态学研究

目的:观察动物缺血/再灌注损伤(I/R)早期肠黏膜屏障的形态学变化.方法:在建立大鼠失血性休克模型的基础上,通过放血和输入生理盐水的方法,输注所放出血液2倍以上的生理盐水供动物休克后复苏,复苏后0h、1h、3h、6h、12h、24h观察其肠黏膜标本在显微镜下病理改变及肠黏膜上皮损伤指数等指标.结果:①I/R过程可造成肠黏膜屏障损伤,表现在复苏0h可见回肠绒毛水肿,片状坏死、脱落及黏膜萎缩,黏膜损伤以1h和3h明显,其损伤指数分别为2.8和2.6,损伤的黏膜6h后开始重建,24h重建基本完成;②结肠黏膜上皮水肿、脱落,伴有中性粒细胞浸润及杯状细胞脱颗粒,但其损伤指数明显小于回肠.结论:失血性休克早期的肠I/R后可造成肠黏膜屏障损害,但肠黏膜具有强大的重建潜能;早期的重建只是肠黏膜上皮细胞间连续性建立,其黏膜仍进行性萎缩;结肠较回肠更耐受I/R打击.     

缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响,以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只,分３ 组,每组８ 只,即假手术对照（ＳＣ）组;缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化,多道记录仪测量心功能指标,透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ,心肌超微结构损伤严重,左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时,心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ,Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上,而且对心肌间质也有重要的保护作用。     

缺血预处理对大鼠压疮缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的比较不同缺血处理方法对大鼠皮肤及皮下组织的保护作用,为临床判断压疮损伤的程度及压疮干预效果提供理论依据。方法将60只SD大鼠随机分为对照组（S组）、缺血再灌注组（RI组）和缺血预处理组（IPC组）,每组20只．建立大鼠压疮缺血再灌注损伤处理模型,通过肉眼观察受压程度,检测血清氧自由基的水平,以判断压疮缺血再灌注损伤程度。结果RI组和IPC组大鼠出现I期压疮的发生率为100％。IPC组血清一氧化氮、丙二醛含量高于S组,明显低于RI组．超氧化物歧化酶活性低于S组,明显高于RI组。结论缺血预处理对压疮缺血再灌注损伤具有保护作用。     

再灌注前干预肥大细胞功能对大鼠肠缺血再灌注后早期肝损伤的影响

 目的：探讨肠缺血后再灌注前干预肥大细胞功能对SD大鼠继发肝脏损伤的影响及机制。方法：35只大鼠随机分成5组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血再灌注＋色甘酸钠组（IR+C组）、缺血再灌注＋酮替芬组（IR+K组）和缺血再灌注＋compound 48/80 组（IR+CP组）。复制大鼠肠缺血再灌注模型,IR+C、IR+K和IR+CP组分别在再灌注前5 min经尾静脉给予相应药物,S和IR组给予等量生理盐水。再灌注4 h后处死大鼠,观察各组肝脏病理变化及评分,测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性和组胺含量,检测肝脏乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素8（IL-8）水平。结果：与S组相比,IR组肝脏病理损伤明显（P<0.05）,血清ALT、AST水平、组胺含量、肝LDH活性、MDA、TNF-α、IL-8水平升高,SOD活性减弱（P<0.05）。与IR组相比,IR+C和IR+K组肝脏损伤减轻,以上指标呈相反趋势（P<0.05）,IR+CP组则加重肝损伤及恶化检测结果（P<0.05）。结论：再灌注前抑制肥大细胞功能可以减轻肠缺血再灌注后早期肝脏损伤,其机制可能与组胺释放、氧化损伤和炎症反应有关。     

他米巴罗汀减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨他米巴罗汀(Am80)对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIR)的作用。方法将大鼠随机分为:假手术组(sham)、模型组(I/R)和他米巴罗汀干预组(Am80,灌胃给予Am80 6 mg/kg)。采用线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。术后24 h断头取脑,在处死前采用双盲法进行神经行为学评分;TTC染色测定脑梗死体积;Western blot和RT-q PCR法分别检测RARα、Bcl-2和Bax蛋白及mRNA的表达。结果 Am80可显著改善MCAO大鼠神经功能缺损,有效地降低脑梗死体积(P0.01),上调RARα和Bcl-2表达(P0.01),降低Bax的表达(P0.01)。结论他米巴罗汀对脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用,其作用可能与抗凋亡有关。     

苦参素降低大鼠肾脏缺血-再灌注损伤

目的观察苦参素的抗大鼠肾缺血再灌注损伤的作用并从抗氧化方面探讨其机制。方法用双肾肾蒂夹闭45 min建立IRI模型,将SD大鼠随机分为假手术组(sham);缺血再灌注组(I/R);苦参素治疗组(oxymatrine+I/R)。苦参素治疗组又分为高、中和低3个剂量组,在缺血再灌注前,连续7 d经腹腔注射。用自动生化仪测定血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,观察苦参素对肾缺血再灌注的保护作用及确定最优剂量;以最优剂量干预用分光分析法测定肾组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果不同剂量组均能明显减轻肾脏IRI的病理形态学改变,改善肾功能。与I/R组相比,再灌注72 h后,MDA水平,血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平明显降低(P<0.05);苦参素治疗组的CAT、T-SOD、GSH-Px活性改善明显(P<0.05)。苦参素无体外抗氧化作用。结论苦参素对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,作用机制可能与调控机体的抗氧化系统有关。     

小鼠急性缺血-再灌注肾损伤模型的建立及体会

目的观察应用小鼠制备急性缺血-再灌注性肾损伤模型的效果。方法应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性缺血-再灌注肾损伤模型,其中两组分别于术后24h和48h后处死观察肾功能及肾脏病理变化,另一组观察其病情及存活情况14天。结果各次造模成功率均达85%以上;术后24h及48h实验组血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组肾脏外观出现典型"大白肾"表现,镜下出现典型急性肾小管坏死表现,并有较多炎症细胞浸润,肾小管组织学评分与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.01);实验组在观察期间逐渐出现典型急肾衰竭表现,至14天末,死亡率达91.7%,而对照组全部正常存活。结论应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉可制备稳定急性缺血-再灌注肾损伤模型,而且成功率较高。     

大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜差异表达蛋白质组的分离与鉴定

3、醛脱氢酶和醛糖还原酶,前3种酶与改善能量代谢相关,后3种酶与抗氧化应激、抑制凋亡相关.结论 建立了重复性较好的正常与II/R损伤后大鼠肠黏膜组织的双向凝胶电泳图谱.II/R的损伤机制可能与顺乌头酸酶、丙酮酸激酶、细胞色素C还原酶、蛋白二硫化物异构酶A3、醛脱氧酶和醛糖还原酶的下调有关.     

Olmesartan restores the protective effect of remote ischemic perconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury in spontaneously hypertensive rats

OBJECTIVES:Remote ischemic perconditioning is the newest technique used to lessen ischemia/reperfusion injury. However, its effect in hypertensive animals has not been investigated. This study aimed to examine the effect of remote ischemic perconditioning in spontaneously hypertensive rats and determine whether chronic treatment with Olmesartan could influence the effect of remote ischemic perconditioning.METHODS:Sixty rats were randomly divided into six groups: vehicle-sham, vehicle-ischemia/reperfusion injury, vehicle-remote ischemic perconditioning, olmesartan-sham, olmesartan-ischemia/reperfusion and olmesartan-remote ischemic perconditioning. The left ventricular mass index, creatine kinase concentration, infarct size, arrhythmia scores, HIF–1α mRNA expression, miR-21 expression and miR-210 expression were measured.RESULTS:Olmesartan significantly reduced the left ventricular mass index, decreased the creatine kinase concentration, limited the infarct size and reduced the arrhythmia score. The infarct size, creatine kinase concentration and arrhythmia score during reperfusion were similar for the vehicle-ischemia/reperfusion group and vehicle-remote ischemic perconditioning group. However, these values were significantly decreased in the olmesartan-remote ischemic perconditioning group compared to the olmesartan-ischemia/reperfusion injury group. HIF–1α, miR-21 and miR-210 expression were markedly down-regulated in the Olmesartan-sham group compared to the vehicle-sham group and significantly up-regulated in the olmesartan-remote ischemic perconditioning group compared to the olmesartan-ischemia/reperfusion injury group.CONCLUSION:The results indicate that ¹ the protective effect of remote ischemic perconditioning is lost in vehicle-treated rats and that chronic treatment with Olmesartan restores the protective effect of remote ischemic perconditioning; ² chronic treatment with Olmesartan down-regulates HIF–1α, miR-21 and miR-210 expression and reduces hypertrophy, thereby limiting ischemia/reperfusion injury; and ³ recovery of the protective effect of remote ischemic perconditioning is related to the up-regulation of HIF–1α, miR-21 and miR-210 expression.     

LP17多肽对小鼠肠缺血再灌注损伤影响

目的：探讨LP17多肽对小鼠肠缺血再灌注（ IIR）损伤影响。方法将36只小鼠按数字表法随机分为假手术组（ S组）、IIR组（ I/R组）、IIR＋LP17对照肽治疗组（ C1组）、IIR＋LP17治疗组（ C2组）,每组9只。肠系膜上动脉夹闭20 min制作小鼠IIR模型,于再灌注前5 min将药物注入小鼠腹腔,24 h后处死小鼠,检测血清中可溶性髓样细胞触发受体-1（ sTREM-1）和肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）的浓度,观察肠黏膜损伤程度,免疫组化法检测肝脏细胞的核因子-κB（ NF-κB）的表达情况。结果血清sTREM-1、血清TNF-α和肝脏细胞NF-κB在I/R组和C1组升高,分别为（1686.34±55.98）pg/ml、（121.81±8.01） pg/ml、（3.36±0.62）表达和（1643.73±65.45） pg/ml、（119.88±8.05）pg/ml、（3.21±0.94）分;在C2组降低,分别为（944.58±39.75）pg/ml、（65.92±4.91）pg/ml和（0.92±0.55）分,与I/R组和C1组比较,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。光镜下S组小鼠小肠黏膜基本正常;I/R组和C1组绒毛破坏较重,绒毛坏死明显,黏膜下水肿、炎性细胞浸润更加明显,肠壁各层均变薄;C2组肠绒毛损伤明显减轻,其肠黏膜损伤评分与其他各组比较,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。结论 LP17多肽通过调节TREM-1的信号转导通路,减轻NF-κB和TNF-α过度激活所致炎症反应,减轻IIR引起的肠黏膜及远隔脏器的损伤。     

己酮可可碱对兔缺血再灌注损伤脊髓的保护作用及机制

目的： 对己酮可可碱(PTX)在脊髓缺血再灌注损伤中神经元的保护作用及其机制进行初步探讨。方法: 采用日本大耳白兔腹主动脉夹闭法建立脊髓缺血再灌注损伤动物模型，随机分为A组（假手术组，8只）、B组（对照组，20只）、C组（夹闭血管前用药组，20只）、D组（再灌注即刻用药组，20只）。于再灌注后12 h、24 h、48 h、72 h检测血TNF-α活性、组织MPO活性、免疫组化法观察并检测PECAM-1及caspase-3表达、HE染色观察神经元并计数坏死神经元、TUNEL染色观察并计数凋亡神经元、电镜观察坏死及凋亡神经元形态改变，并于再灌注后48 h进行运动功能评分（改良Tarlov评分）。结果: 用药组（C组及D组）改良Tarlov评分明显高于对照组（P<0.05），血TNF-α、组织MPO含量、免疫组化PECAM-1及caspase-3表达强度均明显下降，HE及TUNEL染色切片中坏死细胞及凋亡细胞均明显减少，与对照组有显著差异（P<0.05）。假手术组未见坏死及凋亡细胞。结论: 己酮可可碱在脊髓缺血再灌注损伤中能够发挥抑制神经元坏死及凋亡的双重脊髓保护作用。