藏药余甘子鞣质部位对人肿瘤细胞凋亡与周期的影响

目的研究藏药余甘子鞣质部位的体外抗肿瘤作用机制。方法余甘子鞣质部位40、80、160μg·m L-1作用于人肿瘤A549及BEL-7402细胞48 h,MTT法测定剂量反应曲线;倒置相差显微镜下观察两种细胞形态学的变化;流式细胞术测定细胞周期及凋亡的情况。结果不同浓度的余甘子鞣质部位作用48 h对A549和BEL-7402细胞均表现明显的细胞毒作用;倒置镜下可见加药组细胞生长受到明显抑制,细胞收缩变小;流式细胞术测定发现余甘子鞣质部位具有显著的诱导细胞早期凋亡和G2/M期阻滞作用。结论余甘子鞣质部位可通过诱导肿瘤细胞凋亡和对细胞周期阻滞而发挥其体外抗肿瘤作用。     

喹诺酮类化合物H25抗肿瘤侵袭活性体外研究

目的 研究喹诺酮类化合物H25抗肿瘤细胞侵袭转移的活性,初步探讨其作用机制.方法 明胶酶谱法验证H25对Ⅳ型胶原酶的竞争性抑制作用.MTT法检测H25对HT1080细胞的生长抑制作用.TranswellTM侵袭小室试验检测H25对HT1080细胞侵袭转移的抑制作用.明胶酶谱法和RT-PCR法检测H25对MMP-2、MMP-9表达水平的影响.细胞粘附试验观察H25对HT1080细胞粘附作用的影响.结果 H25能竞争性抑制Ⅳ型胶原酶的水解酶活性.5h和48h药物处理条件下,H25对HT1080细胞生长抑制作用的IC50分别为13.51和1.311μmol/L.TranswellTM侵袭小室试验中,H25对HT1080细胞侵袭Matrigel的抑制率分别为49.1%(1μmol/L,5h)、25.9%(0.1μmol/L,5h)、69.4%(0.1μmol/L,48h)、39.6%(0.01μmol/L,48h),其有效抑制浓度低于细胞生长抑制浓度.明胶酶谱分析证明,H25处理过的HT1080细胞培养上清中Ⅳ型胶原酶活性明显降低.但RT-PCR分析未检测到MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平的变化.另外,1μmol/L的H25能抑制HT1080细胞的异质粘附作用.结论 H25能有效抑制HT1080细胞的侵袭,不仅因为H25是Ⅳ型胶原酶的竞争性抑制剂,而且可能与其对MMP-2、MMP-9表达的转录后抑制和异质粘附抑制相关.     

土槿乙酸对人HT1080细胞系增殖抑制的体外研究

目的：研究土槿乙酸（PAB）对人成纤维肉瘤（HT1080）细胞系生长的抑制效应，并探讨其作用机制。方法：用不同浓度的PAB加入体外培养HT1080细胞中，观察加药后细胞生长数量及其形态的变化；用MTT法检测PAB的细胞毒作用；用Hoechest 33342和PI双荧光染色法检测细胞凋亡。结果：PAB明显抑制HT1080细胞生长，IC50值为5μmol/L，其抑制率与药物浓度呈剂量依赖关系，凋亡细胞的比例与药物浓度及作用时间呈正相关。结论：PAB能有效抑制HT1080细胞的增殖。     

大豆苷元对人非小细胞肺癌A549、H1299细胞增殖、迁移能力的影响及机制

目的探究大豆苷元(daidzein,Daid)对非小细胞性肺癌细胞株A549和H1299增殖、迁移能力的影响及可能机制。方法以A549和H1299为研究对象,CCK-8法检测Daid(0,5,10,25,50,100,200μmol·L^-1)抑制A549和H1299两种细胞的增殖情况。划痕和Transwell小室实验检测Daid对肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测Cleaved Caspase-3和LC3Ⅱ/Ⅰ等的蛋白表达。结果与对照组相比,Daid在体外可明显抑制肺癌细胞的增殖,且抑制作用呈浓度依赖关系。Daid(100μmol·L^-1)可明显降低人肺癌细胞A549和H1299的迁移侵袭能力。Western blot结果显示,Daid(100μmol·L^-1)预处理后,两种肺癌细胞的Cleaved Caspase-3及LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高。结论Daid可抑制人非小细胞肺癌A549和H1299细胞的增殖,使上述细胞的迁移侵袭能力明显下降,其机制可能与Daid诱导细胞凋亡及自噬有关。     

姜黄素异硫脲修饰嘧啶类衍生物1g对结肠癌细胞自噬和迁移侵袭的影响

目的研究新型异硫脲修饰姜黄素嘧啶类衍生物1g对人结肠癌细胞的自噬和侵袭迁移的作用及其可能的分子机制。方法通过CCK-8法检测不同浓度1g对人结肠癌细胞HCT116和HT29增殖作用;透射电镜观察1g对结肠癌细胞自噬的影响;Transwell小室检测1g对结肠癌细胞迁移及侵袭能力的影响;蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测1g对结肠癌细胞内CD147、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、LC3II/LC3I的表达。结果 1g对HCT116和HT29细胞的增殖都有抑制作用,呈剂量依赖性。1g可诱导结肠癌细胞自噬及LC3II/LC3I蛋白表达,抑制结肠癌细胞迁移及侵袭能力,降低CD147、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达。结论异硫脲修饰姜黄素嘧啶类衍生物1g可能通过CD147及PI3K/AKT通路诱导HCT116和HT29细胞的自噬、抑制迁移侵袭及增殖。     

一枝黄花提取物下调cyclinA1/CDK2通路抑制肝癌细胞增殖、迁移与侵袭

目的 研究一枝黄花总皂苷与总黄酮（SDSF）对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 体外培养HepG2细胞，给予不同浓度（0、10、20、40μg·mL-1）SDSF处理24 h后，采用MTT法、克隆形成实验检测细胞的增殖活力；流式细胞术检测细胞周期；划痕实验、transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力；q RT-PCR法、Western blotting法检测细胞周期蛋白（cyclin）A1、周期蛋白依赖性激酶（CDK）2、γ-H2AX、p-p53、基质金属蛋白酶（MMP）-2与MMP-9的水平变化。结果 与0μg·mL-1 SDSF组相比，SDSF呈剂量依赖性趋势地抑制HepG2细胞增殖活力，将HepG2细胞周期阻滞于S期，以及显著抑制HepG2细胞的迁移与侵袭能力（P <0.01）。SDSF还可显著降低细胞内cyclinA1、CDK2、MMP-2、MMP-9蛋白表达，增加γ-H2AX、p-p53蛋白表达（P <0.05）。结论 SDSF能显著抑制HepG2细胞的增殖与侵袭转移，其机制可能与下调cyclinA1、CDK2、MMP-2、MMP-9水...     

普罗布考对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及转化生长因子-β1的影响

目的探讨普罗布考（probucol,PRB）对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞（rat mesangial cells,RMCs）增殖及转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。方法①将RMCs分为正常对照组（葡萄糖5．5mmol·L^-1）、高糖组（葡萄糖30．0mmol·L^-1）、高糖＋不同浓度PRB纽（葡萄糖30．0mmol·L^-1＋10、20、50μmol·L^-1PRB）,MTT法检测培养24、48、72h后细胞的增殖情况,ELISA法检测培养24h后TGF-β1分泌量。②将RMCs分为正常对照组（葡萄糖5．5mmol·L^-1）、渗透浓度对照组（5．5mmol·L^-1葡萄糖＋24．5mmol·L^-1甘露醇）、高糖组（葡萄糖30．0mmol·L^-1）、高糖＋20μmol·L^-1PRB组,ELISA法检测培养12、24、48、72h后TGF-β1分泌量。结果①培养24h后,高糖刺激RMCs增殖,PRB呈时间依赖性和剂量依赖性地抑制RMCs的增殖（P〈0．05）。②高糖刺激24h后,TGF-β1分泌量增多,PRB能抑制高糖诱导的TGF-β1,分泌（P〈0．05）。结论PRB可能通过抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的分泌,抑制高糖条件下大鼠肾小球系膜细胞的增殖,发挥肾脏保护作用。     

褐藻苷苔多酚7-Polyphenol-Ecklonia抑制肿瘤转移和血管新生的研究

目的 探究海洋褐藻苷苔(Ecklonia cava)多酚7-polyphenol-ecklonia(7PE)对肿瘤侵袭转移和血管生成的影响.方法 采用细胞毒性实验检测7PE分别对人成纤维肉瘤细胞(HT-1080)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的毒性作用;划痕实验检测7PE对HT-1080细胞的迁移能力影响;明胶酶谱法...     

黄连素以浓度依赖性方式逆转子宫颈癌HeLa细胞上皮间充质转换进程并显著抑制细胞增殖和侵袭

目的 探索黄连素对子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭活性的影响,并探讨传统中药提取物黄连素在子宫颈癌治疗中的潜在价值。方法 采用CCK-8细胞活性检测实验分析不同浓度黄连素对HeLa细胞增殖活性的影响;流式细胞凋亡检测实验及免疫印迹实验分析高浓度（40μmol·L-1）黄连素对HeLa细胞凋亡的影响;免疫印迹实验及免疫荧光检测实验分析高浓度黄连素对HeLa细胞DNA损伤的影响;侵袭及迁移实验分析高浓度黄连素对HeLa细胞迁移和侵袭能力的影响;免疫印迹实验及免疫荧光检测实验分析高浓度黄连素对HeLa细胞上皮及间充质表型的影响。结果 黄连素以浓度依赖的方式抑制HeLa细胞的增殖活性（P<0.05）并诱导细胞凋亡（P<0.01）;高浓度黄连素对HeLa细胞DNA损伤无显著影响（P>0.05）;高浓度黄连素可显著抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力（P<0.01）;高浓度黄连素可显著逆转HeLa细胞的上皮间充质转换（EMT）进程。结论 高浓度黄连素可显著逆转HeLa细胞的EMT进程并抑制其增殖和侵袭能力。     

石榴皮鞣质对前列腺癌细胞侵袭转移影响的研究

目的探讨石榴皮鞣质对人前列腺癌PC-3细胞侵袭转移的影响。方法以人前列腺癌PC-3细胞为靶细胞,通过划痕愈合实验检测石榴皮鞣质对体外培养的PC-3细胞运动能力的影响;采用Transwell小室实验(无基质胶)检测石榴皮鞣质对PC-3细胞运动能力的影响,采用Transwell小室实验(有基质胶)检测石榴皮鞣质对PC-3细胞侵袭能力的影响;采用裸鼠肺转移模型检测石榴皮鞣质对PC-3细胞体内侵袭能力的影响。结果划痕愈合实验结果显示,石榴皮鞣质能够抑制PC-3细胞的运动性,随着石榴皮鞣质浓度增加,其抑制PC-3细胞运动能力也逐渐增强,呈明显的浓度依赖性,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);Transwell小室实验(无基质胶)显示,石榴皮鞣质能够抑制PC-3细胞运动;与空白对照组相比,随着石榴皮鞣质浓度增加,其降低PC-3细胞运动性也逐渐增强(P<0.05);Transwell小室(有基质胶)侵袭实验显示,与空白对照组相比,含有不同浓度石榴皮鞣质的实验组中,PC-3细胞穿膜细胞数即抑制其侵袭性得到有效抑制,与空白对照组相比,随着药物浓度的增加,其抑制侵袭性能力也逐渐增强(P<0.05);此外,裸鼠肺转移模型结果显示,石榴皮鞣质能够抑制PC-3细胞的侵袭性;与空白对照组相比,随着石榴皮鞣质浓度增加,PC-3细胞形成的肺转移瘤减少(P<0.05)。结论石榴皮鞣质对人前列腺癌PC-3细胞侵袭转移具有抑制作用,能抑制前列腺癌的侵袭转移。     

小白菊内酯通过下调NOX4抑制结肠癌SW480细胞增殖和侵袭

目的:探讨小白菊内酯对人结肠癌细胞SW480增殖及侵袭的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法:以不同浓度(5,10,15μmol·L^-1)小白菊内酯作用于体外培养的人结肠癌SW480细胞,以环磷酰胺(30μmol·L^-1)作为阳性对照。采用CCK8法以及平板克隆法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移及侵袭;免疫印迹法(Western blotting)检测NOX4蛋白以及增殖相关蛋白[β-连环蛋白(β-catenin)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、侵袭相关蛋白金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)蛋白]表达情况。结果:随着小白菊内酯浓度的增加,对SW480细胞增殖抑制率明显升高,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同一浓度作用下,随作用时间的延长,增殖抑制率显著升高(P<0.05),小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,小白菊内酯组克隆细胞形成数、侵袭、迁移细胞数、增殖相关蛋白β-catenin、Cyclin D1、侵袭迁移关蛋白MMP-2、MMP-9以及NOX4蛋白水平显著下降(P<0.05),且小白菊内酯各组间呈浓度依赖(P<0.05);与阳性对照组相比,小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组以上各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小白菊内酯可能通过下调NOX4表达,抑制结肠癌细胞SW480细胞增殖、侵袭能力。     

Ginsenoside 20(S)-protopanaxadiol inhibits the proliferation and invasion of human fibrosarcoma HT1080 cells

Ginsenoside 20(S)-protopanaxadiol, one of metabolites of ginseng saponins, has been well characterized to possess the pleiotropic anticancer capabilities in several cancer cell lines. The object of this study was to investigate the effects of ginsenoside 20(S)-protopanaxadiol on the invasion in vitro and the expression of matrix metalloproteinase-2 in human fibrosarcoma HT1080 cells in absence of cytotoxicity. Our results showed that ginsenoside 20(S)-protopanaxadiol exerted a concentration-dependent inhibitory effect on the proliferation of HT1080 cells (IC50 was 76.78+/-2.24 microM, 48 hr). Treatment with 20(S)-protopanaxadiol significantly declined the invasive capacity of HT1080 cells compared to the control cells (P<0.01) in the in vitro invasion assay. Further analysis with gelatin zymography and western blotting revealed that both the activity and the expression of matrix metalloproteinase-2 decreased dramatically in a concentration-dependent manner (P<0.01). Taken together, these results indicated that ginsenoside 20(S)-protopanaxadiol is able to inhibit the invasiveness of HT1080 cells significantly in vitro and this action may be primarily due to down-regulating the expression of matrix metalloproteinase-2. Ginsenoside 20(S)-protopanaxadiol, a metabolite of ginseng, may be applied as a potential therapeutic agent in the prevention and treatment of cancer.     

金荞麦提取物抑制肿瘤细胞侵袭、转移和HT-1080细胞产生Ⅳ型胶原酶的研究

目的探讨金荞麦提取物对肿瘤细胞侵袭和转移的影响。方法以人工重组基底膜及小鼠黑色素瘤高转移株自发性肺转移模型观察了金荞麦提取物对Ｂ１６－ＢＬ６细胞的体外抗侵袭活性和体内抗转移作用；用聚丙烯酰胺凝胶电泳法进一步观察了其对人纤维肉瘤ＨＴ－１０８０细胞Ⅳ型胶原酶的产生及活性的影响；同时用ＷＳＴ法观察了该药的细胞毒性。结果金荞麦提取物在１００ｍｇＬ－１剂量下能明显抑制Ｂ１６－ＢＬ６细胞侵袭；在２００ｍｇｋｇ－１剂量下能有效抑制Ｂ１６－ＢＬ６黑色素瘤细胞在Ｃ５７／ＢＬ６小鼠体内自发性肺转移。该药对Ｂ１６－ＢＬ６和ＨＴ－１０８０细胞无明显细胞毒作用。该药能抑制ＨＴ－１０８０细胞Ⅳ胶原酶的产生，但对酶的活性无明显影响。结论金荞麦提取物具有明显的抗癌侵袭和转移的作用。     

丙戊酸通过GSK3β/β-catenin信号轴抑制胃癌细胞的增殖和迁移

目的探讨丙戊酸(valproic acid,VPA)对胃癌细胞增殖、迁移的影响及可能涉及的分子机制。方法以0、2、4、6和8 mmol·L^-1浓度的VPA分别处理人胃癌细胞AGS、SGC-7901、MGC-803和BGC-82324、48、72 h后,MTT法检测细胞的活性;软琼脂克隆实验检测VPA对胃癌细胞增殖的影响;划痕实验和Transwell迁移实验检测VPA对胃癌细胞迁移能力的影响;应用STITCH、STRING和Enrichr数据库预测VPA可能影响的信号通路;免疫印迹实验检测上皮间质转化和GSK3β/β-catenin信号通路等标志物的表达情况;免疫荧光实验检测上皮间质化相关标志物的表达情况。结果与对照组相比,VPA可显著抑制AGS、SGC-7901、MGC-803和BGC-823细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性;可抑制AGS和SGC-7901细胞的迁移能力及EMT进程(上皮标志物E-cadherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调);可下调p-GSK3βser9和β-catenin的蛋白表达水平。结论VPA可有效抑制胃癌细胞的增殖和迁移,其机制可能与GSK3β/β-catenin信号轴的抑制及EMT进程的逆转有关。     

夏枯草抑制人淋巴瘤细胞增殖的机制

目的：研究夏枯草对淋巴瘤细胞生长的影响及其可能的机制。方法：参考临床常用剂量,分别采用50g·L^-1夏枯草（夏枯草组）、50g·L^-1夏枯草＋1μmol·L^-1wortmannin（wortmannin组）处理Raji细胞,以加入同体积生理盐水的naji细胞作对照,应用MTT法检测细胞增殖率,Western Blotting检测Akt磷酸化水平和Caspase-3的表达。结果：夏枯草组细胞增殖率明显低于对照组（P〈0．05）;Akt磷酸化水平在夏枯草组中表达明显降低（P〈0．05）,但wortmannin可抑制其磷酸化,夏枯草组的Caspase-3显著增高（P〈0．05）。结论：夏枯草可以明显抑制Raji细胞的生长,且这种抑制作用可能是通过抑制Akt信号转导通路,继而激活细胞凋亡来实现的。     

羧甲基壳聚糖对人高转移肺癌细胞——95-D增殖能力和体外转移能力的抑制作用

目的评价羧甲基壳聚糖对人高转移肺癌细胞——95-D增殖能力和体外转移能力的抑制作用.方法用软琼脂克隆形成实验、创伤实验、黏附实验和transwell小室实验来评价羧甲基壳聚糖对95-D细胞的影响.结果羧甲基壳聚糖浓度在0～150 μg·ml-1范围内,剂量依赖性地抑制95-D细胞的增殖能力、移动能力、浸润能力、黏附能力和克隆形成能力.结论羧甲基壳聚糖能有效抑制95-D细胞的增殖能力和体外转移能力.     

优降宁与多柔比星协同抑制小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞的增殖和迁移

目的研究赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine-specifc demethylase 1,LSD1)抑制剂优降宁(Pargyline)与化疗药物多柔比星(Doxorubicin)联合应用对小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法体外实验以小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞为模型,以CCK-8法、乳酸脱氢酶释放实验、Chou-Talay法、划痕实验、Transwell实验、Western blot等试验方法检测两药联合对4T-1细胞增殖、侵袭、迁移的影响;构建荷瘤小鼠模型研究两药联用对4T-1细胞体内增殖的影响。结果优降宁和多柔比星可有效抑制4T-1细胞增殖、迁移和侵袭,两药联用具有协同效应,且无明显细胞毒性。体内实验证明,与单用药组相比,两药联用可明显抑制乳腺癌的体内增殖并延长三阴性乳腺癌4T-1细胞荷瘤小鼠的生存期。结论优降宁与多柔比星联合应用对小鼠乳腺癌4T-1细胞的增殖、迁移和侵袭具有协同抑制效应,具有用于临床三阴性乳腺癌治疗的潜在价值。     

Fructus phyllanthi tannin fraction induces apoptosis and inhibits migration and invasion of human lung squamous carcinoma cells in vitro via MAPK/MMP pathways

Aim:

Fructus phyllanthi tannin fraction (PTF) from the traditional Tibetan medicine Fructus phyllanthi has been found to inhibit lung and liver carcinoma in mice. In this study we investigated the anticancer mechanisms of PTF in human lung squamous carcinoma cells in vitro.

Methods:

Human lung squamous carcinoma cell line (NCI-H1703), human large-cell lung cancer cell line (NCI-H460), human lung adenocarcinoma cell line (A549) and human fibrosarcoma cell line (HT1080) were tested. Cell viability was detected with MTT assay. Cell migration and invasion were assessed using a wound healing assay and a transwell chemotaxis chambers assay, respectively. Cell apoptosis was analyzed with flow cytometric analysis. The levels of apoptosis-related and metastasis-related proteins were detected by Western blot and immunofluorescence.

Results:

PTF dose-dependently inhibited the viability of the 3 human lung cancer cells. The IC₅₀ values of PTF in inhibition of NCI-H1703, NCI-H460, and A549 cells were 33, 203, and 94 mg/L, respectively. PTF (15, 30, and 60 mg/L) dose-dependently induced apoptosis of NCI-H1703 cells. Treatment of NCI-H1703 and HT1080 cells with PTF significantly inhibited cell migration, and reduced the number of invasive cells through Matrigel. Furthermore, PTF dose-dependently down-regulated the expression of phosphor-ERK1/2, MMP-2 and MMP-9, up-regulated the expression of phosphor-JNK, but had no significant effect on the expression of ERK1/2 or JNK.

Conclusion:

PTF induces cell apoptosis and inhibits the migration and invasion of NCI-H1703 cells by decreasing MPPs expression through regulation of the MAPK pathway.     

裂果薯皂苷单体Ⅰ通过TGF-β1调控上皮间质转化对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响

目的探究裂果薯皂苷单体Ⅰ通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响。方法MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖活性;用TGF-β1刺激细胞24 h,以TGF-β1/Smad信号通路抑制剂SIS3作阴性对照。细胞划痕实验和Tran-swell小室侵袭实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测Smad7、Smad2/3、p-Smad2/3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果SSPHⅠ能抑制SMMC-7721细胞的增殖,其24 h的IC50为1.72μmol·L^-1;与TGF-β1组相比,TGF-β1+SSPHⅠ组细胞迁移率和侵袭细胞数显著降低;Western blot实验结果显示,TGF-β1+SSPHⅠ组的Smad2/3,p-Smad2/3,N-cadherin和Vimentin蛋白的表达降低,Smad7和E-cadherin表达升高,结果与TGF-β1+SIS3组相同(P均<0.05)。结论SSPHⅠ能抑制SMMC-7721细胞侵袭和转移,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路,阻断EMT发生有关。