左卡尼汀联合表柔比星对GLC-82细胞增殖及凋亡影响机制的探讨

目的:研究左卡尼汀与表柔比星(EPI)联合应用对肺腺癌GLC-82细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法:MTT比色法检测肺腺癌GLC-82细胞增殖的变化情况。流式细胞仪检测GLC-82细胞周期和凋亡情况。蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bcl-xl和Bax蛋白的表达。结果:与空白对照组比,单给药左卡尼汀(20μg/mL)24h后,细胞的促进生长率为37.56%,F=46.287,P=0.001;48h后为33.33%,F=41.638,P=0.001。EPI联合不同浓度的左卡尼汀后,减弱了EPI对GLC-82细胞生长的抑制作用,联合给药24和48h后,对GLC-82细胞毒作用的减弱较明显,减少率分别为12.14%(F=20.527,P=0.002)和18.52%(F=27.269,P=0.001),差异有统计学意义。左卡尼汀上调Bcl-2和Bcl-xl的蛋白表达,Bax蛋白表达无明显变化;联合给药后Bcl-2和Bcl-xl的蛋白表达明显增加。结论:左卡尼汀与EPI联合应用对肺腺癌GLC-82细胞的增殖有一定影响,其作用机制可能使G0/G1期细胞比例增加,促进细胞的有些分裂,并通过上调Bcl-2和Bck-xl蛋白的表达减弱EPI的诱导凋亡作用。     

三氧化二砷(As2O3)诱导人肺腺癌GLC-82细胞凋亡及分子机制的研究

目的:探讨As2O3对人肺腺癌GLC-82细胞系抑制生长、诱导凋亡的生物学效应及作用机制.方法:通过MTT还原法检测As2O3对该细胞系生长的影响;用光学显微镜、流式细胞仪、DNA凝胶电泳和细胞凋亡原位检测(TUNEL)研究As2O3诱导细胞凋亡的情况;用RT-PCR、Northern blot或Western blot分析As2O3对c-myc、p53、p16和bcl-X等基因表达的影响.结果:As2O3能抑制GLC-82细胞的生长.As2O3处理GLC-82细胞后,光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞,细胞周期的G1期前有低于2倍体的凋亡峰,DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征:DNA有规律断裂形成的梯状图谱,蛋白水平的检测表明As2O3可使细胞c-myc基因表达下降,p16和p53表达升高.结论:As2O3能显著抑制GLC-82细胞生长、诱导细胞凋亡,并主要通过调节c-myc,p16和p53等基因的表达来实现.     

三氧化二砷对GLC-82细胞的增殖抑制机制

[目的] 探讨三氧化二砷对肺癌细胞株GLC-82细胞的增殖抑制作用及其作用机制。[方法] 以不同浓度的三氧化二砷作用于体外培养的GLC-82细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡，TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。[结果] 三氧化二砷可显著降低GLC-82细胞的端粒酶活性，抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。[结论] 三氧化二砷对肺癌细胞株GLC-82具有明显的增殖抑制作用。降低细胞端粒酶活性，诱导细胞发生调亡，可能是其重要作用机制之一。     

高能电磁脉冲诱导肺癌细胞株GLC-82凋亡的研究

背景与目的:电磁脉冲(electromagneticpulse,EMP)辐射已用于饮食行业的灭菌,且较2450MHz连续微波辐射消毒更加有效。本研究探讨高能电磁脉冲对肺癌细胞GLC-82凋亡的影响,以发现治疗肿瘤的新手段。方法:以场强为6×104V/m的EMP2min内辐照5次,然后采用细胞计数、MTT、流式细胞术及SP免疫组化法检测bcl-2和p53蛋白的表达,并对表达强度用CMIAS-Ⅱ图像分析仪在放大400倍条件下进行分析,通过上述方法观察EMP对肺癌细胞GLC-82的损伤作用,所有数据经SPSS8.0软件进行分析。结果:EMP可明显抑制肺癌细胞GLC-82的增殖与活力。照射后细胞的MTT光吸收值(A570)与对照组相比,在辐照后0h,1h和6h明显降低。流式细胞术证明,GLC-82细胞在辐照后6h发生明显的凋亡,凋亡率达13.38%。免疫组化的图像分析表明,照射后GLC-82细胞有不同程度的bcl-2蛋白表达的下调及p53蛋白表达的上调。结论:EMP可诱导肺癌细胞GLC-82的凋亡。bcl-2及p53蛋白参与了GLC-82细胞的凋亡过程。     

多西他赛诱导HL60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨多西他赛诱导HL60细胞凋亡的作用机制。方法：应用形态学方法、流式细胞术、DNA凝胶电泳和Annexin V标记等方法检测细胞凋亡的发生，应用RT-PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2和c-myc表达的变化。结果：多西他赛对HL60细胞的生长有明显的抑制作用。多西他赛使细胞分裂阻滞于G2M期，并诱导肿瘤细胞发生凋亡：具有典型的凋亡形态，细胞固缩，核染色质呈周边凝聚，形成凋亡小体，胞膜完整；DNA凝胶电泳呈凋亡特有的ladder带；FCM检测出现Sub-G1峰，0．1μmol／L多西他赛作用72h的apo％最高为33．46％；凋亡相关基因Fas转录水平比用药前增强，bcl-2和c-myc无明显变化；结论：多西他赛可诱导HL60细胞凋亡，可能主要与促进Fas基因表达有关。     

二氧化硒对GLC-82肺癌细胞株C-FOS蛋白表达的影响

目的:本研究通过观察不同浓度的二氧化硒(SeO2)对GLC-82肺癌细胞株C-FOS蛋白表达的影响,初步探讨SeO2致肺癌细胞损伤的机制。方法:把GLC-82细胞分别接种于3个6孔板中,同时在每个孔中放置4片盖玻片后;于37℃、5% C02下培养爬片24h,分别加SeO2,使每个板5个孔SeO2的浓度分别为3,10,30礛,而每板保留1个孔作为空白对照。分别在1h、6h、12h和24h捞片。100%丙酮固定后,进行SP法的C-FOS蛋白免疫组化染色。在光镜10×40倍视野下,应用CMIAS-H图像分析仪对阳性细胞的图像学参数进行分析,最后结果经Spss8.0统计软件统计分析。 结果:Se02在早期(1h)即可引起 C-FOS蛋白表达增强,随后逐渐增强,在6～12h时GLC-82细胞C-FOS均呈明显的高表达(P<0.05和P相似文献   

多西他赛诱导HL60细胞凋亡的实验研究

目的:探讨多西他赛诱导HL60细胞凋亡的作用机制。方法:应用形态学方法、流式细胞术、DNA凝胶电泳和Annexin V标记等方法检测细胞凋亡的发生,应用RT-PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2和c-myc表达的变化。结果:多西他赛对HL60细胞的生长有明显的抑制作用。多西他赛使细胞分裂阻滞于G2M期,并诱导肿瘤细胞发生凋亡:具有典型的凋亡形态,细胞固缩,核染色质呈周边凝聚,形成凋亡小体,胞膜完整;DNA凝胶电泳呈凋亡特有的ladder带;FCM检测出现Sub-G1峰,0·1μmol/L多西他赛作用72h的apo%最高为33·46%;凋亡相关基因Fas转录水平比用药前增强,bcl-2和c-myc无明显变化;结论:多西他赛可诱导HL60细胞凋亡,可能主要与促进Fas基因表达有关。     

三氧化二砷对人肺癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对人肺癌的潜在性治疗作用及可能的机制。方法 选用人肺癌细胞株ＧＬＣ－８３,运用细胞培养法、ＭＴＴ法、流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞生长曲线、细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 三氧化二砷可明显抑制ＧＬＣ－８２细胞的增殖,其抑制作用具有时－效和量－效关系。当４．０μｍｏｌ／Ｌ三氧化二砷处理ＧＬＣ－８２细胞９６小时,增殖抑制率达８１．０５％,ＦＣＭ检测肿瘤细胞ＤＮＡ含量,观察到三氧化二砷ＧＬＣ－８２细胞周期阻滞于Ｇ２／Ｍ期,细胞周期进程变慢,同时出现剂量依赖性Ｇ１峰。结论 三氧化二砷能有效地抑制人肺癌细胞株ＧＬＣ－８２的增殖,其可能的机制与三氧化二砷使细胞阻滞于Ｇ２／Ｍ期并诱导其调亡有关。     

多西他赛联合TRAIL诱导胃癌细胞SGC7901凋亡的作用

背景与目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体能够诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,但并不是所有的肿瘤细胞都对其敏感.以往研究表明一些化疗药物能够增强TRAIL所诱导的肿瘤细胞凋亡.本实验旨在探讨多西他赛联合TRAIL体外诱导胃癌细胞凋亡的作用及可能机制.方法:采用MTT法检测不同浓度(1、5、10、20、40μg/ml)及不同时间(12、24、36、48 h)下多西他赛的抗癌活性并计算其亚毒性剂量.用流式细胞仪检测多西他赛(亚毒性剂量)及TRAIL(200 ng/ml)单独及联合应用后SGC7901的凋亡率.RT-PCR法检测DR4、DR5、DcR1、DcR2、Caspase-8及Bc1-2 mRNA在加药前后的表达.结果:对照组(C组)、亚毒性剂量的多西他赛(P组)、TRAIL(T组)及两者联合(T P)作用24 h后胃癌细胞的凋亡率分别为2.09%、10.65%、7.79%和24.51%,T P组凋亡率明显升高,与C组、T组、P组相比,差异均具有显著性(P<0.05).多西他赛处理组DR5表达增加.结论:多西他赛与TRAIL具有协同抗胃癌作用,其机制可能与DR5 mRNA表达上调有关.     

多西他赛诱导乳腺癌Bcap37细胞凋亡作用的研究

目的：探讨多西他赛（≤10μmol／L）体外对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的作用及其机制。方法：采用琼脂糖凝胶电泳观察Bcap37细胞凋亡情况；原位末端标记（TUNEL）法测定Bcap37细胞凋亡指数（apoptotic index，AI）；流式细胞仪检测Bcap37细胞周期。结果：与对照组相比，实验组琼脂糖凝胶电泳显示凋亡特有的梯状图谱；实验组显示细胞核染成棕色的凋亡细胞，且AI较对照组显著增大，具有量效依赖性，P〈0．001。实验组G2／M期细胞比例较对照组显著升高，G1、S期细胞比例显著降低，P〈0．01。结论：多西他赛（≤10μmol／L）诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡，细胞周期阻滞在G2／M期。     

EMP INDUCES APOPTOSIS IN HUMAN LUNG CARCINOMA CELL LINE GLC-82

The possibility of health risks resulting from exposure to electric and magnetic fields provides a strong motivation to determine how such fields interact with cells. The short, intense electromagnetic pulse (EMP) produced by high-altitude nuclear explosions may radiate over many hundreds of miles. Basically, EMP consists of a pulse of radio-frequency waves with a nearly instantaneous rise in the electric and magnetic fields and a subsequent decline in the fields. EMP radiation may be repre…     

Studies on arsenictrioxide induced human pulmonary adenocarcinoma GLC-82 cell apoptosis and its molecularmechanisms

】 ObjectiveTo study thebiological effect of As₂O₃ on human pulmonary adenocarcinoma GLC-82cells and its mechanisms. MethodsMTT reduction assay,morphologyinvestigation,flowcytometric analysis,DNA gel electrophoresis and TUNEL,RT-PCR,Northernblot, Western blot methods were perfomed. ResultsAs₂O₃inhibited the growth of GLC-82 cell line. The cells treated with As₂O₃showed a typical apoptotic morphology and hypodiploid peak before G1 phase. DNA of treatedGLC-82 cells appeared a ladder pattern characteristic of apoptosis. In situ cell deathdetection analysis also revealed the DNA fragmentation. Besides,As₂O₃inhibited c-myc gene expression and increased p53 and p16 gene expression. ConclusionAs₂O₃can induce GLC-82 cell apoptosis mainly with regulation of c-myc,p53 and p16 geneexpression.     

腺病毒介导的野生型p53基因对肺腺癌细胞株生长的抑制作用

为研究野生型p53基因对肺腺癌细胞株GLC-82细胞生长的作用,确立腺病毒介导的野生型p53基因在肿瘤治疗中的意义,应用分子克隆技术首先构建了野生型p53复制缺陷型腺病毒重组体,应用生化染色方法确定了重组体的转染效率,以免疫组化法及PCR技术分别确定了腺病毒载体介导的p53基因转染GLC-82细胞后p53蛋白和p53 cDNA的表达情况;最后应用细胞生物学方法检测了p53对GLC-82细胞扩增及细胞周期的影响.结果表明所构建的重组体可以高效、快速转染GLC82细胞,抑制GLC-82细胞扩增,使细胞合成期和分裂后期的量减少,出现细胞凋亡现象:提示野生型p53基因导入可作为治疗肺腺癌的途径之一     

Effect of SeO<Subscript>2</Subscript> on telomerase activity in human lung carcinoma cell line GLC-82

Objective: To observe the effect of inhibition of telomerase activity by selenium dioxide (SeO2) on lung carcinoma cell line GLC-82. Methods: TRAP-PCR-ELISA was used to study the changes of telomerase activity in human pulmonary adenocarcinoma cell line GLC-82 treated by SeO2 at the different concentrations (3, 10, 30 μmol/L) and for different times (24, 48, and 72 h). Results: SeO2 inhibited the telomerase activity of GLC-82 at the different concentrations after treatment of 24, 48 and 72 h. Conclusion: SeO2 inhibits from telomerase activity of human lung carcinoma line GLC-82. The effect of inhibition is dose-dependant and time-dependant.     

LBH589或联合多烯紫杉醇对人卵巢癌OVCAR-3细胞增殖和凋亡的研究

  目的  探讨新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589或联合多烯紫杉醇（DTX）对人卵巢癌OVCAR-3细胞增殖和凋亡的影响。  方法  采用不同浓度LBH589、DTX或两者联合处理OVCAR-3细胞, 用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力, 台盼兰、吖啶橙溴化乙啶（AO/EB）双染色法检测细胞凋亡; Western blot检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、caspase-3、caspase-7、bcl-2、bax蛋白水平。  结果  LBH589、DTX均能抑制OVCAR-3细胞增殖, 诱导凋亡, 小剂量LBH589联合DTX作用更强。经Calcusyn软件分析证明两者联合具有明显的协同作用。Western blot检测发现caspsae-3、PARP-85kD剪切蛋白增加, bax表达增加, bcl-2表达减少。caspase-7无明显变化。  结论  LBH589、DTX能抑制OVCAR-3细胞增殖, 诱导凋亡, 两者联合有明显的协同作用。      

Induction of apoptosis by SeO<Subscript>2</Subscript> in human lung carcinoma cell line GLC-82

Objective:To investigate the effect of selenium dioxide(SeO2) on human pulmonary adenocarcinoma GLC-82 cell lines to reveal its probable mechanism and the relationship between apoptosis and SeO2. Methods: Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) method, flow cytometry (FCM), DNA agarose gel electrophoresis, light and electron microscope were used to study cell apoptosis in human pulmonary adenocarcinoma cell line GLC-82 treated by SeO2 at different concentrations (3, 10, 30μmol/L) and for different times (24, 48, and 72 h). Results: SeO2 significantly inhibited the proliferation and induced the cell apoptosis of GLC-82 at the different concentrations after treatment of 48h and 72 h. Conclusion: Selenium dioxide could inhibit the growth of lung cancer GLC-82 cells through inducing apoptosis. The effect of inhibition is dose-dependant and time-dependant.     

肺癌膜蛋白识别分子诱导肺癌细胞凋亡的机制

目的:探讨肺癌患者血清中癌抗原识别分子及其抗肿瘤机制。方法:免疫亲合层析法分离纯化肺癌患者外周血中肺癌膜蛋白识别分子,SDS-PAGE电泳法分析其相对分子质量。MTT法测定细胞增殖情况;Annexin V/PI双标法检测细胞凋亡率,并通过流式细胞仪检测p53、Bcl-2蛋白表达水平。结果:肺癌患者外周血中存在肺癌膜蛋白识别分子,相对分子质量分别约为70×103、66×103和15.2×103。不同浓度膜蛋白识别分子(10、20和40mg/L)具有抑制肺癌细胞株(GLC-82)生长和促进细胞凋亡作用。肺癌细胞株与肺癌膜蛋白识别分子共培养6h后,Bcl-2蛋白表达水平明显降低,P=0.008;而p53水平明显增加,P=0.000。结论:肺癌患者外周血中存在肺癌膜蛋白识别分子,并具有抑制肺癌细胞增殖和促进凋亡作用,其机制与p53和Bcl-2表达改变有关。     

转染野生型p53基因对人肺腺癌细胞作用的研究

目的研究外源性野生型p53基因对人肺腺癌细胞系GLC-82的生物学作用.方法将含有野生型p53基因的pDOR-neo逆转录病毒载体,通过Lipofectin转染GLC-82细胞,采用流式细胞分析、电镜下观察、3H-TdR掺入试验、软琼脂培养集落形成率测试及裸小鼠成瘤性实验,观察野生型p53基因对GLC-82细胞的生物学效应.结果电镜下观察可见,转染野生型p53基因可使GLC-82细胞出现一些病理现象,如细胞质中有明显的空泡及线粒体肿胀;流式细胞仪分析结果显示,野生型p53基因可阻止GLC-82细胞周期停止于G1-S区域;3H-TdR掺入试验结果提示野生型p53基因能够抑制GLC-82细胞的DNA合成,软琼脂培养集落形成率减少及裸小鼠成瘤减慢.结论转染野生型p53基因可抑制GLC-82细胞恶性增殖.     

二氧化硒对肺癌细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响

背景与目的:近年研究表明硒可诱导肿瘤细胞凋亡,并且其与端粒酶活性以及肿瘤的发生密切相关。本研究旨在通过观察二氧化硒(seleniumdioxide,SeO2)对肺腺癌细胞株GLC-82的体外作用,探讨SeO2对肺癌细胞的作用机制,以及细胞凋亡与端粒酶活性之间的关系。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度SeO2作用不同时间对肺癌GLC-82细胞生长的抑制作用;用TRAP-PCR-ELISA法检测SeO2作用前后GLC-82细胞端粒酶活性变化;采用流式细胞术(FCM)观察SeO2作用后GLC-82细胞的凋亡率;通过琼脂糖凝胶电泳法观察DNA梯状带;通过光镜和透射电镜观察GLC-82细胞的形态变化。结果:在3、10、30μmol/LSeO2作用下,GLC-82细胞的生长和端粒酶活性明显受抑制,24h时细胞生长抑制率分别为0.7%、12.8%、31.8%,72h时分别达15.1%、51.2%、61.1%;24h时端粒酶活性分别为1.173±0.029、1.127±0.067、1.050±0.098(P<0.05),48h时为1.150±0.026、1.047±0.060、0.950±0.036(P<0.05),未处理组24h和48h时端粒酶活性分别为1.227±0.032、1.167±0.023;流式细胞仪检测二倍体峰前出现凋亡峰,30μmol/LSeO2与GLC-82细胞共育24h、48h、72h后细胞凋亡率分别为0.7%、3.8%、12.1%;琼脂糖凝胶电泳显示细胞凋亡典型梯状条带;SeO2作用后,GLC-82细胞呈典型