外源性促红细胞生成素对大鼠视网膜脱离光感受器细胞的保护作用

目的 观察外源性促红细胞生成素(EPO)对大鼠视网膜脱离(RD)状态下光感受器细胞的保护作用.方法 采用计算机产生随机数字的方法将162只正常雄性SD大鼠分为正常对照组(NC组)、RD组、RD+磷酸盐缓冲液(PBS)组、RD+EPO 100、200、400 ng组.RD后3 d,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性和B细胞淋巴瘤/白血病-XL(bcl-XL)的表达,免疫荧光检测caspase-3活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测光感受器细胞凋亡情况.RD后14、28 d,2个月,视网膜组织病理学观察并测量外核层(ONL)厚度.结果 Western bolt检测发现,各组间活化caspase-3条带灰度值差异有统计学意义(F=35.96,P<0.01),bcl-XL条带灰度值差异也有统计学意义(F=30.75,P<0.01).免疫荧光和TUNEL检测发现,caspase-3免疫阳性光感受器细胞数目与TUNEL阳性细胞核趋势表现一致.RD后14 d、2个月,各组间ONL差异有统计学意义(F=21.52,96.25;P<0.01).结论 RD后补充外源性EPO可通过抑制caspase-3活性并增加bcl-XL的表达拮抗凋亡,从而发挥对光感受器细胞的保护作用.     

促红细胞生成素对大鼠实验性视网膜脱离细胞凋亡的干预作用

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对实验性视网膜脱离大鼠细胞凋亡的干预作用。方法选用SD大鼠44只,随机分为正常对照组(4只)、生理盐水(normal saliue,NS)对照组20只和EPO治疗组(20只)。正常对照组不做任何处理,其他两组大鼠建立孔源性视网膜脱离模型。造模前4hEPO治疗组大鼠腹腔中注射EPO,NS对照组注射生理盐水。术后1h、6h、12h、24h、72h处死大鼠,每个时间点各取4只,摘取眼球,TUNEL染色,计算内核层、节细胞层及外核层细胞数,进行统计学分析。结果正常对照组大鼠视网膜层次结构清晰,各层排列整齐。NS对照组在脱离后12h连续层状结构紊乱,外节丢失增多,而EPO治疗组的连续层状结构存在,外节变性较轻。TUNEL染色结果显示EPO治疗组在视网膜脱离后1h、12h、24h、72h节细胞层及内核层凋亡细胞数[分别为(4.75±1.42)/目、(7.17±1.27)/目、(9.41±1.08)/目、(11.83±1.11)/目]少于NS对照组(7.83±1.70)/目、(9.67±1.56)/目、(12.42±1.31)/目、(15.25±1.22)/目,差异有统计学意义(均为P<0.001)。而外核层EPO治疗组在视网膜脱离后12h、24h、72h的凋亡细胞数[分别为(33.08±8.64)/mm2、(49.17±12.52)/mm2、(92.83±14.14)/mm2]少于NS对照组,差异有统计学意义(均为P<0.05),余时段2组间比较差异均无统计学意义。结论通过腹腔注射EPO能减少实验性视网膜脱离所致视网膜各层细胞的凋亡。     

促红细胞生成素对中枢神经系统及视网膜神经元的保护作用

传统认为促红细胞生成素是调节红细胞生成重要激素。近来研究表明促红细胞生成素同时具备非常重要的促进神经元生长和神经元保护作用。我们就促红细胞生成素对中枢神经系统及视网膜神经元的保护作用作一综述     

视网膜脱离模型中外源性促红细胞生成素对其受体表达的影响

目的探讨外源性促红细胞生成素（EPO）对促红细胞生成素受体（EPOR）在脱离的视网膜中表达的影响。方法通过视网膜下腔注射质量分数1.4%透明质酸钠在60只SD大鼠的右眼建立视网膜脱离（RD）模型,12只正常SD大鼠为正常对照组。不同组RD模型眼（每组12只眼）玻璃体腔内分别注射PBS或100、200、400ng重组大鼠源性EPO。玻璃体注射后3d应用Westernblot法半定量检测各组SD大鼠脱离的视网膜中EPOR蛋白表达水平的变化并进行比较,应用免疫组织化学法定位检测脱离的视网膜中EPOR蛋白的表达。结果 Westernblot检测结果表明大鼠正常视网膜中EPOR表达量少,为0.28±0.02;造模后3d,EPOR在脱离的视网膜中表达量明显增加,为0.41±0.05,差异有统计学意义（P〈0.05）。RD＋PBS组、RD＋EPO100ng组、RD＋EPO200ng组和RD＋EPO400ng组EPOR蛋白的表达量分别为0.39±0.03、0.41±0.03、0.43±0.07、0.44±0.05,明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但RD＋PBS组、RD＋EPO100ng组、RD＋EPO200ng组和RD＋EPO400ng组间EPOR蛋白的表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。RD组与RD＋不同剂量EPO组比较EPOR表达的差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫组织化学检测结果证实EPOR蛋白表达于视网膜各层,RD＋不同剂量的EPO处理组EPOR表达均强于正常对照组。结论 RD发生后补充外源性EPO对EPOR的表达并无影响。     

促红细胞生成素对视网膜神经元的保护作用

促红细胞生成素(EPO)是红细胞生成的重要调节蛋白.EPO受体(EPO-R)属于细胞因子受体超家族.近来研究证实,EPO及其受体在神经系统也有表达,具有神经保护和促进神经元再生的双重作用.在眼科,虽然EPO和EPO-R在晶状体、角膜上皮、光感受器的内段、内核层、神经节细胞层均有表达,但近年来的研究重点是其对视神经的保护作用.研究表明,EPO可以通过抑制凋亡保护视网膜神经节细胞.因此,EPO的神经保护作用对治疗青光眼、视网膜色素变性等疾病有一定的实际意义.     

促红细胞生成素及其受体与视神经视网膜疾病

促红细胞生成素（EPO）具有促进红系祖细胞增生和分化的作用,其在光诱导性视网膜变性、视网膜缺血一再灌注损伤、急慢性高眼压、视神经损伤、多发性硬化性视神经炎、糖尿病视网膜病变（DR）、早产儿视网膜病变（ROP）等视神经视网膜疾病模型中的神经保护作用也受到了关注。就EPO及其受体在视网膜的分布、其在视神经视网膜病变模型中的表达情况及其对视网膜神经元的保护作用和机制方面的研究进展进行综述。     

促红细胞生成素对视神经视网膜的保护作用

促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)主要作用于骨髓巨核前体细胞,刺激红系造血祖组织及早幼红细胞形成成熟的红细胞集落。近年来,大量的研究显示EPO和EPO受体在神经系统上有功能表达,在体外培养及动物试验中都显示了显著的神经保护功能。在眼科,青光眼、视网膜脱离、视网膜色素变性等疾病的共同病理机制是视网膜神经节细胞、光感受器细胞等神经元的凋亡,最终导致视力的丧失。因此,EPO的神经保护作用对治疗这些疾病有一定的实际意义。现总结了EPO的神经保护性质分子机制及信号传导途径,探讨EPO用于青光眼视神经保护治疗的基础和可能性。     

促红细胞生成素与促红细胞生成素受体在大鼠脱离视网膜中的表达

目的 观察促红细胞生成素（EPO）和促红细胞生成素受体（EPOR）在大鼠脱离视网膜中的表达情况。方法48只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、视网膜脱离（RD）后1、3、6、12、24、48、72 h组,每组6只大鼠12只眼。视网膜下腔单次注射1.4%透明质酸钠致上半侧视网膜隆起建立RD模型,采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）测定不同时间点EPO和EPOR的mRNA和蛋白水平的表达情况,同时采用免疫组织化学方法观察EPO和EPOR在视网膜中定位表达的情况。结果 EPO和EPOR的mRNA表达水 平在RD后均上调,均于RD后48 h达到高峰,分别于RD后6、12 h显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;同样,EPO和EPOR的蛋白表达水平也在RD后均增高并在RD后48 h达到高峰,均于RD后3 h显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。免疫组织化学结果显示正常视网膜自神经节细胞层至光感受器细胞的内外节均有EPO弱表达,RD后48 h视网膜相应部位呈强阳性表达;正常视网膜自神经节细胞层至光感受器细胞的内节均有EPOR表达,RD后48 h视网膜相应部位呈强阳性着染。结论 RD后大鼠视网膜EPO和EPOR表达均逐渐增强,48 h达到高峰;大鼠神经视网膜大部分层次能表达EPO和EPOR。     

促红细胞生成素对大鼠急性缺血视网膜节细胞的保护作用

目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retina ischemia reperfusion injury,RIR)中视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)的保护作用。方法:成年雌性SD大鼠20只,采用夹闭视网膜动脉30min造成大鼠双眼缺血再灌注模型。所有大鼠均于建模前1h给予左眼rhEPO10U(6μL),右眼给予同等剂量眼用平衡盐液。按照建模后眼球取材时间不同(1,4,7,14d)分为4组,每组5只,均于取材前4d利用荧光金(fluorogold,FG)逆行标记大鼠RGC,视网膜铺片RGC计数,比较双眼存活RGC数量。结果:rhEPO治疗眼RGC存活数多于平衡盐液对照眼。结论:rhEPO对大鼠视网膜急性缺血后RGC具有保护作用。     

促红细胞生成素对视网膜神经节细胞保护作用的研究进展

青光眼是一组由病理性眼压升高导致进行性视网膜神经节细胞凋亡和视野缺损的眼病,通过延缓视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGC）凋亡进度对受损视神经进行保护是青光眼研究领域的重要方向。近几年在对视神经保护的药物研究中,促红细胞生成素（erythropoietin, EPO）受到广泛关注。EPO 通过与红细胞膜表面的促红细胞生成素受体（erythropoietin receptor, EPOR）结合,抑制不同的细胞信号转导通路（如 HIF-1／iNOS 通路、RhoA ／ROCK 通路等）,从而抑制细胞内诱导凋亡发生的 Bax／Bcl-2等复合物的形成,发挥视神经保护作用。（国际眼科纵览,2016,40：155-160）     

视网膜脱离后光感受器细胞死亡机制及潜在治疗策略

视网膜脱离(RD)是临床上常见的致盲眼病之一,患者术后视功能恢复不理想.近年来研究表明,光感受器细胞死亡是导致RD后视功能损伤的主要原因,其发生机制复杂,涉及半胱氨酸蛋白酶依赖性的经典凋亡途径、内质网应激等非半胱氨酸蛋白酶依赖性凋亡途径以及坏死性凋亡、自噬等多种信号通路及其相互作用.阐明RD光感受器细胞的死亡机制,并在此基础上采取联合抑制多条死亡通路、干预上游靶点和加强内源性保护等策略有助于保护光感受器细胞,最终改善RD患者的视功能.本文综述了近年来RD光感受器细胞死亡机制的研究进展,探讨了可能存在的干预靶点以及未来潜在的治疗策略.     

小鼠实验性视网膜脱离后光感受器细胞的凋亡

目的 研究小鼠实验性视网膜脱离后光感受器细胞的凋亡情况。 方法 将成年C57Bl/6J小鼠36只分为2组：实验组小鼠18只左眼视网膜下注射1.4%透明质酸钠造成视网膜脱离，对照组小鼠18只左眼仅作巩膜穿刺。分别于手术后1、3、7和28 d摘除眼球，视网膜切片进行组织化学、免疫荧光染色，共聚焦显微镜检查。抗视锥和抗视杆细胞的抗体分别标记视锥和视杆细胞，dUTP缺口末段标记法(TUNEL)标记凋亡细胞。通过计数存活和凋亡的视锥和视杆细胞来定量光感受器细胞的凋亡和细胞丢失。 结果 凋亡细胞只存在于脱离部分视网膜的外核层，凋亡细胞在视网膜脱离后1 d即可检测得到，3 d时达到高峰，7 d后陡然减少。视网膜脱离后视杆和视锥细胞的死亡呈现同样的时程。 结论 凋亡是视网膜脱离后光感受器细胞死亡的主要病理改变。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 124-127)     

Viral delivery of heme oxygenase-1 attenuates photoreceptor apoptosis in an experimental model of retinal detachment

This study was designed to evaluate the efficacy of subretinal injection of recombinant adeno-associated virus vector expressing heme oxygenase-1 (rAAV-HO-1) in attenuating photoreceptor apoptosis induced by experimental retinal detachment (RD) in Sprague-Dawley rats. Our results disclosed that subretinal rAAV-HO-1 delivery achieved localized high HO-1 gene expression in retinal outer nuclear layer (ONL) compared with rAAV-lacZ-injected eyes and eyes with RD left untreated both at 2 (p = 0.003) and 28 (p = 0.007) days of RD. The ONL thickness (p = 0.018) and mean photoreceptor nuclei count (p = 0.009) in eyes receiving rAAV-HO-1 injection was significantly higher than in rAAV-lacZ-injected or eyes with RD left untreated at 28 days of RD. There were fewer apoptotic photoreceptor nuclei at 2 (p = 0.008) and 5 (p = 0.018) days of RD and less activated caspase-3 expression (p = 0.008) at 2 days of RD in rAAV-HO-1 treated eyes than in control eyes. These data supported that gene transfer approach might attenuate photoreceptor apoptosis caused by RD with a resultant better ONL preservation.     

促红细胞生成素缓释微球玻璃体腔注射对视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨乳酸/羟基乙酸共聚物（PLGA）装载的促红细胞生成素（EPO）缓释微球（EPO-PLGA微球）经玻璃体腔注射对大鼠视神经挫伤模型中受损视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用.方法 选取成年SD大鼠,建立视神经挫伤模型.建模后分别经玻璃体腔内注射含10 IU EPO的PLGA微球（EPO-PLGA组）、10 IU EPO（EPO组）、5 μl空白PLGA（PLGA组）、5 μl PBS（PBS组）,另设未治疗组不予玻璃体腔注药.术后5 d和2周,做视网膜切片,对各组RGC凋亡情况行TUNEL检测;术后23 d,DiI上丘逆标RGC,并于术后4周处死大鼠,视网膜铺片观察各组RGC存活情况;每组各个时间点分别处死6只SD大鼠.采用方差分析对结果进行比较.结果 TUNEL检测显示,术后5 d和2周,各组均可见TUNEL阳性细胞,其中EPO-PLGA组和EPO组TUNEL阳性细胞显著减少,其细胞凋亡率明显少于PLGA组、PBS组及未治疗组.术后4周,视网膜铺片RGC计数显示,正常SD大鼠RGC密度为（2387.7±164.9）个/mm^2,未治疗组为（748.3±58.8）个/mm^2,EPO-PLGA组为（1296.7±157.6）个/mm^2,EPO组为（1418.5±154.9）个/mm^2,PLGA组为（821.7±52.1）个/mm^2,PBS组为（804.4±86.4）个/mm^2;可见EPO-PLGA组和EPO组较未治疗组细胞密度显著增高,具有明显的RGC保护作用（P均＜0.01）,而EPO-PLGA组和EPO组间差异无统计学意义（P=0.065）.结论 EPO-PLGA缓释微球与EPO具有等效的RGC保护作用,这为进一步观察EPO-PLGA缓释微球的长效神经保护作用奠定了基础.     

视网膜脱离合并脉络膜脱离的治疗效果分析

目的　评价视网膜脱离合并脉络膜脱离不同治疗方法的效果。方法　回顾分析 1998年 1月～ 2 0 0 0年 12月我院收治的视网膜脱离合并脉络膜脱离共 114例 (114只眼 )患者的治疗方法及其预后。结果　 5 5例采用环扎加压术的患者中 ,一次手术成功 40例 (90 .9%) ;采用环扎加压 +放液术的 2 0例患者中 ,一次手术成功 14例(70 %) ;采有玻璃体切割 +环扎加压 +剥膜术 +气液交换 39例中 ,一次手术成功 36例 (92 .1%)。其玻璃体切割组与环扎加压组、环扎加压 +放液组差别有统计学意义 (x2 =5 .84,P <0 .0 5 )。结论　对视网膜脱离合并脉络膜脱离患者 ,玻璃体手术是一种比较有效的治疗方法。     

重组人促红细胞生成素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 制作Sprague-Dawley (SD)大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)损伤模型,探讨腹腔内注射重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对急性RIR损伤所致的大鼠视网膜神经元损伤的保护作用及其对热休克蛋白72(HSP72)表达的影响.方法 采用前房灌注的方式建立RIR损伤模型,灌注压110 mm Hg(1 mm Hg=0.133kPa),缺血时间1h;腹腔注射rHuEPO.78只SD大鼠随机分组:正常组6只,EPO组、EPO+槲皮黄酮组、RIR组各24只,均以右眼为实验眼.采用免疫组织化学法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)分别测定正常对照组和各实验组大鼠再灌注24h、48 h、72 h和1周视网膜中HSP72及凋亡细胞的表达,观察各组大鼠视网膜病理学改变.结果 ①正常组大鼠视网膜中HSP72表达微弱,各实验组大鼠视网膜中HSP72表达自再灌注12 h开始增强,24h达到高峰,随后逐渐减弱,72 h时表达稍高于正常.再灌注后各时间段,EPO组大鼠视网膜中HSP72表达均高于RIR组、EPO+槲皮黄酮组(P＜0.05).②正常大鼠视网膜中几乎没有凋亡细胞.再灌注后12 h,各实验组大鼠视网膜中可见凋亡细胞,24 h达高峰,48 h后凋亡细胞数逐渐减少;再灌注后各组大鼠视网膜中凋亡细胞数比正常组多(P＜0.05).③再灌注后,RIR组,EPO+槲皮黄酮组大鼠内层视网膜明显水肿,炎性细胞侵入,膜结构逐渐破坏;EPO组大鼠视网膜结构保持相对完整,炎性细胞相对较少.结论 ①HSP72在正常大鼠视网膜中表达微弱,RIR损伤后表达增多.腹腔注射EPO可以明显诱导大鼠视网膜中HSP72的表达增多.②EPO可以减少大鼠RIR损伤后视网膜细胞凋亡,减少视网膜内炎性细胞的浸润,保护视网膜结构,对视网膜具有明显的保护作用.其机制可能与使HSP72表达上调有关.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:30-35)     

网脱术后并发渗出性视网膜脱离11例报告

目的：探讨网脱术后并发渗出性视网膜脱离的原因、临床表现及预后。方法：分析11例视网膜脱离行外路手术后的病例，裂孔性视网膜脱离6眼，锯齿缘离断性视网膜脱离3眼，巨大裂孔性视网膜脱离2眼，行硅压，环扎，外放液，冷凝手术。结果：11只眼于手术3天一10天出现了不向程度的渗出性视网膜脱离，经保守治疗视网膜下渗液吸收，视网膜复位。结论：渗出性视网膜脱离为视网膜脱离术后并发症，正确诊断、处理可以治愈。