TRAF6在胃癌患者腹直肌中的表达及意义

目的：分别检测各期胃癌患者和腹腔良性疾病患者腹直肌中肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）的表达情况,分析其表达的差异性,并进一步探讨 TRAF6与胃癌患者营养状况及预后的关系。方法应用实时荧光定量 PCR 和 Western blotting 检测 TRAF6在64例各期胃癌患者和53例腹腔良性疾病患者腹直肌中的表达情况,并与患者临床数据相结合,探讨其表达的意义。结果与腹腔良性疾病患者相比（1．249±0．723）,Ⅰ期（2．080±0．611）、Ⅱ期（2．126±0．640）、Ⅲ期（3．127±0．953）、Ⅳ期（3．289±0．734）胃癌患者腹直肌中 TRAF6 mRNA 的表达显著升高,差异有统计学意义（t ＝4．107,P ＝0．001;t ＝4．128,P ＝0．000;t ＝8．741,P ＝0．000;t ＝9．208,P ＝0．000）。与腹腔良性疾病患者相比（0．088±0．013）,Ⅰ期（0．198±0．042）、Ⅱ期（0．209±0．051）、Ⅲ期（0．295±0．072）、Ⅳ期（0．345±0．084）胃癌患者腹直肌中 TRAF6蛋白的表达显著升高,差异有统计学意义（t ＝5．203,P ＝0．000;t ＝5．642,P ＝0．000;t ＝9．351,P ＝0．000;t ＝9．854,P ＝0．000）。TRAF6 mRNA 在67．2％（43／64）的胃癌患者腹直肌组织中呈高表达。TRAF6 mRNA 的表达与胃癌患者体质量下降百分比（χ2＝12．231,P ＝0．000）、白蛋白水平（χ2＝22．808,P ＝0．000）显著相关。TRAF6 mRNA 在胃癌患者腹直肌中的表达与生存率显著相关（χ2＝3．933,P ＝0．047）。结论TRAF6在胃癌患者腹直肌中呈高表达,可能在胃癌患者恶病质的发生、发展过程中发挥关键性作用,其高表达提示预后不良。     

胃癌患者血清Dickkopf-1的表达及其临床意义

[目的]探讨胃癌患者血清中Dickkopf-1 (DKK1)的表达及其临床意义.[方法]酶联免疫吸附夹心法和化学发光免疫法分别检测160例胃癌患者术前血清DKK1、CA19-9、CEA水平,以及52例胃良性疾病患者和40名正常体检者的DKK1水平,并观察其中123例患者根治术后血清DKK1变化.[结果]胃癌患者血清DKK1水平[(5.89±1.77) ng/ml]明显高于健康体检组[(3.18±1.12)ng/ml] (P＜0.0001)和胃良性疾病组[(3.57±1.05 )ng/ml] (P＜0.0001);分层分析发现,随着疾病的进展,血清DKK1水平逐渐升高,Ⅲ期和Ⅳ期血清DKK1水平均高于Ⅰ期(P＜0.001),有淋巴结转移及肝脏转移者的血清DDK1水平升高更为明显(P=0.006、0.028).根治术后血清DKK1水平[(4.21±1.27)ng/ml]比术前[(5.64±1.56)ng/ml]明显降低(P＜0.001).此外,血清DKK1水平对胃癌诊断的灵敏度和准确率均高于CA19-9和CEA.[结论]胃癌患者血清DKK1水平明显高于健康体检组和胃良性疾病组,且血清DKK1的表达水平与胃癌患者的TNM分期以及淋巴结转移、肝脏转移有关.血清DKK1表达水平可作为反映胃癌生物学行为和术后随访、监测的参考指标.     

胃癌组织MACC1表达及其临床意义分析

目的:研究结肠癌转移相关基因1(MACC1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用RT-qPCR检测胃癌组织株和67例胃癌组织及癌旁正常组织中MACC1mRNA的表达,免疫组化技术检测67例胃癌组织及癌旁正常组织中MACC1蛋白的表达,并分析其与临床病理资料的关系。结果:BGC823、SGC7901和MGC803 3种胃癌细胞株中MACC1mRNA的相对表达量分别为3.458 4±0.047 9、4.768 5±0.100 6和4.257 5±0.029 5,差异有统计学意义,F=295.131,P<0.05。癌组织MACC1mRNA表达量(5.560 0±2.853 1)较癌旁正常组织(2.190 1±1.675 9)显著增高,t=6.907,P=0.000。肿瘤组织中MACC1蛋白的阳性率为64.18%(43/67),显著高于癌旁正常组织5.97%(4/67),χ2=49.844,P<0.05,且MACC1蛋白的异常高表达与分化程度(χ2=14.492,P=0.000)、腹膜转移(χ2=4.251,P=0.039)、淋巴转移(χ2=11.978,P=0.001)、临床分期(χ2=11.024,P=0.001)密切相关,而与年龄(χ2=0.129,P=0.720)、性别(χ2=0.407,P=0.523)、肿瘤大小(χ2=0.017,P=0.897)、部位(χ2=3.021,P=0.082)及远处转移(χ2=0.000,P=1.000)无关。结论:MACC1可以作为预测腹膜转移、淋巴转移,评价胃癌进展的有效指标,可为胃癌患者的临床诊疗提供依据。     

胃癌组织MYH-9蛋白表达及MYH-9 siRNA下调SGC-7901细胞MYH-9表达对细胞侵袭转移的影响

目的 非肌性肌球蛋白重链9基因(non-muscular myosin heavy chain 9,MYH-9)在多种恶性肿瘤中高表达,且预后差.检测胃癌组织MYH-9的表达及利用RNA干扰(RNA interference,RNM)技术特异性,抑制胃癌SGC--7901细胞中MYH-9的表达对细胞侵袭和转移的影响,探讨在胃癌治疗中将MYH-9作为基因治疗靶点的价值.方法 选取2009-06-01-2010-01-01南昌大学第一附属医院126例胃癌及癌旁组织.利用RNAi技术将MYH-9 siRNA转染到胃癌SGC-7901细胞中,蛋白质印迹法检测MYH-9蛋白的表达,RT-PCR法检测MYH-9 mRNA的表达;运用细胞迁移和侵袭实验检测MYH-9 siRNA下调胃癌SGC-7901细胞中MYH-9的表达对细胞侵袭转移的影响.结果 MYH-9在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织,x2=77.83,P＜0.001.胃癌MYH-9蛋白表达与肿瘤Lauren分型(x2=5.296,P=0.020)、肿瘤分化程度(x2=14.39,P=0.002)、肿瘤浸润深度(x2=5.296,P=0.026)、肿瘤淋巴结转移数(x2=11.15,P=0.003)、脉管癌栓(x2=5.255,P=0.022)、肿瘤远处转移状态(x2=6.683,P=0.009)和TNM分期(x2=10.73,P=0.002)密切相关.MYH-9蛋白表达(HR=2.825,95％CI=1.104～3.706,P=0.041)、胃癌远处转移状态(HR=1.749,95％CI=0.983～3.503,P=0.035)和胃癌淋巴结转移数(HR=3.235,95％CI=1.579～5.358,P＜0.001)可作为预测患者不良预后的独立指标.与空白对照组及阴性对照组比较,特异性siRNA可以高效抑制SGC-7901细胞MYH-9基因的表达,在mRNA水平其表达抑制率分别为87.5％(t=48.22,P＜0.001)和86.9％(t=57.30,P＜0.001);在蛋白质水平其表达抑制率分别为52.9％(t=11.01,P＜0.001)和60.1％(t=15.53,P＜0.001).在侵袭实验中,实验组细胞数为(49.5±13.8)个,显著低于阴性对照组(112±4.34)个(t=15.53,P＜0.001)和空白对照组(116±5.57)个(t=28.12,P＜0.001).在迁移实验中,实验组细胞数为(81.5±7.26)个,显著低于阴性对照组(185±7.33)个(t=47.29,P＜0.001)和空白对照组(189±3.46)个,t=46.40,P＜0.001.结论 MYH-9高表达患者预后较差,MYH-9可能成为胃癌基因治疗的新靶点.     

胃癌组织Skp2表达的意义及其与P27、PTEN表达的关系

背景与目的:S期激酶相关蛋白2(S-phaseKinase-associatedProtein2,Skp2)促进泛素介导的细胞周期素依赖激酶抑制剂P27蛋白降解,是细胞G1-S期转化所必需。研究发现Skp2过表达参与细胞转化和肿瘤的形成。本研究旨在探讨人胃癌Skp2表达的意义及Skp2与P27和PTEN表达的关系。方法:采用免疫组化法检测胃癌组织及配对癌旁胃粘膜138例、配对淋巴结转移癌组织102例、非典型增生30例、肠上皮化生30例、慢性浅表性胃炎10例和正常胃粘膜5例Skp2表达及138例胃癌P27和PTEN的表达。结果:Skp2的标记率(%)在肠化(12.68±0.86)及癌旁胃粘膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃粘膜(0.47±0.19)(P<0.001),后两者无显著性差异(P﹥0.05);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P<0.001);原发胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃粘膜(P<0.001);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2标记率与分化程度(rs=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rs=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rs=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白P27表达(rs=-0.451,P=0.000)和肿瘤抑制蛋白PTEN(rs=-0.480,P=0.000)表达呈负相关;胃癌PTEN表达与P27表达呈正相关(rs=0.642,P=0.000)。结论:胃癌Skp2蛋白过表达与P27蛋白降解及PTEN蛋白低表达有关,提示Skp2蛋白过表达可能是胃癌发生和发展的一个重要原因。     

结肠癌组织NPRL2表达及其临床意义研究

目的观察结肠癌组织中抑癌基因NPRL2的表达情况,并探讨其临床意义。方法收集2012-07-05-2012-12-21郑州大学第二附属医院普外科经手术治疗40例患者的结肠癌组织及其正常组织。应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NPRL2mRNA的表达水平,蛋白质印迹法和免疫组织化学技术检测NPRL2的蛋白表达情况。结果RT-PCR结果显示,NPRL2mRNA在结肠癌组织的表达水平为0.459±0.045,显著低于正常组织的0.656±0.041,t=15.124,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,结肠癌组织和正常组织的蛋白表达量分别为0.271±0.015和0.588±0.051,t=27.357,P<0.001。免疫组化结果显示,正常组织及肿瘤组织中NPRL2蛋白阳性率分别为87.50%(35/40)和32.50%(13/40),组间差异有统计学意义,χ2=17.802,P<0.001。NPRL2的表达与患者的性别(χ2=0.631)、年龄(χ2=0.684)和Dukes分期(χ2=0.743)无明显相关关系,P值均>0.05;而与肿瘤组织分化级别相关,高、中分化组NPRL2阳性表达率高于低分化组,χ2=4.862,P<0.05。结论 NPRL2在结肠癌组织中表达降低,而且其表达与结肠癌的分化程度有关,提示其可能对结肠癌的发生或发展有重要的作用。     

Skp2和P27kip1在前列腺癌组织中的表达与临床病理特征的相关性研究

背景及目的:F-box蛋白Skp2参与细胞周期抑制蛋白P27kip1泛素化降解,研究发现Skp2在乳腺癌、胃癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中表达增加.本研究旨在探讨Skp2和P27kip1在前列腺癌组织中的表达及与前列腺癌各项临床病理特征的关系,并探讨两者的相关性.方法:用免疫组化EnVisionTM方法检测Skp2和P27 kip1蛋白在41例前列腺癌和20例良性前列腺增生组织中的表达情况.结果:在前列腺癌中的Skp2蛋白阳性率[(8.52±2.40)%]显著高于良性前列腺增生[(0.21±0.15)%](P＜0.001).Skp2蛋白表达与前列腺癌术前血清前列腺特异性抗原(PSA)水平(r=0.360,P=0.021)、局部浸润(r=0.570,P＜0.001)、肿瘤分期(r=0.531,P＜0.001)、病理分级(r=0.514,P=0.001)呈正相关.在前列腺癌中的P27kip1蛋白阳性率[(70.71±4.25)%]显著低于良性前列腺增生[(97.21±2.10)%](P＜0.001).P27kip1蛋白表达与前列腺癌术前PSA水平(r=-0.399,P=0.010)、局部浸润(r=-0.329,P=0.036)、肿瘤分期(r=-0.453,P=0.003)、病理分级(r=-0.290,P=0.046)呈负相关.前列腺癌中P27kip1蛋白与Skp2表达呈负相关(r=-0.572,P＜0.001).结论:前列腺癌中Skp2蛋白表达与靶蛋白P27 kip1蛋白降解有关,提示Skp2蛋白可能与前列腺癌的发生发展有关.     

卵巢癌组织Hippo-Yes相关蛋白表达与临床病理参数及增殖凋亡相关性研究

目的探讨卵巢癌组织中Hippo-Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)的表达与临床病理参数的关系,及其对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法免疫组化染色技术检测湖南省肿瘤医院病理科2010-01-01-2013-12-31保存的68例卵巢癌及38例良性卵巢组织中YAP蛋白表达,分析YAP表达与卵巢癌临床病理参数的相关性;逆转录病毒介导的YAP shRNA干扰人卵巢癌EFO-21细胞中YAP表达,蛋白质印迹法检测干扰效率,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxy Uridine,BrdU)细胞增殖分析和流式细胞术检测肿瘤细胞增殖和凋亡变化。结果卵巢癌组织YAP蛋白阳性表达率为61.8%(42/68),良性卵巢组织为10.5%(4/38),差异有统计学意义,χ2=26.054,P<0.001。卵巢癌组织中YAP蛋白阳性表达率在高临床分期(χ2=8.600,P=0.003)和高病理分级(χ2=5.688,P=0.017)中显著升高。YAP shRNA显著降低卵巢癌EFO-21细胞中YAP蛋白表达,对照组YAP蛋白表达为0.96±0.16,实验组为0.14±0.04,P<0.001。YAP shRNA导致肿瘤细胞增殖能力显著减弱,对照组细胞增殖水平为121.00±3.19,实验组为55.83±3.56,P<0.001。YAP shRNA并诱导细胞凋亡,对照组凋亡率为(8.75±0.15)%,实验组为(32.75±4.76)%,P<0.001。结论 YAP蛋白在卵巢癌组织中表达异常升高并核内蓄积,其阳性表达与高病理分级和高临床分期显著有关,干扰YAP表达导致肿瘤细胞增殖减弱和凋亡增加,提示YAP通过促进肿瘤细胞生长发挥促癌作用,其可能成为卵巢癌靶向治疗的潜在靶点。     

胃癌组织中Her-2/neu和E-cadherin的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中Her-2/neu和E-cadherin的表达情况及在胃癌发生发展及侵袭转移中的作用。方法应用SP法研究112例胃癌及40例正常胃黏膜组织中Her-2/neu和E-cadherin的表达。结果胃癌组织中Her-2/neu阳性表达率为20·5%(23/112),E-cadherin阳性表达率为34·0%(38/112);40例正常胃黏膜阳性表达率Her-2/neu为5·0%(2/40),E-cadherin为100·0%(40/40)。胃癌Her-2/neu阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织,χ2=5·17,P<0·05;正常胃黏膜E-cadherin阳性表达率显著高于胃癌阳性表达率,χ2=18·11,P<0·01。胃癌组织中Her-2/neu的表达与胃癌分化程度(χ2=4·82,P<0·05)、TNM分期(χ2=5·37,P<0·05)、淋巴结转移数(χ2=6·42,P<0·05)及浆膜浸润(χ2=7·30,P<0·01)显著相关。胃癌组织中E-cadherin的表达与胃癌分化程度(χ2=14·40,P<0·01)和淋巴结转移(χ2=29·27,P<0·01)呈负相关,但与TNM分期(χ2=1·31,P>0·05)和有无浆膜浸润(χ2=2·62,P>0·05)均无显著相关。结论Her-2/neu和E-cadherin在胃癌的发生发展及侵袭转移中起重要作用,对两者的检测有助于对患者预后的判断。     

弥漫大B细胞淋巴瘤CD5表达与临床病理特征及疗效关系的研究

目的:检测CD5蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的表达情况,并探讨CD5表达与临床病理特征及疗效的关系。方法:采用免疫组化方法(ElivisionTM法)检测232例患者中CD5蛋白的表达,回顾性研究CD5阳性表达DLBCL与CD5阴性表达DLBCL患者的临床病理特征及化疗效果,运用χ2检验比较两者差异。结果:232例DLBCL患者中,CD5阳性表达率19.8%(46/232)。DLBCL中,CD5表达与年龄(χ2=61.061,P=0.001)、性别(χ2=92.115,P=0.001)、分期(χ2=47.508,P=0.001)、KPS评分(χ2=42.178,P=0.001)、B症状(发热、乏力、盗汗和消瘦,χ2=56.344,P=0.001)、血清LDH水平(χ2=33.341,P=0.001)以及侵犯部位(χ2=78.123,P=0.001)相关;而与血清β2-MG水平无关,χ2=2.495,P=0.138。46例CD5表达阳性的患者中,6例化疗有效,有效率为13.0%(6/46);而186例CD5表达阴性DLBCL患者中,131例患者化疗有效,有效率为70.4%(131/186)。两者比较差异有统计学意义,χ2=50.227,P<0.05。结论:CD5阳性表达的DLBCL好发于老年女性,侵袭性高;CD5阳性表达DLBCL患者比CD5阴性表达的患者疗效差。     

Expression of TRAF6 and ubiquitin mRNA in skeletal muscle of gastric cancer patients

Objective

To investigate the prognostic significance of tumor necrosis factor receptor (TNFR),-associated factor 6 (TRAF6),-and ubiquitin in gastric cancer patients.

Methods

Biopsies of the rectus abdominis muscle were obtained intra operatively from 102 gastric cancer patients and 29 subjects undergoing surgery for benign abdominal diseases, and muscle TRAF6 and ubiquitin mRNA expression and proteasome proteolytic activities were assessed.

Results

TRAF6 was significantly upregulated in muscle of gastric cancer compared with the control muscles. TRAF6 was upregulated in 67.65% (69/102) muscle of gastric cancer. Over expression of TRAF6 in muscles of gastric cancer were associated with TNM stage, level of serum albumin and percent of weight loss. Ubiquitin was significantly upregulated in muscle of gastric cancer compared with the control muscles. Ubiquitin was upregulated in 58.82% (60/102) muscles of gastric cancer. Over expression of ubiquitin in muscles of gastric cancer were associated with TNM (Tumor-Node-Metastasis) stage and weight loss. There was significant relation between TRAF6 and ubiquitin expression.

Conclusions

We found a positive correlation between TRAF6 and ubiquitin expression, suggesting that TRAF6 may up regulates ubiquitin activity in cancer cachexia. While more investigations are required to understand its mechanisms of TRAF6 and ubiquitin in skeletal muscle. Correct the catabolic-anabolic imbalance is essential for the effective treatment of cancer cachexia.     

胃癌患者血清炎性因子水平的检验分析

目的:探讨胃癌患者血清炎性因子的表达水平检测在其临床诊治中的意义。方法:选取92例胃癌患者为观察组,并选择同期105例发生胃良性病变的患者作为良性病变对照组,同期76例急性胃炎和胃溃疡合并作为急性炎症对照组,对三组患者的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、中期因子（MK）、白细胞介素（IL）-6、白细胞介素（IL）-8和C-反应蛋白（CRP）表达水平进行检测,比较上述血清炎性因子在三组中的表达情况。结果:胃癌患者TNF-α、MK、IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子水平分别为（15.7±2.1）ng·L-1、（616.5±254.6）pg·ml-1、（12.6±2.4）ng·L-1、（234.3±31.4）ng·L-1、（12.3±2.6）mg·L-1,与胃良性病变组和急性炎症对照组比较,均明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）。胃良性病变组上述血清炎性因子水平和急性炎症对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。TNF-α、MK、IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子在胃癌组III期-IV期和发生淋巴结转移患者的表达水平,分别与I期-II期和无淋巴结转移患者相比显著增高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:TNF-α、MK、IL-6、IL-8、CRP等血清炎性因子与胃癌的发生和进展具有一定的相关性,有进一步扩大研究的价值。     

胃癌组织TRAF4和RSK4蛋白表达与腹腔镜根治术后复发的关系

Objective To investigate the relationships between the expression levels of tumor necrosis factor receptor associated factor 4 (TRAF4) and ribosomal S6 protein kinase 4 (RSK4) protein in gastric cancer tissues and the recurrence after laparoscopic radical gastrectomy. Methods In total, 176 patients were divided into the recurrence and non-recurrence group, and the expression levels of TRAF4 and RSK4 protein in cancer and adjacent tissues and in gastric cancer tissues in the recurrence and non-recurrence group were compared. The influencing factor of recurrence and the efficacy of TRAF4 and RSK4 protein expression in predicting recurrence were analyzed. Results The positive expression rate of TRAF4 protein in gastric cancer tissues was higher than that in adjacent tissues (P<0.05) and that in the recurrence group was higher than that in the non-recurrence group (P<0.05). The positive expression rate of RSK4 protein in gastric cancer tissues was lower than that in adjacent tissues (P<0.05) and that in the recurrence group was lower than that in non-recurrence group (P<0.05). The largest tumor diameter 5 cm, poor differentiation, TNM Ⅲ stage, depth of invasion T3-T4, lymph node metastasis, absence of adjuvant chemotherapy after operation, positive expression of TRAF4 and RSK4 protein, and regular diet w influenced the post-operative recurrence (all P<0.05). The accuracy of TRAF4 and RSK4 protein in gastric cancer tissues in combined predicting the recurrence was 83.52%. Conclusion The expression of TRAF4 protein is high, and the RSK4 protein is low in gastric cancer tissue, which are related to recurrence. © 2023, CHINA RESEARCH ON PREVENTION AND TREATMENT. All rights reserved.     

食管鳞癌组织ADAMTS-5表达临床意义研究

目的 探讨含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素金属蛋白酶5(a disintegrin and metalloprotease with thrombospondinmotifs 5,ADAMTS-5)蛋白在食管癌组织中的表达,对食管癌细胞增殖及迁移能力的影响,并分析其对患者预后影响的临床意义.方法 选取正常食管上皮细胞株(HEEC)和4株食管鳞状细胞癌细胞株(TE1、TE10、TE11以及Eca109),采用蛋白质印迹法检测ADAMTS-5蛋白在细胞内的表达.通过RNA干扰技术在食管鳞状细胞癌细胞株TE10中转染ADAMTS-5-shRNA和Neg-shRNA后采用蛋白质印迹法检测ADAMTS-5蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、划痕实验检测干扰ADAMTS-5表达对TE10细胞增殖以及迁移的影响.采用免疫组化法检测2009-04-15-2012-11-20南通大学附属医院97例食管鳞癌组织中ADAMTS-5蛋白的表达,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系.结果 在食管鳞癌细胞株TE1、TE10、TE11和Eca109中ADAMTS-5蛋白相对表达量分别为2.10±0.06、5.70±0.21、4.50±0.32和4.60±0.39,明显高于食管正常上皮细胞株HEEC蛋白相对表达量(1.10±0.07),其中在TE10中的表达强度最高.使用小干扰技术转染TE10细胞株48 h后,蛋白质印迹法检测结果显示,以GAPDH为内参照,未处理组、阴性对照组和干扰组的ADAMTS-5蛋白相对表达量分别为1.00±0.05、1.10±0.09和0.50±0.07,干扰组蛋白表达相比阴性对照组(P<0.001)和未处理组(P<0.001)明显下降;MTT法检测结果显示,转染72 h后,未处理组、阴性对照组和干扰组的增殖率分别为(100.00±10.02)%、(98.04±9.80)%和(72.19±12.24)%,干扰组相比阴性对照组(P<0.001)和未处理组(P<0.001)细胞增殖明显抑制;在划痕24 h后,干扰组迁移率为(46.34±1.27)%,而阴性对照组为(73.17±1.54)%,干扰组迁移能力明显抑制,t=40.33,P<0.001;ADAMTS-5蛋白表达在97例食管鳞癌组织中的阳性率为59.79%(58/97),明显高于癌旁组织的28.87%(28/97),与分化程度、淋巴结转移、临床分期和浸润深度相关(P<0.05),而与性别、年龄无关(P>0.05).58例阳性患者的中位生存时间为32.45个月,39例阴性患者的中位生存时间为42.3个月,差异有统计学意义,χ2=8.399,P=0.004.Cox回归多因素分析显示,ADAMTS-5表达是判断食管鳞癌预后的重要因素,χ2=5.429,P=0.020.结论 ADAMTS-5蛋白在食管鳞癌细胞和组织中高表达,能促进肿瘤细胞的增殖和迁移能力,并影响食管鳞癌患者的预后.ADAMTS-5有望成为食管鳞癌的生物标志物、评价预后的指标和治疗的新靶点.     

胃癌组织中miR-320a和CYLD的表达及与临床病理特征及预后的关系

目的 研究miR-320a和头帕肿瘤综合征蛋白(CYLD)在胃癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2013年3月—2014年11月在我院行肿瘤切除术的460例胃癌患者作为研究对象, 分别收集患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤胃粘膜组织, 采用荧光定量PCR检测miR-320a和CYLD mRNA表达水平, 采用免疫组织化学染色法检测CYLD蛋白表达, 分析miR-320a和CYLD表达水平及其与临床病理特征及预后的关系。结果 miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量为(0.37±0.09)、(0.91±0.23), 在癌旁非肿瘤组织中的相对表达量为(0.86±0.15), (1.56±0.42), miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量与非肿瘤组织比较, 差异具有统计学意义(t=60.078, 29.113, P＜0.001);CYLD蛋白在肿瘤组织中的阳性表达率43.48%与癌旁非肿瘤组织73.91%比较, 差异具有统计学意义(χ²=86.624, P=0.003);miR-320a表达水平与患者肿瘤直径和淋巴结转移有关(χ²=25.859, 13.742, P＜0.05);YLD表达水平与患者TNM分期和肿瘤分化程度有关(χ²=37.725, 59.323, P＜0.05)。miR-320a低表达患者中位生存期(20.36±0.56)(95% CI:19.252~21.462)与miR-320a高表达患者中位生存期(28.29个月95% CI:27.158~29.412个月)比较, 差异具有统计学意义(χ²=87.967, P＜0.001);CYLD阴性表达患者中位生存期(17.70个月95% CI:16.599~18.796个月)与CYLD阳性表达患者中位生存期(26.74个月95% CI:25.474~27.997个月)比较, 差异具有统计学意义(χ²=109.887, P＜0.001);miR-320a和CYLD共表达患者中位生存期(29.01个月95% CI:26.831~28.946个月)与非共表达患者中位生存期(17.13个月95% CI:17.214~19.568个月)比较, 差异具有统计学意义(χ²=117.680, P＜0.001)。肿瘤组织miR-320a与CYLD mRNA表达水平呈正相关(r=0.607, P＜0.001);miR-320a低表达、CYLD阴性表达、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤分化程度是影响胃癌患者预后的独立危险因素(HR=1.939、2.180、1.561、1.719、1.608, 95% CI:1.141~3.295, 1.252~3.796, 1.014~2.403, 1.115~2.650, 1.097~2.357, P＜0.05)。结论 miR-320a和CYLD在胃癌患者肿瘤组织中表达量明显降低, 与疾病发生发展及不良预后有关, 是潜在的胃癌诊断及治疗新靶点。     

Expression and Clinical Significance of REGy in Gastric Cancer Tissue and Variously Differentiated Gastric Cancer Cell Lines

OBJECTIVE To evaluate the REGy expression in gastric cancer tissue and gastric cancer cell lines of various differentiation levels and its clinical significance.METHODS Immunohistochemistry was used to detect the expression of REGy protein in 70 specimens of gastric cancer and 30 specimens of normal gastric mucosa. The relationship between the expression of REGy protein and the biological behaviors of gastric cancer was analyzed. RT-PCR and Western blot were used to detect the mRNA level and the protein expression of REGγ in normal gastric cell line GES-1, well differentiated gastric cancer cell line MKN-28, moderately differentiated gastric cancer cell line SGC-7901 and poorly differentiated gastric cancer cell line BGC-823.RESULTS The expression rate of REGγprotein in gastric cancer tissue (52/70, 74.29%) was significantly higher than that in normal gastric tissue (12/30, 40%) (P<0.01). The expression rate of REGywas correlated with tumor size (P<0.01), lymph node metastasis (P<0.05), differentiation degree (P<0.01), infiltration depth (P<0.01)and distant metastasis (P<0.05). RT-PCR analysis showed that theexpression of REGγ mRNA was 0.459±0.079 in the normal gastric mucosa cell line, 0.588±0.118 in the well differentiated gastric cancer cell line, 0.715±0.066 in the moderately differentiated gastric cancer cell line, and 0.873±0.099 in the poorly differentiated gastric cancer cell line, showing a negative correla- tion between REGγmRNA expression and differentiation level (P <0.05). Western blot analysis showed that the expression of REGy protein was 0.712±0.065 in the normal gastric mucosa cell line, 1.176±0.185 in the well differentiated gastric cancer cell line, 1.533 ±0.127 in the moderately differentiated gastric cancer cell line, and 2.061±0.398 in the poorly differentiated gastric cancer cell line, showing a negative correlation between REGγprotein expression and differentiation level (P<0.05).CONCLUSION REGγ is expressed in gastric cancer tissue and normal gastric tissue. In gastric cancer tissues, REGγexpression is positively correlated with the tumor size, lymph node metastasis,differentiation degree, infiltration depth and distant metastasis. Detecting the expression of REGy mRNA and protein is helpful for early diagnosis and predicting prognosis of gastric cancer.     

ECT2 mRNA及蛋白在胃癌患者外周血中的表达及意义

目的:探讨ECT2 mRNA及蛋白在胃癌患者外周血中的表达水平及其意义。方法:应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及酶联免疫吸附实验（ELISA）测定50例胃癌患者及30例健康志愿者外周血ECT2 mRNA及蛋白的表达水平。结果:胃癌患者外周血中ECT2 mRNA阳性表达率为54%,健康志愿者外周血中ECT2 mRNA均阴性表达(P<0.05)。ECT2蛋白在胃癌患者外周血中的浓度（1 306.389±215.824)ng/L显著高于健康志愿者外周血中的浓度（502.718±69.440)ng/L(P<0.05),并且与TNM分期、淋巴结转移和浸润深度相关(P<0.05)。结论:外周血中ECT2 mRNA及蛋白的表达与胃癌关系密切,可作为反映胃癌发生、发展过程的有效分子指标。     

胃癌肿瘤微环境中Th17细胞的分布及临床意义

目的：探讨随着肿瘤的进展胃癌肿瘤微环境中Th17细胞的分布及与患者预后、生存之间的关系。方法采用流式细胞术检测60例胃癌患者Th17细胞在不同时期的胃癌肿瘤微环境中的阳性表达率及分布。通过免疫组织化学染色验证120例胃癌患者Th17细胞的表达情况，并分析Th17细胞的表达与患者预后生存之间的关系。结果60例新鲜胃癌组织标本中，Th17细胞在肿瘤组织中的阳性表达率（10.3%±7.2%）高于癌旁正常胃组织（4.6%±2.5%），且组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。而进展期胃癌组织中Th17细胞的阳性表达率（8.7%±6.8%）显著低于早期胃癌组织（12.4%±7.6%），且组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。120例胃癌根治术后的组织标本中，Th17细胞高表达组5年生存率为58.7%，低表达组为40.4%，二者的差异有统计学意义（χ2=4.634，P=0.031）。结论胃癌肿瘤微环境中Th17细胞的表达与疾病的进展及患者的预后密切相关，可以作为预测胃癌患者术后生存的重要免疫指标。     

Sema3A在胃癌中的表达及意义

目的:探讨Sema3A在胃癌中的表达及意义。方法:利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测正常健康人及胃癌患者血清中Sema3A表达的差异性。应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real time PCR)检测胃癌细胞系、人正常胃黏膜细胞中Sema3A mRNA的表达差异。应用免疫印迹法（Western Blot)检测胃癌细胞系、人正常胃黏膜细胞中Sema3A 蛋白的表达差异。结果:与正常健康对照者相比,Sema3A在胃癌患者血清中表达下降（P<0.001）,且与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度相关（P<0.05）。人转移潜能胃癌细胞株MKN-28M、MKN-28NM中Sema3A mRNA和蛋白表达量明显低于人正常胃黏膜细胞（P<0.05）,且在高转移潜能MKN-28M细胞中表达量最低（P<0.05）。结论:与正常对照组相比,Sema3A在胃癌患者血清、人胃癌细胞株中均表达下降,且在胃癌高转移潜能MKN-28M细胞中表达最低,提示Sema3A在胃癌的发生发展中具有重要作用,可能扮演着抑癌基因的作用。