冬虫夏草菌发酵滤液多糖的组分分析

对冬虫夏草蝙蝠蛾被孢霉的发酵滤液多糖进行组分分析和含量测定。纸层析和气相色谱的结果表明虫草菌滤液多糖含有葡萄糖,甘露糖和半乳糖。并采用内标法测定它们的含量和摩尔比。     

茜草多糖的组成及其摩尔比测定

将多糖水解后的单糖转化为糖腈乙酰酯衍生物，用气相色谱分析确定三种茜草多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成。茜草多糖ＱＣ－Ⅰ、ＱＣ－Ⅱ和ＱＣ－Ⅲ组成单糖的摩尔比分别为鼠李糖－阿拉伯糖－木糖－甘露糖－葡萄糖－半乳糖＝１．０：０．３２：０．７６：０．６６：１．０４：１．４８；１．０：１．８６：１．２９：０．９９：２．９７：３．０４和１．０：０．５１：０．１３：０．１９：０．３６：１．０４。     

猴头多糖中脂肪酸成分分析及含量测定

目的:GC内标法测定猴头多糖中脂肪酸的含量.方法:猴头多糖中脂肪酸种类由GC-MS法测定.含量由GC内标法确定:取猴头多糖样品1.5 g,加入含内标0.5 mg的硫酸-甲醇溶液(1:20)5 mL,80℃甲酯化3 h,环己烷萃取4次,定容,GC分析.色谱柱为DB-1,初始温度60℃,程序升温10℃·min-1至200℃,保持30 min.检测器(FID)250℃,进样口250℃,载气为高纯氮气.结果:脂肪酸甲酯得到很好的分离,在0.4～3.6 mg·mL-1的浓度范围内呈线性,稳定性和回收率良好.结论:该方法准确、重现性好,适合于测量猴头多糖中脂肪酸的含量.     

头花蓼多糖组分的GC、GC-MS分析

目的 对头花蓼中水溶性多糖进行分离、纯化及组成分析。方法 头花蓼水提干燥粉经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法去蛋白、H2O2脱色,逆向流水透析得多糖精制品。经多糖水解、衍生化后用GC、GC-MS分析。结果 确定头花蓼水溶性多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖组成,其中以阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖为主。结论 GC和GC-MS这两种方法简便、灵敏,可以准确测定出头花蓼多糖中所含有的各种单糖。     

三七叶多糖的提取分离及结构信息

目的:研究三七叶多糖的提取、分离及初步结构信息。方法:采用单因素试验及正交试验优化三七叶多糖的提取工艺;树脂法及离子交换色谱、凝胶滤过色谱柱色谱法等方法进行纯化分离;纸色谱法和气-质联用色谱法分析单糖组成及骨架结构。结果:三七叶多糖的最佳提取工艺为提取温度80℃,提取时间1 h,料液比1∶12,提取次数3次。纯化分离后得到1个三七叶均一多糖A1,主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖这3种单糖组成,其摩尔比为1.00∶1.56∶1.17;主链主要由葡萄糖、半乳糖组成,支链由阿拉伯糖、半乳糖组成。结论:优化了三七叶多糖的热水提取工艺,并采用树脂新技术取代了传统的多糖脱色脱蛋白工艺,效果良好。此外三七叶多糖的单糖组成与三七(根)多糖一致。为三七中多糖成分的综合利用提供理论和实验依据。     

芦荟多糖的气相色谱和色谱-质谱联用分析

目的：探索较佳的衍生化方法，对芦荟多糖进行定性定量分析。方法：采用不同的衍生化方法，利用气相色谱仪及其与质谱联用的分析手段研究多糖的单糖组成及摩尔比。结果：芦荟多糖主要由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，摩尔比为15.8：1.0：1.4。结论：糖腈乙酸酯衍生化更适合于芦荟多糖的分析。     

蒙药哈斯-哈图古日水溶性多糖的组分研究

文献记载哈斯-哈图古日主要用于气滞血瘀,胸痹作痛,咽喉肿疼等疾病[1].多糖几乎存在于所有生物体中,具有能量储存、防御功能、抗肿瘤作用、免疫促进活性等多方面的生物功能,所以近年多糖成为天然药物研究的热点[2,3].本文在研究广枣多糖组分[4]的基础上,研究了哈斯-哈图古日的水溶性多糖组成和含量,为研究天然药物活性,开发研制蒙药新制剂,更好地发挥其药效提供理论依据.     

桂蚕沙多糖组分的制备与GC-MS分析

目的:制备桂蚕沙的多糖并分析其组分,为专属性鉴定特征的建立奠定基础.方法:桂蚕沙多糖制备流程脱脂后水提醇沉→三氯乙酸除蛋白→大孔吸附树脂纯化→活性炭脱色.桂蚕沙多糖组分的确定采用衍生化后GC-MS分析.结果:桂蚕沙多糖提取率为23.5％.桂蚕沙多糖组分:核糖-木糖-鼠李糖-半乳糖-吡喃葡萄糖-阿拉伯糖(1.97∶3.14∶0.58∶0.92∶5.62).结论:气相色谱-质谱联用技术能够有效的分析桂蚕沙中的多糖组分.     

番木瓜种子油提取方法及成分的研究

本文研究了番木瓜种子的提取方法及超声提取条件。试验表明超声提取法是一种提取时间短、溶剂用量少、出油率高的提取方法。采用L9(34)正交试验法找到其最佳提取条件:提取次数3次,料液比1∶10,超声时间20 m in。本文还探讨了适合番木瓜脂肪酸成分鉴定的甲酯化方法;并运用气-质联用鉴定出番木瓜中自由中脂肪酸的种类及含量为:棕榈酸(17.34%)、硬脂酸(5.22%)、二十碳烷酸(1.12%)、油酸(69.25%)、亚油酸(4.31%)、十九碳烯酸(1.68%)、二十碳烯酸(0.75%)、二十一碳烯酸(0.33%)。     

薄层色谱法联合气相色谱法分析金银花多糖的单糖组分研究

目的:用薄层色谱法(TLC)联合气相色谱法(GC)分析金银花多糖的单糖组分与比例。方法:热水法提取金银花多糖,酸水解后用TLC联合GC分析其单糖组成。结果:组成金银花多糖的单糖包括葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖及阿拉伯糖,其比例为23.6∶3.3∶1.8∶2.3∶1.0∶4.2。结论:实验确定了金银花多糖中单糖的组成及比例,为金银花多糖的进一步研究奠定了基础。     

不同年龄的野生与家种猪苓菌核糖类等成分的含量测定

野生与家种猪苓菌核还原糖含量均随生长年龄的增加而递减;二年龄菌核的多糖含量最高;菌核中蛋白质含量随着年龄的增加而递增;一年龄菌核的脂肪含量最高;家种二年龄菌核的麦角甾醇含量最高,而野生菌核则与此相反。     

灵芝孢子中抗肿瘤成分的提取与分离

目的 :检测不同破壁率的灵芝孢子的醇提效果并用色谱技术对醇提物中的抗肿瘤成分进行分析。方法 :乙醇为溶剂对灵芝孢子粉进行振荡浸提 ,醇提物依次用硅胶柱和高效液相色谱分析 ,以各部分对Hela细胞的毒性作为其抗肿瘤活性的指标。结果 :未破壁孢子 ,60%～80%及 99%破壁率孢子的醇提率分别为5% ,25% ,33%。99%破壁率灵芝孢子的醇提物经硅胶柱分离 ,氯仿洗脱部分对Hela细胞无毒害作用 ;甲醇洗脱部分的抗肿瘤活性约为乙酸乙酯洗脱部分的 34倍 ;甲醇洗脱部分经高效液相色谱分析 ,得到 2种活性较强且组成较为简单的混合物(Ⅱ1和Ⅱ3 )。结论 :灵芝孢子破壁后醇提物含量远高于未破壁孢子 ;甲醇 水洗脱系统可用于灵芝孢子醇提物中抗肿瘤活性成分的RP HPLC分析。     

青钱柳嫩叶中多糖的含量测定

目的建立青钱柳叶中多糖含量的测定方法.方法采用苯酚-浓硫酸显色法,于490 nm处测吸光度.结果青钱柳嫩叶中多糖含量为0.65 32%;平均回收率99.03%;r=0.9991.结论方法简便、快速,结果准确、可靠,适合多糖的含量测定.     

猴头菌丝体多糖的化学研究

目的:对猴头菌丝体的多糖类成分进行化学组成及结构研究。方法:DEAE 纤维素、DEAE-Sephadex 柱分离,葡聚糖凝胶柱层析测定纯度,凝胶过滤法测定分子量,酶解、气相色谱及光谱分析等测定化学组成及结构。结果和结论:从猴头菌丝体中分离得到5 个多糖均一体,其主要成分HEPA₁ 分子量6 .2 ×10⁴ ,为以葡萄糖为主的杂多糖,单糖组成摩尔比为葡萄糖∶阿拉伯糖∶木糖= 33 .1∶1 .7∶1 .0 ;HEPA₄ 分子量2 .6 ×10⁴ ,为杂多糖肽,肽部分由17 种氨基酸组成,占糖肽的3 .8 % ;HEPB2 分子量1 .2×10⁴ ,为以葡萄糖为主的杂多糖,单糖组成摩尔比为葡萄糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖= 50 .7∶2 .1∶1 .0∶2 .4 。各均一体单糖间的甙键构型均以α-甙键为主。     

稀针嗜蓝孢孔菌多糖分析方法研究

目的:用紫外分光光度法建立稀针嗜蓝孢孔菌多糖的定量分析方法。方法:采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖含量为指标,用L9(34)正交试验法选择最佳显色条件,检测波长为488 nm。结果:苯酚、浓硫酸二因素对多糖含量有显著影响,以葡萄糖表示,本法在(3.223~12.89)μg.mL-1范围内,吸收度与浓度有良好的线性关系,平均回收率96.60%,RSD为1.71%。结论:本法快速、简便,灵敏度、重复性好,不受蛋白质干扰,亦可用于混有糖苷的粗多糖的测定。     

TLR4-mediated activation of macrophages by the polysaccharide fraction from Polyporus umbellatus(pers.) Fries

Aim of the Study

Zhu Ling (Polyporus umbellatus) is well-known to reduce the risk of a variety of diseases. In this study, we explored the molecular mechanism of its immunostimulatory potency in immune responses of macrophages, using polysaccharides prepared from Polyporus umbellatus (PPS).

Materials and methods

Splenocyte proliferation was analyzed with ³H-TdR incorporation method. Nitric oxide (NO) was measured by Griess method and cytokines of culture supernatants was detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The fluoresceinamine-labeled PPS (Flu-PPS) and dextran (Flu-dextran) were prepared by the cyanogen bromide activation method. The cell-binding activity of Flu-PPS was analyzed with FACS and confocal microscopy. NF-κB activity was measured by ELISA assay.

Results

We found that PPS is able to strongly upregulate the functions of macrophages such as Nitric oxide (NO) production and cytokine expression. Compared with C3H/HeJ group, PPS significantly stimulated the proliferation of splenocytes and the production of TNF-α, IL-1β and NO of peritoneal macrophages from C3H/HeN mice. The function blocking antibodies to TLR-4, but not TLR-2 and CR3, markedly suppressed PPS-mediated TNF-α and IL-1β production. Flow cytometric and confocal laser-scanning microscopy analysis shown that fluorescence-labeled PPS (f-PPS) can bind specifically to the target cells, and the binding can blocked by unlabeled PPS and anti-TLR4, but not anti-TLR2 and CR3 monoclonal antibodies. Nuclear translocation and DNA binding activity of NF-κB was significantly induced by PPS.

Conclusions

Therefore, our data suggest that PPS may exert its immunostimulating potency via TLR-4 activation of signaling pathway.