饮水消毒剂一无机一氯氨的致突变性研究

本文用枯草杆菌重组修复试验(芽孢法)和大肠杆菌回变试验方法,研究了饮水消毒剂一氯氨(NH_2Cl)的致突变性。结果显示:NH_2Cl在检测DNA损伤及修复的枯草杆菌重组修复试验中,在加和不加S_9的条件下,当浓度分别为:3.24、6.47、12.94mM和3.64、7.28、14.56mM时,均未检出致突变性;在检测基因突变的大肠杆菌回变试验中,在加和不加S_9的条件下,当浓度分别是:2.82×10~(-3)、1.41×10~(-2)、7.04×10~(-2)mM和2.74×10~(-3)、1.37×10~(-2)、6.84×10~(-2)mM时,均获得了阳性结果。根据国际预访环境致突变物致癌物委员会意见,有理由认为,在本实验条件下,NH_2Cl为一致突变剂。     

甲基对硫磷、P_(204)等对人外周血淋巴细胞DNA损伤修复测定

DNA切除修复试验可用作检测化学物质的致突变性。用人类外周血淋巴细胞DNA切除修复试验检测化合物(甲基对硫磷、杀螟松、P_(204)、抗矽—14)致突变性。结果表明:甲基对硫磷、P_(204)能诱导程序外DNA合成大量增加,切除修复试验阳性。杀螟松、抗矽—14阴性。     

损伤DNA物质的快速检验

当前用哺乳动物细胞检测潜在致突变物质或致癌物质的试验方法一般都是测定对DNA损伤的细胞反应,如DNA的修复等。如果实验说明这种物质能损伤DNA,即可认为这种物质是一种潜在性的致突变物质或致癌物质。人类细胞对DNA损伤的早期反应是DNA合成的抑制;某些不损伤DNA的物质也可能抑制DNA的合成,但可以根据染毒停止以后     

沙门氏菌致突变试验方法的改进

本文报道了沙门氏菌致突变试验(Ames 试验)检测致癌物和致突变物方法的改进。一、试验菌株Ames 试验使用的是一组需要组氨酸的菌株。每一试验菌株含有不同类型组氨酸操纵子突变(见表1) ,此外,标准试验菌株还有可增强检测致突变物能力的其它突变。新的移码菌株TA 97代替过去标准菌株中不敏感的菌株TA 1537。此菌株有一个外加的胞嘧啶,从而     

无铅汽油新型添加剂甲基叔丁基醚的致突变性研究

目的；研究甲基叔丁基醚（MTBE）的致突变性及遗传毒性。方法：采用Ames试验检测MTBE的遗传毒性，并用单细胞凝胶电泳法检测国产MTBE大鼠经口亚慢性染毒后血液有核细胞的DNA的损伤状况。结果：Ames试验（TA98和TA100菌株）中，在加与不加S9的情况下，MTBE均未表现出明显的致突变性。染毒大鼠血液有核细胞DNA的断裂损伤也较对照组未见统计学差异。结论：本研究结果未发现MTBE对受试系统有致突变性。     

适用于彗星试验的神经细胞分离方法研究

单细胞凝胶电泳试验(SCGE)，又称慧星试验(comet assay)，是近年来发展起来的一种高效、快速、形象化、灵敏度很高的检测哺乳动物细胞DNA损伤的新技术，它突破了传统短期测试在许多领域的局限性，而且该方法更适合于测定DNA单链断裂损伤，故在检测化学物质致突变性方面有其独特之处。该试验方法的优点之一是可以检测体内各种组织器官的DNA损伤作用，包括过去很少开展的神经细胞的遗传损伤研究。     

利用姊妹染色单体交换作为致突变性检测方法的研究

近来,姊妹染色单体交换(SCE)现象,已被用作检测化学物质致突变性的方法。其优点是对已知的致突变物呈现高度的敏感性,同时可以研究对细胞分裂周期的影响。在姊妹染色单体交换的形成中,提示与DNA链的损伤或DNA复制过程的修复有关。但是,到目前为止,其详细的机理及生物体内的生物意义几乎     

天津市饮用水源与其它水源的致突变性研究

本研究采用细菌徬徨试验和枯草杆菌重组修复试验对天津市饮用水源与其它水源十七个水样进行了致突变检测。试验结果表明地下水两个样品两种试验均为阴性。地面水和自来水七个样品徬徨试验均有不同程度的致突变性,但重组试验均为阴性。污水样品六个样品在徬徨试验中为阳性,六个样品在重组试验中为阳性。两种试验方法检测终点不同,可以互相补充。该试验系统用于水样的检测既灵敏又方便,大大提高了水样品的致突变检出率。     

某市饮用水有机提取物对小鼠肝细胞DNA损伤的研究

目的研究某市生活饮用水有机提取物对小鼠肝原代细胞所致的DNA损伤作用。方法采用小鼠肝原代细胞彗星试验分别对某市南郊水厂的水源水、出厂水、自来水的有机提取物的致突变性进行检测。结果该市水源水、出厂水和自来水对小鼠肝原代细胞均产生了不同程度的DNA损伤作用,但出厂水和自来水引起肝细胞DNA损伤作用的阈值更低(在本研究为100m1)。结论该市生活饮用水的水源水和氯化消毒后饮用水都受到不同程度的有机致突变物的污染,氯化消毒后饮用水比水源水的致突变性更强,可能是由氯化消毒副产物的致突变性所致。     

彗星试验对4种化学物质诱导人淋巴细胞DNA损伤的检测

目的验证彗星试验可否用于检测不同类型化学诱变剂诱发的DNA损伤。方法人淋巴细胞经4-硝基喹啉氧化物(4-NQO,拟紫外线诱变剂)、甲基甲烷磺酸酯(MMS,烷化剂)、博来霉素(BLM,拟X射线诱变剂)和丝裂霉素C(MMC,DNA交联损伤剂)染毒3h,再培养0h或21h,然后用彗星试验检测这4种化合物所诱发的DNA单链断裂(SSB)。结果彗星试验能立即检出4-NQO、MMS和BLM诱发的SSB,并具有剂量-效应关系(P<0.01),在21hDNA损伤程度减轻(与0h比较,P<0.01)。MMC诱发的DNA损伤在染毒后21h才被检出,并有剂量-效应关系(P<0.01)。结论虽然这4种化学诱变剂的作用机制不同,但彗星试验仍能检测出他们诱发人淋巴细胞DNA损伤的效应。     

基于GADD153启动子的环境致癌物快速筛选系统研究

[目的]构建快速检测环境中痕量致癌物DNA损伤效应的重组人肝细胞株。[方法]构建含生长抑制与DNA损伤基因153(GADD153)启动子和萤光素酶报告基因的重组稳定转染人肝肿瘤HepG2细胞;发光检测不同致癌物对稳定转染细胞的DNA损伤效应;同时RT-PCR检测内源性GADD153mRNA的表达;彗星试验(Cometassay)检测DNA的损伤效应。[结果]稳定转染GADD153-LUC细胞株可检出多环芳烃、芳香胺、重金属、农药等已知环境致癌物以及实际水样中的含量。检测结果与彗星试验结果相比,大多数检测下限均低于彗星试验的检测限,其中对苯并芘、氯化镉和2-氨基芴的检测灵敏度分别高于彗星试验1000、300和100倍;对Aems试验不敏感的重金属、四氯化碳、氟化钠等重组细胞株具有较高的检测灵敏性。10μmol/L的氯化镉可诱导内源性GADD153mRNA和萤光素酶活性表达增加,相关分析表明两者具有良好的相关性(r2=0.9539)。[结论]重组细胞株GADD153-LUC细胞可快速检测环境中痕量污染物的DNA损伤效应。     

ERCC2/XPD基因缺失对短波紫外线所致CHO细胞DNA损伤修复的影响

目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因2(excision repair cross complementation group 2/Xeroderma pigmentosum D,ERCC2/XPD)在短波紫外线(UVC)所致细胞DNA损伤与修复过程中的作用。方法采用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)野生型AA8及ERCC2蛋白表达缺失型UV5构建细胞对照模型。MTT法比较两种细胞经UVC处理后细胞抑制率的差别;彗星试验与Rad51免疫荧光试验检测经不同照射强度的UVC处理后修复1、3、6和24 h,不同细胞对UVC所致DNA损伤修复能力的差异。结果与野生型AA8相比,UV5对UVC所致DNA损伤更加敏感,细胞存活率降低(P0.05)。彗星试验和Rad51免疫荧光试验结果显示,UV5细胞DNA损伤程度较AA8严重,并且修复UVC所致DNA损伤的能力降低(P0.05)。结论 ERCC2/XPD基因缺失细胞DNA损伤修复能力下降,说明ERCC2/XPD修复酶在UVC所致DNA损伤的切除修复过程中发挥重要作用。     

饮水砷暴露对DNA的损伤作用

目的探讨饮水砷暴露的致突变性及对大鼠脾脏淋巴细胞DNA的损伤作用。方法采用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames)检测不同剂量亚砷酸钠水溶液(450、150、50、17、5 g/皿)及阳性、溶媒及阴性对照组在加与不加肝微粒体酶活化系统条件下(+S9与-S9)诱发TA97、TA98、TA100和TAl02菌株的基因突变作用;应用单细胞凝胶电泳试验(彗星试验)分析不同剂量饮水砷暴露(50、150和450μg/L)对大鼠脾脏淋巴细胞DNA的损伤作用。结果 Ames试验结果显示,在+S9与-S9时,各剂量组亚砷酸钠水溶液作用下,TA97、TA98、TA100和TAl02回变菌落数和空白对照组相比均未达到2倍以上,差异无统计学意义(P0.05);彗星试验结果显示,低剂量组和中剂量组脾细胞尾部DNA百分率、尾距和阴性对照组相比,差异均无统计学意义;高剂量组的尾部DNA百分率与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P0.05);而其DNA的尾矩与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论饮水砷暴露对原核细胞DNA未显示致突变作用;高剂量组饮水砷会引起大鼠脾脏淋巴细胞DNA一定程度的损伤。     

组织细胞对氧化损伤的敏感性及修复能力的研究

目的：探讨体内多种组织细胞对DNA氧化损伤效应的敏感性及损伤后的自身修复能力。方法：以H2O2作为氧化损伤剂，对离体的小鼠肝，肾，脾细胞进行染毒，用慧星试验观察各种细胞的DNA氧化损伤效应与修复动力学改变。结果：H2O2能诱导三种细胞DNA氧化损伤，其损伤的敏感性依次为：脾细胞＞肾细胞＞肝细胞，修复试验显示肝细胞修复能力最强，修复时间最短，脾细胞次之，而肾细胞在2h内几乎无修复。结论：体内组织细胞对氧化损伤的敏感性及修复能力差异很大，彗星试验在一定程度上可以检测外源化学物的DNA氧化损伤效应。     

ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力

目的 探讨核苷酸切除修复基因ERCCl在肺癌细胞修复苯并(a)芘所致DNA损伤中的作用。方法 构建表达ERCCl反义RNA的重组质粒,Lipofectin转染肺癌A549细胞,潮霉素筛选出稳定转染的细胞克隆;噻唑蓝法检测24h细胞生存力;Northern Blot分析细胞ERCCl基因mRNA表达水平;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤程度,每组计算50个细胞损伤情况。结果 筛选出表达ERCCl反义RNA的7个阳性克隆,其生长特性与亲本细胞差别无显著性;内源性mRNA表达水平不同程度降低,为亲本细胞的12％-86％;DNA损伤修复速度减慢,10μmol/L苯并(a)芘作用24h后再孵育24h,修复程度为亲本细胞的29％-71％;相关分析表明DNA损伤修复程度与ERCClmRNA水平显著相关。结论 ERCCl反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力。     

氯丁二烯的致突变性鉴定——大肠杆菌回变试验及枯草杆菌重组试验

近年来,国内外对氯丁二烯(chlorobutadi-ene,CBD)的致突变性有广泛的研究,且多数获阳性结果[1].本文选用大肠杆菌回变试验及枯草杆菌重组修复试验测试CBD的致突变性,同时     

山楂对十二种抗肿瘤药物致突变性的拮抗效应

当前国内外常用的治疗肿瘤的化学药物不少品种有一定的致突变毒性,在治疗肿瘤的同时增加了病人患第二肿瘤的危险性,并尚无更好的药品能取代。为了寻找拮抗这种毒性的物质,我们对山楂有否拮抗治疗肿瘤化学药物的致突变遗传毒性作用进行了试验研究,报告如下。材料采用的标准试验菌株为大肠杆菌溶源性菌GY_(5027),对该菌株释放的噬菌体敏感的指示菌为GY_(4015)。被检测物质为山楂。阴性对照剂是生理盐水,阳性对照剂是丝裂霉素C     

冷培养对金属化合物枯草杆菌致变试验结果的影响

目的：研究枯草杆菌芽孢重组修得试验中增加冷培养对金属化合物和间接致变物DNA损伤试验的影响。方法：比较直接培养法与增加4℃ 24h冷培养对测试结果的作用。观察指标：最小抑菌浓度（MIC）和敏感性。结果：增加冷培养对大多数金属化合物测试结果无影响，而对K2Cr2O4、CoCl2、CoSO4及2种间接致突变物2-AF、AFB反而提高了MIC，降低了敏感性。此结果与Kada的报道不尽一致，对其原因加以探讨。结论：枯草杆菌芽孢重组修复试验增加冷培养，降低了部分金属致突变物和间接致变物敏感性。     

素食者和非素食者粪便中的致突变剂

曾有人报道人的粪便中含有致突变剂,且多数致突变剂亦为致癌剂,因此粪便中的致突变剂可能是结肠癌的病因。流行病学研究也指出,进食低肉类、高纤维素膳食的人群结肠癌发病率低。为此,作者采用彷徨变异测验(Fluctuation test)比较了素食人群与非素食人群粪便中致突变剂的情况,其灵敏度可达标准Ames法的100倍。彷徨变异测验系采用TA100与TA 98两个菌株。先将试验用菌株接种于营养肉汤中培养过夜,再用营养肉汤稀释为     

肿瘤促进剂引起姊妹染色单体交换增加

发生姐妹染色单体交换(SCE)的分子机制还不清楚,但已知SCE中存在DNA的某些改变,如DNA-DNA或DNA-蛋白质交联、DNA单链的断裂。诱发这种改变的化合物多数是致突变剂,它们直接或经代谢活化后引起DNA损伤。肿瘤促进剂12-0-十四酰咐(口拜)-13-醋酸酯(TPA)无致突变作用,但能诱发中国地