白细胞介素-1β或白细胞介素-6致痫大鼠脑内γ-氨基丁酸和谷氨酸免疫反应性的变化

目的研究白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）致痫过程中谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）在大脑皮质及海马内表达的变化,探讨IL-1β及IL-6在癫痫发病中的作用机制。方法大鼠随机分为生理盐水对照组、IL-1β组、IL-6组,侧脑室注射相应试剂120min后观察大鼠行为变化,并采用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马内Glu及GABA的表达变化。结果动物行为学观察,生理盐水对照组无明显癫痫发作,IL-1β组、IL-6组发作程度达中度。免疫组织化学染色显示,在注射IL-1β或IL-6 120min后,IL-1β、IL-6组Glu表达在大脑皮质及海马较对照组明显升高,GABA表达较对照组明显降低,差异显著。结论IL-1β或IL-6可能通过升高Glu含量并降低γ-氨基丁酸的含量参与促痫和致痫过程,从而使神经元兴奋性升高促进癫痫发作。     

白细胞介素-17在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中的作用

目的 观察白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)在阿霉素肾病大鼠肾组织中的表达,并探讨其在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中的作用.方法 雄性SD大鼠分为正常对照组和阿霉素肾病组(模型组),每组8只,于第2、4、8、12周分别处死.光镜观察肾小球的病理学情况并分析肾小球硬化指数;采用半定量RT-PCR法检测肾组织IL-17 mRNA的表达;ELISA法检测肾组织匀浆上清中IL-17和IL-1β蛋白水平;免疫组化观察IL-17在肾脏的定位表达.结果 第8周模型组肾组织IL-17 mRNA水平、IL-17和IL-1β蛋白水平均高于正常组(P=0.041、P=0.000、P=0.007);第12周均进一步升高(均P=0.000),并且IL-17与IL-1β、肾小球硬化指数均呈明显的正相关(P=0.037、P=0.021).结论 IL-17在阿霉素肾病大鼠硬化的肾组织中表达明显增加,可能在阿霉素肾病大鼠发生肾小球硬化过程中起了一定的作用.     

γ-干扰素抗体对早期流产大鼠γ-干扰素、白细胞介素-2、白细胞介素-4的表达及滋养层细胞凋亡的影响

目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)抗体对孕鼠早期流产的影响及其机制.方法:实验孕鼠随机分成流产模型组、IFN-γ抗体组、流产模型+ IFN-γ抗体组及正常对照组.酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清IFN-γ、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)水平,免疫组织化学检测子宫蜕膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达,Hoechst 33342荧光染色检测滋养层细胞凋亡情况.结果:血清测定数据显示,流产模型组IFN-γ、IL-2水平高于正常对照组,IL-4水平低于正常对照组;流产模型+IFN-γ抗体组IFN-γ、IL-2水平低于流产模型组,高于IFN-γ抗体组;IL-4水平高于流产模型组,低于IFN-γ抗体组.免疫组织化学Bcl-2和Bax蛋白阳性产物光密度值比值(Bax/Bcl-2)流产模型+IFN-γ抗体组低于流产模型组.结论:大鼠血清中3种细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4表达的改变及滋养层细胞凋亡可能是流产发生的重要因素.应用IFN-γ抗体可降低孕鼠IFN-γ、IL-2水平,升高IL-4水平,抑制滋养层细胞的凋亡,从而使流产率降低.     

子痫前期患者白细胞介素-8和胎盘生长因子的表达及其意义

目的通过检测子痫前期患者羊水中白细胞介素-8（IL-8）和胎盘组织中胎盘生长因子（PLGF）的水平．以探讨IL-8和PLGF在子痫前期发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附法和免疫组化法分别测定20例轻度子痫前期患者,22例重度子痫前期患者和30例正常妊娠妇女（对照组）的羊水中IL-8和胎盘组织中的PLGF的表达。结果子痫前期轻度组及重度组羊水IL-8均高于对照组,重度组羊水IL-8显著高于轻度组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中PLGF表达量均低于对照组（P〈0．01）,而重度组低于轻度组（P〈0．01）。子痫前期轻、重度组及对照组胎盘组织中PLGF表达量与羊水IL-8水平均呈高度负相关（P〈0．01）。结论子痫前期患者羊水中IL-8增高,而胎盘组织中PLGF表达下降,可能与子痫前期的发生、发展有关。     

白细胞介素-8蛋白在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的 探讨反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素-8 （IL-8）蛋白水平的表达。 方法 应用免疫组织化学染色和Western blotting 技术,分别对30例反复自然流产患者（流产组）和30例正常妊娠者（对照组）绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析。 结果 免疫组织化学染色结果显示,在绒毛组织中,流产组和对照组IL-8的蛋白表达主要定位于绒毛上皮细胞的细胞质内;在蜕膜组织中,流产组IL-8蛋白表达于蜕膜细胞的胞质内,对照组蜕膜细胞则为阴性,但两组腺上皮细胞均为阳性反应。Western blotting结果显示,在绒毛组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量明显高于对照组（P﹤0.01）;在蜕膜组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量高于对照组（P﹤0.05）。 结论 流产组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达增强与反复自然流产有关,IL-8可能参与反复自然流产的病理过程。     

白细胞介素-10通过乙二醛酶1影响脊髓钝挫伤大鼠运动功能的恢复

目的　用慢病毒介导的方法抑制白细胞介素-10（IL-10）的RNA,观察IL-10通过乙二醛酶1（GLO1）影响大鼠脊髓损伤后运动功能恢复。 方法　SD大鼠66只,采用Allen’s法制备脊髓钝挫伤（spinal cord contusion,SCC）模型,随机分为Sham组（n=9）、SCC组（n=27）、Vector组（n=15）和IL-10 SH组（n=15）,分别注射空质粒和包装IL-10 siRNA的质粒;每组再分为3 d、7 d和28 d 亚组。采用BBB（Basso,Beattie,Bresnahan）评分评估大鼠后肢运动功能;免疫组织化学和qRT-PCR技术定位和定量测定IL-10和GLO1的表达变化;用慢病毒包装的RNA构建IL-10的RNA干扰模型（IL-10-SH-LV）评估IL-10和GLO1在脊髓损伤后的功能,GeneMANIA生物信息学预测IL-10和GLO1的关系。 结果　SCC后大鼠双后肢截瘫,后肢运动功能消失,BBB评分在损伤后1 d,3 d,7 d,14 d逐渐恢复,但低于对照组。qRT-PCR结果显示IL-10在脊髓损伤后表达显著降低;SCC后,免疫组织化学结果显示IL-10主要在脊髓前角的神经元和神经胶质细胞中表达。慢病毒干扰IL-10的表达后,随着时间推移,GLO1表达增加,大鼠运动功能BBB评分也逐渐恢复。GeneMANIA结果显示GLO1和IL-10通过共表达的Hpd和Klk1c2、Kcns1、Proc相互作用。 结论　IL-10通过上调抗氧化应激因子GLO1的表达促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复。     

白细胞介素-1β对谷氨酸钠致痫大鼠海马Gs蛋白表达的影响

目的 探讨白细胞介素-1β(Interleukin-1，IL-1β)在谷氨酸钠致痫大鼠中对海马兴奋性G-蛋白α亚基(stimulated G-protein α subunit，Gsα)蛋白表达的影响，为阐明IL-1β在致痫中的作用机制提供线索。方法 免疫组织化学方法结合行为观察(SD大鼠随机分为对照组、GluNa组、IL-1β GluNa组、rhIL-1ra IL1β GluNa组和D-AP-5 IL-1β GluNa组)。结果 行为观察显示，IL-1β GluNa组大鼠痫性发作潜伏期(平均2min)较其他组(平均6min)明显缩短，且发作程度(Ⅲ～Ⅳ级)较其他组(Ⅰ～Ⅲ级)严重；对照组无痫性发作。免疫组织化学染色显示，Gsα蛋白在海马各区均有表达，IL-1β GluNa组大鼠在齿状回、CAl区和CA3区Gsa表达较其他组明显增强。结论 IL-1β参与致痫，且在谷氨酸致痫中可能通过Gs蛋白介导发挥作用。     

支气管哮喘患者白细胞介素-4、13检测的临床意义

目的 探讨哮喘患者外周血白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-13（IL-13）的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法 采用ELISA法检测30例支气管哮喘患者及25例正常对照组的血浆IL-13的含量。结果 支气管哮喘急性期患者的血浆IL-4、IL-13均明显高于正常对照组（P均〈0。01）。结论 IL-4、IL-13等因子多与支气管哮喘发病的病理生理过程，可为判断病情提供较好的实验室参数。     

大鼠脑内白细胞介素-1Ⅰ型受体在致痫活动中的表达变化

为了探讨白细胞介素 -1I型受体 ( IL-1RI)在癫痫发病中的作用 ,本实验采用免疫组织化学方法观察了致痫大鼠行为改变与脑内 IL-1RI表达变化。结果发现 ,侧脑室注射白细胞介素 -1β( IL-1β)后再注射阈下剂量谷氨酸钠 ,可导致动物痫样发作 ,其大脑皮质及海马锥体细胞层 IL -1RI免疫反应阳性细胞数量较对照组明显增多 ,免疫反应增强 ;如先注射白细胞介素 1受体拮抗剂 ( IL-1ra)、再注射 IL-1β和阈下剂量谷氨酸钠 ,则动物无痫样发作 ,且大脑皮质及海马锥体细胞层 IL-1RI免疫反应阳性细胞数量较注射 IL -1β和阈下剂量谷氨酸钠组减少 ,免疫反应着色减弱。结果提示 ,IL -1β有明显促进谷氨酸钠致痫的作用 ,IL-1RI可能参与致痫过程 ,IL-1ra具有抗痫效应。     

白细胞介素-12对干燥综合征小鼠肝脏的损伤作用及其机制

目的 探讨白细胞介素-12（IL-12）对干燥综合征（SS）小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法 选取12周龄C57BL/6小鼠、非肥胖型糖尿病（NOD）SS模型小鼠、IL-12基因敲除NOD小鼠各5只,分别纳入正常对照组、SS模型组和IL-12 KO NOD组。各组小鼠取外周静脉血分离提取外周血单个核细胞（PBMC）和血清,处死小鼠解剖获取颌下腺组织和肝脏组织。（1）取正常对照组和SS模型组小鼠肝脏组织制备石蜡切片,HE染色观察肝脏肝小叶结构,MASSON染色观察肝脏纤维化情况。（2）取正常对照组和SS模型组小鼠肝脏组织、颌下腺组织的石蜡切片免疫组织化学染色观察比较IL-12阳性细胞光密度（OD）值的改变。（3）采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测正常对照组、SS模型组小鼠PBMC和肝脏组织IL-12 mRNA的相对表达量,以及正常对照组、SS模型组、IL-12 KO NOD模型组小鼠肝脏组织纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子-β（TGF-β）、Ⅰ型胶原（Col1）mRNA的相对表达量。（4）取正常对照组、SS模型组、IL-12 KO NOD模型组小鼠外周血血清和肝脏组织,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、溶质载体家族7成员11（SLC7A11）、转铁蛋白（TRF）、转铁蛋白受体（TFR）蛋白的表达情况。结果 （1）HE染色可见正常对照组小鼠肝小叶结构基本正常,而SS模型组小鼠肝脏的肝小叶、肝索结构紊乱,肝细胞胞浆内有空泡出现。MASSON染色可见SS模型组小鼠肝脏组织中见弥漫不规则的染为蓝色的胶原纤维,正常对照组小鼠肝组织中染为蓝色的胶原纤维则少见。（2）正常对照组小鼠颌下腺和肝脏IL-12阳性细胞OD值分别为0.08±0.01、0.03±0.01,高于SS模型组的8.74±0.78、2.58±0.07,差异均有统计学意义（t=24.82、80.64,P值均<0.001）。（3）正常对照组小鼠肝脏组织及PBMC中IL-12 mRNA表达分别为1.07±0.15、1.03±0.14,均低于SS模型组的3.00±0.50、3.01±0.57,差异均有统计学意义（t=8.27、7.54,P值均<0.001）。与正常对照组比,SS模型组FN、TGF-β mRNA的相对表达量均增高,差异均有统计学意义（P值均<0.001）;与SS模型组比较,IL-12 KO NOD组FN、TGF-β mRNA的相对表达量均降低,差异均有统计学意义（P值均<0.05）;3组间Col1 mRNA的相对表达量差异无统计学意义（P=0.243）。（4）与正常对照组比较,SS模型组血清和肝脏组织中SLC7A11、GPX4、TRF蛋白相对表达量均明显降低,TFR蛋白相对表达量均增高,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。与SS模型组比较,IL-12 KO NOD组血清和肝脏组织中SLC7A11、GPX4、TRF的相对表达量均增加,血清TFR蛋白的相对表达量降低,差异均有统计学意义（P值均<0.05）;而肝脏组织中TFR蛋白的相对表达量差异无统计学意义（P>0.05）。结论 IL-12表达增高对SS小鼠肝脏组织的损伤起到了促进作用,其机制可能与增高的IL-12诱导肝脏细胞铁死亡有关。     

IL-8在兔动脉粥样硬化模型中斑块处的蛋白和基因表达

白细胞介素- 8(Interleukin- 8,IL- 8)是趋化因子CXC亚家族的一员,对中性粒细胞有趋化作用,可以诱导平滑肌细胞的增殖和迁移,是一个促血管生成因子,在动脉粥样硬化慢性炎症过程中起着重要作用。本文通过建立兔高脂血症动脉粥样硬化斑块模型,动态监测了在动脉粥样硬化发展过程中IL- 8的蛋白和基因表达,以了解IL- 8在动脉粥样硬化中的作用。采用免疫组化的方法定位IL- 8在高脂血症兔动脉粥样硬化斑块模型主动脉升弓部血管壁的蛋白表达,8、12周模型组内膜显著增厚并有明显阳性染色,半定量分析AS模型组阳性染色的面积分别是对照组的4 .4 8、8.76倍,平均积分光密度(IOD)值分别是对照组的4 .16、4 .36倍。采用双抗夹心EL ISA法测定兔血管组织匀浆液中的IL- 8蛋白表达量,8、12周AS模型组IL- 8蛋白含量与总蛋白比值和对照组比较均有显著性差异,分别是对照组的1.84、2 .0 6倍。用原位杂交的方法定位IL- 8m RNA的表达,8周模型组血管内膜有强的阳性染色,IL- 8m RNA的表达增加。本研究通过建立动脉粥样硬化模型,动态监测了整个动脉粥样硬化过程中IL-8的蛋白和基因表达。IL- 8的蛋白和基因上调主要是在高脂血症兔动脉粥样硬化模型的脂纹期     

应用胶原酶软膏治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床实验研究

目的探讨无菌胶原酶软膏对于深Ⅱ度烧伤创面酶学清创的临床疗效及安全性。方法选择深Ⅱ度烧伤创面50例，随机分为实验组和对照组。实验组创面采用无菌胶原酶软膏治疗，而对照组创面则采用凡士林油膏治疗，观察坏死组织清除和创面愈合情况。所获数据采用分层区组随机化法进行分析，组间比较分别采用X^2检验和方差分析进行检验。结果实验组创面的坏死组织清除率明显大于对照组创面（P〈0．05），愈合时间也较对照组短（P〈0．05）。结论胶原酶软膏能有效清除深Ⅱ度烧伤创面的坏死组织，加速创面的愈合。     

褪黑素对糖尿病大鼠早期视网膜神经组织GFAP表达影响的实验研究

目的观察褪黑素（MLT）对糖尿病大鼠早期视网膜神经组织神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。方法 SD大鼠尾静脉注射适量2%STZ溶液制造糖尿病模型。随机分成3组：正常对照组、模型对照组和MLT治疗组,每组12只。MLT治疗组的大鼠给予腹腔注射MLT10mg/（kg·d）;正常对照组和模型对照组大鼠每天腹腔注射等量的0.9%氯化钠溶液。每组于4、6、8周各取4只大鼠分别应用Western Blotting和免疫组织化学方法定量定性检测视网膜神经组织GFAP的表达。结果模型对照组于4、6、8周时的视网膜神经组织GFAP阳性表达量分别是0.0887±0.0239、0.1057±0.0282和0.2039±0.0228,均明显高于同时相的正常对照组（分别是0.0452±0.0089、0.0479±0.0100和0.0526±0.0165）和MLT治疗组（分别是0.0485±0.0149、0.0510±0.0144和0.0722±0.0228）,差异有统计学意义（P〈0.01）;而MLT治疗组视网膜神经组织GFAP阳性表达与正常对照组相比,4、6周时差异无统计学意义,8周时高于同时相的正常对照组（P〈0.05）。结论 MLT可降低糖尿病大鼠视网膜神经组织GFAP的阳性表达,减轻视网膜神经组织的退行性变。     

特异性整合素连接激酶抑制剂QLT0267对大鼠烧伤创面愈合影响的初步研究

目的 观察局部注射特异性整合素连接激酶（ILK）抑制剂QLT0267对SD大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合影响,初步探讨ILK在创面愈合过程中的作用及机制.方法 选取45只雄性SD大鼠,采用恒温恒压烫伤仪在其背部皮肤制备深Ⅱ度烧伤创面,并随机分成实验组、对照组及二甲基亚砜（DMSO）组,每组15只.实验组创面每天注射浓度100 μM QLT0267液100 μL;对照组创面每天注射0.9％氯化钠溶液100 μL;DMSO组创面每天注射0.3％ DMSO液100 μL.测量各组大鼠创面愈合时间和愈合率;伤后14 d取材,各组随机选择5只大鼠,用SP法检测ILK、AKT、PAKT、α-SMA在创面组织中的表达,Western Blot检测各组ILK、AKT、PAKT蛋白含量;用Masson改良法检测创面胶原.结果 实验组大鼠创面平均愈合时间为（21.1±0.6）d,比对照组（17.1±0.6）d和DMSO组（17.7 ±0.6）d长;实验组创面愈合率也低于对照组和DMSO组,比较差异有统计学意义（P＜0.05）.Western Blot检测结果显示：各组ILK、AKT蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）,实验组PAKT蛋白显著低于对照组和DMSO组.SP法结果各组ILK、AKT表达差异无统计学意义（P＞0.05）,实验组ILK活性被抑制,PAKT（0.406±0.008）表达较对照组（0.901 ±0.013）、DMSO组（0.966±0.011）降低,比较差异有统计学意义（F=11.27,P=0.04）;实验组α-SMA表达（0.201±0.003）较对照组（0.339 ±0.006）、DMSO组（0.351 ±0.005）也降低,比较差异有统计学意义（F=52.86,P=0.001）;实验组细胞外基质胶原排列较对照组、DMSO组明显稀疏、紊乱.结论 ILK活性被抑制时延迟大鼠皮肤创面愈合.ILK特异性抑制剂QLT0267通过抑制ILK活性PAKT合成减少,可能影响其下游信号的传导,导致肌成纤维细胞生成减少、胶原合成减少,影响创面愈合.     

贵州某白酒对大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白表达及血清睾酮水平的影响

目的探讨摄入贵州某54°白酒后,不同时程及不同剂量对大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白(St AR)表达及血清睾酮水平的变化,以期为科学饮酒提供基础资料。方法正常成年雄性SD大鼠69只,随机分为正常对照组(n=15)及实验组(n=54)。实验组分为低剂量组0.8ml/(kg·d)、中剂量组1.6ml/(kg·d)及高剂量组2.4ml/(kg·d),实验组大鼠每日灌胃2次。分别于第4周末、第8周末、第12周末采血清,取睾丸组织。采用免疫组织化学SABC法、图像分析、Western blotting检测睾丸组织St AR的表达,采用化学发光法检测大鼠血清睾酮水平。结果各实验组的血清睾酮水平与正常对照组比较未见明显异常,差异无统计学意义(P0.05)。St AR免疫组织化学阳性产物存在于睾丸间质细胞胞质内;与正常对照组比较,4周、8周、12周各剂量组St AR免疫染色及平均吸光度均有所增强(P0.05);Western blotting检测,4周、8周、12周各剂量组St AR蛋白表达水平增强(P0.05)。结论在本实验设定的剂量和时程内用该白酒灌胃后,大鼠睾丸间质细胞内St AR表达水平有所增强,血清睾酮水平并无明显变化。     

IL-1β对脓毒症新生幼鼠胼胝体内少突胶质细胞前体细胞分化成熟的影响

目的:探讨IL-1β对少突胶质细胞前体细胞(OPCs)分化成熟及轴突髓鞘化的影响。方法:将出生1 d的SD幼鼠96只随机分为2组:对照组和脂多糖(LPS)组各48只。LPS组给予腹腔注射1mg/kg LPS,对照组腹腔注射等体积PBS。根据注射后时间分为3 h、24 h、3 d、7 d、14 d、28 d 6个亚组,应用双标免疫组化及Western blotting的方法观察3 h、24 h、3 d、7 d时IL-1β及IL-1受体1(IL-1R1)的表达和14 d、28 d时髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达。进行原代OPCs培养将其分为对照组、IL-1β组、IL-1β+IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)组及IL-1Ra组。将其诱导分化3 d后利用免疫荧光及Western blotting比较4组间MBP的表达。结果:与对照组相比,LPS注射后3 h、24h、3 d、7 d幼鼠胼胝体小胶质细胞表达IL-1β明显增加,其受体在OPCs表达增加。LPS注射后14 d、28 d,MBP在胼胝体的表达下降。细胞实验显示原代OPCs培养诱导分化3 d后IL-1β可以抑制MBP的表达,并且可以被IL-1Ra逆转。IL-1β可抑制磷酸化ERK的表达,ERK过表达可逆转IL-1β对MBP的抑制作用。结论:在脓毒症新生幼鼠胼胝体内IL-1β有可能通过抑制ERK通路来抑制OPCs成熟,从而导致脑白质轴突低髓鞘化。     

A comparative analysis of the osteogenic capacity of osteoblasts from newborn and two-week-old rats

AimTo compare the proliferation and osteogenic differentiation of osteoblasts between newborn rats (1d group) and two-week-old rats (14d group) and to clarify the mechanism underlying these effects.MethodThe endogenous expression of osteogenic marker genes was detected by qPCR, including ALP, OCN, Col1a1, and Runx2. The osteoblasts proliferation was evaluated by EdU assay and Western Blotting [PCNA and Cyclin D1]. ALP activities in osteoblasts were detected using a PNPP kit, ALP staining and qPCR. Mineralized nodule formation and intracellular calcium levels were assessed by Alizarin Red staining and calcium colorimetric assay respectively while OCN, Col1a1 and Runx2 levels in osteoblasts were analyzed by immunostaining. Osteogenesis-associated pathways including Wnt/β-Catenin, Akt/PPAR and Smad were analyzed via Western Blotting.ResultEndogenous ALP, OCN, Col1a1, and Runx2 expression levels were significantly higher in osteoblasts from 14d group than those from 1d group. After treatment with osteogenic induction medium, osteoblast proliferation, ALP activity, mineralized nodule formation, and intracellular calcium levels were markedly increased in osteoblasts from 1d group, with similar results also being observed for the expression of OCN, Col1a1, and Runx2. Wnt3a, β-catenin, p-Akt, p-Smad1/5/8, and p-Smad5 protein levels were also higher in osteoblasts from 1d group relative to those from 14d group, while the expression of PPARγ was lower.ConclusionThe superior osteogenic differentiation capacity in osteoblasts was associated with the higher activation levels of Wnt/β-Catenin, Akt/PPAR and Smad signaling pathways, and the enhanced proliferative activity in osteoblasts from 1d group.     

FasL/Fas pathway is involved in dengue virus induced apoptosis of the vascular endothelial cells

The hallmark of the dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome is hematologic abnormality. The pathogenesis of dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome remains unknown. Our work showed that the dengue virus serotype‐2 induced apoptosis in human umbilical vein endothelial cells. Fas (CD95), Tumor Necrosis Factor receptors, and Tumor Necrosis Factor‐related apoptosis‐inducing ligand receptors are the most common death receptors, which can induce apoptosis. Compared with the untreated human umbilical vein endothelial cells, Fas expression was increased both in the mRNA level and on the surface of infected human umbilical vein endothelial cells. FasL was expressed at similar levels on human umbilical vein endothelial cells over a course of dengue virus serotype‐2 infection, but the expression in mRNA level was increased in infected human umbilical vein endothelial cells. It is possible that there is soluble FasL secreted from human umbilical vein endothelial cells in the supernatant. Tumor Necrosis Factor‐related apoptosis‐inducing ligand receptor 1 and Tumor Necrosis Factor receptors 1–2 were constantly very low, whereas Tumor Necrosis Factor‐related apoptosis‐inducing ligand receptors 2–4 decreased after dengue virus serotype‐2 infection. This result suggested that dengue virus serotype‐2 may inhibit Tumor Necrosis Factor‐related apoptosis‐inducing ligand receptors‐induced apoptosis. The apoptotic rates in human umbilical vein endothelial cells were decreased upon the addition of caspase family inhibitors. In addition, activated caspase 8 and caspase 3 were also observed by Western blot following dengue virus serotype‐2 infection. Thus, it is shown that the Fas/FasL pathway may participate in dengue virus‐induced apoptosis of vascular endothelial cells in vitro. J. Med. Virol. 82:1392–1399, 2010. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.     

Modulation of inflammatory mediators by ibuprofen and curcumin treatment during chronic inflammation in rat

Inflammation is a protective tissue response occurring in three distinct phases, acute, subacute and a chronic proliferative phase. We undertook the present study to understand the overall immune response of the body during adjuvant induced chronic inflammation in rat and the effect of ibuprofen and curcumin on this response. Inflammatory mediators were estimated on day 21 and day 35 after adjuvant injection. The level of C-reactive protein increased to 200% on day 21 and then reduced to 50% on day 35 compared to control. Curcumin and ibuprofen further reduced the increased levels at both the time intervals. Haptoglobin level decreased to 42% on day 21 but increased to 5 times of control on day 35. Curcumin and ibuprofen reduced the increased levels at day 35. No significant change was observed in Prostaglandin-E2 and Leukotriene-B4 levels and in Lymphocyte proliferation. The level of Tumor Necrosis Factor-alpha increased by three folds on day 21, but came down to 88% on day 35. Ibuprofen treatment decreased the raised level on day 21 and increased the reduced level on day 35. Interleukin-1beta increased to 2 folds on day 21 and 10 folds on day 35 which were significantly brought down by curcumin and ibuprofen. Nitric oxide level was reduced at both the time intervals, which were increased by drug treatment.