胎盘生长因子与子痫前期发病及一氧化氮关系的研究

目的:探讨胎盘生长因子(PLGF)在子痫前期发病中的作用及其与一氧化氮的关系。方法:选择妊娠期高血压疾病患者45例,其中妊娠期高血压10例,轻度子痫前期12例,重度23例;选择同期正常妊娠妇女20例作为对照组。采用免疫组织化学染色法和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测两组患者胎盘PLGF蛋白及mRNA的表达。采用硝酸盐还原酶法测定两组胎盘组织NO浓度的变化。结果:(1)免疫组化结果显示,轻度和重度子痫前期的胎盘绒毛合体滋养细胞、绒毛间质PLGF表达均显著低于正常妊娠组(P<0.05),妊娠期高血压组与正常组无差别;PLGF在妊娠期高血压、子痫前期组及正常妊娠组分布范围基本一致,主要分布在绒毛合体滋养细胞和间质细胞胞浆,部分血管合体膜上也有表达;(2)轻、重度子痫前期胎盘组织PLGF mRNA平均灰度分别为3.33±0.39、1.97±0.29,显著低于正常妊娠组的平均灰度4.87±0.60(P<0.01);(3)轻、重度子痫前期胎盘组织中NO浓度分别为8.20±5.56μmol/g、6.46±2.25μmol/g,显著低于对照组18.10±7.12μmol/g(P<0.05);妊娠期高血压组胎盘组织NO浓度与对照组差异无显著性;(4)胎盘组织中胎盘生长因子表达水平与胎盘组织NO浓度呈显著正相关(r=0.54,P<0.05)。结论:子痫前期胎盘组织中胎盘生长因子水平降低,NO浓度下降,可能在子痫前期的发病中起一定作用。     

survivin和livin在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的:检测抑凋亡基因survivin和livin在子痫前期患者胎盘的表达,研究滋养细胞凋亡与子痫前期的关系。方法:用免疫组化SP法检测胎盘组织中survivin和livin的表达,其中子痫前期20例、子痫4例、正常晚期妊娠20例,用计算机图像分析系统定量分析。结果:(1)survivin主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞,在子痫前期的表达显著低于正常晚期妊娠(P<0.05),随病情加重表达降低;(2)livin主要在合体滋养细胞的细胞核中表达,在子痫前期、子痫组的表达均低于正常晚期妊娠(P<0.05);(3)子痫前期、子痫中survivin和livin表达无相关性(P>0.05)。结论:子痫前期及子痫患者胎盘组织中survivin、livin的表达均明显低于正常对照组,但两者无相关性(r=0.142,P=0.298,P>0.05)。     

同源异型盒基因DLX4在妊娠期高血压疾病中的表达研究

目的:检测妊娠期高血压疾病胎盘组织中同源异型盒基因DLX4的表达,探讨其在妊娠期高血压疾病发生、发展中的意义。方法:严格设置病例组和对照组,采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组化SABC法检测40例胎盘组织中DLX4mRNA和蛋白的表达情况。结果:DLX4 mRNA在子痫前期胎盘组织中的表达(轻度为0.17±0.05、重度为0.09±0.03)明显低于对照组(0.49±0.07,P<0.001)。DLX4蛋白在子痫前期胎盘中表达与对照组相比也显著降低(P<0.001)。结论:随着妊娠期高血压疾病临床症状的加重,胎盘组织中DLX4的表达呈明显下降趋势,同源异型盒基因DLX4参与了妊娠期高血压疾病胎盘的发育障碍及功能缺陷。     

胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1和凋亡相关基因的表达与子痫前期发病的关系

目的 探讨胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)和凋亡相关基因easpase-3、Bax及bcl-2的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 选择2005年6月-2006年12月在中国医科大学附属盛京医院产科住院的子痫前期患者30例(子痫前期组),以同期正常孕妇40例为对照组.采用免疫组化、RT.PCR技术和蛋白印迹(western-blot)法检测两组孕妇不同孕周胎盘组织中LOX-1和caspase-3、Bax及bel-2的表达.结果 (1)子痫前期组20周+1～24周、24周+1～28周、28周+1-32周、32周+1～36周、36周+1～40周孕妇胎盘组织中LOX-1蛋白表达水平分别为20.1±1.8、25.6±1.3、32.8±1.6、34.3±1.5、39.9±1.2,对照组分别为11.2±0.6、18.5±1.6、26.1±1.8、28.3±1.6、32.3±1.6,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);子痫前期组孕妇胎盘组织中easpase-3蛋白表达水平分别为12.3±0.9、16.3 4-0.9、24.4±0.8、28.3±0.5、36.3±1.1,对照组分别为8.5±1.0、12.3±1.1、17.4±1.2、20.4±0.5、24.2±1.3,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组不同孕周孕妇胎盘组织中LOX-1、easpase-3及Bax mRNA和蛋白的表达水平明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);bel-2 mRNA和蛋白的表达趋势与Bax表达结果相反.结论 LOX-1和caspase-3、Bax在子痫前期患者胎盘组织中表达上调,bcl-2表达下调,-与子痫前期发病有关.     

重度子痫前期患者胎盘合体滋养细胞凋亡的研究

目的 比较早发型与晚发型重度子痫前期患者胎盘合体滋养细胞凋亡水平变化,探讨其病因及发病机制的差异.方法 选择2008年11月至2009年5月在上海交通大学附属第六人民医院住院剖宫产分娩的早发型重度子痫前期患者15例(早发型组)、晚发型重度子痫前期患者15例(晚发型组)和健康妊娠妇女10例(对照组),采用酶联免疫吸附试验检测孕妇血浆中合体滋养细胞微粒(STBM)水平,蛋白印迹法检测胎盘组织中凋亡蛋白--半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达水平.结果 (1)STBM:早发型组孕妇血浆STBM水平为(71±21)μg/L,高于晚发型组的(42±30)μg/L和对照组的(26±11)μg/L,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);晚发型组血浆STBM水平与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)caspase-3蛋白:早发型组胎盘组织中caspase-3蛋白表达水平为0.85±0.61,晚发型组为0.77±0.46,对照组为0.32±0.15,早发型和晚发型组胎盘组织中caspase-3蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);但早发型组和晚发型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 早发型与晚发型重度子痫前期可能存在不同的发病机制,早发型重度子痫前期可能是一种胎盘疾病,而晚发型则可能与母体因素有关.     

子痫前期患者滋养细胞浸润相关基因mRNA及蛋白表达的研究

目的研究子痫前期患者胎盘滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP)9、2及其组织抑制物(TIMP)1、2,肿瘤转移抑制基因KiSS-1 mRNA、蛋白的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR、免疫印迹(western blot)法对30例正常足月妊娠妇女(正常妊娠组)和10例妊娠期高血压患者(高血压组)及27例子痫前期(子痫前期组)患者胎盘滋养细胞中MMP-9、MMP-2、KiSS-1、TIMP-1和TIMP-2基因mRNA及蛋白表达水平[均以相对吸光度(A)表示]进行检测;应用明胶酶谱分析法,检测3组妇女胎盘孵育液MMP-9、MMP-2活性。结果(1)胎盘滋养细胞浸润相关基因mRNA表达水平:子痫前期组MMP-9、MMP-2 mRNA表达水平分别为0．39±0．05和0．71±0．16,均明显低于正常妊娠组的0．78±0．11和1．63±0．31,两组分别比较,差异有统计学意义(P均<0．05)。高血压组MMP-9 mRNA的表达水平明显高于重度子痫前期患者,差异有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘滋养细胞KiSS-1 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达水平分别为1．97±0．21和1．11±0．18,均明显高于正常妊娠组的0．69±0．27和0．65±0．19,差异均有统计学意义(P<0．05);高血压组胎盘滋养细胞KiSS-1 mRNA表达水平低于子痫前期组,但与正常妊娠组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。重度子痫前期患者胎盘滋养细胞TIMP-2 mRNA表达水平明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P<0．05)。(2)胎盘滋养细胞浸润相关基因的蛋白表达水平:子痫前期组MMP-9、MMP-2基因的蛋白表达水平分别为1．07±0．35和0．74±0．23,均明显低于正常妊娠组的2．43±0．92和1．48±0．78,差异均有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘KISS-1和TIMP-1蛋白表达水平分别为2．46±0．39和1．51±0．40,均明显高于正常妊娠组的0．91±0．35和0．93±0．56,差异均有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘滋养细胞TIMP-2蛋白表达水平与正常妊娠组及高血压组比较,差异均无统计学意义(P>0．05)。(3)胎盘MMP-9和MMP-2酶比活性:子痫前期组分别为(2．67±0．53)和(1．13±0．28)灰度·g-1·L-1,均明显低于正常妊娠组的(8．44±3．70)和(3．87±1．43)灰度·g-1·L-1,差异均有统计学意义(P<0．05)。结论子痫前期患者胎盘滋养细胞促进浸润基因。MMP-9、MMP-2表达降低和抑制浸润基因KiSS-1和TIMP-1表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧中起重要作用。     

子痫前期患者血浆对人脐静脉内皮细胞生长活性及Edg4表达的影响

目的:探讨子痫前期患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生长活性的影响以及与溶血磷脂酸受体蛋白内皮分化基因-4(Edg4)的关系。方法:体外培养HU-VECs,取对数生长的细胞,分组实验:对照组,正常晚孕组,轻度子痫前期组,重度子痫前期组。用MTT比色法和流式细胞仪检测各组细胞增殖及凋亡情况,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞Edg4蛋白及mRNA表达水平。结果:(1)子痫前期组HUVECs增殖减少,细胞凋亡增加;各组间细胞增殖率及细胞凋亡率差异显著(P<0.05);(2)Edg4蛋白主要表达于HUVECs的细胞浆和细胞膜,子痫前期病情越重,其血浆诱导的HUVECs Edg4蛋白表达越强;(3)子痫前期组Edg4 mRNA表达明显升高,与对照组和正常晚孕组相比显著差异(P<0.05);重度子痫前期组Edg4 mRNA表达较轻度组显著升高(P<0.05)。结论:子痫前期患者血浆可诱导HUVECs Edg4蛋白表达增强,并抑制HUVECs细胞增殖,促进细胞凋亡,提示子痫前期患者溶血磷脂酸升高可能与血管内皮细胞功能异常有关。     

特发性胎儿生长受限与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系

目的 探讨特发性胎儿生长受限(FGR)与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系.方法 应用透射电镜、脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)、流式细胞技术(FCM)检测特发性FGR孕妇(FGR组)及正常妊娠妇女(对照组)各15例的胎盘细胞凋亡情况,并采用RT-PCR技术观察两组胎盘细胞中bcl-2基因相对表达量.结果 电镜下观察到FGR组胎盘合体滋养细胞核膜皱缩,核仁消失,染色质致密、凝聚;TUNEL 检测 FGR 组胎盘细胞凋亡率为13.68%,高于对照组的4.05%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测胎盘S期细胞比率FGR组为3.4%,对照组为2.2%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),FCM检测的胎盘细胞凋亡率变化趋势与TUNEL检测结果一致;FGR组胎盘细胞bcl-2基因相对表达量为0.19±0.13,对照组为0.55±0.17,两组比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 特发性FGR的发生与胎盘细胞凋亡增加有关,胎盘细胞凋亡增加与胎盘细胞中bcl-2基因表达下调有一定关系.     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7的表达及其意义

目的 探讨胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7的表达与妊娠期高血压疾病发生的关系及作用机制。方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法,检测20例正常晚期妊娠妇女（正常晚孕组）、20例妊娠期高血压患者（妊娠期高血压组）、20例轻度子痫前期患者（轻度子痫前期组）、30例重度子痫前期患者（重度子痫前期组）的胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4与Edg7的表达。结果（1）表达部位：Edg4与Edg7主要表达于胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞的细胞质和细胞膜。（2）Edg4和Edg7在胎盘绒毛滋养细胞中的表达阳性率：正常晚孕组分别为25％和20％,妊娠期高血压组分别为60％和40％,轻度子痫前期组分别为80％和65％,重度子痫前期组分别为83．3％和86,7％。轻、重度子痫前期组阳性率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义（P〈0,05）;妊娠期高血压组与正常晚孕妇组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）Edg4和Edg7在胎盘蜕膜细胞中的表达阳性率：正常晚孕组分别为20％和25％,妊娠期高血压组分别为55％和50％,轻度子痫前期组分别为70％和55％,重度子痫前期组分别为83．3％和73．3％。轻度子痫前期组及重度子痫前期组阳性表达率明显高于正常晚孕组,两组分别比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;妊娠期高血压组与正常晚孕组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中溶血磷脂酸受体蛋白Edg4、7呈高表达,提示溶血磷脂酸与胎盘组织中的特异性受体Edg4、7结合,并参与了妊娠期高血压疾病的发生。     

妊娠期高血压疾病胎盘肝细胞生长因子表达与滋养细胞凋亡

目的探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP)妇女胎盘组织中的表达及对胎盘绒毛滋养细胞凋亡的影响。方法选取不同程度HDCP晚孕孕妇34例及正常晚孕孕妇30例。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测其胎盘组织中HGF和Fas mRNA表达量。结果(1)与对照组(0.67±0.19)相比,妊娠期高血压组HGF mRNA表达无显著差异(0.65±0.06,P>0.05),轻度子前期、重度子前期和子组HGF mRNA表达显著降低(0.43±0.12,0.38±0.09和0.19±0.17,P<0.05),且随病情加重,表达强度逐渐降低;(2)轻度子前期、重度子前期和子组FasmRNA与对照组相比,表达显著升高(1.58±0.26,2.96±0.14,5.98±1.17和1.01±0.36,P<0.05),且随病情加重,表达强度逐渐增加;(3)胎盘组织中HGF和Fas表达呈负相关(r=-0.618,P<0.05)。结论胎盘间质细胞表达的HGF具有抑制由Fas介导的滋养细胞凋亡作用。患HDCP孕妇胎盘HGF表达下降可能是引起滋养细胞凋亡的原因之一。     

干扰素-γ诱导蛋白10在子痫前期大鼠模型的表达

目的:检测子痫前期孕鼠子宫及胎盘中干扰素-γ诱导蛋白10(IP-10)的表达,探讨其与子痫前期发病的关系。方法:采用注射L-NAME方法制备子痫前期动物模型,将妊娠大鼠随机分为正常妊娠组、子痫前期组。同时采用免疫组化及Western blot法检测IP-10在正常妊娠组、子痫前期组孕鼠肝脏、肾脏、子宫及胎盘等组织中的表达。结果:免疫组化及Western blot结果显示在子痫前期组,孕鼠肝脏、肾脏中IP-10表达增加,与正常妊娠组差异有统计学意义(P<0.05)。正常妊娠组孕鼠子宫及胎盘IP-10表达不明显,而子痫前期组孕鼠子宫及胎盘IP-10表达大幅增高,差异有统计学意义(P<0.05)。同样在子痫前期组中,胎盘中IP-10表达量显著高于子宫中IP-10的表达量,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子痫前期孕鼠子宫及胎盘IP-10表达升高可能与子痫前期的发病有关。     

水通道蛋白1在妊娠期高血压疾病患者胎盘、胎膜及腹膜组织中的表达及其意义

目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)在妊娠期高血压疾病发病机制中的作用及其与子痫前期患者腹水形成之间的关系.方法 选择2006年7月至12月在郑州大学第一附属医院、第三附属医院以及郑州市妇幼保健院住院的60例妊娠期高血压疾病患者为妊娠期高血压疾病组(其中包括妊娠期高血压20例、轻度子痫前期20例、重度子痫前期20例),以及同期正常孕妇20例作为正常妊娠组.采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测两组孕妇的胎盘、胎膜及腹膜组织中AQP1的表达.B超检查两组孕妇腹水量.结果 (1)两组孕妇胎盘、胎膜及腹膜组织中均有AQPl表达,表达部位分别位于胎盘组织中血管及毛细血管的内皮细胞、胎膜组织中羊膜上皮细胞、腹膜组织中毛细血管和小静脉的内皮细胞.(2)妊娠期高血压疾病组腹水发生率(63%,38/60)明显高于正常妊娠组(10%,2/20),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(3)妊娠期高血压疾病组胎盘组织中AQP1阳性表达率(85%,51/60)明显高于正常妊娠组(70%,14/20),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).其中,重度子痫前期孕妇胎盘组织中AQP1阳性表达率(90%,18/20)明显高于妊娠期高血压孕妇(80%,16/20)及正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05).(4)妊娠期高血压疾病组胎膜组织中AQPI阳性表达率(87%,52/60)明显低于正常妊娠组(95%,19/20),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).其中,重度子痫前期孕妇胎膜组织中AQP1阳性表达率(80%,16/20)明显低于妊娠期高血压孕妇(95%,19/20)及正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05).(5)妊娠期高血压疾病组腹膜组织中AQPl阳性表达率(82%,49/60)明显高于正常妊娠组(70%,14/20),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).其中,重度子痫前期孕妇腹膜组织中AQPl阳性表达率(90%,18/20)明显高于妊娠期高血压孕妇(75%,15/20)及正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 AQP1在子痫前期患者胎盘及腹膜组织中阳性表达率升高,在胎膜组织中阳性表达率降低,并与妊娠期高血压疾病病情轻蕈程度有关.AQP1在胎盘、胎膜和腹膜组织中表达的改变可能与妊娠期高血压疾病的发生、发展有关,并可能是腹水形成的机制之一.     

子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α基因的表达变化及其临床意义

目的 通过检测子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α(Gadd45α)基因的定位及表达变化,探讨其与子痫前期发病的关系.方法 选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的36例子痫前期孕妇为研究对象,按病情分为子痫前期轻度组(20例),子痫前期重度组(16例),另以同期择期行足月剖宫产术的18例健康孕妇为对照组.3组孕妇分娩后取胎盘组织标本,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的定位及分布,采用逆转录(RT)-PCR技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α mRNA表达水平,采用蛋白印迹(western blot)技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的表达水平.结果 (1)子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中均有Gadd45α蛋白表达,主要定位于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核中,血管内皮细胞及少量间质细胞胞核也可见阳性染色;对照组胎盘组织中阳性染色较弱,且仅见于胎盘滋养层细胞中,血管内皮细胞中未见阳性染色.(2)子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45αmRNA表达水平分别为0.75±0.07及0.44±0.13,明显高于对照组的0.18±0.04,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);子痫前期重度组Gadd45α mRNA表达水平与子痫前期轻度组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).(3)子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45α蛋白表达水平分别为1.34±0.17及0.65±0.15,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组也明显高于对照组的0.22±0.11,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中Gadd45α mRNA和蛋白表达水平均明显高于健康孕妇,并且随子痫前期患者病情加重其表达上调;Gadd45α定位在与子痫前期发生密切相关的胎盘滋养层细胞中,Gadd45α基因可能参与了子痫前期的发生与发展.     

白介素24在子痫前期胎盘的表达及与基质金属蛋白酶2关系的研究

目的:研究IL-24在子痫前期胎盘的表达及rhIL-24对TEV-1细胞MMP-2蛋白活性表达的影响,探讨二者与子痫前期发病机制的关系。方法:RT-PCR检测子痫前期及正常足月孕妇胎盘中IL-24 mRNA的表达;明胶酶谱检测0、10、50、100、500ng/mlrhIL-24作用后TEV-1细胞的MMP-2活性;Western blot检测不同浓度rhIL-24作用后TEV-1细胞的MMP-2蛋白表达。结果:子痫前期组胎盘组织中IL-24 mRNA表达显著高于正常足月组(P<0.05)。当rhIL-24浓度≥50ng/ml后,TEV-1细胞中MMP-2蛋白活性表达均明显降低(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性。结论:IL-24异常升高,抑制了滋养细胞MMP-2的分泌及活性,使其侵袭力下降,从而在子痫前期发病中起一定作用。     

胰岛素样生长因子1及胰岛素样生长因子结合蛋白1表达与妊娠期高血压疾病发病的关系

目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)与胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫组化方法检测60例妊娠期高血压疾病患者(妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压20例、轻度子痫前期19例、重度子痫前期21例)及18例正常妊娠妇女(对照组)的血清及胎盘组织中IGF-1及IGFBP-1的水平,并分析妊娠期高血压疾病组患者血清中IGF-1水平与胎盘组织中IGFBP-1的相关性。结果(1)血清IGF-1水平:妊娠期高血压疾病组为(229±100)μg/L,明显低于对照组的(336±120)μg/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。妊娠期高血压患者血清中IGF-1水平为(303±80)μg/L,轻度子痫前期患者为(233±77)μg/L,重度子痫前期患者为(155±73)μg/L。3者间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)胎盘组织中IGF-1阳性率:妊娠期高血压疾病组为48%(29/60),明显低于对照组的83%(15/18),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);轻、重度子痫前期患者明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。(3)血清中IGFBP-1水平:妊娠期高血压疾病组为(161±90)μg/L,明显高于对照组的(98±75)μg/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。妊娠期高血压患者为(97±73)μg/L,轻度子痫前期患者为(157±69)μg/L,重度子痫前期患者为(225±81)μg/L。3者间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)胎盘组织中IGFBP-1阳性率:妊娠期高血压疾病组为77%(46/60),明显高于对照组的39%(5/18),两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);轻、重度子痫前期患者明显高于对照组(P<0.05,P<0.01)。(5)相关性:妊娠期高血压疾病组患者血清及胎盘组织中IGF-1水平分别与相应部位的IGFBP-1水平均呈负相关(r=-0.269,P<0.05;r=-0.396,P<0.01)。血清中IGFBP-1水平与胎盘组织中IGFBP-1表达水平呈正相关(r=0.388,P<0.01)。结论孕妇血清及胎盘组织中IGF-1、IGFBP-1水平变化与妊娠期高血压疾病发病及病情发展有关。     

DLX4在子痫前期胎盘组织的表达及与上皮细胞间质化相关性的研究

目的:探讨DLX4在妊娠期高血压疾病中的作用及其对滋养细胞EMT的影响。方法:采用Western blot法分别检测子痫前期胎盘组织及缺氧培养的滋养细胞系JEG-3中DLX4蛋白表达的变化;通过实时PCR技术,比较缺氧条件下滋养细胞中DLX4、HIF-1α和E-cad表达变化的差异。结果:滋养细胞缺氧培养后DLX4蛋白表达明显下降(P0.05),与其在子痫前期胎盘组织的表达变化一致;缺氧抑制滋养细胞中DLX4 mR-NA表达,同时伴有HIF-1α和E-cad mRNA表达增加。结论:缺氧引起滋养细胞DLX4表达下调,伴随EMT相关因子表达的改变。子痫前期滋养细胞侵袭力异常可能与缺氧引起DLX4表达下调及滋养细胞EMT异常有关。     

妊娠期高血压和子痫前期患者胎盘及子宫浅肌层中转化生长因子-β1、endoglin蛋白及mRNA表达水平

目的 研究妊娠期高血压和子痫前期患者胎盘组织和子宫浅肌层中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、endoglin(Eng)蛋白及mRNA表达水平及其相关性,探讨Eng与TGF-β1在妊娠期高血压和子痫前期发病中的作用. 方法 选取2009年4月至2010年4月在天津医科大学第二医院产科住院并分娩的孕妇共110例,其中妊娠期高血压组30例,轻度子痫前期组30例,重度子痫前期组30例,正常对照组20例.剖宫产时取胎盘及子宫浅肌层组织.采用Western印迹技术测定胎盘及子宫浅肌层中Eng、TGF-β1蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应技术检测各组孕妇胎盘及子宫浅肌层中Eng及TGF-β1 mRNA表达情况.多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用Student-Newman-Keuls检验;相关性用Pearson相关分析及直线回归分析.结果 在正常对照组、妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组,胎盘组织Eng蛋白表达水平分别为0.11±0.07、0.15±0.05、0.18±0.06和0.43±0.04,TGF-β1蛋白表达水平分别为0.11±0.02、0.26±0.05、0.27=0.03和0.88±0.09;子宫浅肌层中Eng蛋白表达水平分别为0.14±0.06、0.16±0.04、0.20±0.08和0.46±0.05,TGF-β1蛋白表达水平分别为0.15±0.03、0.29±0.06、0.31±0.04和0.91±0.08.在正常对照组、妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组,胎盘组织Eng mRNA表达水平分别为1.00、1.27±0.58、1.54±0.41和1.83±0.35,TGF-β1 mRNA表达水平分别为1.00、1.64±0.33、1.92±0.38和2.23±0.53;子宫浅肌层中Eng mRNA表达水平分别为1.00、1.32±0.46、1.59±0.37和1.93±0.52,TGF-β1 mRNA表达水平分别为1.00、1.71±0.45、1.91±0.51和2.37±0.46.随着病情的加重,2种因子蛋白和mRNA的表达均呈上升趋势,组间差异均有统计学意义(P均＜0.05).妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组孕妇胎盘中TGF-β1与Eng蛋白水平呈正相关(r值分别为0.57、0.61和0.60,P＜0.05);在子宫浅肌层中表达亦呈正相关(r值分别为0.59、0.62和0.61,P＜0.05). 结论 Eng及TGF-β1可能参与了妊娠期高血压和子痫前期的发生和发展.     

子痫前期孕妇血清和胎盘组织中干扰素-γ诱导蛋白10的表达及意义

目的:检测子痫前期孕妇胎盘组织及血清中干扰素-γ诱导蛋白10(IP-10)的表达情况,探讨其与子痫前期发病的关系。方法:收集正常妊娠、轻度子痫前期、重度子痫前期孕妇的胎盘组织及血清,采用ELISA、实时荧光定量PCR及Western blot方法检测IP-10在3组孕妇胎盘组织及血清中的表达变化。结果:ELISA结果显示,与正常对照组相比,轻度子痫前期组、重度子痫前期组孕妇血清中IP-10表达均明显增加(P均<0.05);实时荧光定量PCR及Western blot结果显示,与正常对照组相比,轻度子痫前期组、重度子痫前期组孕妇胎盘组织中IP-10 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度增高(P均<0.05)。结论:子痫前期孕妇胎盘及血清中IP-10表达升高,可能与子痫前期的发病有关。     

妊娠期高血压疾病患者外周血共刺激分子B7-1和B7-2的研究

目的:研究妊娠期高血压疾病患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1和B7-2的表达水平,探讨B7-1、B7-2在发病中的作用。方法:实验组为妊娠期高血压疾病患者60例(包括20例重度子痫前期患者,20例轻度子痫前期患者,20例妊娠期高血压患者);对照组为同期正常妊娠妇女20例,正常未孕妇女20例。分别采集、分离两组研究对象外周血单核细胞,用流式细胞术检测各组外周血单核细胞B7-1、B7-2的表达率。结果:(1)妊娠期高血压疾病患者B7-1表达率为9.49±2.66,显著高于正常妊娠组和正常未孕组(P<0.05);(2)妊娠期高血压疾病患者B7-2表达率为20.00±4.93,显著低于正常妊娠组(P<0.05);(3)重度子痫前期患者B7-1表达率为10.67±2.57,轻度子痫前期患者为10.14±2.31,显著高于妊娠期高血压患者(P<0.05)。结论:妊娠期高血压疾病患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2异常表达在其发病中有重要作用,可能是妊娠期高血压疾病发生的重要原因。     

滋养细胞内质网应激特征性分子葡萄糖调节蛋白及内质网凋亡因子caspase-12与子痫前期发病的关系

目的 探讨滋养细胞内质网超微结构变化及内质网应激特征性分子--内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白(GRP)78、94和内质网凋亡因子--半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)mRNA及蛋白表达与子痫前期发病的关系.方法 选择2008年7月-2010年1月在南京医科大学第一附属医院分娩的孕妇共65例,其中子痫前期孕妇30例(子痫前期组),健康孕妇35例为对照组.应用透射电镜扫描观察胎盘组织中滋养细胞内质网超微结构改变,逆转录(RT)PCR技术检测胎盘组织中GRP78、GRP94和caspase-12 mRNA的表达,蛋白印迹法检测胎盘组织中GRP78、GRP94和caspase-12蛋白的表达.结果 (1)对照组胎盘组织中滋养细胞内质网体积无明显增大,内质网无扩张也无肿胀变化;子痫前期组滋养细胞内质网水肿,数量减少,内质网体积增大,内质网扩张及液泡化,且内质网脱颗粒改变明显.(2)子痫前期组胎盘组织中GRP78 mRNA及蛋白表达水平分别为2.59±0.09及0.81±0.31,显著高于对照组的1.16±0.07及0.40±0.10,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(3)子痫前期组胎盘组织中GRP94 mRNA和蛋白表达水平分别为1.31±0.91及0.55±0.24,显著高于对照组的0.63±0.57及0.22±0.09,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(4)子痫前期组胎盘组织中caspase-12 mRNA和蛋白表达水平分别为4.03±0.65及1.56±0.17,显著高于对照组的1.85±0.85及0.91±0.69,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 子痫前期孕妇的滋养细胞内质网有明显的扩张及肿胀性改变;胎盘组织中GRP78、GRP94以及caspase-12 mRNA及蛋白表达水平比健康孕妇有明显升高.提示,内质网应激介导的滋养细胞凋亡可能是子痫前期发病的又一重要机制.