视网膜脱离模型中外源性促红细胞生成素对其受体表达的影响

目的探讨外源性促红细胞生成素（EPO）对促红细胞生成素受体（EPOR）在脱离的视网膜中表达的影响。方法通过视网膜下腔注射质量分数1.4%透明质酸钠在60只SD大鼠的右眼建立视网膜脱离（RD）模型,12只正常SD大鼠为正常对照组。不同组RD模型眼（每组12只眼）玻璃体腔内分别注射PBS或100、200、400ng重组大鼠源性EPO。玻璃体注射后3d应用Westernblot法半定量检测各组SD大鼠脱离的视网膜中EPOR蛋白表达水平的变化并进行比较,应用免疫组织化学法定位检测脱离的视网膜中EPOR蛋白的表达。结果 Westernblot检测结果表明大鼠正常视网膜中EPOR表达量少,为0.28±0.02;造模后3d,EPOR在脱离的视网膜中表达量明显增加,为0.41±0.05,差异有统计学意义（P〈0.05）。RD＋PBS组、RD＋EPO100ng组、RD＋EPO200ng组和RD＋EPO400ng组EPOR蛋白的表达量分别为0.39±0.03、0.41±0.03、0.43±0.07、0.44±0.05,明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但RD＋PBS组、RD＋EPO100ng组、RD＋EPO200ng组和RD＋EPO400ng组间EPOR蛋白的表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。RD组与RD＋不同剂量EPO组比较EPOR表达的差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫组织化学检测结果证实EPOR蛋白表达于视网膜各层,RD＋不同剂量的EPO处理组EPOR表达均强于正常对照组。结论 RD发生后补充外源性EPO对EPOR的表达并无影响。     

外源性促红细胞生成素对大鼠视网膜脱离光感受器细胞的保护作用

目的 观察外源性促红细胞生成素(EPO)对大鼠视网膜脱离(RD)状态下光感受器细胞的保护作用.方法 采用计算机产生随机数字的方法将162只正常雄性SD大鼠分为正常对照组(NC组)、RD组、RD+磷酸盐缓冲液(PBS)组、RD+EPO 100、200、400 ng组.RD后3 d,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性和B细胞淋巴瘤/白血病-XL(bcl-XL)的表达,免疫荧光检测caspase-3活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测光感受器细胞凋亡情况.RD后14、28 d,2个月,视网膜组织病理学观察并测量外核层(ONL)厚度.结果 Western bolt检测发现,各组间活化caspase-3条带灰度值差异有统计学意义(F=35.96,P<0.01),bcl-XL条带灰度值差异也有统计学意义(F=30.75,P<0.01).免疫荧光和TUNEL检测发现,caspase-3免疫阳性光感受器细胞数目与TUNEL阳性细胞核趋势表现一致.RD后14 d、2个月,各组间ONL差异有统计学意义(F=21.52,96.25;P<0.01).结论 RD后补充外源性EPO可通过抑制caspase-3活性并增加bcl-XL的表达拮抗凋亡,从而发挥对光感受器细胞的保护作用.     

外源性可溶性促红细胞生成素受体对正常大鼠视网膜神经元存活的影响

目的观察玻璃体腔注射外源性可溶性促红细胞生成素受体（EPOsR）对视网膜神经元存活的影响。方法30只SD鼠随机分为正常对照组、PBS组、EPOsR 2ng组、EPOsR 20ng组、EPOsR 200ng组，每组6只（12只眼）。后4组玻璃体腔内分别注射5μL PBS，2、20、200ng EPOsR。注射前记录闪光视网膜电图（FERG），注射后3d再次进行FERG检查及视网膜神经元TUNEL凋亡原位检测，注射后7d进行光学显微镜和透射电镜检查。结果注药前后各组a波、b波的潜伏期及振幅差异无统计学意义（P〉0．05），震荡电位（OPs）的P4潜伏期和各子波总振幅差异亦无统计学意义（P〉0．05）；全层视网膜神经元TUNEL凋亡原位检测未见凋亡细胞；光学显微镜和透射电镜检查均未见明显的水肿、空泡状变性等组织病理学改变。结论玻璃体腔注射200ng以下剂量的外源性EPOsR不影响正常状态下视网膜神经元的存活。     

促红细胞生成素缓释微球玻璃体腔注射对视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨乳酸/羟基乙酸共聚物（PLGA）装载的促红细胞生成素（EPO）缓释微球（EPO-PLGA微球）经玻璃体腔注射对大鼠视神经挫伤模型中受损视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用.方法 选取成年SD大鼠,建立视神经挫伤模型.建模后分别经玻璃体腔内注射含10 IU EPO的PLGA微球（EPO-PLGA组）、10 IU EPO（EPO组）、5 μl空白PLGA（PLGA组）、5 μl PBS（PBS组）,另设未治疗组不予玻璃体腔注药.术后5 d和2周,做视网膜切片,对各组RGC凋亡情况行TUNEL检测;术后23 d,DiI上丘逆标RGC,并于术后4周处死大鼠,视网膜铺片观察各组RGC存活情况;每组各个时间点分别处死6只SD大鼠.采用方差分析对结果进行比较.结果 TUNEL检测显示,术后5 d和2周,各组均可见TUNEL阳性细胞,其中EPO-PLGA组和EPO组TUNEL阳性细胞显著减少,其细胞凋亡率明显少于PLGA组、PBS组及未治疗组.术后4周,视网膜铺片RGC计数显示,正常SD大鼠RGC密度为（2387.7±164.9）个/mm^2,未治疗组为（748.3±58.8）个/mm^2,EPO-PLGA组为（1296.7±157.6）个/mm^2,EPO组为（1418.5±154.9）个/mm^2,PLGA组为（821.7±52.1）个/mm^2,PBS组为（804.4±86.4）个/mm^2;可见EPO-PLGA组和EPO组较未治疗组细胞密度显著增高,具有明显的RGC保护作用（P均＜0.01）,而EPO-PLGA组和EPO组间差异无统计学意义（P=0.065）.结论 EPO-PLGA缓释微球与EPO具有等效的RGC保护作用,这为进一步观察EPO-PLGA缓释微球的长效神经保护作用奠定了基础.     

BMSCs联合ChABC对视网膜变性大鼠光感受器细胞凋亡的影响

目的：研究骨髓间充质干细胞（ bone mesenchymal stem cells, BMSCs ）联合硫酸软骨素酶（ chondroitinaseABC, ChABC）行视网膜下腔注射对碘酸钠诱导的视网膜变性大鼠光感受器细胞凋亡的影响。
　　方法：选取40只SD大鼠行腹腔注射碘酸钠（ NaIO3,30g／L,100mg／kg）造视网膜变性模型,分为A组不干预组,B组BMSCs注射组,C组BMSCs＋ChABC注射组,D组PBS注射组。造模后28d将ChABC处理或未处理的BMSCs注射入大鼠视网膜下腔,对照组注射PBS液,21 d后处死大鼠并取出眼球,行视网膜HE染色、视网膜细胞凋亡及免疫组化检测。
　　结果：B组凋亡率、外核层细胞数与A组、D组比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）。 C组凋亡率、外核层细胞数与A组、D组比较,差异均有统计学意义（ P＜0．05）。 B组凋亡率、外核层细胞数与C组相比,差异无统计学意义（P＞0．05）。免疫组化显示BMSCs在眼内表达GFAP抗原。结论：BMSCs联合ChABC行视网膜下腔注射可缓解视网膜变性大鼠光感受器细胞的凋亡,延缓细胞数目的减少,从而保护视网膜光感受器细胞。     

促红细胞生成素与促红细胞生成素受体在大鼠脱离视网膜中的表达

目的 观察促红细胞生成素（EPO）和促红细胞生成素受体（EPOR）在大鼠脱离视网膜中的表达情况。方法48只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、视网膜脱离（RD）后1、3、6、12、24、48、72 h组,每组6只大鼠12只眼。视网膜下腔单次注射1.4%透明质酸钠致上半侧视网膜隆起建立RD模型,采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）测定不同时间点EPO和EPOR的mRNA和蛋白水平的表达情况,同时采用免疫组织化学方法观察EPO和EPOR在视网膜中定位表达的情况。结果 EPO和EPOR的mRNA表达水 平在RD后均上调,均于RD后48 h达到高峰,分别于RD后6、12 h显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;同样,EPO和EPOR的蛋白表达水平也在RD后均增高并在RD后48 h达到高峰,均于RD后3 h显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。免疫组织化学结果显示正常视网膜自神经节细胞层至光感受器细胞的内外节均有EPO弱表达,RD后48 h视网膜相应部位呈强阳性表达;正常视网膜自神经节细胞层至光感受器细胞的内节均有EPOR表达,RD后48 h视网膜相应部位呈强阳性着染。结论 RD后大鼠视网膜EPO和EPOR表达均逐渐增强,48 h达到高峰;大鼠神经视网膜大部分层次能表达EPO和EPOR。     

促红细胞生成素在大鼠视网膜胚胎发育中的表达变化

背景促红细胞生成素（EPO）表达于造血组织和神经组织,发挥促红细胞生成和神经保护的作用。研究证实,EPO在胚胎发育的脑组织中有表达,但其在神经组织来源的视网膜中的表达情况研究较少。目的观察大鼠视网膜胚胎期发育过程中EPO的表达变化,探讨其与视网膜发育的关系。方法于Wistar母鼠孕12d（E12d）、孕16d（E16d）、孕20d（E20d）时氯胺酮麻醉后剖腹取胎,获得各阶段的胚胎鼠,每组孕鼠各5只,每只孕鼠任意选取1只胎鼠;成年组（12月龄）共选Wistar大鼠5只。成年鼠及胎鼠用颈椎脱臼法处死后立即摘除眼球,分离视网膜并制作石蜡切片。用免疫组织化学法、半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测大鼠视网膜组织中EPO蛋白及EPOmRNA的表达。结果胚胎各期视网膜神经上皮层及RPE层均有EPO阳性表达,免疫阳性染色主要位于细胞质和细胞核;成年鼠EPO阳性表达主要集中于RGCs层,E12d、E16d、E20d和成年组大鼠视网膜中EPO的表达量分别为105．55±10．35、99．35±8．71、83．27±7．84和30．30±3．80,差异有统计学意义（F=76．13,P〈0．01）。凝胶成像半定量分析显示,EPO基因扩增产物的表达在E16d最高,E20d次之,成年组最低。E16d、E20d和成年组大鼠视网膜中EPOmRNA表达的相对值分别为0．88±0．10、0．86±0．09和0．26±0．03,胚胎鼠明显高于成年鼠,差异有统计学意义（F=136．81,P=0．00）。结论Wistar大鼠视网膜胚胎发育过程中EPO的表达呈现由高到低的趋势,其表达规律与视网膜发育各期的组织学改变相吻合。这种变化可能与大鼠视网膜胚胎期的发育密切相关。     

rhEPO对早期糖尿病大鼠视网膜超微结构和EPO-R表达的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）对于早期糖尿病大鼠视网膜超微结构和促红细胞生成素受体（erythropoietin-receptor,EPO-R）的影响.方法 采用10 g·L^-1 STZ建立糖尿病大鼠模型,成模2周后通过腹腔注射EPO进行干预,每周3次,共2周.各组大鼠视网膜经固定、脱水、浸透和包埋后,对组织切片进行透射电子显微镜观察、拍片.将各组大鼠眼球石蜡包埋后连续组织切片,EnVision^＋TM二步法进行EPO-R免疫组织化学染色,光镜下观察EPO-R在视网膜的表达.结果 4周末,STZ诱导糖尿病SD大鼠视网膜出现大量空泡变性,神经节细胞层和神经纤维层的神经节细胞内线粒体肿胀,线粒体嵴断裂、消失;EPO腹腔注射糖尿病大鼠视网膜未出现明显的空泡变性,神经节细胞形态基本正常;正常大鼠视网膜中可见EPO-R弱阳性表达.4周末,STZ诱导糖尿病大鼠视网膜中可见EPO-R呈大量强阳性表达;EPO腹腔注射糖尿病大鼠视网膜中仅见EPO-R弱阳性表达.其中EPO-R在视网膜的表达主要位于视网膜内层,包括视网膜节细胞层和内核细胞层.结论 在早期糖尿病大鼠模型中,内源性EPO-R的上调对视网膜神经细胞形态有影响.使用外源性的EPO能改善早期糖尿病大鼠的视网膜EPO-R的上调以及延缓视网膜神经细胞的结构损伤.     

阻断促红细胞生成素抑制小鼠视网膜新生血管生成

目的：建立C57 BL/6小鼠氧致血管增生性视网膜病变模型( oxygen induced retinopathy, OIR),探讨阻断促红细胞生成素( Erythropoietin, EPO )对视网膜新生血管的抑制作用。
　　方法：取鼠龄7 d ( P7)的健康C57 BL/6小鼠置于75%±2%氧气浓度的密闭氧舱中5d,鼠龄12d (P12)时返回正常空气环境以建立氧诱导鼠视网膜新生血管模型;新生小鼠于P12~P16隔日给予玻璃体腔内注射0.5μL含有25ng(A组),50ng(B组),250ng(C组)可溶性EPO受体的PBS液以及不含EPO受体的PBS液( D组)。于P17时分批处死各组小鼠,小鼠眼球以4%多聚甲醛固定,制成病理切片,进行视网膜组织形态病理学观察计数突破内界膜新生血管细胞核数,了解视网膜新生血管增生程度。
　　结果：计数病理切片突破内界膜新生血管细胞核数目,各组玻璃体内EPO受体注射组较PBS注射组新生血管细胞核数明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。并且各不同浓度EPO受体组间新生血管细胞核计数差异亦有统计学意义(P<0.01),随着EPO受体浓度增高,突破内界膜新生血管内皮细胞数减少。
　　结论：可溶性EPO受体玻璃体腔内注射能够阻断EPO的促新生血管生成作用,有望成为治疗眼部新生血管性疾病的新方法。     

促红细胞生成素对大鼠实验性视网膜脱离细胞凋亡的干预作用

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对实验性视网膜脱离大鼠细胞凋亡的干预作用。方法选用SD大鼠44只,随机分为正常对照组(4只)、生理盐水(normal saliue,NS)对照组20只和EPO治疗组(20只)。正常对照组不做任何处理,其他两组大鼠建立孔源性视网膜脱离模型。造模前4hEPO治疗组大鼠腹腔中注射EPO,NS对照组注射生理盐水。术后1h、6h、12h、24h、72h处死大鼠,每个时间点各取4只,摘取眼球,TUNEL染色,计算内核层、节细胞层及外核层细胞数,进行统计学分析。结果正常对照组大鼠视网膜层次结构清晰,各层排列整齐。NS对照组在脱离后12h连续层状结构紊乱,外节丢失增多,而EPO治疗组的连续层状结构存在,外节变性较轻。TUNEL染色结果显示EPO治疗组在视网膜脱离后1h、12h、24h、72h节细胞层及内核层凋亡细胞数[分别为(4.75±1.42)/目、(7.17±1.27)/目、(9.41±1.08)/目、(11.83±1.11)/目]少于NS对照组(7.83±1.70)/目、(9.67±1.56)/目、(12.42±1.31)/目、(15.25±1.22)/目,差异有统计学意义(均为P<0.001)。而外核层EPO治疗组在视网膜脱离后12h、24h、72h的凋亡细胞数[分别为(33.08±8.64)/mm2、(49.17±12.52)/mm2、(92.83±14.14)/mm2]少于NS对照组,差异有统计学意义(均为P<0.05),余时段2组间比较差异均无统计学意义。结论通过腹腔注射EPO能减少实验性视网膜脱离所致视网膜各层细胞的凋亡。     

原纤维蛋白-2(FBN2)抗体玻璃体内注射对小鼠视网膜变性的影响

目的　探讨原纤维蛋白-2（fibrillin-2,FBN2）抗体玻璃体内注射对小鼠视网膜变性的影响。方法　选取18只8周龄C57BL/6J小鼠,随机分为3组:正常对照组、PBS组、FBN2抗体组,每组6只。正常组小鼠不做任何处理,PBS组小鼠双眼玻璃体内注射4 μL PBS溶液,FBN2抗体组小鼠双眼玻璃体内注射4 μL FBN2抗体（0.2 g·L^-1）,每周注射1次,连续3周。利用眼底照相和视网膜电流图（ERG）分别检测3组小鼠眼底改变和视网膜功能。PAS染色法观察小鼠视网膜形态并测量眼球后极部视网膜、外核层以及内核层厚度,采用实时定量PCR和ELISA检测小鼠视网膜中FBN2 mRNA和蛋白的表达。结果　眼底照相显示:FBN2抗体组小鼠眼底出现明显渗出,黄白色似玻璃膜疣样沉积物以及色素沉着的病理改变,且随时间延长病理改变加重。ERG结果显示:每次注射后FBN2抗体组暗适应视杆细胞反应b波和暗适应混合细胞反应a波振幅均低于正常对照组和PBS组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05),且两者振幅在抗体注射3次后均最低,分别为(13.28±3.41)μV和(21.67±8.81)μV;在注射2次和3次后,FBN2抗体组暗适应混合细胞反应b波振幅均低于正常对照组和PBS组,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）,且该波振幅在抗体注射2次时最低为(59.12±18.00)μV;正常对照组和PBS组之间,各振幅差异均无统计学意义（均为P＞0.05）。PAS染色结果表明:FBN2抗体组视网膜厚度和外核层厚度 ［（129.33±15.38）μm、（23.39±3.93）μm］均低于正常对照组［(197.68±13.50）μm、（46.54±7.44）μm］和PBS组［（198.27±8.28）μm、（38.92±2.39）μm］,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）;正常对照组和PBS组之间比较,差异均无统计学意义（均为P＞0.05）。ELISA检测显示:FBN2抗体组视网膜中FBN2蛋白的相对表达［(0.15±0.01）ng·mg^-1］低于正常组［(0.17±0.01）ng·mg^-1］和PBS组［(0.17±0.02）ng·mg^-1］ （均为P＜0.05）。PCR结果显示:FBN2抗体组视网膜中FBN2 mRNA的相对表达低于正对照组和PBS组。结论　玻璃体内注射FBN2抗体能够降低小鼠视网膜中FBN2蛋白的表达,引起小鼠发生视网膜变性 。     

人脐带间充质干细胞对大鼠视网膜光损伤的保护作用

目的　观察体外人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）能否由视网膜匀浆上清液诱导分化为神经样细胞及移植到视网膜光损伤大鼠玻璃体内后存活、迁移、整合及分化的情况。方法　无菌条件下采集健康足月剖宫产胎儿的正常脐带组织，经2.5 g·L^-1胰蛋白酶和1 g·L^-1胶原酶消化、贴壁培养获得hUCMSCs。将CM-Dil标记的hUCMSCs注入光损伤大鼠玻璃体内，观察眼内整合分化情况，对正常对照组、光损伤组、PBS治疗组和hUCMSCs治疗组大鼠视网膜外核层层数和厚度进行对比分析。结果　hUCMSCs培养48 h后贴壁生长，呈长梭形，14 d后可见细胞融合成片。光损伤后大鼠视网膜外核层结构紊乱、细胞层数减少，厚度变薄，与正常对照组［（40.73±1.32）μm］相比，hUCMSCs治疗组［（31.28±1.79）μm］与PBS治疗组［（17.21±1.02）μm］及光损伤组［（12.68±1.42）μm］的视网膜外核层厚度均变薄（均为P<0.05）。与光损伤组相比，PBS治疗组和hUCMSCs治疗组视网膜外核层层数显著增加。结论　HUCMSCs移植到光损伤大鼠玻璃体内后能存活、迁移及整合到受损伤视网膜，hUCMSCs玻璃体内移植可抑制光损伤大鼠光感受器的凋亡。     

Safety and efficacy of intravitreal injection of recombinant erythropoietin for protection of photoreceptor cells in a rat model of retinal detachment

Purpose

To elucidate the safety and efficacy of exogenous erythropoietin (EPO) for the protection of photoreceptor cells in a rat model of retinal detachment (RD).

Methods

Recombinant rat EPO (400 ng) was injected into the vitreous cavity of normal rats to observe the eye manifestations. Retinal function was assessed by flash electroretinograms. Histopathological examination of retinal tissue was performed at 14 days and 2 months after injection, respectively. To investigate the inhibitory effect of EPO on photoreceptor cell apoptosis in RD rats, 100, 200, or 400 ng EPO was injected into the vitreous cavity immediately after RD model establishment. Apoptosis of photoreceptor cells was determined at 3 days after injection. Caspase-3 activation was measured by western blot analysis and immunofluorescence, respectively, and the level of Bcl-X_L expression was analyzed by western blot.

Results

Intravitreal injection of EPO 400 ng into normal rats had no significant impact on retinal function, morphology, or structure. Apoptosis of retinal photoreceptor cells apparently increased after RD and was significantly reduced following EPO treatment. The thickness of the outer nuclear layer in the RD+400 ng group was significantly thicker than that in other experimental RD groups both at 14 days and at 2 months after RD (P<0.05). Western blot and immunofluorescence analyses showed decreased caspase-3 activation and increased Bcl-X_L expression following EPO treatment.

Conclusion

Intravitreal injection of EPO 400 ng is safe, and EPO may suppress caspase-3 activation and enhance Bcl-X_L expression, resulting in inhibition of apoptosis and protection of photoreceptor cells.     

Caspase-dependent apoptosis in light-induced retinal degeneration

PURPOSE: To study the apoptotic mechanism involved in our model of light-induced retinal degeneration. METHODS: Rats were injected intravitreally with PBS, 2% dimethyl sulfoxide (DMSO), caspase inhibitor Z-VAD-FMK (1.06 mM), Z-YVAD-FMK (0.16 mM), or Z-DEVD-FMK (2 mM) before they were placed in constant light (3400 lux) for 24 hours. Additional controls included rats that were uninjected or were punctured with a dry needle. Electroretinograms were recorded before injection and 1 day after the cessation of exposure to constant light. A group of rats was killed for apoptotic cell detection in the outer nuclear layer. Fifteen days later, the remaining rats were killed for histology, and the outer nuclear layer (ONL) thickness was measured. Caspase-1, caspase-3, and calpain activities were measured before and 1 day after exposure to the damaging light. RESULTS: ZVAD, YVAD, and DEVD inhibited caspase-1 and -3 activities, but not calpain activity, from the beginning and up to 1 day after light exposure. In untreated, dry needle-punctured, PBS, DMSO, and YVAD groups, light exposure significantly reduced retinal function and ONL thickness and increased by 51-fold the number of apoptotic cells. ZVAD and DEVD preserved retinal function to 86% and 78%, respectively, and reduced by three times the number of apoptotic photoreceptors. ONL thickness was more preserved in ZVAD (to 72%) than in DEVD (to 56%). CONCLUSIONS: In the authors' model of retinal degeneration, photoreceptor cells die through a caspase-dependent mechanism. However, the molecular events involved during and after light exposure seemed to implicate different proteases.     

频域OCT对正常人和青光眼光感受器细胞层厚度的检测

背景青光眼以视网膜内层的神经节细胞丢失为主要病理特征,但其是否累及视网膜外层尚有争议。部分研究认为青光眼将导致视网膜外层（光感受器）功能的异常,而病理学研究得出了不同的结论。目的用频域OCT测量正常人和青光眼患者光感受器细胞层的厚度,探讨青光眼对光感受器细胞层厚度的影响。方法采用病例对照研究。用频域OCT（SDOCT）对正常人38例38眼和青光眼患者48例48眼的黄斑区进行扫描,由一位检测者采用Sigma图像分析软件盲法测量黄斑中心凹和旁中心凹处（中心凹外1．5mm）视网膜光感受器层的厚度。同时采用时域OCT（Stratus OCT）测量所有检测眼的视盘周围视网膜神经纤维层（RNFL）厚度,比较正常组和青光眼组光感受器细胞核层的平均厚度,分析光感受器细胞层厚度与RNFL厚度的关系。结果正常组和青光眼组在黄斑中心凹光感受器细胞核层厚度分别是（96．7±10．7）μm、（103．7±13．3）μm,差异有统计学意义（P=0．011）;中心凹光感受器内节和外节层厚度分别是（59．3±5．5）μm、（59．5±5．5）μm,差异无统计学意义（P=0．890）。正常组和青光眼组在中心凹外3mm处光感受器细胞核层厚度分别是（70．9±14．0）μm、（68．7±10．7）μm,光感受器内节和外节层厚度分别为（45．2±6．4）μm,（43．6±5．5）μm,差异均无统计学意义（P=0．410,P=0．228）。黄斑中心凹处光感受器细胞核层厚度和RNFL厚度两者有二元线性关系（γ=-0．019X。＋2．73X＋10．34,R^2=0．211,P=0．005）。结论青光眼的黄斑中心凹光感受器细胞核层显著增厚,并随病程的变化而改变。     

不同剂量N-乙酰-5-羟色胺（NAS）对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜细胞凋亡的影响

目的　探讨不同剂量N-乙酰-5-羟色胺（N-acetylserotonin,NAS）对视网膜缺血-再灌注损伤（retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI）大鼠视网膜细胞凋亡的影响。方法　成年SD大鼠随机分为正常对照组、RIRI 组和 NAS 组。采用高眼压法建立RIRI大鼠模型。NAS组按照给药剂量的不同分为NAS低剂量组（5 mg·kg^-1）、NAS中剂量组（10 mg·kg^-1）和NAS高剂量组（20 mg·kg^-1）,造模前后30 min腹腔注射NAS。HE染色法观察各组大鼠视网膜形态学的改变,免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜中活性Caspase-3的表达,TUNEL法检测各组视网膜细胞凋亡的变化。结果　HE染色结果显示,NAS中剂量组大鼠视网膜各层细胞排列最整齐,视网膜内层厚度［（53.24±1.68）μm］显著薄于RIRI组［（60.54±2.52）μm］及NAS低剂量组［（56.78±1.78）μm］（均为P<0.01）,NAS中剂量组视网膜神经节细胞数［（1113.65±74.40）个·mm^-2］显著多于RIRI组［（719.89±83.67）个·mm^-2］及NAS低剂量组［（882.09±55.62）个·mm^-2］（均为P<0.01）。免疫组织化学结果示,视网膜中活性Caspase-3阳性细胞数RIRI组［（246.08±19.23） 个·mm^-2］及NAS低、中、高剂量组［（196.95±19.83）个·mm^-2、（142.77±18.25）个·mm^-2、（133.10±15.19）个·mm^-2］均显著多于正常对照组［（95.37±10.93）个·mm^-2］（均为P<0.01）;NAS中剂量组视网膜中活性Caspase-3阳性细胞数量显著少于RIRI组及NAS低剂量组（均为P<0.01）。TUNEL检测结果显示,TUNEL阳性细胞数RIRI组［（225.45±18.93）个·mm^-2］及NAS低、中、高剂量组［（175.06±17.69）个·mm^-2、（108.85±13.41）个·mm^-2、（100.37±13.53）个·mm^-2］均多于正常对照组［（81.98±11.29）个·mm^-2］（均为P<0.01）;NAS中剂量组视网膜TUNEL阳性细胞数显著少于RIRI组及NAS低剂量组（均为P<0.01）。结论　腹腔注射NAS治疗可减轻RIRI大鼠视网膜细胞凋亡,具有神经保护作用,中剂量NAS治疗方案最佳。