依达拉奉对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性及MMP-9表达的影响

[摘要] 目的 观察自由基清除剂依达拉奉对创伤性脑缺血再灌注大鼠血脑屏障(BBB)通透性及脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达的影响,探讨自由基清除剂保护血脑屏障的作用机制。方法 采用大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,通过测定渗出血管外的EB（伊蓝）含量来评价BBB通透性的变化,采用免疫组化的方法检测各组大鼠脑MMP-9的表达。结果 脑缺血再灌注后3h脑组织EB渗出量增加,1d时达到高峰,2d以后逐渐减小。MMP-9在缺血再灌注12h起显著显著增加,2d达高峰期,依达拉奉组脑组织EB渗出量及MMP-9表达较模型组降低(P＜0.01)。结论 脑缺血后MMP-9表达增高,BBB通透性增加。自由基清除剂依达拉奉可以保护BBB,其作用可能与抑制MMP-9在损伤脑组织中的表达有关。     

人工麝香对大鼠局灶性脑缺血再灌注后大脑MMP-9 mRNA及其蛋白表达的影响

目的观察人工麝香对大鼠脑缺血再灌注后脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及其蛋白表达的影响。方法采用SD大鼠制作大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注模型,用高、中、低浓度人工麝香治疗缺血2h再灌注24、48h大鼠。应用实时荧光定量PCR法检测缺血再灌注脑组织MMP-9 mRNA的表达水平,免疫组化方法检测脑组织MMP-9蛋白表达量。结果与假手术组相比,各组在缺血再灌注不同时间段脑组织MMP-9 mRNA及MMP-9蛋白表达水平均升高(P<0.05),其中,以模型组MMP-9 mRNA及MMP-9蛋白表达水平最高(P<0.01),高、中浓度人工麝香治疗组MMP-9 mRNA及MMP-9蛋白表达水平最低(P<0.05);与模型组相比,高、中浓度人工麝香治疗组脑组织MMP-9 mRNA及MMP-9蛋白表达水平降低最为显著(P<0.01)。结论人工麝香能降低大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织MMP-9 mRNA及MMP-9蛋白的表达水平。人工麝香可能通过抑制缺血再灌注后大鼠脑组织MMP-9的表达,降低脑组织血脑屏障基底膜细胞外基质的降解和血脑屏障(BBB)的通透性,减轻脑缺血后脑水肿。     

缺血再灌注过程中MMP-9和IL-8的变化及其相关性研究

目的 探讨MMP-9和IL-8在缺血再灌注过程中的变化及其相关性.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测46例大白兔(伪手术组7只,缺血再灌注2 h组、4 h组及6 h组分别为10、10、9只,心肌梗死组10只)12 h～7 d血浆中MMP-9及IL-8的含量.结果 缺血再灌注组MMP9从12 h时逐渐升高,第3天达高峰,4～7天显著下降.缺血再灌注组IL-8从12 h开始升高,第2天达高峰,以后显著下降,第5天达正常水平.12 h～7 d缺血再灌注组MMP-9明显高于伪手术组(P<0.05),但明显低于心肌梗死组明显(P<0.05);缺血再灌注4 h组明显高于缺血再灌注2 h组(P<0.05),明显低于缺血再灌注6 h组(P<0.05).12 h～3 d缺血再灌注.IL-8明显高于伪手术组(P<0.05),明显低于心肌梗死组(P<0.05);MMP-9和IL-8在缺血再灌注4h组明显高于缺血再灌注2 h组(P<0.05),明显低于缺血再灌注6 h组(P<0.05).结论 血浆MMP-9及IL-8水平可预测急性心肌梗死的严重性,在3天内缺血再灌注组血管再通后血浆MMP-9与IL-8显著正相关,血浆IL-8在缺血再灌注过程中可进一步促进血浆MMP-9水平升高.     

EPO对大鼠脑缺血再灌注后脑水肿及MMP-9的影响

目的观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠脑缺血再灌注后神经功能缺损评分、脑水肿及MMP-9影响。方法将健康SD大鼠150只分为假手术组、缺血组及EPO组,线栓法复制大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h后,缺血组于再灌注开始前10 min经腹腔注入生理盐水2 ml,EPO组注射重组人红细胞生成素(3 000 U/kg)+生理盐水2 ml,再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d及10 d,采用Zea Longa法测定大鼠神经功能缺损评分后,断头取脑,按Elliot公式计算脑组织含水量,免疫组织化学法测定相应时间点MMP-9免疫阳性细胞数。结果缺血组再灌注6 h出现神经功能障碍,48h最严重,72 h开始恢复;缺血组脑含水量在再灌注6 h轻度升高,24-48 h时达高峰;缺血组再灌注6 h有少量表达MMP-9的免疫阳性细胞,12 h开始增多,48 h达到高峰,72 h后有所下降,7 d、10 d明显降低。EPO治疗组与缺血组相比,神经功能缺损评分降低、脑含水量和MMP-9免疫阳性细胞数明显减少(P<0.05)。结论 EPO对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与降低MMP-9表达有关。     

缺血再灌注损伤大鼠脑组织MMP-2、MMP-9动态变化与脑水肿改变

[摘要]目的探讨发生脑缺血再灌注损伤时MMP-2、MMP-9表达和活性的变化规律及应用强力霉素后脑水肿的变化。方法大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,根据再灌注时间不同分为再灌注3、6、12、24、72、120 h组及假手术组。应用干湿重法测定强力霉素干预后缺血侧脑半球含水量的变化,应用蛋白质印迹法检测缺血侧脑组织MMP-2和MMP-9蛋白表达变化,应用明胶酶谱法检测缺血侧脑组织MMP-2和MMP-9活性变化。结果MMP-2在脑缺血再灌注3 h和120 h表达和活性升高(P<0.01);MMP-9在脑缺血再灌注6 h表达和活性开始升高(P<0.01),到再灌注24 h达到峰值,再灌注120 h降至正常水平(P>0.05);脑缺血再灌注大鼠各时间点缺血侧脑半球含水量与假手术组相比皆升高,并且随着再灌注时间延长持续升高;应用强力霉素大鼠缺血侧脑半球含水量与同时间点生理盐水组相比降低(P<0.05或P<0.01)。结论MMP-2和MMP-9降解细胞外基质引发血管源性脑水肿,MMP-2和MMP-9的表达及其活性在脑缺血再灌注120 h内的交替变化可能会影响脑水肿的发展。     

MMP-2、MMP-9在大鼠肾缺血再灌注损伤早期的表达及意义

目的探讨大鼠肾缺血再灌注后肾组织中MMP-2、MMP-9的表达及在肾缺血再灌注损伤中的作用机制。方法48只健康雄性SD大鼠,分组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,应用免疫组化二步法检测MMP-2、MMP-9表达的变化,测定肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性及血清肌酐(Scr)水平,以反映中性粒细胞浸润及肾功能损害的程度变化。结果MMP-2、MMP-9蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45min再灌注6h有少量表达,再灌注12、24、72h呈阳性表达,以24h达高峰(P<0.05),多表达在皮质深层近曲小管及髓质区。与假手术组比较,缺血再灌注各组Scr水平和MPO的活性升高,且随再灌注时间延长而进一步升高,24h达高峰(P<0.01)。MMP-2和MMP-9蛋白的表达变化与Scr水平呈显著性正相关关系(r分别为0.763和0.874,P<0.01);与MPO活性也呈显著性正相关关系(r分别为0.752和0.693,P<0.01)。结论肾缺血再灌注后肾组织中MMP-2、MMP-9表达增加,提示MMP-2、MMP-9可能与早期肾缺血再灌注后损伤及加重有关。     

缺血再灌注损伤促进裸鼠肝癌生长及癌旁组织VEGF和MMP-9表达

目的:观察缺血再灌注损伤对裸鼠肝癌生长及癌旁组织转移复发相关基因(VEGF、MMP-9)表达的影响.方法:将人肝癌细胞Hep3B原位种植于裸鼠肝脏制备荷肝癌裸鼠模型,荷瘤裸鼠随机分为缺血再灌注后1 h、6 h、5 d、7 d及假手术组(n=8),缺血再灌注组荷肝癌裸鼠采用肝门阻断法制备缺血再灌注损伤模型,假手术组不阻断肝门血供,其余同缺血再灌注组.缺血再灌注后1 h、6 h检测裸鼠肝功能(ALT、AST)的变化(n=8);实时荧光定量PCR检测瘤旁组织VEGF和MMP-9 mRNA的表达,并与正常对照组作比较(n=6).缺血再灌注后5 d、7 d 取肝组织,H-E染色观察肝组织病理学变化,计算肿瘤周边变性坏死区域(n=6).剩余荷瘤裸鼠于缺血再灌注后2周处死取肿瘤,测定缺血再灌注组及假手术组裸鼠肿瘤体积及质量.结果:术后2周缺血再灌注组肿瘤体积(mm3) 及质量(g) 明显高于假手术组[(209.6±25.74)vs(330.6±32.01),(0.214±0.036) vs (0.374±0.045),P＜0.01].缺血再灌注后1、6 h裸鼠血浆ALT和AST增高,明显高于假手术组(P＜0.01).H-E染色结果表明再灌注后5 d肿瘤周边组织炎症细胞浸润、变性坏死区域较假手术组更明显(P＜0.05);再灌注后7 d肿瘤周边变性坏死区域较5 d减少(P＜0.05),但变性坏死区域被肿瘤细胞浸润代替.荧光定量结果表明,缺血再灌注后1 h和6 h癌旁组织VEGF和MMP-9 mRNA表达明显高于假手术组(P＜0.01),且二者表达具有一定相关性(r=0.418,P＜0.01).结论:肝门阻断所导致的缺血再灌注损伤加速了裸鼠肝肿瘤细胞的生长,促进了癌旁组织中与转移复发相关基因(VEGF、MMP-9)的表达.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动态病变及其与MMP-2表达关系

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的病变规律及MMP-2在损伤机制中的作用。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别采用HE、TUNEL染色法观察缺血2 h再灌注3 h-7 d脑组织的动态病理变化及免疫组化法检测MMP-2的蛋白表达。结果假手术组大鼠脑组织形态结构正常;与之相比,缺血再灌注3 h-7 d组脑组织均有明显病变且差异有显著性(P<0.01);缺血中心区再灌注后3 h以变性损伤为主,24 h-7 d以坏死及继发炎症为主;边缘区一直以持续进行性凋亡为主;水肿贯穿病变全程,分别于再灌注后24 h、72 h两次出现高峰,其中24 h尚伴灶片状出血。缺血再灌注组大鼠大脑组织的MMP-2表达显著高于假手术对照组,P<0.05;MMP-2表达存在时空改变且与脑水肿、细胞凋亡有正相关性,P<0.01,相关度R值在0.5以上,其中24 h的首次脑水肿高峰与MMP-2表达峰值点重叠。结论再灌注后24 h、72 h的两次水肿高峰及迟发、持续性细胞凋亡是再灌注损伤两个最重要的方面,MMP -2表达参与了其机制。     

半球缺血沙鼠脑表达MMP-9的变化

目的 :动态观察沙土鼠脑缺血再灌脑内MMP - 9的蛋白表达情况 ,探讨它在脑缺血损伤中的作用。方法 :制作沙土鼠半球缺血 /再灌注模型 ,分别于术后 6 ,2 4,48h ,5d和 14d取脑 ,免疫组化技术观察MMP - 9的表达。结果 :免疫组化发现MMP - 9在正常组及手术组非缺血半球没有表达 ,缺血半球术后 6h开始表达 ,并在 2 4～ 48h表达最强 (P <0 .0 1)。结论 :脑缺血再灌诱导沙鼠脑微血管内皮细胞MMP - 9表达增加。MMP- 9表达增高可能是早期脑缺血再灌后脑损伤的重要原因     

基质金属蛋白酶在大鼠局灶脑缺血再灌注损伤中的表达变化

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP-9)在大鼠短暂大脑中动脉闭塞诱导的局灶脑缺血后不同时间的表达.方法 制备大脑中动脉短暂缺血90 min再灌注12 h、24 h、48 h和7 d的模型,用Real time PCR、Western blotting 方法检测MMP-9 mRNA水平和蛋白表达在不同时间的变化.结果 MMP-9蛋白表达在缺血再灌注12h、24h、48h和7d均显著增加,其中48h为高峰期,7d开始下降.结论 MMP-9蛋白表达上调,提示MMP-9在局灶脑缺血再灌注损伤中发挥重要作用.     

子宫内膜异位症中MMP-2、MMP-9表达的研究

目的研究MMP-2和MMP-9在子宫内膜异位症发生中的作用。方法采用免疫组化方法研究25例子宫内膜异位症患者的病理组织和22例正常子宫内膜组织中的MMP-2和MMP-9蛋白的表达情况。结果子宫内膜异位症组中的MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显高于对照组(P分别小于0.01和O.05)。结论MMP-2和MMP-9在子宫内膜异位症的发生发展中起一定的作用。     

MMP-1、MMP-2、MMP-9在脑胶质瘤中的联合检测及其意义

目的：探讨MMP-1、MMP-2、MMP-9在胶质瘤中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学法对78例石蜡包埋的胶质瘤组织和12例正常脑组织进行标记和分析。结果：MMP-1、MMP-2、MMP-9在正常脑组织中几乎不表达;而在胶质瘤中的阳性率分别为66%、64%、75%,联合检测率为62%,采用Spearm an进行相关性分析,它们与胶质瘤的恶性程度均呈正相关（rs=0.2671～0.5631,P〈0.05）。结论：联合检测这3个指标对判断胶质瘤的恶性程度和侵袭能力具有重要的意义。     

MMP-2及MMP-7在食管癌及癌旁组织中的表达

目的 探讨MMP-7和MMP-2在食管癌中的表达及其相互关联。方法 采用RT-PCR方法检测MMP-7和MMP-2在60例食管癌组织及其相应癌旁组织中的表达。结果 MMP-7和MMP-2在癌组织中阳性率分别为90.0%（54/60）和91.7%（55/60）,在其对应癌旁组织中的阳性率为48.3%（29/60）和65.0%（39/60）。通过RT-PCR半定量分析癌组织及其相应的癌旁组织中MMP-7和MMP-2的表达量,差异有统计学意义（P<0.05）。MMP-7的表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关（P<0.05）。MMP-2与MMP-7表达呈正相关。结论 MMP-7和MMP-2的表达可能与食管癌的早期进展和程度有关。     

骨巨细胞瘤组织中基质金属蛋白-2、基质金属蛋白-9的表达及意义

目的研究骨巨细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9（MMP-2,MMP-9）的表达与肿瘤复发的关系。方法用免疫组化法检测50例骨巨细胞瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达,对比肿瘤复发组和非复发组的差异。结果骨巨细胞瘤组织有高水平的MMP-2和MMP-9表达,表达比非复发组明显增高。结论骨巨细胞瘤的复发与MMP-2、MMP-9表达增高相关。     

结直肠癌患者血清中MMP-2、MMP-9和MMP-14检测的临床意义

目的探讨MMP-2、MMP-9及MMP-14在结直肠癌患者血清中的表达水平,并分析其与结直肠癌分化程度、Dukes分期及淋巴结转移等病理参数的关系,以更好的指导临床工作。方法应用ELISA(酶联免疫吸附实验)分别检测200例结直肠癌患者(观察组)、60例健康成人(对照组)血清中MMP-2、MMP-9和MMP-14的含量。结果观察组血清中MMP-2、MMP-9及MMP-14表达量显著高于对照组(P<0.01),观察组中不同临床特征患者血清MMP-2、MMP-9和MMP-14的表达与肿瘤分化程度、Dukes分期以及淋巴结转移有关(P<0.01),经相关性分析,MMP-2和MMP-9、MMP-9和MMP-14的表达呈正相关(P均<0.05)。结论MMP-2、MMP-9和MMP-14在结直肠癌患者血清中高表达,三者可能在结直肠癌发生发展中起重要作用;早期联合检测MMP-2、MMP-9和MMP-14可能对判断患者的预后及指导临床治疗有重要价值。     

基质金属蛋白酶-1和8在根尖肉芽肿中的表达及意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和8（MMP-8）的表达水平与根尖肉芽肿的关系及意义。方法：采用免疫组化方法,检测了20例根尖肉芽肿和20例正常根尖组织中MMP-1和MMP-8的表达水平,并用独立样本t检验分析MMP-1和MMP-8的表达水平与根尖肉芽肿的关系。结果：MMP-1和MMP-8在根尖肉芽肿组织中均有表达,且表达的阳性细胞数高于正常组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：MMP-1和MMP-8可能参与了根尖肉芽肿的发病过程。     

细菌性角膜溃疡角膜组织中MMP-2、MMP-9表达的研究

目的:研究细菌性角膜溃疡患者角膜组织中的基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、-9)的表达与分布,探讨其含量的变化与角膜病变的相关性.方法:收集细菌性角膜溃疡患者的病变角膜和正常角膜,应用免疫组化染色方法检测MMP-2、MMP-9在角膜分布和表达,应用图像分析系统分析.结果:细菌性角膜溃疡角膜组织中,MMP-2的阳性表达主要分布于角膜基质层;MMP-9的阳性表达主要分布于角膜上皮层和基底膜附近.病变角膜组织中两种酶的阳性表达均具有统计学意义.结论:MMP-2、MMP-9对细菌性角膜溃疡的发展可能起重要作用.MMP-2参与角膜基质层的损害,MMP-9参与角膜上皮层和基底膜的损害.     

结、直肠癌中MMP-2、MMP-7、MMP-9与EMMPRIN的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7、MMP-9和基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在结、直肠癌中的表达以及在结、直肠癌发展过程中的作用。方法:采用免疫组织化学法检测100例结、直肠癌组织中MMP-2、MMP-7、MMP-9和EMMPRIN的表达。结果:MMP-2、MMP-7、MMP-9和EMMPRIN在结、直肠癌组织中的表达在结、直肠癌的浸润深度、Dukes分期和有无淋巴结转移间差异均有统计学意义(P<0.01);EMMPRIN分别与MMP-2、MMP-7、MMP-9蛋白在结、直肠癌组织中的表达呈正相关关系(P<0.01)。结论:MMP-2、MMP-7、MMP-9和EMMPRIN在结、直肠癌的演进过程中可能具有一定的协同作用。     

口腔扁平苔藓中MMP-2和MMP-9的表达及意义

[目的]探索MMP-2和MMP-9与口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的发生、发展乃至癌变潜能的关系。[方法]采用免疫组化SP法检测MMP-2和MMP-9在22例OLP、11例正常口腔黏膜组织、22例白斑和22例口腔鳞癌组织表达。[结果]在正常口腔黏膜、扁平苔藓、白斑和鳞癌组织中MMP-2和MMP-9的表达依次增加。MMP-2和MMP-9在口腔扁平苔藓和白斑中的表达显著高于正常口腔黏膜(P<0.05),但在口腔扁平苔藓和白斑间的表达差异无显著性意义(P>0.05);在鳞癌中的表达显著高于其他3组(P<0.05)。[结论]MMP-2和MMP-9表达与OLP的发生、发展乃至癌变潜能有关。     

MMP-7、MMP-9及MMP-10与骨肉瘤侵袭转移的关系及临床意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP)在骨肉瘤中的表达及与侵袭转移的关系。方法:应用免疫组化方法检测40例ⅡB期骨肉瘤MMP鄄7、MMP鄄9及MMP鄄10的表达,并分析它与无瘤生存率及侵袭转移的关系。结果:40例骨肉瘤MMP鄄7、MMP鄄9及MMP鄄10的阳性率分别为62.5%(25/40)、67.5%穴27/40雪和42.5%(17/40)。复发转移者MMP鄄7、MMP鄄9及MMP鄄10阳性率显著高于无瘤生存者(P<0.05);;累计无瘤生存率阳性组均低于阴性组(P<0.05),与接受辅助化疗患者分析结果类似。多因素分析提示,MMP鄄9表达是影响无瘤生存率的预后因素。结论:MMP鄄7、MMP鄄9及MMP鄄10在骨肉瘤中有不同程度的表达,与骨肉瘤细胞的高侵袭转移能力相关,其中MMP鄄9阳性表达有预后意义。